LncRNA MEG3在骨肉瘤组织中的表达及对MG-63细胞增殖、凋亡与侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA母系印记基因3(lncRNA MEG3)在骨肉瘤组织中的表达及对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡与侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测5例骨肉瘤组织及癌旁对应正常组织中lncRNA MEG3的表达水平。构建pcDNA3.1-MEG3重组质粒,MEG3过表达后,MTT方法检测MG63细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测MG63细胞的凋亡率;Transwell实验检测MG63细胞侵袭能力的变化;Western blot方法检测MG63细胞增殖细胞核抗原(PCNA)与Racl蛋白的表达变化。结果 lncRNA MEG3在骨肉瘤组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P0.01)。lncRNA MEG3过表达后,MG63细胞的增殖与侵袭能力显著降低,凋亡率显著上升,PCNA与Racl蛋白的表达显著降低(P0.01)。结论 lncRNA MEG3在骨肉瘤组织中低表达,过表达lncRNA MEG3能够抑制人骨肉瘤细胞MG-63的增殖与侵袭,并促进凋亡。     

长链非编码RNA GASL1在乳腺癌组织及细胞系中的表达及作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) GASL1在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌癌细胞增殖和凋亡的影响。方法RT-qPCR检测癌组织、癌旁组织、多个乳腺癌细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468和SK-BR-3)及正常乳腺细胞HBL-100中lncRNA GASL1的表达水平。MCF-7细胞经pc DNA3. 1质粒过表达lncRNA GASL1,或siRNA干扰lncRNA GASL1表达后,运用MTT法检测细胞增殖; caspase-3活力检测试剂盒检测caspase-3活力; Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果 LncRNA GASL1在乳腺癌组织和乳腺癌细胞中表达水平降低(P 0. 05);过表达lncRNA GASL1可抑制MCF-7的增殖,促进其凋亡(P0. 05);干扰lncRNA GASL1表达可促进MCF-7的增殖,抑制其凋亡(P0. 05)。结论 lncRNA GASL1在乳腺癌中表达水平降低,通过调节乳腺癌细胞增殖和凋亡参与乳腺癌的发生发展。     

长链非编码RNA XIST可能通过miR-22/NLRP3促进喉鳞癌细胞增殖

目的:探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(XIST)通过miR-22/NLRP3通路对喉鳞状细胞癌(LSCC)增殖的影响.方法:RT-PCR检测34例LSCC患者癌组织和癌旁组织中XIST的表达;CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖活性;Western blot检测蛋白表达水平.荧光素酶报告分析...     

Yap通过长链非编码RNA MALAT1调控肝癌细胞增殖

目的观察Yap对肝癌细胞增殖的影响及可能机制。方法应用Western blot与q RT-PCR方法检测Yap与MALAT1蛋白在肝癌组织及癌旁正常组织中的表达,应用CCK-8法检测si Yap后肝癌细胞增殖活力的改变以及MALAT1的表达变化,过表达MALAT1检测si Yap后肝癌细胞增殖活力的改变。结果 Yap与MALAT1蛋白在肝癌组织中表达水平均高于癌旁正常组织,沉默Yap基因的表达后肝癌细胞增殖活力受到抑制,MALAT1的表达水平减少,过表达MALAT1后阻断Yap表达,Yap对肝癌细胞增殖抑制作用消失。结论 Yap参与肝癌细胞增殖可能与调控MALAT1相关。     

lncRNA COLCA1/miR-423-5p/FAM172A分子轴对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖和迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA)COLCA1在皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)组织中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响、分子机制.方法 采用qRT-PCR法检测COLCA1在正常皮肤组织和CSCC组...     

长链非编码RNA LINP1对肝癌细胞增殖、侵袭转移的影响

目的探究长链非编码RNA LINP1在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖及侵袭转移能力的影响。方法使用qRT-PCR方法检测60例肝癌组织以及癌旁组织、肝癌细胞株及正常肝细胞中LINP1的表达情况。si-LINP1转染肝癌细胞敲低LINP1表达;CCK-8实验检测si-LINP1对肝癌细胞增殖影响;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和cyclinD1表达。结果 LINP1在肝癌组织中的表达水平高于癌旁组织,肝癌细胞高于正常肝细胞系Lo2(P0.05);敲低LINP1抑制肝癌细胞增殖及侵袭转移,抑制Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和cyclinD1表达(P0.05)。结论敲低LINP1抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。     

长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达及对SKOV-3细胞增殖与侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖与侵袭能力的影响。方法 qRT-PCR检测39例卵巢癌组织及对应癌旁正常卵巢组织lncRNA-GAS5的表达;通过重组质粒过表达SKOV-3细胞lncRNA-GAS5,采用CCK8法与Transwell侵袭实验分别检测过表达lncRNA-GAS5后SKOV-3细胞增殖与侵袭能力的变化;qRT-PCR及Western blot检测PTEN表达变化。结果 lncRNA-GAS5在卵巢癌组织表达水平低于对应癌旁正常卵巢组织,P0.01。lncRNA-GAS5重组质粒转染SKOV-3细胞后可抑制细胞的增殖与侵袭能力;qRT-PCR与Western blot结果证实,过表达lncRNA-GAS5后,SKOV-3细胞PTEN的表达上调,P0.01。结论 lncRNA-GAS5在卵巢癌组织中表达降低,lncRNA-GAS5可能通过上调PTEN的表达来抑制SKOV-3细胞的增殖与侵袭。     

沉默lncRNA-H19对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和细胞周期的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)-H19对甲状腺癌细胞增殖、 侵袭和细胞周期的影响.方法 检测lncRNA-H19在癌组织、 癌旁组织、 正常人甲状腺上皮细胞TEC及甲状腺癌细胞KAT18、FTC133、BCPAP、TPC-1中的表达;检测沉默lncRNA-H19对细胞增殖、 侵袭和细胞周期的影响.结果 ln...     

长链非编码RNA TTTY15在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞活力和侵袭的影响

目的:观察长链非编码RNA TTTY15在骨肉瘤组织及细胞株中的表达,并探讨其对骨肉瘤细胞活力和侵袭的影响。方法:应用qPCR法检测11例骨肉瘤组织及其瘤旁组织中TTTY15的水平,同时检测TTTY15在骨肉瘤细胞株(143B、Saos2、MG-63、U2OS和HOS)和人成骨细胞株hFOB1.19中的表达。在表达量最高的细胞株(MG-63)中通过转染小干扰RNA敲减TTTY15的表达,CCK-8法检测TTTY15低表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测其对细胞周期的影响,Transwell检测其对细胞侵袭能力的影响,qPCR检测miR-216b-5p和FOXM1 mRNA的表达,Western blot法检测相关蛋白的变化。结果 :与瘤旁正常组织相比,TTTY15在骨肉瘤组织中表达升高(P0.01);与人成骨细胞相比,TTTY15在骨肉瘤细胞株中表达升高(P0.05),其中在MG-63细胞中表达水平最高(P0.01)。敲减TTTY15在MG-63细胞的表达后,细胞活力降低(P0.05),细胞周期被抑制在G_0/G_1期(P0.01),细胞的侵袭能力降低(P0.01),miR-216b-5p mRNA表达水平升高(P0.01),FOXM1的mRNA表达降低(P0.01),同时FOXM1、CDK4、cyclin D1、MMP-2和N-cadherin的蛋白表达降低,而E-cadherin的蛋白表达升高(P0.05)。结论:TTTY15在骨肉瘤组织和细胞株中表达增高,敲减TTTY15的表达可抑制骨肉瘤细胞的活力和侵袭能力,其机制可能与TTTY15低表达导致miR-216b-5p的表达升高,引起FOXM1基因表达下调有关。     

长链非编码RNA HOTAIR对急性淋巴细胞白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究长链非编码RNA HOTAIR调控糖皮质激素受体的表达对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的作用。方法:采用RT-qPCR法检测人正常骨髓基质细胞系HS-5及急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4、CCRF-CEM和CEM-C1中HOTAIR和糖皮质激素受体的表达。用si RNA沉默CEM-C1细胞中HOTAIR的表达,CCK-8法检测si-HOTAIR对CEM-C1细胞活力的影响; Brd U法检测si-HOTAIR对CEM-C1细胞增殖的影响以及对地塞米松抑制CEM-C1细胞增殖的增效作用; Hoechst 33342染色法和caspase 3/7活性检测法研究si-HOTAIR对CEM-C1细胞凋亡的影响;并采用Western blot法检测糖皮质激素受体的蛋白表达水平。结果:人急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4、CCRF-CEM和CEM-C1中HOTAIR的表达显著高于人正常骨髓基质HS-5细胞(P 0. 01)。在CEM-C1细胞中干扰HOTAIR表达后,细胞活力降低,细胞增殖被抑制并发生凋亡,地塞米松抑制CEM-C1增殖的作用被增强,糖皮质激素受体表达上调(P 0. 01)。结论:长链非编码RNA HOTAIR增强急性淋巴细胞白血病的活力,促进其增殖并抑制其凋亡,该作用可能与其抑制糖皮质激素受体的表达有关。     

lncRNA TTN-AS1通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭

目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达水平。将未转染的A549细胞设为空白组,转染si-NC的为si-NC对照组,转染沉默TTN-AS1表达的siRNA为si-lncRNA组(n=5),采用CCK8和Transwell方法检测沉默TTN-AS1表达对A549细胞活力和侵袭的影响。使用双萤光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀实验、RT-qPCR和Western blot测定TTN-AS1对miR-519d-3p和miR-519d-3p对MMP2的靶向调控作用。结果:32例肺腺癌组织中TTN-AS1的表达水平显著高于对应癌旁正常组织(P<0.05)。沉默A549细胞中TTN-AS1的表达可抑制细胞的活力和侵袭。TTN-AS1可通过海绵吸附的方式负调控miR-519d-3p的表达;MMP2是miR...     

胃腺癌中HOXD-AS1的表达及与预后的相关性

目的探讨长链非编码RNA HOXD-AS1在胃腺癌中的表达及其与临床病理特征、预后的关系。方法应用癌症基因组图谱(TCGA)胃腺癌数据集的RNA系统评估HOXD-AS1在胃腺癌中的差异表达。回顾性分析南京医科大学附属无锡第二医院88例接受胃腺癌手术的组织标本,验证TCGA数据库的结果。结果 HOXD-AS1在胃腺癌中高表达(P0.05);HOXD-AS1高表达与淋巴结(N)分期(P0.05)相关;HOXD-AS1高表达胃腺癌患者总生存期明显低于HOXD-AS1低表达患者(P0.05);Cox比例风险模型的单变量和多变量分析结果证实,HOXD-AS1是胃腺癌相关独立预后的预测因子(P0.05)。结论 HOXD-AS1在胃腺癌组织中高表达,且其高表达的患者预后较差;HOXD-AS1可以作为胃腺癌预后判断的标志物。     

LncRNA DQ786243促进肝细胞癌增殖及机制分析

目的探讨长链非编码RNA DQ786243(LncRNA DQ786243)促进肝细胞癌细胞增殖的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测175例肝细胞癌癌组织及对应癌旁正常组织中LncRNA DQ786243的表达;在Hep G2细胞中瞬时转染LncRNA DQ786243的小干扰RNA片段(si-DQ786243),CCK-8实验检测降低LncRNA DQ786243的表达对细胞增殖能力的影响,Western blot法检测降低LncRNA DQ786243表达对p18蛋白表达的影响;在Hep G2细胞中瞬时共转染si-DQ786243、p18的小干扰RNA片段(si-p18),CCK-8法检测同时降低LncRNA DQ786243、p18的表达对细胞增殖能力的影响。结果肝细胞癌组织中LncRNA DQ786243的表达增加(P 0.05);在Hep G2细胞中降低LncRNA DQ786243的表达,细胞增殖减慢,p18表达增加(P均0.05);降低p18表达可部分逆转LncRNA DQ786243表达下降导致的细胞增殖能力下降(P 0.05)。结论 LncRNA DQ786243可通过下调p18的表达促进肝细胞癌细胞的增殖,进而促进肝细胞癌的发生、发展。     

lncRNA RGMB-AS1在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA RGMB-AS1在卵巢癌组织和细胞系中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 GEPIA数据库分析RGMB-AS1表达水平与卵巢癌患者生存期的关系。采用qRT-PCR技术检测RGMB-AS1在卵巢癌组织及其癌旁组织、卵巢癌细胞系(OC3、A2780、SKOV-3、HO-8910)和正常卵巢上皮细胞系IOSE80中的表达。利用Lipofectamine 3000将阴性对照质粒(NC组)和RGMB-AS1质粒(RGMB-AS1组)分别转染至RGMB-AS1表达最少的细胞系。CCK-8法和细胞划痕愈合实验检测各组细胞的增殖活力和迁移能力。利用生物信息学方法预测和双荧光素酶活性报告基因实验验证RGMB-AS1的靶向基因。qRT-PCR和Western blot法检测RGMB-AS1靶向基因的表达。结果 RGMB-AS1低表达的患者总生存期明显低于RGMB-AS1高表达患者(P<0.01)。RGMB-AS1在卵巢癌组织中的相对表达量(1.51±0.41)明显低于癌旁组织(5.28±0.63),差异有统计学意义(P<0.01)。卵巢癌细胞系(OC3...     

lncRNA TDRG1通过调节miR-101-3p促进结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)睾丸发育相关基因1(TDRG1)对结直肠癌(CRC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并探讨其作用机制是否与微小RNA-1010-3p(miR-101-3p)相互作用有关.方法:收集40对CRC组织及相应的癌旁组织.采用RT-qPCR方法检测TDRG1和miR-101-3p在CRC组...     

MALAT1对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA MALAT1对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制.方法 以子宫内膜癌RL95-2细胞为研究对象,采用慢病毒载体敲低和过表达MALAT1,利用实时荧光定量PCR检测敲低及过表达效率,通过CCK-8、流式细胞术检测敲低及过表达MALAT1后对RL95-2细胞增殖和凋亡的影响.采用免疫印迹法...     

miR-124靶向调节STAT3基因对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨miR-124及STAT3在骨肉瘤组织中的表达,以及miR-124对骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的影响。方法 Real-time PCR法检测67例患者骨肉瘤组织及对应的癌旁组织中miR-124的表达,免疫组织化学方法检测STAT3蛋白的表达。使用脂质体将miR-124抑制剂及miR-124模拟物转染至骨肉瘤MG-63细胞株,以无关序列作为阴性对照。Western blot方法检测转染后STAT3蛋白的表达变化,采用MTT方法与Transwell实验检测转染后MG-63细胞的增殖侵袭能力变化。结果 miR-124在骨肉瘤组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.01);STAT3蛋白在骨肉瘤组织中的表达明显高于癌旁组织(P0.01);转染miR-124抑制剂的MG-63细胞增殖侵袭能力与对照组相比显著升高,细胞内STAT3蛋白表达亦明显升高;转染miR-124模拟物后则得到相反的结果(P0.01)。结论 miR-124抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖和侵袭可能与下调STAT3的表达相关。     

MIF激活lncRNA-ZEB1-AS1/miR-200b信号通路促进结肠癌增殖和转移作用研究北大核心CSCD

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在结肠癌中发挥的作用及其可能的调控机制。方法:qRT-PCR检测MIF在结肠癌组织和癌旁组织中的表达及其对结肠癌患者预后的影响;qRT-PCR和免疫荧光检测MIF在结肠癌细胞HCT116和正常肠上皮细胞HIEC-6中的表达;si-RNA沉默MIF在HCT116细胞中的表达,CCK-8、Transwell和细胞划痕实验观察HCT116细胞增殖和迁移能力的变化,同时检测长链非编码RNA锌指E-盒结合同源异形盒1-反义链1(lncRNA-ZEB1-AS1)表达;starBase数据库预测分析lncRNA-ZEB1-AS1和miR-200b间的关系,双荧光素酶进行验证;分别过表达lncRNA-ZEB1-AS1和沉默miR-200b后检测HCT116增殖能力变化。结果:MIF在结肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织;MIF在HCT116细胞中表达显著高于HIEC-6细胞。靶向沉默MIF表达后,HCT116细胞增殖和转移能力降低,且lncRNA-ZEB1-AS1表达随着MIF沉默显著降低;starBase数据库预测及双荧光素酶标记实验结果表明lncRNA-ZEB1-AS1抑制miR-200b表达,且过表达lncRNAZEB1-AS1和沉默miR-200b均可逆转沉默MIF导致的细胞增殖能力下降。结论:MIF可能通过激活ZEB1-AS1/miR-200b信号通路促进结肠癌细胞的增殖和转移。     

MTSS1基因在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究MTSS1基因在膀胱癌中组织的表达及其对膀胱癌EJ138细胞增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测41例膀胱癌及相应癌旁正常组织中MTSS1基因的表达。将MTSS1基因特异性的siRNA转染EJ138细胞。转染后,Western Blot检测转染后MTSS1蛋白的表达,MTT法测定细胞生长抑制率,流式细胞法检测细胞凋亡率。结果与癌旁正常组织相比,MTSS1 mRNA在膀胱癌组织中表达明显下调。RNA干扰能够显著抑制EJ138细胞中MTSS1蛋白的表达;MTSS1基因表达降低后,EJ138细胞的生长抑制率明显降低,细胞增殖活力明显增加,而且凋亡率明显降低。结论 MTSS1基因在膀胱癌低表达,促进膀胱癌细胞增殖并抑制细胞凋亡。     

LINC00355调控miR-494-3p/CCND2对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA LINC00355)对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其作用机制.方法:qRT-PCR检测前列腺癌组织及癌旁组织中LINC00355、miR-494-3 p、细胞周期蛋白HD2(CCND2) mRNA的表达水平;体外培养前列腺癌细胞DU145,分别将si-NC、si-LIN...