小剂量内毒素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及其机制

目的:观察小剂量内毒素(LPS)预处理对心肌缺血再灌注损伤(IRI)大鼠的作用及其机制。方法:30只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、IRI组、内毒素各剂量(0.1mg/kg,0.5mg/kg,1mg/kg)预处理组(LPS组),每组各6只;IRI组采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)30min、再灌注4h的方法制备心肌IRI模型;LPS各剂量组分别于术前24h腹腔注射LPS 0.1mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg,其余处理同IRI组;Sham组只穿线不结扎。各组分别于再灌注4h结束后下腔静脉采血并摘取心脏,HE染色观察心肌组织病理学改变,全自动生化分析仪检测血清心肌酶(LDH、AST)含量,ELISA检测血清炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果:与Sham组比较,IRI组大鼠血清LDH、AST、IL-1β和IL-10明显升高(P0.01),LPS各剂量组血清LDH、AST和IL-1β均较IRI组明显降低(P0.05或P0.01),而LPS各剂量组间LDH、AST和IL-1β差异无统计学意义(P0.05)。IRI组、LPS 0.1mg/kg组、LPS 1mg/kg组IL-10含量无统计学差异(P0.05),而LPS 0.5mg/kg组IL-10含量较IRI组和LPS 0.1mg/kg组升高(P0.05或P0.01)。结论:小剂量LPS预处理对心肌IRI有保护作用,其机制与促进抗炎因子IL-10及抑制促炎因子IL-1β的表达有关,且该保护作用不呈剂量依赖性。     

人参皂甙Rd对大鼠脑缺血后丘脑远隔损害的保护作用研究

目的:探讨人参皂甙Rd(GS-Rd)对大鼠脑缺血后对丘脑远隔损害的保护作用。方法:成年SD雄性大鼠,线栓法制备大脑中动脉堵塞脑缺血模型(MCAO),随机分为假手术组,MCAO脑缺血组(1、3、5 d),GS-Rd治疗组(5 mg/kg、10 mg/kg),每组五只。GS-Rd治疗组的大鼠在MCAO手术前30 min,腹腔注射5 mg/kg或10mg/kg GS-Rd,之后每天腹腔注射相应剂量。观察并记录每组大鼠的体重变化;收集大鼠丘脑组织,采用Miliplex试剂盒法检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量变化。结果:MCAO脑缺血组大鼠的体重较假手术组减轻(P0.05),而炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量增多(P0.05);与MCAO脑缺血组相比,给予10 mg/kg剂量GS-Rd治疗组的大鼠体重增加(P0.05),而且炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量减少(P0.05);但5mg/kg剂量组较MCAO组体重无显著变化(P0.05)。结论:GS-Rd(10 mg/kg)可能通过减少炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量,减轻大鼠脑缺血后对丘脑等远隔脑区的损害。     

丙酮酸乙酯对LPS致急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB p65及TNF-α和IL-lβ的影响

目的:观察丙酮酸乙酯(EP)对内毒素性急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子-κB(NF-κB)p65表达及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)含量的影响,探讨EP可能的肺保护机制。方法:雄性SD大鼠30只随机分为三组(n均=10):正常对照组,静脉注射与其它二组等量生理盐水;LPS组,静脉注射脂多糖(LPS)5mg/kg复制大鼠ALI模型;EP+LPS组,于静脉注射LPS前1h腹腔内注射EP(40mg/kg)。所有动物于注射LPS或生理盐水后4h颈动脉放血处死,取肺组织用Westernblot测定其NF-κBp65的表达,用ELISA测定其TNF-α和IL-1β的含量。结果:与对照组相比,LPS组、EP+LPS组肺组织NF-κBp65表达增加,肺组织TNF-α和IL-lβ含量升高(P0.05);与LPS组相比,EP+LPS组肺组织NF-κBp65表达降低,肺组织TNF-α和IL-lβ含量降低(P0.05)。结论:EP通过下调大鼠LPS诱导的肺组织NF-κBp65表达,降低了TNF-α和IL-lβ的释放。EP可减轻ALI大鼠肺的炎症反应。     

大黄灵仙方对LPS诱导的肝内胆管组织损伤大鼠炎症反应及Wnt5a-Ca;-PKC信号转导通路的影响

目的:探讨大黄灵仙方对LPS诱导的肝内胆管组织损伤大鼠Wnt5a-钙离子(Ca;)-活化蛋白激酶C(PKC)信号转导通路及炎症反应的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、大黄灵仙方组(320 mg/kg)、炎症信号阻断剂组(PDTC+SB203580,120 mg/kg+10 mg/kg)、大黄灵仙方+信号阻断剂组(320 mg/kg+120 mg/kg+10 mg/kg),每组12只。采用胆总管注射内毒素LPS构建肝内胆管组织损伤模型,分别于造模前和造模后连续给药3 d,2次/d。末次给药12 h后,ELISA检测血清总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)及肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-6水平;截取胆管周围组织,HE染色观察组织病理变化;荧光免疫法检测胆管组织细胞内Ca;水平;RT-qPCR和Western blot检测胆管组织Wnt5a、骨桥蛋白(OPN)、PKC mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TBIL、TBA、TNF-α、IL-6水平、胆管组织细胞内Ca;水平、胆管组织Wnt5a、OPN、PKC mRNA及蛋白、IL-6蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与模型组相比,炎症信号阻断剂组及大黄灵仙方组大鼠TBIL、TBA、TNF-α、IL-6水平、细胞内Ca;水平、Wnt5a、OPN、PKC mRNA及蛋白、IL-6蛋白表达水平均降低(P<0.05)。与炎症信号阻断剂组及大黄灵仙方组相比,大黄灵仙方+信号阻断剂组上述指标进一步降低(P<0.05)。结论:大黄灵仙方可能通过抑制Wnt5a-Ca;-PKC信号通路活化降低肝内胆管组织损伤大鼠炎症反应。     

红景天苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和NF-κB、p38信号影响

目的:研究红景天苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和活化B细胞κ轻链增强子的核因子(NF-κB)、p38信号的影响。方法:以肺炎克雷伯菌诱导构建重症肺炎大鼠模型。实验分成对照组(只用生理盐水)、模型组(重症肺炎大鼠模型)、红景天苷小剂量组(重症肺炎大鼠模型,给予20mg/kg红景天苷治疗)、红景天苷大剂量组(重症肺炎大鼠模型,给予40mg/kg红景天苷治疗)、地塞米松组(重症肺炎大鼠模型,给予0.8mg/kg地塞米松治疗),每组大鼠各9只。治疗6天后,血气分析仪分析大鼠血气指标动脉血氧分压(PaO_2)、血氧饱和度(SaO_2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)。取大鼠肺组织,检测肺组织干/湿比重。收集肺泡灌洗液,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)含量,Griess法检测一氧化氮(NO)含量,计数炎性细胞数目。Western blot方法检测肺组织中p38、磷酸化p38(p-p38)、p65、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠PaO_2、SaO_2降低,PaCO_2升高,肺组织干/湿比重升高,肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-10、NO含量和炎性细胞数量均增加,肺组织中iNOS、p-p38/p38、p65蛋白表达水平均增加(P0.05)。与模型组比较,红景天苷小剂量组、红景天苷大剂量组、地塞米松组大鼠PaO_2、SaO_2升高,PaCO_2降低,肺组织干/湿比重降低,肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-10、NO含量和炎性细胞数量均减少,肺组织中iNOS、p-p38/p38、p65蛋白表达水平均降低(P0.05)。红景天苷大剂量组对大鼠血气指标PaO_2、SaO_2、PaCO_2和肺组织干/湿比重以及iNOS、p-p38/p38、p65蛋白表达和肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-10、NO含量的改善优于红景天苷小剂量组。结论:红景天苷改善重症肺炎大鼠肺组织炎症反应,减少炎性介质释放和炎性细胞浸润,且呈剂量依耐性,其作用与降低NF-κB和p38信号通路激活水平有关。     

小剂量羟乙基淀粉对脓毒症大鼠的肺保护作用研究

目的研究小剂量羟乙基淀粉130/0.4(HES)对脓毒症模型大鼠肺毛细血管通透性以及全身及局部炎症细胞因子水平的影响。方法 40只雄性SD大鼠,随机分为小剂量组(S组)、大剂量组(L组)、脓毒症对照组(SC组)及假手术对照组(C组)4组,每组10只。S组、L组及SC组均采用盲肠结扎穿孔的方法建立脓毒症大鼠模型;分别于CLP后4h时静脉输注HES 5ml/kg+生理盐水25ml/kg、HES 30ml/kg,SC组于相应时点输注生理盐水30ml/kg。CLP后6h处死大鼠,取肺组织计算含水量,测定毛细血管通透性、炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平及外周血炎症细胞因子水平。结果与C组比较,S组、L组及SC组肺含水量、毛细血管通透性均明显增高,肺组织及外周血TNF-α、IL-1β、IL-6水平增高(P0.05)。与SC组比较,S组与L组肺含水量、毛细血管通透性均有降低,肺组织及外周血TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P0.05);与S组比较,L组TNF-α、IL-1β、IL-6水平有所降低,但无统计学差异。结论小剂量羟乙基淀粉130/0.4具有一定肺保护作用。     

异丙酚和氯胺酮减轻大鼠肾缺血再灌注损伤

目的:观察异丙酚(propofol)或氯胺酮(ketamine)对缺血再灌注肾损伤(IR)大鼠肾组织病理变化的影响。方法:48只成年Wistar大鼠随机均分成6组,每组8只,分别为假手术组(S组)、缺血再灌注模型组(R组)、小剂量异丙酚(5mg/kg)组(P1组)、大剂量异丙酚(10mg/kg)组(P2组)、小剂量氯胺酮(10mg/kg)组(K1组)、大剂量氯胺酮(20mg/kg)组(K2组)。输液后72h处死所有大鼠,在实验开始及处死大鼠前取4mL静脉血放入低温冰箱中保存待测。处死大鼠后取部分肾脏组织置于甲醛及戊二醛溶液,用于石蜡切片,光镜及电镜观察肾脏组织结构的变化。另取一部分肾组织制作成肾组织匀浆待测。待测指标包括血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果:与缺血再灌注模型组相比,异丙酚和氯胺酮能显著降低缺血再灌注肾损伤大鼠肾组织中MDA含量(P0.05),增强SOD活性(P0.05),使缺血再灌注肾损伤大鼠肾功能及组织学改变得到明显改善。结论:异丙酚或氯胺酮对肾缺血再灌注损伤有明显拮抗作用,其作用机制可能与药物抗氧化及抗炎作用有关。     

罗格列酮通过降低IL-17减轻LPS诱导的新生大鼠急性肺损伤

目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对脂多糖(lipopolysaccharide LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤气道炎症的影响及其机制。方法清洁级SD新生大鼠随机分为对照组、LPS组及罗格列酮干预组。LPS组鼻腔中滴入LPS的剂量为4 mg/kg,对照组给予等量生理盐水,罗格列酮干预组鼻腔中滴入LPS(剂量同前)1 h后腹腔内注射罗格列酮(2 mg/kg);对照组和LPS组鼻腔滴入等量LPS或生理盐水1 h后腹腔注射等量生理盐水。各组新生鼠分别于6、12、24 h被处死,然后评估肺组织的病理评分、湿/干质量比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中多形核白细胞(PMN)计数,并检测BALF中的IL-17水平。结果与对照组相比,不同时间点LPS组的肺组织炎症病理评分、W/D、BALF中的PMN值及IL-17水平均升高(P0.05),而罗格列酮干预组肺组织炎症病理评分、W/D、BALF中的PMN值及IL-17水平在不同时间点均较LPS组降低(P0.05)。结论罗格列酮可显著减轻LPS诱导的新生鼠肺部炎症,其机制可能与其抑制IL-17分泌相关。     

黄连解毒汤调控NLRP3 炎症小体改善动脉粥样硬化的机制研究

目的:探讨黄连解毒汤对小鼠动脉粥样硬化(AS)模型NLRP3炎症小体的调控作用。方法:将ApoE~(-/-)小鼠随机分成空白组、模型组、治疗大剂量组(20 g/kg)、中剂量组(10 g/kg)、小剂量组(5 g/kg)和阳性组(20 mg/kg吡格列酮),每组6只。除空白组外,其他各组均构建AS模型,造模后连续给药6周,检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C含量;HE染色观察主动脉形态学变化;油红O染色评估AS斑块的形态和大小;免疫组织化学技术检测主动脉中NLRP3的含量;ELISA检测血清中TNF-α、IL-18和IL-1β的表达;RT-qPCR检测主动脉组织中IL-1β、Caspase-1、NLRP3、TNF-αmRNA的表达。结果:与模型组比较,用药组小鼠体重明显下降(P0.05);黄连解毒汤小剂量组和中剂量组主动脉斑块面积显著减少(P0.05);各剂量组小鼠血清LDL-C、TC、TG和TNF-α、IL-18、IL-1β水平均降低(P0.05);中剂量组HDL-C含量上调(P0.05);黄连解毒汤中、大剂量干预后,小鼠主动脉组织中IL-1β、Caspase-1、NLRP3、TNF-αmRNA表达明显下降(P0.05)。结论:黄连解毒汤可通过调控NLRP3炎症小体的表达,降低小鼠AS模型炎症因子水平,从而发挥抗AS作用。     

虫草素联合谷氨酰胺对LPS诱导的脓毒症大鼠炎症失衡及肝肺病理变化的影响

目的　研究虫草素（cordycepin,Cop）联合谷氨酰胺（glutamine,Gln）对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导的脓毒症大鼠炎症失衡和肝肺病理变化的影响及其可能机制。 方法　将大鼠按体重随机分为5组：对照组、模型组（LPS组）、LPS+Cop组、LPS+Gln组和LPS+Cop+Gln组,腹腔注射LPS（5 mg/kg）诱导建立脓毒症大鼠模型。ELISA检测外周血中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-10的含量;HE染色观察肝肺组织的病理损伤情况;TUNEL染色观察肝肺组织的细胞凋亡情况;Western blot检测肝肺组织中Caspase-3表达水平及NF-κB p65的磷酸化情况 。 结果　LPS+Cop组、LPS+Gln组和LPS+Cop+Gln组均能逆转LPS诱导的促炎因子（IL-6、TNF-α、IL-1β）的高表达和抗炎因子（IL-10）的低表达（P<0.05）,减轻病理损伤,抑制细胞凋亡（P<0.05）,降低凋亡蛋白Caspase-3高表达（P<0.05）,下调NF-κB p65的磷酸化水平（P<0.05）。 结论　在LPS诱导的脓毒症大鼠模型中,虫草素联合谷氨酰胺能有效改善其炎症失衡和肝肺病理变化。     

虫草素联合谷氨酰胺对LPS诱导的脓毒症大鼠炎症失衡及肝肺病理变化的影响

目的　研究虫草素（cordycepin,Cop）联合谷氨酰胺（glutamine,Gln）对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导的脓毒症大鼠炎症失衡和肝肺病理变化的影响及其可能机制。 方法　将大鼠按体重随机分为5组：对照组、模型组（LPS组）、LPS+Cop组、LPS+Gln组和LPS+Cop+Gln组,腹腔注射LPS（5 mg/kg）诱导建立脓毒症大鼠模型。ELISA检测外周血中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-10的含量;HE染色观察肝肺组织的病理损伤情况;TUNEL染色观察肝肺组织的细胞凋亡情况;Western blot检测肝肺组织中Caspase-3表达水平及NF-κB p65的磷酸化情况 。 结果　LPS+Cop组、LPS+Gln组和LPS+Cop+Gln组均能逆转LPS诱导的促炎因子（IL-6、TNF-α、IL-1β）的高表达和抗炎因子（IL-10）的低表达（P<0.05）,减轻病理损伤,抑制细胞凋亡（P<0.05）,降低凋亡蛋白Caspase-3高表达（P<0.05）,下调NF-κB p65的磷酸化水平（P<0.05）。 结论　在LPS诱导的脓毒症大鼠模型中,虫草素联合谷氨酰胺能有效改善其炎症失衡和肝肺病理变化。     

石榴皮多酚对妊娠糖尿病大鼠炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨石榴皮多酚(PPPs)对妊娠糖尿病(GDM)大鼠肾脏炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立GDM大鼠模型,将大鼠分为对照组(Control组)、GDM组、PPPs组(300 mg/kg PPPs)、脂多糖(LPS)组(0.1 mg/kg LPS)、PPPs+LPS组(300 mg/kg PPPs+0.1 mg/kg LPS),给药2周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)及血脂、肾功能指标;称取胎鼠体质量及胎盘质量;检测肾脏组织炎症因子水平;H-E染色观察肾脏病理变化;Westernblot检测肾脏组织TLR4、p-NF-κBp65、p-IκB-α蛋白表达。结果 GDM组大鼠FBG、血脂指标(TC、TG、LDL)、肾功能指标(UA、BUN、Cr)、肾脏组织炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平与肾组织TLR4、p-NF-κB p65、p-IκB-α蛋白表达水平较Control组显著升高(P<0.05),肾脏组织发生病理损伤,胎鼠体质量及胎盘质量亦显著高于Control组(P<0.05);PPPs可显著降低GDM大...     

天麻素对CUS大鼠抑郁样行为及IL-1β和IL-6水平的影响

目的:探讨天麻素对慢性不可预见应激(CUS)大鼠抑郁样行为的改善作用及对炎症因子IL-1β、IL-6表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(Sham),模型组(CUS),模型(CUS)+天麻素低、中、高剂量组,每组8只。对照组每天腹腔注射生理盐水(1 ml/kg),连续14 d;模型组接受CUS造模,并且在造模结束后每天腹腔注射生理盐水(1 ml/kg),连续14 d;模型+天麻素低、中、高剂量组在CUS造模结束后每天腹腔注射不同剂量的天麻素(50、100或者200 mg/kg),持续14 d。随后,通过糖水偏好实验和强迫游泳实验检测各组大鼠的抑郁样行为,在行为学检测结束后处死大鼠,通过ELISA检测海马和血清中IL-1β、IL-6水平变化情况。结果:(1)慢性不可预见应激(CUS)可以导致明显的抑郁样行为,包括糖水偏好减少(P0.05)和强迫游泳不动时间增加(P0.01),CUS组大鼠海马及血浆的IL-1β、IL-6水平明显升高(P0.01)。(2)一定剂量(100和200 mg/kg)天麻素干预可以缓解CUS大鼠的抑郁行为,CUS与CUS+GAS(M)组(P0.05)以及CUS与CUS+GAS(H)组之间(P0.01)存在显著性差异。(3)中高剂量的天麻素可以恢复CUS大鼠海马和血清的IL-1β、IL-6水平,CUS与CUS+GAS(M)组(P0.05)以及CUS与CUS+GAS(H)组之间(P0.05)的IL-1β、IL-6水平存在显著性差异。结论:天麻素可以缓解CUS模型大鼠抑郁样行为,抑制CUS模型大鼠的IL-1β、IL-6水平升高。     

基于IL-33 / ST2 信号通路的茯苓多糖调控溃疡性结肠炎大鼠肥大细胞活化的机制研究

目的:探究基于IL-33/ST2信号通路的茯苓多糖调控溃疡性结肠炎(UC)大鼠肥大细胞(MC)活化的机制。方法:SPF级SD大鼠90只,15只大鼠为对照组,其余大鼠采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法建立UC模型,造模成功后大鼠分为模型组、茯苓多糖低剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(100 mg/kg)、高剂量组(200 mg/kg)、柳氮磺胺吡啶组(SASP组)(300 g/kg),各组15只进行灌胃治疗,对照组、模型组每天灌胃生理盐水10 ml/kg,连续治疗14 d;治疗前后称量大鼠体质量,对大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分,组织学损伤(TDI)评分,结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,HE染色观察病变部位炎症程度,甲苯胺蓝法检测MC形态、数目、脱颗粒率,免疫组化检测胰蛋白酶(TA)表达水平,ELISA法检测血清IL-33、IL-5、IL-13、IL-6、sST2的水平;Western blot检测结肠组织IL-33、ST2蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠皮毛干枯、饮食量减少,黏膜腺体结构排列紊乱,炎症细胞浸润,MC数目、TA水平及IL-33、IL-5、IL-13、IL-6、sST2的水平升高(P0.05);与模型组比较,茯苓多糖组和SASP组大鼠饮食量增加,精神状态改善,黏膜损伤及炎症细胞减轻,MC数目、TA水平、IL-33、IL-5、IL-13、IL-6、sST2的水平显著降低,尤以茯苓多糖高剂量组和SASP组治疗效果最为显著(P0.05)。结论:MC活化在UC发病机制中发挥重要作用,中药茯苓多糖和SASP对UC均具有明显的治疗作用,茯苓多糖可通过抑制IL-33/ST2信号通路的激活,减少MC活化,抑制炎症因子的表达,降低结肠炎症浸润程度。     

内毒素“二次打击”顽固性低氧血症大鼠ARDS模型建立与评价

目的： 研究经内毒素“一次打击”和“二次打击”后致急性肺损伤(ALI)大鼠,建立稳定和可靠的急性呼吸窘迫综合征（ARDS）动物模型,并探讨其意义和理论依据。方法: 大肠杆菌脂多糖(LPS) 较大剂量（10 mg/kg）静脉注射或气管滴入致伤大鼠,复制“一次打击”ARDS模型;LPS小剂量（1 mg/kg）腹腔注射致伤大鼠后,再予中等剂量LPS（5 mg/kg）气管滴入,建立“二次打击”ARDS模型。连续3 d动脉血气分析,结合肺湿重/干重比值(W／D)及肺组织病理观察,评价3种ALI/ARDS模型异同。测定血浆与支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1、IL-10水平,探讨LPS二次打击法可能致病机制。结果: (1)单次LPS打击（无论是静脉注射或气管滴入）仅引发大鼠ALI和一过性低氧血症, LPS二次打击法可以引发大鼠更为持久的低氧血症和特异性肺损伤,是较为理想的ARDS的动物模型。(2)LPS二次打击法引发的ARDS发病机制与全身失控性炎症反应与肺的特异性损伤有关。结论: LPS二次打击法可建立更为稳定可靠的符合诊断指标的大鼠ARDS模型,并能更好地反映肺损伤的病理变化。     

不同剂量脂多糖预处理对哮喘小鼠肺部炎症的影响的研究

目的:研究不同剂量脂多糖(LPS)通过诱导肺泡巨噬细胞(AM)Toll样受体4(TLR4)的高表达, 探讨其对哮喘小鼠肺部炎症的影响.方法:BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组(OVA)A, 低剂量LPS处理组(0.1 mg/L LPS OVA)B, 高剂量LPS处理组(100 mg/L LPS OVA)C, 对照组(生理盐水)D.用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的含量, 实时荧光定量PCR法测定AM的TLR4的表达, 光镜观察肺组织病理变化.结果:与A组相比较, B组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著增高(P＜0.05), 而IFN-γ差异无统计学意义(P＞0.05), C组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著降低, IFN-γ显著增高(P＜0.05);与A组相比, B组与C组AM的TLR4mRNA表达均明显增高(P＜0.05), 两组间差异无统计学意义;光镜下, A组支气管黏膜下水肿, 黏液腺增生, 可见大量以嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润.B组与C组上述情况未见减轻, 并出现肺泡腔及间质充血, 中性粒细胞等大量的炎症细胞浸润, D组管腔内无黏液栓, 气道周围无炎症细胞浸润, 肺泡壁结构完整.结论:低剂量LPS(0.1 mg/L)诱导哮喘小鼠AM的TLR4高表达, 使肺部炎症加重, 而高剂量LPS(100 mg/L)可能会减轻变态反应症状.     

右美托咪啶减轻急性肺损伤的机制研究

目的探讨右美托咪啶(Dex)对小鼠急性肺损伤(ALI)的影响及潜在作用机制。方法将32只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组(Sham组)、右美托咪啶组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和药物干预组(LPS+Dex组)。LPS组和LPS+Dex组小鼠通过腹腔注射LPS(10 mg/kg)构建小鼠ALI模型,Dex组及LPS+Dex组小鼠腹腔注射Dex(40μg/kg),Sham组和LPS组注射等剂量生理盐水。LPS注射12 h后,采用HE染色比较各组小鼠肺损伤状况;qRT-PCR检测各组小鼠肺组织中促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA的表达;Western blot检测各组小鼠肺组织中GPX4、COX2和转录因子红系2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达。结果与Sham组相比,LPS组小鼠肺损伤评分明显升高(P0.05),促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1mRNA表达水平均明显升高(P0.05),肺组织铁死亡标志物GPX4蛋白表达水平明显降低(P0.05),COX2蛋白表达水平则明显升高(P0.05),肺组织中Nrf2蛋白表达水平明显降低(P0.05)。与LPS组相比,LPS+Dex组小鼠肺损伤评分明显降低(P0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA表达水平明显降低(P0.05),GPX4的蛋白表达水平明显升高(P0.05),COX2蛋白表达水平则明显降低(P0.05),Nrf2的蛋白表达水平也明显升高(P0.05)。结论 Dex可能通过激活Nrf2抑制小鼠肺组织铁死亡,进而发挥肺保护作用。     

基于NRG/ErbB通路探讨三七总皂苷对偏头痛大鼠的作用机制

目的:基于神经调节蛋白(NRG)/表皮生长因子受体(ErbB)信号通路探讨三七总皂苷(TSPN)对偏头痛大鼠的保护机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、TSPN(10 mg/kg)组和TSPN(10 mg/kg)+NRG/ErbB信号通路抑制剂AG825(50μg/kg)组(TSPN+抑制剂组),每组12只。给药1周后,模型组、TSPN组和TSPN+抑制剂组大鼠用2 mL硝酸甘油溶液(剂量为10 mg/kg)皮下注射建立偏头痛模型,对照组相同部位注射等体积的生理盐水。各组进行行为学评分;苏木精-伊红(HE)染色检测脑组织神经元形态;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平,以及脑组织中5-羟色胺(5-HT)、β-内啡肽(β-EP)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量;Western blot法检测脑组织中NRG1、ErbB2、ErbB3、ErbB4、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白水平。结果:模型组神经元空泡状明显,细胞萎缩、坏死严重,出现局部坏死、血管阻塞现象;TSPN组神经元得到一定修复,仅存在部分空泡现象;TSPN+抑制剂组细胞空泡现象明显,出现部分血管阻塞现象。与对照组相比,模型组在0～30 min、60～90 min和120～150 min中行为学评分,血清中NO、IL-6和IL-1β水平,脑组织中CGRP含量,以及脑组织中cleaved caspase-3/caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05),脑组织中5-HT和β-EP含量及NRG1、ErbB2、ErbB3和ErbB4蛋白水平显著降低(P0.05);与模型组相比,TSPN组上述指标有所缓解,耳红出现时间延长(P0.05),耳红消失时间缩短(P0.05);与TSPN组相比,NRG/ErbB信号通路抑制剂AG825逆转TSPN对上述指标的缓解。结论:TSPN可能通过激活NRG/ErbB信号通路实现对偏头痛的缓解。     

盐酸戊乙奎醚抑制脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶的活化

目的:观察盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)活化的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、LPS模型组（5 mg/kg LPS,iv）和LPS+PHC高、中、低(3.0、1.0和0.3 mg/kg)3个剂量组,每组6只,进行PHC对肺组织p38MAPK、JNK表达的量效性分析;另取大鼠在注入NS后即刻0（对照组）和注射LPS后2 h、4 h、6 h和12 h共5个时点,每时点6只,进行肺组织p38MAPK、JNK表达的时效性分析。蛋白免疫印迹法检测肺组织p38MAPK、JNK的表达。结果:LPS模型组大鼠肺组织磷酸化p38MAPK、JNK的表达显著高于对照组（P＜0.05);PHC高剂量组显著抑制LPS诱导的大鼠肺组织磷酸化p38MAPK表达（P＜0.05);PHC在造模后6 h时最能有效抑制磷酸化p38MAPK上调。与LPS模型组相比,PHC高、中、低剂量组磷酸化JNK的表达均无显著差异(均P＞0.05);造模后不同时点,PHC对磷酸化JNK的表达均无抑制作用。结论:PHC抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织p38MAPK活化,但不能抑制JNK活化,PHC对LPS诱导大鼠ALI的拮抗作用可能与其抑制p38MAPK的活化有关。     

连翘酯苷A对溃疡性结肠炎模型大鼠免疫功能的影响

目的:研究连翘酯苷A对溃疡性结肠炎大鼠免疫功能的影响,并探讨其相关作用机制。方法:将健康SD大鼠随机分为5组:对照组(不做任何处理,正常喂养)、模型组(建立溃疡性结肠炎大鼠模型)及连翘酯苷A低、中、高剂量组(分别给予模型大鼠5 mg/kg、20 mg/kg和80 mg/kg连翘酯苷A灌胃)。比色法检测大鼠结肠组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)和IL-4含量;还测定脾脏指数和胸腺指数,外周血单个核细胞(PBMC)中CD3~+、CD4~+和CD8~+T淋巴细胞百分比,血清IgA和IgG水平,以及血清补体C3和C4水平。结果:模型组大鼠结肠组织出现明显炎症和溃疡,提示造模成功;与模型组比较,连翘酯苷A各剂量组大鼠结肠炎症和溃疡明显减轻,其中高剂量组效果最好。与对照组比较,模型组大鼠脾脏指数和胸腺指数降低(P0. 05),结肠组织中MDA含量增多(P0. 05),SOD活性降低(P0. 05),PBMC中CD3~+、CD4~+和CD8~+水平及CD4~+/CD8~+比值降低(P0. 05),血清补体C3和C4水平及IL-4含量降低(P0. 05),血清IgA、IgG、TNF-α和IL-2含量升高(P0. 05);与模型组比较,连翘酯苷A各剂量组大鼠脾脏指数和胸腺指数升高(P0. 05),结肠组织中MDA含量降低(P0. 05),SOD活性增强(P0. 05),PBMC中CD3~+、CD4~+和CD8~+水平及CD4~+/CD8~+比值升高,血清补体C3和C4水平及IL-4含量升高(P0. 05),血清IgA、IgG、TNF-α和IL-2含量降低(P0. 05),均呈剂量依赖性变化。结论:连翘酯苷A能有效减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠病变,其作用机制与增强氧自由基清除力、抑制炎症反应和增强免疫功能有关。