适应性免疫新兴免疫检查点的相关研究进展

第一代免疫检查点抑制剂(抗CTLA-4和抗PD-1/PD-L1)靶向天然免疫稳态途径驱动更强的免疫应答来抗肿瘤,已成为一线晚期肿瘤的治疗策略,但这些药物仅在少数患者中有效。靶向新兴的免疫调节机制来激活自身的抗肿瘤免疫反应的策略已成为趋势,我们对新兴免疫靶点的临床前疗效与临床试验的报道提出一个简单的总结。这些新兴的靶点主要包括适应性免疫系统的共抑制/刺激标志物。本综述将讨论:糖皮质激素诱导的TNF受体(GITR),T细胞上可诱导表达的、与单纯疱疹病毒的糖蛋白D竞争结合HSV侵入介导物的淋巴毒素类似物(LIGHT),T细胞活化的免疫球蛋白抑制V型结构域(VISTA),诱导性T细胞共刺激物(ICOS/ICOSL),ATP-腺苷通路途径腺苷A2a受体(CD39/CD73/A2aR),蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型2(Ptpn2)。最后,我们简要地总结这些癌症免疫疗法的当前研究进展及治疗策略。     

4-1BBL胞膜外区蛋白增强抗CD3/抗PgP的抗肿瘤作用

目的研究4-1BBL胞膜外区蛋白对抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体抗肿瘤作用的影响。方法表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白及抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,体外CytoTox96检测联合应用人4-1BBL胞膜外区融合蛋白、抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用,体内建立裸鼠移植瘤模型检测4-1BBL胞膜外区蛋白作为一种免疫调节蛋白,增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤效果。结果4-1BBL胞膜外区融合蛋白在体外能够增强抗CD3/抗Pgp及PBL对靶细胞K562/A02的杀伤作用,在体内能够增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤作用。结论可溶型4-1BBL可能成为一种有前景的生物治疗佐剂,有助于PBL更高效地靶向杀伤肿瘤细胞。     

TIGIT/CD155在恶性肿瘤中的研究进展

T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains, TIGIT)是一种共抑制性受体,在T细胞和NK细胞介导的免疫应答过程中发挥重要作用。在肿瘤免疫监视中,TIGIT的作用与PD-1/PD-L1轴在肿瘤免疫抑制中的作用类似;其通过与配体CD155结合抑制T细胞和NK细胞抗肿瘤反应,导致肿瘤细胞发生免疫逃逸。有研究发现抗TIGIT单克隆抗体可减轻小鼠肿瘤负荷;抗TIGIT抗体和抗PD-1抗体可发挥协同抗肿瘤作用。因此,TIGIT/CD155有望成为肿瘤免疫治疗的新靶点和更精准的筛选PD-1/PD-L1抑制剂受益人群的生物标志物。该文就TIGIT及其配体CD155的分子结构、生物学功能及其在恶性肿瘤中的表达和免疫调控作用作一综述。     

4-1BB及其配体的分子生物学研究进展

4-1BB是激活的T淋巴细咆表而抗原。属神经生长因了受体(NGF-R)/肿瘤坏死因子受体(TNF-R)家族,4-1BB通过与其相应配体(4-1BB-L)结合,不仅能调节T淋巴细胞的激活和生长,而且还能促进抗μ激活的B淋巴细胞的增殖。抗4-1BB抗体能诱导T淋巴细胞增殖,其抗肿瘤作用比抗CD28单抗和抗CTLA4单抗作用更强。以4-1BB为基础的免疫基因治疗有望成为临床治疗某些低免疫原性肿瘤的有效策略。     

T细胞免疫检查点研究进展

探索有效的肿瘤治疗方法依然是亟待解决的难题。免疫检查点抑制剂(ICI)的使用是癌症治疗领域最重大的突破之一,通过免疫检查点阻断(ICB)能够广泛激活宿主T细胞抗肿瘤反应。以阻断程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)为代表的ICB疗法已经在多种血液恶性肿瘤和实体瘤中获得了若干适应症,大大延长了患者的生存时间。但随着临床治疗的深入也出现了诸多问题,如并非所有患者都能对ICI治疗有反应、具有单药治疗的局限性和许多临床治疗中出现的不良反应。随着T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因3(LAG-3)、 T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域(TIGIT)、含免疫球蛋白可变区结构域的T细胞活化抑制因子(VISTA)、唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(Siglec-15)等众多新的免疫检查点的发现,在不同肿瘤类型中探索靶向多个免疫检查点的联合治疗模式,或使用ICI联合化疗、抗血管生成药物等的联合疗法,将有助于提高T细胞抗肿瘤作用和患者的临床反应性;对于免疫微环境中影响ICB治疗效果的关键分子和通路的研究和调控,也将提高无应答类型肿瘤的治疗效果...     

Chop在T细胞无法杀伤肿瘤细胞起重要作用

<正>据Cao Y 2019年3月20日[Nat Commun,2019,10(1):1280-1280.]报道,美国莫菲特癌症中心的研究人员发现一种名为CD8~+T细胞的免疫细胞的功能会由于寻找疾病机制失调,从而阻碍其寻找和杀死癌细胞的能力。大多数癌症患者T细胞功能受损是癌细胞逃避保护性抗肿瘤免疫的主要原因,也是发展新免疫疗法的一大局限。免疫系统是对抗癌症的重要防御系统。免疫细胞不断在体内寻找疾病,并利用它们的抗肿瘤细胞特性来靶向和摧毁有缺陷的细胞。然而,大多数癌症患者的免疫系统受损,无法检测到癌细胞。莫菲特的研究人员调查了免疫系统的功能如何失调,希望更好地理解这些机制,从而能够改善治疗策略。以往的研究表明,蛋白质Chop参与了细胞应激反应和髓样免疫细胞反应。莫菲特的团队想要确定Chop是否也在T细胞免疫中起作用。他们发现卵巢     

CD248促肿瘤机制的研究进展

CD248又称内皮唾液酸蛋白(endosialin)或肿瘤血管内皮标志物1(TEM1),是一种具有C型凝集素样结构域的单次跨膜糖蛋白。研究表明,CD248在胚胎期表达于成纤维细胞和周细胞,在成人的绝大部分组织均不表达,仅在结肠平滑肌细胞和前列腺组织中有低水平的表达。CD248在多种肿瘤的间质和血管周细胞,以及肉瘤的实质细胞特异性高表达,CD248可通过促进肿瘤细胞的增殖、黏附和迁移、促进肿瘤的血管生成及调节肿瘤微环境等机制促进肿瘤进展。因此,CD248被认为是一种理想的抗肿瘤治疗靶点,多种靶向CD248的治疗策略已显示出初步的抗肿瘤效果,展示出较好的临床应用前景。     

免疫检查点抑制剂治疗后肝功能异常的组织病理学分析

目的:探讨单独使用免疫检查点阻断剂(immune checkpoint inhibitors,ICI)、ICI与靶向抗血管生成的酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)联合使用两种情况下,免疫反应介导性肝炎(immune-mediated hepatitis,IMH)的组织学表现差异。方法:收集2015至2019年在复旦大学附属中山医院接受抗ICI治疗发生肝功能异常且获得肝组织标本的病例21例。其中10例使用单药ICI,另11例使用ICI及靶向抗血管TKI联合治疗,观察组织病理形态,使用免疫组织化学方法检测程序性死亡配体1、2(programmed cell death-ligand 1,PD-L1/2)表达情况。结果:单药ICI治疗的IMH表现为程度不等、均匀分布于肝小叶及汇管区的炎性病变,并可出现小胆管炎、静脉内皮炎、Kupffer细胞活化及紫癜样变。8例(8/10)出现轻度肝损伤,2例(2/10)出现轻-中度肝损伤。在使用ICI及抗血管TKI联合治疗的患者中,肝损伤往往较为严重,其中4例(4/11)出现中-重度肝损伤,肝细胞桥接坏死、大片坏死,汇管区中-重度炎性病变,部分小胆管上皮变性,伴显著界面性肝炎。在较严重IMH的病例中,较多CD8+的T淋巴细胞聚集在汇管区及肝窦内,且有部分肝窦内皮细胞表达PD-L1。单药治疗、联合治疗中各有2例发生死亡,其中联合治疗组中有1例发生急性多发性肝炎,肝组织大片凝固性坏死,肝功能不可逆损伤,最终患者因多系统免疫失调,多器官衰竭而死亡。结论:与单用ICI相比,联合使用ICI及抗血管TKI有可能造成肝细胞的叠加损伤,引起严重IMH的可能性更高。     

微型双功能抗体在裸鼠体内介导人T细胞杀伤白血病细胞

目的:研究抗CD3/抗CD19微型双功能抗体介导人T细胞对白血病细胞的特异性靶向杀伤活性。方法:利用Ficoll-Hypaque法分离外周血淋巴细胞(PBL),流式细胞术从中分选T淋巴细胞,FACS检测T细胞表面标记CD25和CD69激活后的表达变化,实时定量PCR检测各组穿孔素(Perforin)和颗粒酶A(Granzyme A)的释放,建立BALB/c裸鼠Raji细胞移植瘤模型,测定该双功能抗体介导的体内靶向杀伤活性。结果:激活的T细胞,双功能抗体组CD25和CD69的表达以及释放Perforin和Granzyme A的量均明显高于对照组,在对人白血病裸鼠移植瘤模型的生物治疗中,抗CD3/抗CD19微型双功能抗体能有效抑制白血病移植瘤的生长。结论:抗CD3/抗CD19微型双功能抗体在体外及动物肿瘤模型实验中能介导人T细胞有效杀伤白血病细胞,具有潜在的临床应用前景。     

miR-212通过靶向NRP1调节结肠癌SW480肿瘤干细胞样特性和免疫应答北大核心CSCD

目的:探讨miR-212在SW480肿瘤干细胞样特性和免疫应答中的调控作用,并初步分析其调控机制。方法:结肠癌SW480细胞分别转染mimic、miR-NC或miR-212-5p,RT-PCR检测神经纤毛蛋白1(NRP1)和miR-212-5p表达水平并进行相关性分析;TargetScan预测miR-212-5p潜在靶向基因NRP1,荧光素酶实验验证靶向关系;SW480细胞单独或联合转染miR-212-5p和pcDNA-NRP1,RT-PCR检测miR-212-5p和NRP1 mRNA表达水平,Western blot检测NRP1蛋白表达水平;流式细胞术分选干细胞阳性标记(CD44+)比例,Western blot检测性别决定区Y框蛋白2(SOX2)和富含亮氨酸重复单位的G蛋白偶联受体5(LGR5)蛋白表达;ELISA测定SW480细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL-4蛋白含量,RT-PCR检测IL-6和IL-4 mRNA表达水平。结果:与Control组相比,miR-212-5p显著上调SW480肿瘤干细胞miR-212-5p表达(P<0.05),下调NRP1表达(P<0.05),抑制CD44+、SOX2、LFR5表达(P<0.05),促进炎症反应和免疫应答(P<0.05);与NRP1组相比,miR-212-5p明显抑制因NRP1上调的CD44+、SOX2和LGR5表达(P<0.05),促进因NRP1下调的炎症因子表达(P<0.05)。结论:miR-212-5p靶向抑制NRP1表达,调节结肠癌SW480肿瘤干细胞样特性和免疫应答。     

同时激活CD4+Th和CD8+CTL细胞--诱导抗肿瘤免疫的一个理想策略

细胞免疫在肿瘤的免疫应答中占主导地位,以往人们更多地关注CD8+CTL细胞反应,而忽视了CD4+Th细胞的作用。随着CD4+Th细胞对于诱导、维持和增殖CD8+T细胞作用的不断发现,许多学者希望通过同时激活CD4+Th和CD8+CTL细胞来增强抗肿瘤免疫效果。运用肿瘤全抗原、融合蛋白、融合细胞、靶向于树突状细胞恒定链以及TCR转染等手段,大量尝试显示初步结果令人满意。同时激活CD4+Th和CD8+CTL细胞可能成为诱导抗肿瘤免疫的一个理想策略。     

HCA587蛋白疫苗的抗肿瘤效应及效应细胞亚群

目的探讨HCA587蛋白疫苗对荷瘤小鼠的抗肿瘤效应并揭示抗肿瘤效应的免疫细胞亚群。方法在C57BL/6小鼠左侧胁腹部皮下接种肿瘤细胞建立肿瘤模型,给予HCA587蛋白疫苗等免疫策略治疗2次,观察抗肿瘤效果。用苏木精-伊红(HE)染色法分析疫苗治疗后肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。用SDS-PAGE电泳分析自行制备的抗CD4和CD8分子单抗的相对分子质量和纯度,并用流式细胞术对其体内阻断效果进行鉴定。将上述单抗腹腔内注射入小鼠体内,以实现免疫细胞在体清除。结果与单一蛋白治疗组、佐剂对照组相比,HCA587蛋白疫苗具有显著的抗肿瘤作用(P0.05)。在HE染色中,HCA587蛋白疫苗治疗后肿瘤局部可见大量的免疫细胞浸润。经流式细胞术鉴定,自行制备、纯化的抗CD4和CD8分子单抗在体能完全清除相应的CD4+T和CD8+T细胞亚群。当在体清除CD4+T细胞后,HCA587蛋白疫苗的抗肿瘤效应完全消失,而CD8+T细胞的清除不影响其抗肿瘤效应。结论 HCA587蛋白疫苗具有显著的抗肿瘤效应,其诱导的CD4+T细胞在抗肿瘤效应中起着至关重要的作用。     

抗禽流感(H5N1)免疫球蛋白制备及体外抑制甲型流感病毒FM1株的试验研究

目的:制备抗禽流感(H5N1)卵划黄免疫球蛋白(IgY),探讨其体外阻断甲型流感病毒FM1株的作用.方法:对经过禽流感疫苗免疫后产生并富集在卵黄中的卵黄免疫球蛋白进行提纯,用辛酸-硫酸氨二步盐析-凝胶色谱法进行纯化,利用细胞病变(CPE)抑制实验,在狗肾细胞系(MDCK)检测抗禽流感(H5N1)免疫球蛋白无毒浓度(TD0)范围及阻断甲型流感病毒FM1株攻击MDCK细胞的最小阻断浓度.结果:抗禽流感免疫球蛋白对DMCK的无毒浓度为1.764 mg/ml,当浓度为0.082 8mg/ml对流感病毒仍有阻断作用.结论:利用辛酸-硫酸氨二步盐析-凝胶色谱法成功制备卵黄免疫球蛋白,抗禽流感(H5N1)免疫球蛋白体外对流感病毒有较强的抑制作用.     

减毒沙门氏菌在抗肿瘤治疗中的应用

目前用于肿瘤治疗的细菌已逐渐发展为肿瘤治疗的潜在策略,这主要是由于细菌菌株的发展保持了良好的抗肿瘤功效,同时也具有低毒的特性。细菌介导的肿瘤治疗依赖于兼性厌氧菌,这些厌氧菌可以在氧化良好或贫氧区域存活,可靶向肿瘤。其中,减毒沙门氏菌作为基因递送载体、抗肿瘤免疫激活剂和肿瘤细胞死亡诱导剂,可通过改善宿主免疫环境、降低吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达以及调节肿瘤细胞的自噬与凋亡发挥内在抗肿瘤活性。     

白细胞介素27抗肿瘤作用的研究进展

白细胞介素27(IL-27)是IL-6/IL-12家族的一种异源二聚体细胞因子。IL-27能够通过促进CD4~+T细胞向Th1细胞分化,抑制Th2细胞、Th17细胞分化,增强细胞毒性T细胞效应,发挥抗肿瘤作用。IL-27能够调节抗血管生成相关蛋白和趋化因子的表达,从而抑制肿瘤相关血管的生成。此外,IL-27还能通过抑制上皮-间质转化等过程从多个方面参与抗肿瘤作用。因此,IL-27作为抗肿瘤细胞因子已受到越来越多的关注,成为肿瘤免疫治疗中的热点,本文总结了IL-27在抗肿瘤以及抗转移方面的研究进展。     

免疫检查点抑制剂治疗中免疫相关不良反应的临床表现及处理

正免疫检查点阻断治疗是当今备受瞩目的新兴肿瘤治疗方式。不同于以往其他治疗方式,免疫检查点抑制剂靶向机体免疫系统而非肿瘤细胞,旨在恢复并促进效应T细胞特异性识别和杀伤肿瘤细胞的功能,系统性增强全身的抗肿瘤免疫反应,因而代表了当前肿瘤治疗模式的转变。迄今多个临床试验已证实免疫检查点抑制剂在晚期黑色素瘤、非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer,NSCLC)及膀胱     

免疫检查点抑制剂治疗后肝功能异常的组织病理学分析

目的探讨单独使用免疫检查点阻断剂(immune checkpoint inhibitors, ICI)、ICI与靶向抗血管生成的酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor, TKI)联合使用两种情况下, 免疫反应介导性肝炎(immune-mediated hepatitis, IMH)的组织学表现差异。方法收集2015至2019年在复旦大学附属中山医院接受抗ICI治疗发生肝功能异常且获得肝组织标本的病例21例。其中10例使用单药ICI, 另11例使用ICI及靶向抗血管TKI联合治疗, 观察组织病理形态, 使用免疫组织化学方法检测程序性死亡配体1、2(programmed cell death-ligand 1, PD-L1/2)表达情况。结果单药ICI治疗的IMH表现为程度不等、均匀分布于肝小叶及汇管区的炎性病变, 并可出现小胆管炎、静脉内皮炎、Kupffer细胞活化及紫癜样变。8例(8/10)出现轻度肝损伤, 2例(2/10)出现轻-中度肝损伤。在使用ICI及抗血管TKI联合治疗的患者中, 肝损伤往往较为严重, 其中4例(4/11)出现中-重度肝损伤, 肝细...     

43例血友病/艾滋病患者经高效抗逆转录病毒治疗三年后免疫功能的观察

研究对43例血友病/艾滋病患者用高效抗逆转录病毒治疗三年,定期采用流式细胞仪检测CD4、CD3、CD8和NK细胞;病毒载量仪(bDNA)检测血浆病毒载量;同时检测血清免疫球蛋白及白细胞介素。结果表明,43例血友病/艾滋病患者在治疗三年后CD4+平均上升257/mm3(P<0.001),HIV RNA下降,治疗后平均降至(2.26±1.10)log/ml(P<0.0001),同时伴有IgA下降(P<0.05)IL-10,sIL-2R上升(P<0.05)。HAART能快速抑制HIV RNA的复制,纠正机体免疫功能紊乱和重建免疫功能。     

中药紫癜Ⅰ号对急性过敏性紫癜免疫功能的调节作用

目的:探讨中药对急性过敏性紫癜(Henochschonleinpurpura,HSP)免疫功能的调节作用。方法:将100例HSP患儿按1∶1分为中药治疗组(中药组)和西药治疗组(西药组),观察两组患儿治疗后疗效,检测两组病例治疗前后T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值和免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平,并进行比较。结果:中药组疗效优于西药组,复发率低于西药组;对HSP患儿免疫功能的调节作用,中药组优于西药组。结论:中药能调节HSP患儿的免疫功能,能缩短HSP患儿的症状持续时间,降低HSP患儿的复发率。     

抗癌胚抗原单抗免疫磁性纳米微粒的制备及其与188 Re的放射性标记

目的:将抗CEA单抗与磁性纳米微粒偶联制备免疫磁性纳米微粒用于肿瘤的靶向治疗,并对其进行188Re标记。方法:采用氨基硅烷化修饰的磁性纳米微粒,选择不同的酸度经戊二醛活化后,在不同的酸度下与抗CEA单抗交联制备免疫磁性纳米微粒,并对188Re标记免疫磁性纳米微粒的实验条件进行探索。结果:以抗坏血酸作为抗体的还原剂,以SnC l2-柠檬酸还原188ReO4-溶液进行抗体的直接标记,结果表明,反应3h的标记率为90%,188Re-免疫磁性纳米微粒的免疫活性是188Re-抗CEA单抗的95%,188Re标记物的体外稳定性24h为91%、48h为85%。结论:188Re-免疫磁性纳米微粒的标记率及标记稳定性可满足于进一步的肿瘤靶向治疗的体内研究。