rAd-p53联合伊立替康诱导结肠癌细胞株HT-29凋亡的实验研究

目的 观察重组人p53腺病毒(rAd-p503)注射液、伊立替康(CPT-11)两药单用和联用对结肠癌细胞株HT-29体外增殖、细胞凋亡的影响及可能机制.方法 取对数生长期HT-29细胞随机分为rAd-p53组、CPT-11组、联合组及对照组,其中rAd-p53组分别加入感染剂量(MOI)为50～800的rAd-p53注射液,CPT-11组分别加入质量浓度为10.0～0.1 μg/mL的CPT-11;联合组同时加入上述剂量的rAd-p53注射液和CPT-11,筛选协同作用最佳组为400 MOI rAd-p53注射液+5μg/mL CPT-11;空白组及对照组加入等体积RPMI1640培养基.采用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,Western blot检测Livin蛋白表达,实时荧光定量PCR检测Livin mRNA表达.结果 rAd-p53组、CPT-11组及联合组细胞增殖均受到抑制,细胞凋亡率及G2/M期分布比例均显著高于对照组,Livin mRNA及蛋白表达均显著低于对照组,尤以联合组为著(P＜0.05、0.01),且呈时间-剂量依赖方式.结论 rAd-p53和CPT-11联用可能通过下调Livin mRNA及蛋白表达协同抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡;此为结肠癌的基因治疗提供了新思路.     

吲哚美辛诱导结肠癌细胞凋亡的分子机制

许多凋亡相关基因在细胞凋亡的调节中起重要作用[1] ,如ｂｃｌ 2基因家族是重要的凋亡调控基因。结肠癌的发生发展常伴有凋亡机制障碍 ,许多化疗药物正是通过诱导细胞凋亡起作用的。研究表明 :包括吲哚美辛 (ｉｎｄｏｍｅｔｈａｃｉｎ ,ＩＮ)在内的非甾体抗炎药 (ｎｏｎ ｓｔｅｒｏｉｄａｌａｎｔｉ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄｒｕｇｓ,ＮＳＡＩＤ)能显著改变肿瘤细胞周期 ,抑制细胞增殖 ,诱导肿瘤细胞凋亡[2 ,3] ,但该类药物诱导细胞凋亡的机制尚未阐明。本研究 ,利用反转录ＰＣＲ检测吲哚美辛诱导ＨＣＴ116细胞凋亡过程中ｂｃｌ 2ｂａｘ…     

莱菔子素诱导结肠癌细胞凋亡及其机制

十字花科蔬菜中的异硫氢酸盐成分对癌症具有重要的化学预防作用，莱菔子素(sulforaphane，SFN)为异硫代氰酸盐衍生物，可诱导机体产生Ⅱ型解毒酶，增加对致癌物的代谢解毒作用。我们在SFN诱导结肠癌细胞株Caco-2葡萄糖醛酸转移酶1A(UGT1A)表达的研究中发现，这种植物化学保护剂的浓度超过35μmol／L时，细胞的形态学发生较明显变化，我们设想，     

白藜芦醇诱导胃癌细胞凋亡的分子机制

白藜芦醇是从多种葡萄属植物中提取的多酚类化合物[1] 。近年来发现白藜芦醇具有抗癌作用[2 ,3 ] 。通过透射电镜和ＴＵＮＥＬ法 ,在体外定性、定量地研究白藜芦醇与胃癌细胞凋亡的关系 ;通过免疫组化法和ＲＴ ＰＣＲ检测凋亡相关基因ｂｃｌ 2和ｂａｘ的表达 ,研究白藜芦醇诱导胃癌细胞凋亡发生的可能机制。　　一、材料与方法1.细胞系 :胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1,由山东省立医院中心实验室传代培养。2 .白藜芦醇对胃癌细胞的生长抑制率测定 :将细胞以10 5/ｍｌ浓度接种于 96孔板 ,每孔 10 0 μｌ,2 4ｈ后分别加入不同浓度的白藜芦醇 ,分别培…     

伊立替康联合替吉奥治疗糖尿病合并晚期结肠癌疗效研究

目的探讨伊立替康联合替吉奥治疗糖尿病合并晚期结肠癌的效果。方法选取该科2017年9月—2018年9月收治的糖尿病合并晚期结肠癌患者74例,随机分为两组,各37例,对照组采用替吉奥治疗,观察组采用伊立替康联合替吉奥治疗。结果观察组有效率为59.5%,显著高于对照组43.2%,差异有统计学意义(P0.05);治疗后观察组FPG、2 hPG显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论糖尿病合并晚期结肠癌患者采用伊立替康联合替吉奥治疗效果显著,利于控制血糖。     

槲皮素诱导人结肠癌Lovo细胞凋亡及其机制的研究

目的 目的 :探讨槲皮素诱导结肠癌Lovo细胞凋亡的机制.方法 结肠癌Lovo细胞在不同浓度槲皮素干预后分别采用流式细胞术、Western印迹法等检测细胞周期变化、凋亡及Bcl-2、Bax、p53及Caspase-3蛋白表达.结果 槲皮素作用于结肠癌Lovo细胞后,引起细胞凋亡增加,并出现G2/M期阻滞,Bcl-2蛋白表达抑制,p53、Bax及Caspase-3活性增强.结论 槲皮素可能通过激活p53、Bax及Caspase-3,抑制Bcl-2来诱导Lovo细胞凋亡.     

氧化苦参碱诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的机制

目的探讨氧化苦参碱诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用及机制。方法以不同剂量的氧化苦参碱作用于人结肠癌细胞株SW480,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞的增殖能力,Hoechst 33258染色法观测细胞凋亡。免疫印迹法测定B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,荧光法测定半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3的活性。结果氧化苦参碱可剂量依赖性地抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡。Western印迹方法显示氧化苦参碱可抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,提高促凋亡蛋白Bax的表达,同时激活凋亡效应分子caspase-3。结论氧化苦参碱能够抑制结肠癌SW480细胞的增殖,通过提高Bax的表达、抑制Bcl-2的表达、激活caspase-3发挥其诱导细胞凋亡的作用。     

细胞凋亡的分子机制

细胞凋亡是一种由基因调控的,具有特征形态学和生化改变的细胞主动死亡过程,自1972年病理学家Kerr et al首先提出细胞凋亡的概念以来,世界范围的科学家给予了极大的关注并进行了大量的研究。细胞凋亡学说的建立是20世纪生物医学科学发展史上的又一里程碑。细胞凋亡贯穿生命活动的始终,不仅有助于解释个体发育、衰老过程中的诸多现象,而且有利于阐明许多长期困扰人类的疾病,如恶性肿瘤、自身免疫性疾病、免疫缺陷、感染性疾病、多种神经退化性疾病等的发生及发病机制,并为这些疾病的治疗提供新的可能途径。同样,细胞凋亡与许多消化系统疾病密切相关,凋亡是病毒性肝炎肝细胞死亡的重要机制;细胞凋亡还参与急慢性胰腺炎、溃疡性结肠炎的发生和发展;除细胞增生和分化的异常外,细胞凋亡的异常在绝大多数消化系统肿瘤的形成和发展中同样起着相当重要的作用。因此,本期焦点论坛邀请了有关专家和学者,就细胞凋亡的基础,细胞凋亡与病毒性肝炎、胃癌、肝癌、大肠肿瘤、溃疡性结肠炎的关系做一较为系统的阐述,希望对读者有所启示。     

NDGA诱导胃癌细胞凋亡的分子机制的研究

目的 探讨NDGA诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法 分光光度法检测caspase-3的细胞活性,同时用Western blot分析caspase-3及其底物PARP。用Western blot分析P53、caspase-3、PARP、P21^wafl、P27^kipl、Bcl-2和Bax的浓度,免疫法检测细胞色素C。结果 NDGA通过活化caspase-3诱导细胞凋亡,caspase-3的活化是由于细胞色素C从线粒体释放入细胞质而引起的。NDGA处理也可导致P27^kipl、Bax蛋白水平升高,同时伴有细胞积聚于G1期。z-DEVD-fmk,一种caspase-3抑制剂,可逆转caspase-3的活化及其引起的凋亡。结论 NDGA诱导的细胞凋亡是通过上调P27^kipl、Bak的水平,释放细胞色素C,最终活化caspase-3而引起的。     

苦参碱诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡及机制探讨

目的观察苦参碱（Ma）诱导结肠癌SW1116细胞凋亡的作用，并探讨其机制。方法采用不同浓度的Ma处理SW1116细胞48h，并设正常对照组，MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，半定量RT-PCR检测Fas和Bax mRNA表达水平。结果与正常对照组相比，不同浓度Ma处理的SW1116细胞抑制率、胞凋亡率显著升高（P均〈0.01），Fas和Bax mRNA表达上调（P〈0.05，P〈0.01）。结论Ma可诱导SW1116细胞凋亡，其作用机制可能与上调Fas和Bax mRNA表达有关。     

砷诱导细胞凋亡机制

砷在自然界的分布非常广泛，已经证实砷是一种人体致癌物，与许多癌症有关。同时，砷又作为一种微量元素存在于人体内，其化学形式有三价砷和五价砷两种，在体内的相互转换和代谢决定其毒性作用。但砷的药物学作用在祖国医学中已有悠久的历史，在几世纪以前砷即被用于治疗牛皮癣、风湿症、白血病、梅毒、痔疮等。     

阿司匹林诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制

目的探讨阿司匹林对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及机制,为其用于宫颈癌的临床治疗提供依据。方法体外培养Caski细胞,分别以1．0、2．5、5．0、7．5、10．0mmol／L阿司匹林干预。采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3等凋亡相关基因表达。结果阿司匹林干预后Caski细胞增殖明显受抑,且呈时间和剂量依赖性;Caski细胞G0／G1期和G2／M期比例明显下降,S期比例升高;细胞凋亡率明显升高;Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase-3活化。结论阿司匹林在体外可抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,其机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成,改变其细胞周期时相分布,诱导其凋亡。     

白花蛇舌草诱导白血病CEM细胞凋亡的分子机制

目的探讨白花蛇舌草通过调控细胞凋亡信号通络-死亡受体途径相关信号分子的表达诱导白血病CEM细胞凋亡的研究。方法分光光度法测定CEM细胞内凋亡酶半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(caspase)3、caspase8、caspase9的活性;免疫印迹实验测定caspase3、caspase8凋亡酶蛋白的表达。结果白花蛇舌草水提物浓度为6.64、33.20、166.0μg/ml分别作用于CEM细胞12、24、36 h,细胞内凋亡酶caspase3、8的活性表达高于对照组(P0.05),细胞内凋亡酶caspase9的活性表达与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。白花蛇舌草水提物不同浓度(6.64、 33.20、 166.00μg/ml)分别作用于CEM细胞不同时间(6、12、24 h),凋亡酶蛋白caspase3、8的表达随白花蛇舌草作用浓度的增加和时间的延长呈上升趋势,且与对照组比较差异有显著意义(P0.05)。结论白花蛇舌草水提物可通过上调细胞凋亡信号通路-死亡受体途径信号分子中caspase3、8的表达而达到诱导白血病CEM细胞凋亡。     

放射治疗支架内再狭窄诱导平滑肌细胞凋亡的分子机制

目的 研究支架内再狭窄部位平滑肌细胞（rVSMC）凋亡水平改变的机制,并探讨放疗诱导细胞凋亡的调控途径.方法 50例支架术后再狭窄患者,取其斑块标本,检测p53、p21和Cyclin D1的表达水平,并与正常冠脉血管平滑肌细胞（nVSMC）进行比较.结果 rVSMC中,p53和p21的表达略低于正常细胞,分别为80%和75%左右（P＜0.05）;Cyclin D1则达到了正常细胞的2倍以上（P＜0.01）.照射后,rVSMC和nVSMC的细胞凋亡均有上升（P＜0.01）,且rVSMC的上升幅度大于nVSMC（P＜0.05）;而两组细胞中p53、p21和Cyclin D1的表达水平基本相同.结论 rVSMC中p53、p21和Cyclin D1的表达水平发生改变,导致细胞凋亡减少,是发生支架内再狭窄的重要原因.放疗可改变rVSMC中各凋亡相关分子的表达,诱导细胞凋亡.     

拓扑替康诱导肺癌细胞HTB-56凋亡早期线粒体膜电位的变化

目的探讨拓扑替康诱导肺癌细胞HTB-56凋亡早期线粒体膜电位的改变。方法选择人肺癌细胞HTB-56细胞株,JC-1荧光染色标记线粒体,用早期流式细胞仪检测拓扑替康作用于HTB．56细胞不同时间细胞线粒体膜电位。采用琼脂糖凝胶电泳检测拓扑替康作用不同时间引起HTB-56细胞凋亡情况。结果经拓扑替康处理后48h、72hHTB-56细胞出现了明显的凋亡带,对照组未见明显亮带影。4h后细胞线粒体膜电位下降,8h后细胞膜电位明显下降,且下降程度随时间延长而增大。且药物组绿／红荧光比值与对照组比较均有显著性差异（P〈0．05）。结论拓扑替康诱导肺癌细胞HTB-56可使之凋亡,其机制可能与线粒体膜电位在凋亡极早期发生改变有关。     

硼替佐米诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的机制

目的 探讨硼替佐米诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的机制.方法 采用MTT法检测硼替佐米对SKOV-3细胞的细胞生长抑制率,免疫组化法及Western印迹法检测bcl-2、bad蛋白表达的变化.结果 硼替佐米明显抑制SKOV-3细胞的增殖,48 h后随着作用时间的延长和药物浓度的升高,抑制作用越来越明显,呈明显的时间-剂量依赖关系(P＜0.05).硼替佐米能够有效降低抗凋亡蛋白bcl-2的表达和增加促凋亡蛋白bad的表达.结论 硼替佐米能够有效抑制SKOV-3细胞的增殖;可能通过减少bcl-2蛋白和增加bad蛋白的表达来诱导细胞凋亡.     

酒石酸锑钾诱导人结肠癌细胞凋亡

目的研究表明酒石酸锑钾能抑制白血病细胞及淋巴瘤细胞生长,并诱导其凋亡。本研究旨在探讨酒石酸锑钾诱导人结肠癌SW480凋亡的作用。方法将不同浓度酒石酸锑钾作用于体外培养人结肠癌SW480细胞。采用MTT法检测酒石酸锑钾对结肠癌SW480细胞的生长抑制作用。并计算生长抑制率;流式细胞术检测亚二倍体峰,并利用TUNEL法进行凋亡的分子生物学检测。结果酒石酸锑钾能明显抑制结肠癌细胞生长,抑制作用呈时间和剂量依赖性;流式细胞仪检测到亚二倍体峰,亚二倍体细胞比例随时间延长而增加。TUNEL法观察到棕褐色着染的凋亡阳性细胞。结论酒石酸锑钾能抑制SW480细胞生长并诱导细胞凋亡。