survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示survivin在NP、BPH和PCa组织中的表达率分别为6.25%、18.18%和90.62%(P<0.01);GRIM-19的表达率分别为87.50%、81.82%和9.37%(P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,在NP和BPH组织未检测到survivinmRNA表达,而PCa组织可检测到survivinmRNA高表达。Western印迹结果证实,在NP和BPH组织中有微量的survivin蛋白表达;而PCa组织可检测到survivin蛋白高表达;在NP和BPH组织中GRIM-19蛋白表达强阳性,而PCa组织中只有微量表达,两者比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:survivin和GRIM-19的表达可能与PCa的发生密切相关。     

膀胱移行细胞癌组织survivin和bcl-2的表达及其相关性

目的研究凋亡抑制基因survivin和bcl-2在膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中的表达、对肿瘤细胞凋亡的影响及其二者的相关性,探讨survivin在BTCC发生、发展和细胞凋亡调控中的作用。方法分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测45例BTCC组织中survivinmRNA和bcl-2蛋白的表达,并采用DNA原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数(AI)。结果SurvivinmRNA和bcl-2蛋白在BTCC组织中的阳性表达率分别为71.11%和51.11%。Survivin的高表达与BTCC的淋巴转移密切相关(P<0.05),与病理分级有一定关系;而与患者性别、年龄、临床分期、肿瘤直径和肿瘤发生情况等均无相关性。bcl-2的表达与临床病理特征等均无相关。Survivin和bcl-2表达阳性的AI分别为(4.23±0.68)%和(4.29±0.67)%,均显著低于阴性表达(8.79±1.10)%和(8.85±1.15)%,即与细胞的AI呈负相关。相关性检验表明survivin与bcl-2表达密切相关(χ2=9.338,P<0.05)。结论Survivin在BTCC组织中的高表达提示其可能参与BTCC的发生和发展,可作为判断其预后的重要参考指标。Survivin可能与bcl-2在BTCC细胞凋亡的调控方面起着协同作用。     

丙肝病毒核心蛋白对肝门部胆管癌细胞增殖和细胞凋亡的调控作用

目的　探讨丙肝病毒核心蛋白 (HCVC蛋白 )在肝门部胆管癌发生和发展中的作用。方法　采用过氧化物酶 抗过氧化酶 (PAP)法检测 36例肝门部胆管癌组织中HCVC蛋白的表达 ,原位末端标记技术 (ISEL)和链霉亲合素 生物素技术 (SLAB)分别检测肝门部胆管癌中的细胞凋亡指数 (AI)和细胞增殖指数 (PI)。结果　 36例肝门部胆管癌患者中HCVC蛋白阳性表达率为61 .1 % (2 2 /36) ,AI和PI的平均值分别为 (3 .46± 0 .62 ) %和 (46 .43± 1 2 .59) % ,HCVC蛋白阳性表达组中AI明显低于HCVC蛋白阴性表达组 (P <0 .0 1 ) ,而PI在HCVC蛋白阳性组中明显高于HCVC蛋白阴性组 (P <0 .0 1 )。结论　HCVC蛋白可能有助于肝门部胆管癌细胞增殖 ,抑制细胞凋亡的发生率     

RNA干扰抑制PC-3细胞survivin基因表达并诱导细胞凋亡的实验研究

目的:研究RNA干扰抑制人前列腺癌PC-3细胞survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡的效果。方法:设计、构建针对survivin基因的RNAi表达载体,分别以质粒A、B组,阴性序列组和空白对照E组用脂质体法转染PC-3细胞,应用RT-PCR及Western印迹、流式细胞术检测其对survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡的效果。结果:各组细胞survivin蛋白的表达强度分别为(18.94±0.63)%、(16.35±0.23)%、(46.41±0.76)%、(46.20±1.47)%。各组细胞中survivin mRNA的表达强度分别为(27.94±1.43)%、(24.51±1.37)%、(49.46±0.71)%、(48.49±1.32)%。各组细胞凋亡率分别为(12.80±1.33)%、(16.48±1.00)%、(3.03±0.62)%、(2.96±0.41)%。统计学表明构建的两种阳性表达载体均有效抑制了survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡。结论:RNAi可有效抑制PC-3细胞survivin mRNA和蛋白表达,并诱导细胞凋亡。     

前列腺增生和前列腺癌组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的　探讨良性前列腺增生 (BPH)和前列腺癌 (Pca)组织细胞增殖和凋亡及Bcl 2、Bax蛋白表达的临床意义。　方法　用核酸末端原位标记方法检测BPH和Pca标本各 2 3例及 5例正常前列腺 (NP)标本 ,观察细胞凋亡情况。用ABC免疫组化法研究三种组织中PCNA、Bcl 2、Bax表达及特征。　结果　BPH和Pca的增殖细胞指数 (PI)及凋亡细胞指数 (AI)较NP明显增高 (P <0 .0 1) ,但AI/PI却显著下降 (P <0 .0 1) ,其中Pca的PI和AI又较BPH明显增高 (P <0 .0 1) ,而AI/PI却明显下降 (P <0 .0 1)。NP组织Bcl 2表达阳性 ,Bax表达阴性。BPH和Pca组织Bcl 2蛋白阳性率分别为82 .6 %和 5 2 .2 % (P <0 .0 5 ) ,Bax蛋白阳性率分别为 34.8%和 87.0 % (P <0 .0 1)。Bcl 2表达随Pca病理分级增加而明显降低 (P <0 .0 5 )。　结论　细胞增殖增加和凋亡的相对减少参与了BPH和Pca的发生发展过程。Bcl 2和Bax在BPH和Pca的发生发展过程中起重要作用 ,且与前列腺细胞凋亡调节过程有关     

前列腺癌组织中前列腺干细胞抗原的表达及其意义

目的 :探讨前列腺癌 (PCa)组织中前列腺干细胞抗原 (prostatestemcellantigen ,PSCA)的表达及其意义。方法 :应用核酸分子原位杂交 (ISH)技术 ,对 2 6例PCa和 9例正常前列腺 (NP)组织中PSCAmRNA进行检测和定位。结果 :PSCAmRNA在PCa组织表达阳性率为 84 .6 % ,其中强阳性率为 5 7.7% ;NP组织阳性率为6 6 .7% (均为弱阳性 )。PCa与NP组织表达水平差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。PSCAmRNA在PCa组织主要表达于癌细胞 ,细胞间质和肌肉组织均无表达 ;NP组织表达则定位于前列腺上皮的基底细胞层。PSCAmR NA表达水平与PCa临床分期、病理分级均无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :PSCA在探索PCa起源、PCa免疫靶向治疗方面有重要意义     

胰腺癌组织中细胞凋亡与增殖相关性的研究

目的　通过对胰腺癌组织中细胞凋亡与增殖相关性的研究 ,探讨其在胰腺癌发生发展中的作用。方法　采用原位末端标记、增殖细胞核抗原免疫组织化学染色和HE染色的方法对 32例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎组织中细胞凋亡指数 (AI)、增殖指数 (PI)和分裂细胞指数 (MI)进行检测。结果　胰腺癌组织中的AI(3.37± 2 .38)、PI(46 .6 8± 2 .2 9)、MI(0 .31± 0 .12 )均明显高于慢性胰腺炎(0 .5 1± 0 .2 3、5 .0 8± 2 .82、0 .0 6± 0 .0 3,P <0 .0 0 1) ,癌组织的PI/AI(2 1.16± 17.44 )高于慢性胰腺炎(9 .6 0± 2 .15 ,P <0 .0 5 ) ,癌组织中AI与PI呈负相关 ,随肿瘤进展 ,PI/AI值增大。结论　细胞增殖增多、细胞凋亡相对减少 ,共同促进胰腺癌的发生发展。     

阻塞性黄疸大鼠肝组织细胞凋亡及相关基因bcl-2、bax的表达

目的　探讨阻塞性黄疸肝损害的调控机制。方法　用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL)技术和免疫组织化学方法检测 4 0只阻塞性黄疸大鼠肝脏组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因bcl 2和bax蛋白的表达。结果　胆总管结扎后 ,随结扎时间的延长细胞凋亡增加 ,结扎 14d后细胞凋亡达高峰 ,凋亡指数 (AI)达 5 8.2 3± 1.5 8,各组AI差异有显著性 (P <0 .0 5 )。在阻塞性黄疸过程中 ,bcl 2蛋白表达越强 ,bax蛋白表达越弱 ,AI亦越少。结论　bcl 2和bax蛋白均参与了阻塞性黄疸肝组织中细胞凋亡的调节。     

5-Fu诱导HepG2细胞凋亡过程中Fas抗原和bcl-XL蛋白的表达及意义

目的　研究 5 -氟尿嘧啶 (5 -Fu)诱导人肝癌HepG2细胞凋亡过程中Fas抗原和bcl-XL 蛋白的表达及意义。方法　采用免疫细胞化学法对 5 -Fu处理的HepG2细胞进行染色 ,运用图像处理和分析系统定量分析Fas抗原和bcl-XL 蛋白表达。流式细胞仪检测抗 -Fas -抗体对氟尿嘧啶诱导人肝癌HepG2细胞凋亡百分率的影响。结果　在未用药处理的对照组细胞Fas抗原呈弱表达(0 .17± 0 .0 3) ,加入 0 .0 1mol L 5 -Fu后Fas阳性表达的细胞数目增加 ,表达强度增强。作用 16h后Fas抗原表达强度达高峰 (0 .4 5± 0 .0 5 ) ,与对照组比较两者有显著差异 (P <0 .0 1)。但在 0 .0 1mol L5 -Fu诱导HepG2细胞凋亡过程中癌基因蛋白bcl-XL 表达逐渐减弱 ,经药物处理 4、8、16、2 4h后 ,其表达分别为 0 .2 8± 0 .0 3、0 .2 0± 0 .0 3、0 .14± 0 .0 3和 0 .0 7± 0 .0 2。癌基因蛋白bcl-XL 的表达与Fas抗原表达呈负相关 (r =- 0 .787,P <0 .0 1)。流式细胞仪分析显示 5 -Fu作用 4 8h后 ,肝癌细胞凋亡百分率为 (16 .2 3± 0 .90 ) % ,而加入抗 -Fas -抗体后细胞凋亡百分率显著上升为 (40 .13± 1.4 5 ) % (P<0 .0 1)。结论　 5 -Fu诱导HepG2细胞凋亡是通过Fas依赖途径 ,属于第Ⅱ型Fas信号传导途径。该凋亡过程可能与功能性Fas抗原表达上     

断流术与分流术对门静脉高压性胃病的不同影响

目的　探讨断流术与分流术对门静脉高压性胃病 (PHG)的影响。方法　实验分对照组 9例、断流术组 14例和分流术组 12例 ,采用术前及术后 3个月胃镜检查 ,原位末端标记(TUNEL)染色测凋亡指数 (AI)和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法测定Caspase 3mRNA表达量。结果　对照组AI值为 (2 .3 1± 0 .11) % ,Caspase 3mRNA表达量为0 .5 1± 0 .0 3 ,其他组与对照组比较 ,AI值增加差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,Caspase 3mRNA表达量显著增加 (P <0 .0 5 )。断流术后AI值由术前的 (12 .83± 1.5 4) %增加到 (16.2 4± 1.68) % (P <0 .0 5 ) ,PHG患者 2例由轻转重 ,PHG病变程度加重 (P <0 .0 5 ) ;相反 ,分流术后AI值从术前的 (12 .18± 1.3 2 ) %回降至 (8.5 8±0 .72 ) % (P <0 .0 5 ) ,术后PHG患者 1例由重转轻 ,4例痊愈 ,PHG病变程度得到缓解 (P <0 .0 5 )。Caspcse 3mRNA表达量与AI值有类似改变两者间呈正相关(r =0 .86,P <0 .0 5 )。结论　PHG胃黏膜细胞凋亡增加 ,断流术后凋亡加剧 ,PHG病变程度加重 ;分流术后凋亡改善 ,PHG病变程度缓解。     

前列腺癌细胞凋亡与iNOS、Bcl-2的表达及意义

目的 :探讨细胞凋亡和诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)、Bcl 2蛋白表达在前列腺癌中的意义以及两者之间的关系。　方法 :对 2 4例前列腺癌、15例前列腺增生及 5例正常前列腺组织行原位细胞凋亡检测及iNOS、Bcl 2蛋白免疫组化检测。　结果 :前列腺癌组的细胞凋亡率和iNOS的染色强度均显著高于前列腺增生组及正常前列腺组(P <0 .0 1) ,且Bcl 2蛋白表达阳性者的细胞凋亡率显著低于阴性者 (P <0 .0 1)。　结论 :前列腺癌的细胞凋亡率可反映其恶性程度 ;iNOS的表达与前列腺癌的分化程度无关 ,但与Bcl 2蛋白表达呈负相关 ;Bcl 2蛋白表达与前列腺癌细胞凋亡呈负相关。iNOS与Bcl 2均可通过影响前列腺癌细胞凋亡而在前列腺癌病理发生发展中起作用     

P63、P504S和Survivin三种标记物联合检测在前列腺病变组织中的表达及意义

目的 研究P63、P504S和Survivin在前列腺病变组织中的表达情况以及三种标记物联合应用的诊断价值。方法 采用联合免疫组化的方法，对94例不同前列腺病变组织进行P63、P504S和Survivin联合检测。结果 30例前列腺良性增生（BPH）组织基底细胞的细胞核P63染色皆呈阳性，前列腺上皮细胞的胞浆P504S和Survivin染色皆呈阴性。61例前列腺癌（PCa）组织基底细胞的细胞核P63染色均呈阴性，细胞浆P504S染色均呈阳性，其阳性表达率为95．31％（61／64）；44例前列腺七皮细胞的胞浆Survivin染色呈阳性（包括两例局部显示阳性），其阳性表达率为68．75％（44／64）。三种标记物在BPH和PCa组织中的阳性表达率存在显著差异（P〈0．05）。前列腺癌中P504S阳性表达强度明显高于Survivin，同时发现Survivin在癌术后转移组织中的表达较P504S有增强的趋势。结论 P63阴性表达和P504S阳性表达是诊断前列腺癌的重要指标，而Survivin阳性表达趋势可能在鉴别诊断原发性和继发性前列腺癌方面具有重要意义，因此P63、P504S和Survivin联合检测可提高前列腺癌诊断的准确性。     

凋亡抑制基因Survivin和抑癌基因PTEN在前列腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究凋亡抑制基因Survivin和抑癌基因PTEN在前列腺癌(PCa)中的表达及其与肿瘤病理分级、临床分期的关系。方法:应用免疫组化法,检测43例PCa和5例良性前列腺增生(BPH)组织中Survivin蛋白和PTEN的表达。结果:43例PCa组织中Survivin蛋白的表达率为81.40%,随PCa病理分级、临床分期的增高而增高。5例BPH组织中未见其阳性表达。PTEN蛋白在43例PCa组织中阳性表达率为30.23%,PTEN阳性表达率随肿瘤细胞病理分级、临床分期程度的增高呈下降趋势。5例BPH组织中PTEN蛋白均呈阳性反应。结论:Sur-vivin蛋白和PTEN的表达与PCa临床病理特征和生物学行为有密切关系,联合检测Survivin和PTEN,对诊断PCa、判断其恶性程度及预后均有一定参考价值。     

人骨肉瘤组织中Survivin mRNA的表达及与细胞凋亡的关系

目的　观察人骨肉瘤中Survivin基因表达 ,探讨其与细胞凋亡关系及对骨肉瘤生物学行为的影响。方法　采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记技术对 3 8例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织SurvivinmRNA及骨肉瘤中Caspase 3蛋白和细胞凋亡进行检测。结果　较正常骨 (0 % )和骨软骨瘤 (6.7% ) ,SurvivinmRNA显著表达于骨肉瘤 (65 .8% )中 ,并与骨肉瘤WHO分型和转移有关 (P <0 .0 5 ) ;骨肉瘤中Caspase 3蛋白与凋亡细胞阳性率分别为71.1%和 63 .2 % ,凋亡指数 (AI)均值为 8.3 % ;Survivin阴性组AI显著高于阳性组 (P <0 .0 1) ;Sur vivin与Caspase 3表达不相关。 结论　Survivin选择性表达于骨肉瘤中 ,通过抑制细胞凋亡 ,参与骨肉瘤发生发展 ,其可能是判断骨肉瘤预后的重要参考指标。     

生存素基因表达与脑胶质瘤恶性增殖及凋亡关系的研究

目的探讨凋亡蛋白抑制因子生存素(Survivin)基因在脑胶质瘤中的表达水平以及在脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡中的作用。方法选择83例脑胶质瘤标本,采用免疫组化链霉卵白素生物素复合物(SABC)方法检测Survivin和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,分别计算Survivin免疫反应评分(IRS)和增殖指数(PI);采用TUNEL方法检测脑胶质瘤凋亡细胞,计算凋亡指数(AI)。结果脑胶质瘤SurvivinIRS、PI及AI分别为3.8±3.9、(28.4±19.5)%和(1.0±0.8)%,三者均随脑胶质瘤病理级别的增高而升高(P均<0.01)。Survivin阳性组PI明显高于阴性组PI(P<0.01),PI与SurvivinIRS呈显著正相关(r=0.740,P<0.01)。Survivin阳性组与阴性组之间AI差异无统计学意义(P>0.05),但AI与SurvivinIRS呈显著负相关(r=-0.307,P<0.01)。结论Survivin在脑胶质瘤中高表达,并在脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡过程中发挥重要作用。     

凋亡抑制基因survivin在膀胱癌组织中的表达

目的探讨新的凋亡抑制基因survivin在膀胱癌组织中的表达及其与膀胱癌生物学特性的相关性。方法应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（SP），检测survivin在42例膀胱癌组织、8例正常膀胱组织中的表达。结果Survivin在正常膀胱组织中不表达；42例膀胱癌组织有28例表达阳性，阳性率为66．7％。病理分级Ⅰ-Ⅲ级膀胱癌survivin阳性表达率分别为33．3％、76．2％、88．9％，差别有统计学意义（P〈0．05）；临床分期T1-T3膀胱癌的阳性表达率分别为60．9％（14／23）、66．7％（8／12）、85．7％（6／7），差别无统计学意义（P〉0．05）；无复发与有复发膀胱癌的阳性表达率分别为53．8％（14／26）、87．5%（14／16），差别有统计学意义（P〈0．05）。结论Survivin阳性表达引起的细胞凋亡抑制在膀胱癌的发生、发展中起一定作用，其过度表达可能提示膀胱癌预后不良。     

Survivin的表达与直肠癌细胞凋亡、血管形成及预后的关系

目的:探讨直肠癌凋亡抑制基因Survivin的表达、细胞凋亡及血管形成的关系及临床意义.方法:用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的TUNEL法和免疫组织化学技术检测50例直肠癌细胞凋亡指数(AI)、Survivin的表达及微血管密度(MVD).结果:50例直肠癌组织中Survivin阳性表达率56%(28/50),其表达与AI及MVD相关,Survivin阴性表达组的5年生存率(81.3%)显著优于阳性表达组(50%;P＜0.05);Cox模型多因素分析表明,Survivin及AI指数可作为临床预后判断的指标.结论:凋亡抑制基因Survivin的异常表达与直肠癌细胞凋亡抑制、血管形成及不良预后密切有关.     

TLR4在前列腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨TLR4在前列腺癌（PCa）中的表达情况及意义。方法：采用免疫组化法检测TLR4与Survivin蛋白在41例PCa及20例良性前列腺增生（BPH）组织中的表达,同时分析TLR4和Survivin蛋白表达与Gleason系统分级的关系。结果：TLR4与Survivin蛋白在BPH组织中的阳性表达例数分别为15例（75％）与0例（O）,在PCa组织中的阳性表达例数分别为18例（43．9％）与28例（68．3％）,TLR4表达与PCa的Gleason系统分级有显著相关性（P〈0．05）,随着Gleason评分增高,TLR4表达降低。Survivin蛋白的表达与Gleason系统分级无关（P〉O．05）。结论：TLR4表达与PCaGleason系统分级相关,其表达与PCa的发生发展密切相关,可成为估计肿瘤预后的一项指标。