DIFF33H参与TRAIL诱导的人Jurkat T淋巴细胞白血病细胞凋亡调控

目的：研究DIFF33H在人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡中的表达规律及其生物学功能。方法：采用PCR扩增DIFF33H cDNA，Northern blot分析DIFF33H的mRNA表达，MTT法测定细胞凋亡。结果：在重组可溶性TRAIL诱导的人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡过程中，DIFF33H mRNA的表达水平随着Jurkat细胞的凋亡而下降，并对重组可溶性TRAIL的作用具有浓度和时间的依赖性。在抗肿瘤药物5-FU诱导肿瘤细胞凋亡过程中，DIFF33H的mRNA表达水平也显著下降。结论：DIFF33H参与人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat凋亡的调控。     

细胞自噬的调控与自噬程序性死亡的研究进展

自噬(autophagy)是一种溶酶体依赖性降解途径,涉及细胞内长寿蛋白和受损伤细胞器的降解,其既是细胞保守的自我防御机制,又是一种程序性细胞死亡机制(PCD),与机体的多种疾病有密切关系.自噬具有独特的形态改变和特有的调控通路,自噬的调控涉及到多种机制、如翻译后修饰等.凋亡是研究最清楚的程序性细胞死亡机制,凋亡与细胞自噬程序性死亡之间存在着复杂的关系.对哺乳动物细胞自噬的分子调控机制,自噬程序性细胞死亡过程及其与凋亡的关系等方面进行探讨很有意义.     

3-MA对三氧化二砷诱导Jurkat细胞凋亡作用的影响

目的:探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对三氧化二砷(As2O3)诱导急性T细胞白血病系Jurkat细胞系Jurkat细胞凋亡的影响及机制。方法:XTT法检测三氧化二砷(As2O3)对急性T细胞白血病细胞系Jurkat细胞的增殖抑制作用。电镜下观察不同浓度As2O3作用Jurkat细胞24 h后细胞形态。免疫印迹和流式细胞术检测微管相关蛋白1轻链3B(LC-3B)蛋白的表达变化。AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测3-MA对AS2O3诱导急性T细胞白血病系Jurkat细胞凋亡的影响。结果:As2O3可以抑制急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞的生长,这种作用呈剂量和时间依赖性。2.5、5、10μmol/L AS2O3作用Jurkat细胞24 h后在电镜下可观察到自噬、凋亡、坏死的不同形态,并且自噬体数目不断增多。5μmol/L As2O3处理Jurkat细胞0、24、48 h后,LC-3B的平均荧光强度相对倍数分别(3.1±0.2)倍、(4.6±0.31)倍、(34.2±4.5)倍,组间相比,差异有统计学意义(P<0.05),与生长抑制率一样呈现时间依赖性增强;免疫印迹也显示As2O3处理24 h和48 h后,LC-3B的蛋白表达逐渐增强;相对于As2O3组(33.4±9.1)%的生长抑制率,3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合As2O3处理细胞后,48 h的生长抑制率为(60.6±8.3)%,差异明显,而LC-3B的表达明显降低。联合应用自噬抑制剂3-MA后Jurkat细胞的凋亡率(44.96±3.60)%,与单用As2O3组(2.94±0.26)%相比明显增加,差异有统计学意义。结论:自噬抑制剂3-MA可以增加As2O3引起的急性T细胞白血病细胞系Jurkat细胞的凋亡细胞百分数,其作用机制与诱导凋亡及抑制自噬密切相关。     

脂多糖通过PI3K/Akt/mTOR通路调控巨噬细胞自噬*

 目的： 观察脂多糖对巨噬细胞自噬活化的影响及相关信号通路的探讨。方法: 体外培养巨噬细胞株RAW264.7,分为对照组、饥饿状态激活自噬组、单纯脂多糖（LPS）刺激组、LPS+PI3K抑制剂（hVps34）组和LPS+mTOR抑制剂（雷帕霉素）组。构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-GFP-LC3,转染巨噬细胞,通过荧光显微镜观察各组细胞中自噬体形成情况。qRT-PCR方法检测各组中与细胞自噬相关的Atg5、Atg7、LC3-II和Bnip3 mRNA表达水平的改变。利用Western blotting检测LC3-II、p-Akt和p-mTOR蛋白在各组中的表达情况,以评价LPS激活巨噬细胞自噬的分子通路。结果: 成功构建稳定表达GFP-LC3的巨噬细胞,在荧光显微镜下可以观察到自噬在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组均有明显增强;qRT-PCR检测到Atg5、LC3-II和Bnip3 mRNA的表达在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组均有明显增强,而在LPS组中略微下降;Western blotting 检测发现p-Akt在饥饿状态组、LPS组和LPS+雷帕霉素组中表达明显升高;p-mTOR在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组表达明显下降;LC3-II的表达在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组中表达要高于对照组和LPS组。结论: LPS参与巨噬细胞自噬的调控,其可能的信号通路为PI3K/Akt/mTOR通路,但仍存在其它有效的调控通路。     

粉防己碱通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导卵巢癌细胞自噬

目的:研究粉防己碱(tetrandrine)对人卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞活力及自噬的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测不同作用浓度的粉防己碱对SKOV3细胞活力的影响。采用吖啶橙染色法观察粉防己碱对SKOV3细胞中自噬溶酶体形成的影响。Western blot法检测粉防己碱处理前后SKOV3细胞自噬相关蛋白LC3的表达情况及相关信号通路的变化。最后,采用MTT法检测粉防己碱单用及联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对SKOV3细胞活力的影响。结果:粉防己碱可显著抑制SKOV3细胞的活力(P<0.01),作用24 h其半数抑制浓度为15.21μmol/L。吖啶橙染色结果显示,粉防己碱明显促进SKOV3细胞中自噬溶酶体的生成。Western blot实验结果显示,粉防己碱干预后,SKOV3细胞中LC3-Ⅱ和P62蛋白的表达水平明显上调;同时,粉防己碱能明显降低PI3K/AKT/mTOR信号通路中p-mTOR和p-AKT蛋白的水平(P<0.01)。自噬抑制剂3-MA增强了粉防己碱对SKOV3细胞活力的抑制作用。结论:粉防己碱可通过抑制PI3K/AKT/m...     

rhPGRN通过MAPK/PI3K通路调控自噬和内质网应激并促进细胞增殖

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western blot验证目的蛋白的浓度和纯度。将细胞随机分为对照组、rhPGRN组、U0126组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、rhPGRN+U0126、rhPGRN+3-MA、rhPGRN+巴弗洛霉素A1(Baf-A1)和rhPGRN+4-苯基丁酸(4-PBA)组,采用细胞计数法、Western blot和RT-qPCR检测rhPGRN对C28I2和RAW264. 7两种不同类型细胞增殖、自噬和ERS的影响。结果:(1)在含有His标签的PGRN稳转细胞株中成功提取高纯度、具有生物活性的人源重组蛋白rhPGRN。(2)rhPGRN能促进C28I2和RAW264. 7细胞的增殖,促进细胞周期相关分子(PCNA、cyclin B1和cyclin D1)的mRNA表达(P<0. 05),上调细胞周期调控蛋白Ki67表达,并提高增殖相关信...     

依托泊苷通过线粒体信号通路释放细胞色素C诱导Jurkat白血病细胞凋亡

目的：研究在人类Jurkat白血病细胞株中依托泊苷诱导凋亡的分子机制，揭示由依托泊苷启动的凋亡信号通路。 方法：分别用annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色，通过流式细胞仪测定annexin V阳性和出现亚二倍体DNA的凋亡细胞。以3,3＇-dihexyloxyacarbocyanine iodide ［DiOC6(3)］为染色剂，采用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的变化。采用离心技术分离细胞的胞浆与线粒体。细胞色素c从线粒体转入胞浆，caspase-3的激活，多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）的切割等蛋白质的表达由免疫印迹技术（Western blotting）检测。 结果：依托泊苷诱导Jurkat白血病细胞凋亡，细胞凋亡与依托泊苷的作用时间呈线性关系。广谱的caspase抑制剂zVAD.fmk可抑制依托泊苷诱导的DNA片段化和磷脂酰丝氨酸外翻。依托泊苷引起的线粒体膜电位下降早于DNA片段化和磷脂酰丝氨酸外翻，形成明显对照的是zVAD.fmk不能阻断依托泊苷诱导的线粒体膜电位的下降。依托泊苷介导细胞色素c从线粒体释放到胞浆，激活caspase-3，caspase-3的底物PARP被切割。 结论：依托泊苷诱导Jurkat白血病细胞株凋亡的机制是降低线粒体膜电位和释放细胞色素c到细胞浆启动线粒体信号转导通路, 最终激活caspase而导致细胞凋亡。     

Perifosine通过抑制PI3K/Akt途径调节人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡与自噬

 目的: 探讨Akt激酶抑制剂perifosine对人胶质瘤U251细胞凋亡、细胞周期和自噬的影响,确定perifosine诱导的细胞自噬与其促进胶质瘤细胞凋亡的相关性。方法: Perifosine处理U251细胞后,采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术分析perifosine对U251细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI双标法检测perifosine对胶质瘤细胞凋亡的作用;免疫印迹法检测细胞内P21、P27和cyclin B1等细胞周期调控相关蛋白以及caspase-9、PARP等细胞凋亡相关蛋白的表达水平;通过观察细胞内自噬标志分子LC3-Ⅱ的分布与表达来确定perifosine对自噬的诱导作用。结果: Perifosine剂量依赖性地抑制U251细胞活力,能够通过抑制cyclin B1的表达而阻滞胶质瘤细胞周期于G₂期。Perifosine促进了U251细胞内caspase-9和PARP的剪切,抑制survivin表达,从而诱导胶质瘤细胞发生凋亡。同时,perifosine与自噬抑制剂氯喹联用后,U251细胞凋亡数量明显增加。结论: Perifosine能够抑制U251细胞的增殖,同时诱导细胞发生凋亡与自噬,抑制自噬促进了perifosine诱导的胶质瘤细胞凋亡。     

长春新碱诱导的自噬性细胞凋亡对线粒体膜电位的影响

目的：了解长春新碱（VCR）诱导的自噬性细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位（△Ψm）改变有关及其可能的机制。材料与方法：以正常人的肝细胞系为体外模型,应用碘化丙啶（PI）／Rhodamine123(Rh123)双重染色检测△Ψm,通过亚GI期细胞和透射电镜鉴定细胞凋亡。结果与结论：VCR可明显诱导线粒体△Ψm下降,也可以诱导L－02细胞自噬性凋亡。线粒体△Ψm下降可能是VCR诱导自噬性细胞凋亡的关键环节。     

Hydrostatic pressure induces apoptosis in the human leukaemic T-cell line Jurkat via the mitochondrial pathway

We investigated the effect of pressure levels ranging from 80 to 500 bar on the proliferative capacity and viability of Jurkat leukaemic T cells. Pressurization at 360 bar induced apoptotic cell death as shown by apoptotic morphology after Hoechst staining, DNA fragmentation in the TdT-mediated dUTP nick end labelling-assay and cleavage of several caspase substrates. Cell death could be prevented by the general caspase inhibitor zVAD-fmk. Breakdown of the mitochondrial membrane potential and the release of cytochrome c provided strong evidence for an involvement of the mitochondrial pathway, whereas a central role of the death receptor pathway was excluded because caspase-8 was not significantly activated. Pressure incubation led to calcium influx after 5 min, and we hypothesize that calcium influx could be the primary trigger for pressure-induced apoptosis.     

人甲壳质酶蛋白40通过PI3K/Akt信号通路调控膝骨性关节炎兔软骨细胞的凋亡

文题释义：膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)：常发生在中老年人群,其病理过程涉及软骨基质退行性病变、软骨细胞性状显著性改变和数量明显减少。在外力及内部环境改变等因素影响下,软骨细胞外基质、软骨细胞及软骨下骨的合成和降解动态平衡出现紊乱,软骨细胞大量凋亡使得软骨修复、重塑等稳定状态出现异常,上述情况均可诱导膝骨关节炎的发生。人甲壳质酶蛋白40(YKL-40)：是一种广泛存在于关节滑膜细胞、软骨细胞中的软骨糖蛋白,具有多种生物学功能作用：①促进软骨细胞、成骨细胞的增殖生长及分化;②促进新生血管组织的形成;③调控细胞外基质的重构过程;④协助细胞适应生长环境的显著性改变及缺氧等病理损伤,此外在软骨细胞凋亡方面也发挥一定作用。背景：由于PI3K/Akt信号通路与骨组织生理代谢之间存在着密切的联系,而人甲壳质酶蛋白40(YKL-40)对乳腺癌发病机制中的PI3K/Akt信号通路具有一定调控作用,由此推测YKL-40可能通过PI3K/Akt信号通路对膝骨性关节炎软骨细胞凋亡进行调控。目的：研究YKL-40通过PI3K/Akt信号通路调控膝骨性关节炎兔软骨细胞凋亡的作用机制。方法：①将新西兰大白兔随机分为2组,膝骨性关节炎模型组采用前交叉韧带离断术制作右后膝骨性关节炎动物模型,正常对照组仅切开右后膝关节囊,造模后第6周取材并分离软骨细胞,予以软骨组织苏木精-伊红染色及Mankin组织学评分,同时免疫组化染色检测软骨细胞Ⅱ型胶原表达;②正常对照组兔第2代软骨细胞为正常对照组;将膝骨性关节炎模型组兔第2代软骨细胞分为4组,模型组仅予以含体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM培养基培养,模型+YKL组培养基中加入100 μg/L YKL-40干预,模型+LY组培养基中加入50 µmol/L PI3K通路抑制剂LY294002干预,模型+YKL+LY组：培养基中加入100 μg/L YKL-40和50 µmol/L LY294002干预,采用免疫印迹法检测各组软骨细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶13、Akt、p-Akt、P53、Bcl-2蛋白表达水平。结果与结论：①经软骨组织苏木精-伊红染色、Mankin组织学评分及软骨细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色证实,膝骨性关节炎动物模型构建和软骨细胞培养均获得成功;②模型组Ⅱ型胶原、Bcl-2、p-Akt蛋白表达明显低于正常对照组(P < 0.05),基质金属蛋白酶13、P53蛋白表达明显高于正常对照组(P < 0.05);与模型组比较,模型+YKL组上述指标得到明显改善(P < 0.05),而模型+LY组上述指标则进一步恶化(P < 0.05),模型+YKL+LY组上述指标与模型组比较无显著性差异(P > 0.05),但与模型+YKL组和模型+LY组比较有显著性差异(P < 0.05);各组Akt蛋白表达水平比较无显著性差异(P > 0.05)。提示：YKL-40可通过激活活化PI3K/Akt信号通路,起到抑制兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡,加快软骨损伤修复和延缓软骨退行性改变的作用,可作为临床治疗膝骨性关节炎的新作用靶点。ORCID: 0000-0002-7889-445X(田胜兰)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Cyclooxygenase-2 inhibitors induce anoikis in osteosarcoma via PI3K/Akt pathway

COX-2, an inducible enzyme, is associated with inflammatory diseases and carcinogenesis. Overexpression of COX-2 occurs in many human malignancies, including osteosarcoma. In our study, we reported that Celecoxib, a cyclooxygenase-2 inhibitor, induces apoptosis in human osteosarcoma cell line MG-63 via down-regulation of PI3K/Akt. PI3K/Akt plays an essential role in the cell/extracellar matrix (ECM) and cell/cell adhesion. We hypothesize that COX-2 inhibitors induce anoikis in osteosarcoma via PI3K/Akt, resulted in lack of correct attachment and the down-regulations of β-catenin, TrkB and E-cadherin, which play an essential role in the cell/extracellar matrix (ECM) and cell/cell adhesion. Meanwhile, apoptosis also be disclosed, such as DNA fragments and apoptotic bodies, activation of caspase-8, 9 and cleavage of PARP. With wortmannin, a specific PI3K inhibitor can simulate the effect of COX-2 inhibitors. If our hypothesis is correct, COX-2 inhibitors could cut down the occurrence of metastasis and facilitate the patient who may benefit from addition of COX-2 inhibitors to standard cytotoxic therapy.     

SHIP1调控STAT3信号通路对白血病Jurkat细胞活力和凋亡的影响

目的:探讨含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶1(SHIP1)通过调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对人白血病细胞活力和凋亡的影响。方法:以白血病Jurkat细胞为研究对象,将转染空载体和SHIP1过表达载体的细胞分别记为阴性对照(NC)组和SHIP1组,同时以不作处理的细胞为空白对照(control)组,用real-time PCR和Western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的caspase-3(cleaved caspase-3)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白水平。同时,用STAT3信号通路抑制剂AG490作用于control组和SHIP1组细胞,分别记为control+AG490组和SHIP1+AG490组,再观测上述指标的变化。结果:分别与control组和NC组比较,SHIP1组SHIP1的mRNA表达水平和蛋白水平均显著升高(P0.05);细胞存活率显著降低(P0.05);细胞凋亡率显著升高(P0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P0.05)。分别与control组和control+AG490组比较,SHIP1+AG490组的细胞存活率显著降低(P0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P0.05);细胞凋亡率显著升高(P0.05)。结论:SHIP1能够通过抑制STAT3信号通路抑制人白血病细胞生长,促进白血病细胞凋亡。     

杜仲绿原酸通过PI3K/AKT/Nrf-2通路增强视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性

目的　探究杜仲绿原酸（CGA）通过调控PI3K/AKT/Nrf-2通路,对视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性的增强作用。 方法　通过不同浓度的CGA处理HXO-Rb44细胞,检测IC10,作为后续实验中CGA浓度。将细胞分为Ctrl、Radio、CGA、Radio+CGA组,Radio组给予4 MV X射线照射24 h,CGA组使用CGA处理24 h,Radio+CGA组在CGA处理24 h后再给予4 MV X射线照射24 h,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡,蛋白质印迹检测Ki67、依赖还原型辅酶I/II醌氧化还原酶I（NQO1）、活化型半胱天冬酶（cl-caspase-3）、硫氧还蛋白还原酶1（TrxR1）、活化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、p-AKT、核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达。进一步通过PI3K激活剂740Y-P处理细胞,检测细胞周期、凋亡、增殖和相关蛋白表达、PI3K/AKT/Nrf2通路蛋白表达。 结果　随着CGA浓度的增高,细胞的相对存活率降低,药物毒性呈浓度依赖性,IC10为81.59 μmol/L。与Ctrl组相比,Radio和CGA组G2/M期细胞比例显著升高,细胞凋亡比率显著升高（P<0.01）;与Radio组相比,Radio+CGA组G2/M期细胞比例和细胞凋亡比率进一步显著升高（P<0.01）。同时在蛋白水平上,与Ctrl组相比,Radio和CGA组Ki67、NQO1、TrxR1、p-PI3K、Nrf2蛋白表达及p-AKT/AKT比率显著降低（P<0.01）;放射和CGA联合作用进一步降低以上各指标（P<0.01）。此外,PI3K激活剂可逆转放射对细胞周期、增殖、凋亡以及PI3K/AKT/Nrf2通路的作用,CGA可恢复放射引起的上述各指标的变化（P<0.01）。 结论　CGA可增强HXO-Rb44细胞的放射敏感性,其作用机制与抑制PI3K/AKT/Nrf2通路相关。     

乌骨藤提取物通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制黑色素瘤细胞的活力并诱导细胞凋亡

目的:探究乌骨藤提取物(Marsdenia tenacissima extract,MTE)对黑色素瘤细胞活力及凋亡的作用及机制。方法:用不同浓度(0、50、100和200 mg/L) MTE处理小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10细胞24 h或不同浓度MTE处理不同时间(0、24、48、72和96 h),MTT法检测细胞活力。流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达,同时检测通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理细胞后p-PI3K及细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果:根据预实验结果,选择MTE作用时间为72 h。MTE浓度为100 mg/L和200 mg/L时能明显抑制B16-F10细胞活力及增殖相关蛋白Ki67和PCNA的表达,并且还可诱导B16-F10细胞凋亡,提高凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白水平;同时,MTE还可显著降低p-PI3K、p-AKT和mTOR的蛋白水平;此外,激动剂IGF-1可明显减弱MTE抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的作用。结论:MTE可通过下调PI3K/AKT/mTOR通路活性抑制黑色素瘤细胞活力,诱导细胞凋亡。     

槲皮苷通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导胃癌SGC7901细胞凋亡

目的:探讨槲皮苷是否通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡。方法:选取SGC7901细胞作为研究对象,采用MTT法检测槲皮苷对SGC7901细胞的毒性作用并测定IC50值。实验分为对照组(不加药处理)、槲皮苷组(采用200μmol/L槲皮苷处理)、PI3K/AKT通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)组(采用100μg/L IGF-1处理)和槲皮苷+IGF-1组(采用200μmol/L槲皮苷+100μg/L IGF-1共处理)。处理48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测cleaved caspase-3、p-AKT(Ser473)、AKT、p-PI3K(Tyr508)和PI3K的蛋白水平。结果:从100μmol/L开始,随着槲皮苷处理浓度的逐渐升高,SGC7901细胞活力显著降低(P 0. 05),槲皮苷作用48 h的IC50值为275. 40μmol/L。200μmol/L槲皮苷作用SGC7901细胞48 h后,与对照组比较,细胞凋亡率和cleaved caspase-3蛋白水平显著上升(P 0. 05),p-AKT和p-PI3K蛋白水平显著降低(P 0. 05),然而IGF-1与槲皮苷共同作用时,IGF-1可逆转槲皮苷对SGC7901细胞的作用效果。结论:槲皮苷能够诱导胃癌SGC7901细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。     

Shikonin protects chondrocytes from interleukin-1beta-induced apoptosis by regulating PI3K/Akt signaling pathway

Chondrocyte apoptosis is mostly responsible for the development and progression of osteoarthritis. IL-1β is generally served as an agent that induces chondrocyte apoptosis. Shikonin exerts its anti-inflammatory effect on cartilage protection in vivo. We aimed to explore the protective effect of shikonin on interleukin-1beta (IL-1β)-induced chondrocyte apoptosis and the potential molecular mechanisms. Chondrocytes were isolated from the joints of newborn Sprague-Dawley rats. The MTT assay and LDH cell death assay were used to determine the cell viability and chondrocyte apoptosis was detected by Annexin-V/PI staining and nucleosomal degradation. The contents of phosphorylated-PI3K (p-PI3k), phosphorylated-Akt (p-Akt), Bcl-2, Bax, and cytochrome c were detected by Western blotting. A quantitative colorimetric assay was used to detect the caspase-3 activity. Our results showed that pretreatment with shikonin (4 μM) inhibited cytotoxicity and apoptosis induced by IL-1β (10 ng/ml) in chondrocytes. Shikonin pretreatment also decreased the activity of IL-1β that decreased Bcl-2 expression and levels of p-PI3K and p-Akt, and increased Bax expression, cytochrome c release, and caspase-3 activation. It also reversed the activity of IL-1β that promoted the synthesis of matrix metalloproteinase-13 and inhibited the expression of tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression, with the net effect of suppressing extracellular matrix degradation. These data suggested that shikonin may protect chondrocytes from apoptosis induced by IL-1β through the PI3K/Akt signaling pathway, by deactivating caspase-3.     

黏液瘤病毒作用PI3K/AKT通路诱导子宫内膜癌细胞凋亡

目的 探讨黏液瘤病毒（MV）对子宫内膜癌HEC-IB细胞凋亡和增殖的作用.方法 通过荧光染色等观察细胞核固缩和染色体碎片等形态学变化,MTT法测定MV对HEC-IB细胞的生长抑制作用,采用流式细胞仪和免疫印迹实验检测HEC-IB细胞的生长凋亡情况及其相关蛋白的表达变化.结果 MV对子宫内膜癌HEC-IB细胞具有明显的生长抑制作用,并能诱导细胞发生凋亡,随着作用时间的延长,细胞的生长抑制率及细胞凋亡率均明显升高.MV抑制细胞生长及诱导细胞发生凋亡的过程中,细胞磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、糖原合酶激酶3（GSK3）表达水平及活性显著降低.结论 MV能够通过多条信号途径促进人子宫内膜癌HEC-IB细胞发生凋亡,通过抑制PI3K/AKT的活性是其体外诱导人子宫内膜癌HEC-IB细胞发生凋亡和抑制增值的重要作用机制.