神经干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能及脑组织Bcl-2与Bax表达的影响

目的探讨神经干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能及脑组织Bcl-2与Bax表达的影响。方法108只SD成年大鼠随机分为假手术组(36只)、脑外伤组(36只)和神经干细胞移植组(36只)。采用改良的Feeney氏法制作大鼠脑外伤动物模型,损伤1周后在皮质处局部注射移植神经干细胞,分别在细胞移植后的第7天、14天和21天进行神经功能评分。免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠脑组织Bcl-2与Bax蛋白的表达。结果脑外伤组大鼠出现明显的神经功能障碍,神经干细胞移植后第7、14和21天大鼠的神经功能评分明显降低(P0.05)。与假手术组相比,不同时间点脑外伤组大鼠脑组织Bcl-2蛋白的表达显著降低,Bax蛋白的表达显著升高(P0.05);与相同时间点的脑外伤组大鼠相比,神经干细胞移植组大鼠脑组织Bcl-2蛋白的表达显著升高,Bax蛋白的表达显著降低(P0.05)。结论神经干细胞移植促进脑外伤大鼠神经功能的恢复可能与上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白表达相关。     

骨髓间充质干细胞移植对急性脊髓损伤的保护作用及其机制

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的影响及作用机制。方法从雄性SD大鼠体内提取BMSCs并进行体外培养。选取60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、BMSCs组各20只,使用改良的艾伦自由落体法建立SCI模型。造模成功后,BMSCs组尾静脉注射0.5 ml BMSCs细胞悬液(1×107/ml)。在移植后6、12、24、48 h和7 d使用Tarlov标准对各组神经功能进行评分。在移植后7 d,采用ELISA法测定损伤脊髓组织匀浆中炎症因子的含量,Western blotting检测脊髓组织中p-Akt、Akt、TLR4的表达。结果与模型组相比,BMSCs组在移植后6、12、24、48 h和7 d的Tarlov评分显著提高(P0.05)。模型组大鼠受损的脊髓组织匀浆中NF-κBp65、IL-1β和TNF-α的水平显著高于假手术组(P0.05),而BMSCs组大鼠的上述指标显著低于模型组(P0.05)。模型组大鼠脊髓组织中的p-Akt/Akt显著低于假手术组(P0.05),而TLR4表达显著高于假手术组(P0.05);BMSCs组大鼠的p-Akt/Akt显著高于模型组(P0.05),而TLR4表达显著低于模型组(P0.05)。结论 BMSCs可以通过削弱TLR4介导的信号传导途径来减少组织中炎症因子水平来缓解脊髓炎症,并且可以通过上调p-Akt/Akt表达抑制神经元凋亡。     

骨髓间充质干细胞移植对永久性大脑中动脉阻塞大鼠生长相关蛋白43及脑梗死体积的影响

背景:大量实验表明骨髓间充质干细胞植入缺血大鼠脑内能够通过血脑屏障在脑中成活并迁移,可部分转变为神经元,并能促进多种神经营养因子分泌,明显改善神经功能缺损,较神经保护剂具有更长的治疗时间窗。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对大鼠永久性大脑中动脉阻塞后内源性轴突再生标志物生长相关蛋白 43 的表达及脑梗死体积的影响。方法:将成年 SD 大鼠按随机数字表法分为模型对照组、假手术组、干细胞移植组。另取成年 SD 大鼠 4 只制备骨髓间充质干细胞,并以 5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记。假手术组分离结扎右侧颈总动脉;其余大鼠制备永久性右侧大脑中动脉缺血模型,造模后,干细胞移植组移植骨髓间充质干细胞,模型对照组推注等量磷酸盐缓冲液。于移植前、移植后 7,14,21,28 d 进行神经功能缺损评分,应用免疫组织化学法检测脑梗死灶周边区生长相关蛋白 43 表达。结果与结论:干细胞移植组移植后 7 d 在梗死灶能检测到 5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记的阳性细胞, 移植后 14 d 增多达高峰,移植后 28 d 逐渐减少并消失;移植后 7,14 d 脑梗死灶周边区生长相关蛋白 43 免疫活性显著高于模型对照组(P0.05)。假手术组大鼠无神经损伤症状,神经功能评分均为 0 分;随时间推移,模型对照组和干细胞移植组神经功能评分逐渐降低,从移植后 14 d 开始,干细胞移植组神经功能评分明显低于模型对照组(P0.05)。与模型对照组相比,干细胞移植组脑梗死体积均显著减小(P0.05)。结果显示,骨髓间充质干细胞移植能上调局灶性脑缺血大鼠脑梗死灶周边区生长相关蛋白 43 的表达,并显著减小脑梗死体积。     

神经干细胞移植显著改善脑外伤小鼠的神经功能

目的探讨鼠源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)静脉移植对脑外伤小鼠海马的治疗作用。方法30只BALB/c小鼠随机分为3组,假手术组(10只)、脑外伤组(10只)和NSCs移植组(10只)。NSCs移植7d后,根据小鼠脑损伤NSS(Neurological Severity Score)评分系统进行评分。TUNEL法检测各组小鼠海马细胞凋亡情况。免疫组化和Westernblot检测各组小鼠海马半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspirate specificproteinase3,caspase-3)蛋白的表达。结果NSCs移植7d后,NSS评分显示NSCs移植组的神经功能明显改善(<0.001)。TUNEL法检测结果发现,脑外伤组小鼠海马凋亡细胞百分数明显高于假手术组(<0.05),但经过NSCs移植后,凋亡率显著下降。免疫组化和Westernblot结果显示,脑外伤组小鼠海马caspase-3蛋白表达量明显高于假手术组(<0.05),但NSCs移植组小鼠海马caspase-3表达明显降低(<0.05)。结论静脉NSCs移植能PPPP够显著改善脑外伤小鼠的神经功能,其机制可能与降低caspase-3的表达有关。     

神经干细胞移植脑出血恢复期大鼠神经功能和促血管生成素1及受体的表达

背景：近年研究发现骨髓间充质干细胞经过长时间体外培养后,可自然分化为神经干细胞,从而再定向分化为神经细胞及神经胶质细胞,为帕金森病、脑梗死后遗症、小脑萎缩和脑发育不良等疾病的治疗提供了一种新的思路。 目的：探讨神经干细胞移植对脑出血恢复期大鼠神经功能的影响及其作用机制。 方法：将60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常组(18只)、脑出血组(21只)和移植组(21只),后2组大鼠采用Ⅶ型胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,造模21 d后移植组大鼠通过尾静脉注射神经干细胞,脑出血组给予等量生理盐水。移植后第7,14,21天进行改良黏附物移除试验(MST)评分,评分结束后处死各组大鼠,采用RT-PCR法测定大鼠出血周围脑组织促血管生成素1 mRNA表达,采用Western Blotting法检测大鼠出血周围脑组织酪氨酸激酶受体2蛋白表达。 结果与结论：与正常组相比,脑出血组和移植组各时点MST评分均明显降低,差异均有显著性意义(P < 0.05);从移植后7 d开始移植组各时点的MST评分均明显高于脑出血组,差异均有显著性意义(P < 0.05)。移植后7,14,21 d移植组和脑出血组促血管生成素1 mRNA和酪氨酸激酶受体2蛋白含量均明显高于正常组,且移植组升高更为明显,差异均有显著性意义(P均< 0.05)。结果表明神经干细胞移植能够有效促进脑出血恢复期大鼠神经功能的恢复,其机制可能与增加出血周围脑组织促血管生成素及酪氨酸激酶受体2的含量有关。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

高压氧治疗对急性脑外伤大鼠神经功能修复及BDNF表达的影响

目的探讨高压氧治疗对急性脑外伤大鼠神经行为功能及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法成年SD大鼠24只,随机分配为3组:假手术组、脑外伤组及高压氧治疗组。假手术组仅行开颅手术不致脑外伤;脑外伤组采用Alice打击法制作脑外伤模型;高压氧治疗组在脑外伤基础上行高压氧治疗1个疗程,即每天1次,治疗10天。伤后第14天对大鼠进行神经功能缺损评分,然后处死大鼠,获取脑组织,采用RT-PCR方法测定BDNF mRNA的表达,用免疫组织化学结合图像分析技术确定BDNF光密度值变化。结果与脑外伤组比较,高压氧治疗组NSS评分明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。同时,高压氧治疗组BDNF mRNA明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧治疗能明显改进急性脑外伤大鼠神经功能并增加BDNF表达。     

γ-分泌酶抑制剂对脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经保护作用

目的 探讨γ-分泌酶抑制剂（3,5-二氟苯乙酰基）-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯（DAPT）对脑缺血大鼠神经干细胞（NSCs）移植后的神经保护作用。 方法 SD大鼠33只,脑缺血模型制造成功后,随机平均分为3组：模型组、神经干细胞移植组（移植组）、DAPT+移植组。另假手术组11只仅在麻醉状态下分离暴露血管。NSCs移植后7d观察各组大鼠神经行为学改变;TTC染色观察脑梗死体积;尼氏染色观察脑组织病理形态学变化;免疫荧光双标检测BrdU/神经元核抗原（NeuN）阳性细胞表达。 结果 假手术组神经功能学评分为零,无脑梗死灶,细胞形态完好,尼氏小体丰富,BrdU/NeuN阳性细胞表达阴性;与假手术组相比,模型组神经功能学评分增加,有明显神经功能缺损症状,可见明显脑梗死灶,神经细胞排列紊乱,可见核固缩,尼氏小体稀少,存活神经元数量显著减少(P＜0.05),有少量BrdU/NeuN阳性细胞表达(P＜0.05);与模型组比较,移植组和DAPT+移植组都有不同程度神经功能评分减低,脑梗死体积缩小,神经细胞存活数量增加( P＜0.05),BrdU/NeuN阳性细胞表达增多(P＜0.05),以DAPT+移植组各项指标恢复最为明显。 结论 DAPT能够促进移植的NSCs向神经元分化,对脑缺血大鼠神经干细胞移植后有神经保护作用。     

脑梗死大鼠脑组织生长分化因子-15 的表达及其与神经功能损害的关系

目的:研究脑梗死大鼠脑组织生长分化因子-15(GDF-15)的表达及其与神经功能及Smad2、Smad4、p21水平的关系,探讨GDF-15在脑梗死中的作用及可能机制。方法:45只大鼠根据随机数字法分为脑梗死组(线栓法建立脑梗死大鼠模型)、假手术组和正常对照组,每组15只。建模后1周,各组大鼠进行改良神经功能缺损(mNSS)评分,mNSS评分后取脑组织标本,采用苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理学变化,采用Western blot法测定大鼠脑组织中GDF-15、Smad2、Smad4、p21蛋白水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定脑组织中GDF-15、Smad2、Smad4、p21 mRNA水平。结果:脑梗死组大鼠脑组织水肿,脑细胞排列紊乱,细胞核仁模糊,小胶质细胞数量增多,脑梗死平均面积为20.13%;假手术组大鼠脑组织未见明显异常。脑梗死组大鼠mNSS评分明显高于对照组(P0.05)。脑梗死组大鼠脑组织GDF-15、Smad2、Smad4蛋白水平高于假手术组(P0.05),p21蛋白水平低于假手术组(P0.05)。脑梗死组大鼠脑组织GDF-15、Smad2、Smad4 mRNA水平高于假手术组(P0.05),p21 mRNA水平低于假手术组(P0.05)。脑梗死大鼠脑组织GDF-15蛋白水平与mNSS评分、Smad2蛋白、Smad4蛋白水平呈正相关(P0.05),与p21蛋白呈负相关(P0.05),脑组织GDF-15 mRNA水平与mNSS评分、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA水平呈正相关(P0.05),与p21 mRNA呈负相关(P0.05)。结论:脑梗死大鼠脑组织GDF-15水平升高,GDF-15水平与脑梗死大鼠神经功能关系密切,其机制可能与Smad信号通路及p21水平有关。     

脐带间充质干细胞对颅脑创伤大鼠的治疗作用

目的 探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)对颅脑创伤(TBI)大鼠受损脑组织的保护作用.方法 将30只健康Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为正常对照组(不予任何处理)、模型组(TBI后注射生理盐水)和UC MSCs移植组(TBI后注射UCMSCs),每组10只.UCMSCs移植后第10天处死大鼠,用流式细胞术检测大鼠损伤区周围脑组织中UCMSCs的比例,苏木精-伊红(HE)染色观察损伤区周围脑组织的病理学改变,免疫组化及免疫荧光双染法检测损伤区周围脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达变化,神经功能缺损评分评估大鼠神经功能缺损程度.结果 UCMSCs移植组大鼠损伤区周围脑组织中CD90、CD73和CD105全阳细胞数比例较模型组明显增多(0.4％比0.1％,P＜0.05);HE染色结果显示UCMSCs移植组大鼠脑损伤情况较模型组有所减轻;UCMSCs移植组大鼠损伤区周围脑组织中VEGF表达高于模型组(P＜0.05),GFAP和BDNF阳性细胞数均高于模型组(均P＜0.05),且神经功能缺损评分亦高于模型组(P＜0.05).结论 UCMSCs移植治疗TBI大鼠可有效改善损伤区域的血管重建并促进神经恢复.     

人参皂苷素Rb1对缺血脑卒中大鼠PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨人参皂苷素Rb1对脑卒中大鼠学习记忆能力及大鼠脑组织PI3K/Akt信号通路的影响。方法 60只SD大鼠随机分为3组:假手术组、缺血性脑卒中组与人参皂苷素Rb1组(20 mg/kg),采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)建立局灶性脑缺血动物模型。参照Longa方法进行行为学评分,采用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习、记忆能力,Western blot方法检测大鼠脑组织PI3K与p-Akt表达,real time PCR方法检测大鼠脑组织PI3K mRNA与Akt mRNA的表达水平。结果与缺血性脑卒中组相比,人参皂苷素Rb1组大鼠在实施治疗后,行为学评分明显降低,水迷宫测试的穿台次数明显增多。与假手术组相比,缺血性脑卒中组大鼠脑组织PI3K与p-Akt蛋白与mRNA表达水平显著降低;而与缺血性脑卒中组相比,人参皂苷素Rb1组大鼠脑组织PI3K与p-Akt蛋白与mRNA表达水平显著升高。结论人参皂苷素Rb1对缺血性脑卒中大鼠脑组织有保护作用,可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.