中医药对神经干细胞增殖分化影响的研究进展

目前中医药对神经干细胞增殖分化的研究较多,研究方法分为体内试验和体外试验,神经干细胞主要分化为神经元和神经胶质细胞(多为星形胶质细胞,对少突胶质细胞的研究较少)。其促进增殖分化的中药类型主要有:滋阴、益气、补肾、活血、清热解毒等。虽然已发现许多中药对神经干细胞的增殖分化有调节作用,包括中药单体、单味药、中药复方、中药制剂等,但是目前对神经干细胞的研究仍然比较局限,还需要进一步研究。对2010年以来中医药对神经干细胞的增殖分化作用以及相关机制进行综述。     

结肠康泰对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜细胞增殖及周期的影响

[目的]探讨结肠康泰对溃疡性结肠炎（UC）大鼠模型结肠黏膜细胞增殖及周期的影响。[方法]雌性SD大鼠60只，随机分为正常对照、模型、柳氮磺胺吡啶（SASP）及结肠康泰组，以5％2、4、6，三硝基苯磺酸（TNBs）诱导大鼠形成结肠炎症，免疫组化检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及流式细胞仪分析细胞周期。[结果]SASP及结肠康泰组大鼠增殖细胞指数（LI）明显增高，G0／1期细胞明显减少而G2／M期细胞增加，与模型组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。[结论]结肠康泰能增强UC大鼠结肠黏膜细胞的增殖能力。     

益肾活血法对EAE大鼠模型的影响及对神经干细胞增殖分化的机制研究

目的探讨益肾活血法对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型的影响及对神经干细胞增殖分化的机制。方法构建EAE大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、EAE对照组和低、中、高剂量益肾活血法组,根据病理学方法检测大鼠发病时间和高峰期神经功能障碍评分,ELISA检测IL-17、IL-4、IFL-γ浓度,流式细胞仪检测CD4+和CD8+比例,Brd U标记法检测神经干细胞增殖,RT-PCR检测Hes1和Mash1 mRNA表达。结果与EAE对照组比较,低、中、高剂量组潜伏期显著增加,进展期和神经功能障碍评分显著降低(P0.01);EAE对照组和低、中、高剂量组脑组织匀浆中IFL-γ和IL-17浓度显著高于正常对照组,IL-4浓度显著低于正常对照组;低、中、高剂量组IFL-γ和IL-17浓度显著低于EAE对照组,IL-4浓度显著高于EAE对照组(P0.01);与正常对照组比较,EAE对照组和低、中、高剂量组血中CD4+/CD8+显著降低(P0.01),与EAE对照组比较显著上升(P0.01);与EAE对照组比较,中剂量组Brd U阳性细胞平均光密度显著高于低剂量组,高剂量组高于中剂量组(P0.01);与EAE对照组比较,低、中、高剂量组均能提高Hes1和Mash1 mRNA表达量。结论益肾活血法能延长EAE大鼠发病潜伏期,缩短进展期,降低发病高峰期神经功能受损;升高CD4+和CD8+比例;降低促炎因子IFL-γ和IL-17分泌,升高抗炎因子IL-4的分泌;通过上调Hes1增加神经干细胞增殖。     

胰岛素对结肠平滑肌细胞增殖及其表达干细胞因子的影响

目的:探讨胰岛素(Ins)对大鼠结肠平滑肌细胞(SMCs)增殖及其表达干细胞因子(SCF)的影响.方法:酶解法结合机械刮除法分离培养SD大鼠结肠SMCs,α-actin免疫荧光鉴定.将SMC随机分为Ins剂量组(0、2.5、5、20、40、80mg/L)与时间组(0、8、16、24 h),观察Ins作用下SMCs的增殖...     

AhR对急性胰腺炎大鼠肠道微环境及屏障功能的影响

目的 探讨芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)对急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)大鼠肠道微环境、屏障功能及核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2, Nrf-2)通路的影响。方法 通过胆胰管注射5%牛磺胆酸钠的方法建立AP大鼠模型,将50只大鼠随机分组：AP组、NC组(尾部注射5μl慢病毒空白载体)、AhR过表达组(尾部注射5μl过表达AhR慢病毒载体)、AhR抑制剂组(腹腔注射10μg 2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸)、AhR过表达+ML385组(在AhR过表达组基础上,腹腔注射20 mg/kg ML385),另取10只大鼠为假手术组。心脏采血,检测血清中脂肪酶、淀粉酶水平以及SOD、MDA、CRP水平;分离胰腺组织,观察胰腺组织损伤程度及AhR、Nrf-2、HO-1蛋白表达水平;分离回肠组织,观察肠黏膜损伤情况并进行评分。结果 与假手术组相比,模型组大鼠回肠、胰腺病理评分、CRP、MDA含量、脂肪酶、淀粉酶水平均升高,SOD含量、Nrf-2、HO-1、AhR表达显著降低...     

雷帕霉素对大鼠骨髓源平滑肌祖细胞增殖及分化的影响

目的观察雷帕霉素对骨髓源性平滑肌祖细胞增殖及分化的影响,探讨影响动脉粥样硬化的骨髓源性平滑肌祖细胞与雷帕霉素洗脱支架抑制新内膜增生的关系。方法采用密度梯度离心法从大鼠骨髓获取单个核细胞,接种于纤维连接素包被的培养板,加入不同浓度雷帕霉素(0.01~100μg/L),培养12天后,-αSMA免疫荧光染色鉴定骨髓源性平滑肌祖细胞,并在倒置荧光显微镜下计数。收集培养8天贴壁细胞,分别加入不同浓度雷帕霉素(0.1~200μg/L)培养24 h。分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室和粘附能力测定实验观察平滑肌祖细胞的增殖、迁移和粘附能力。结果雷帕霉素显著抑制骨髓单个核细胞分化为平滑肌祖细胞,0.1μg/L雷帕霉素作用12天,平滑肌祖细胞减少了70.9%±4.5%(P<0.01)。雷帕霉素也显著抑制平滑肌祖细胞增殖,其抑制作用随雷帕霉素浓度增加而增加,1μg/L雷帕霉素作用24 h使平滑肌祖细胞数量减少27.1%±4.5%(P<0.01)。0.1~200μg/L雷帕霉素显著抑制平滑肌祖细胞的粘附和迁移能力。结论雷帕霉素可抑制平滑肌祖细胞分化,并抑制平滑肌祖细胞增殖及迁移能力。     

阿魏酸钠对结肠炎大鼠结肠巨噬细胞功能的影响

目的探讨阿魏酸钠在整体水平对结肠炎大鼠结肠巨噬细胞功能的影响及其机制。方法建立大鼠免疫性结肠炎模型。阿魏酸钠（SF）灌肠用药21d后检测结肠组织MDA、NO、PGE2含量，SOD、IL-1，TNF-α、MPO活性及NF-κB p65表达水平。结果阿魏酸钠（200，400，800mg／kg）灌肠后呈剂量依赖型降低模型组大鼠的MDA、NO、PGE2含量，IL-1、TNF—α、MPO活性及NF-κB p65表达水平，同时升高SOD活性。结论SF可减弱结肠炎大鼠结肠活化巨噬细胞的生物活性，缓解结肠炎症反应，机制可能与抑制NF-κB表达有关。     

针灸对SAMP8小鼠皮层神经干细胞增殖分化的影响

目的 探讨针刺、艾灸对快速老化小鼠(SAMP8)皮层NSC增殖分化的影响.方法 选用8月龄SAMP8雄性小鼠随机分为模型组、针刺组、艾灸组,以同龄雄性正常老化小鼠(SAMR1)为对照组.针刺组、艾灸组选用"百会"进行治疗,每天治疗1次,7 d为1个疗程,共治疗3个疗程.对照组和模型组每天在相同时间给予相同方式的抓取.处死前1 w开始给予BrdU腹腔注射,50 mg/kg ;治疗结束后,取皮层,用免疫荧光双标方法检测神经干细胞(NSC)增殖、分化.结果 (1)各组小鼠均存在皮层NSC增殖.与对照组比较,模型组、针刺组、艾灸组阳性细胞数减少(P＜0.01,P＜0.05);但模型组与针刺组、艾灸组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)各组小鼠均存在皮层NSC分化.与对照组相比,模型组NSC分化为神经元较少(P＜0.01,P＜0.05)、分化为胶质细胞较多(P＜0.01,P＜0.05);与模型组相比,针刺组NSC分化为神经元较多(P＜0.05)、分化为胶质细胞较少(P＜0.01,P＜0.05);艾灸组NSC分化为未成熟神经元较多(P＜0.05)、分化为成熟星形胶质细胞(P＜0.01)和少突胶质细胞较少(P＜0.05).结论 针刺、艾灸治疗3个疗程后,主要反映在促进NSC向不同方向分化的差异.其中,针刺主要促进SAMP8皮层NSC向神经元分化,抑制向胶质细胞分化;艾灸主要是促进其向未成熟神经元分化、抑制向成熟星形胶质细胞和少突胶质细胞分化.     

神经干细胞增殖分化基因调控的进展

文章从Notch基因、bHLH基因和同源盒基因等方面介绍了神经干细胞增殖分化基因调控的最新研究进展。     

神经干细胞增殖分化基因调控的进展

文章从Notch基因，bHLH基因和同源盒基因等方面介绍了神经干细胞增殖分化基因调控的最新研究进展。     

NT-3基因转染对骨髓间充质干细胞增殖及向神经元分化的影响

目的研究神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和向神经元分化的影响,探讨转染NT-3基因的MSCs体内移植治疗脊髓损伤的可行性。方法体外培养稳定表达NT-3蛋白的MSCs,通过MTT法检测NT-3对MSCs增殖的影响;应用免疫细胞化学和免疫印迹方法检测转染NT-3的MSCs表达神经元标志物NeuN蛋白的情况。结果转染NT-3基因的MSCs生长曲线上移,细胞增殖率显著升高,与对照组相比,两者有显著差异(P<0.05),表明转染NT-3后细胞生长加快。免疫荧光染色结果显示转染NT-3的MSCs的NeuN阳性细胞数明显增多,与对照组比较有显著差异(P<0.05);Western印迹检测结果显示转染NT-3的MSCs内NeuN蛋白表达明显增多,与对照组比较有显著差异(P<0.05),表明NT-3促进MSCs向神经元方向分化。结论 NT-3基因转染可促进MSCs的增殖,并诱导其向神经元方向分化。     

人参皂甙Rg1对大鼠局灶性脑缺血后侧脑室下区神经干细胞增殖分化的影响

目的观察人参皂甙Rg1对大鼠局灶性脑缺血后侧脑室下区神经干细胞增殖分化的影响,探讨其促进神经发生的作用。方法将60只Wistar大鼠随机分为假手术组、单纯缺血组及人参皂甙Rg1治疗组。用Longa线栓法制作成年大鼠大脑中动脉闭塞模型。腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记处于增殖状态的神经干细胞,用免疫单标及双标免疫荧光技术观察人参皂甙Rg1对局灶性脑缺血后侧脑室下区BrdU免疫活性及BrdU/神经元特异性烯醇化酶和BrdU/胶质纤维酸性蛋白双标免疫活性的影响,并计数作定量分析。结果脑缺血后侧脑室下区存在BrdU阳性细胞分布;应用人参皂甙Rg1后,上述部位及周边脑区BrdU阳性细胞数及双标阳性细胞明显增多(P<0.01)。结论人参皂甙Rg1能诱导侧脑室下区神经干细胞增殖、分化,提示其具有促进神经发生的能力。     

SOX10对胶质瘤细胞增殖及去分化的影响

目的探讨SOX10过表达对胶质瘤细胞增殖和去分化的影响。方法胶质瘤细胞株U87转染SOX10腺病毒48 h后收集细胞进行MTT、流式细胞术、Western blot和Q-RT-PCR。结果 U87细胞感染SOX10过表达腺病毒后细胞的增殖受抑制,DNA合成减少,S期细胞数减少,干细胞标志CD133上调。结论 SOX10可能在胶质瘤细胞的去分化中起重要作用。     

低氧对肺血管周细胞增殖及分化的影响

目的研究低氧对肺血管周细胞增殖及分化的影响,探讨低氧性肺动脉高压时无肌型肺动脉肌化的细胞来源。方法实验分为４组：直接低氧组（Ｈ组）,常氧组（Ｎ组）,低氧内皮细胞条件培养液组（ＨＥＣＣＭ组）,常氧内皮细胞条件培养液组（ＮＥＣＣＭ组）。应用细胞培养、３Ｈ胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）、免疫细胞化学、图像分析等技术,研究低氧对肺血管周细胞３ＨＴｄＲ的掺入量、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、α平滑肌肌动蛋白（αＳＭＡｃｔｉｎ）表达的影响。结果Ｈ组周细胞３ＨＴｄＲ的掺入量、ＰＣＮＡ及αＳＭＡｃｔｉｎ的表达量分别是Ｎ组的２．１６倍（Ｐ＜０．０１）、１．１６倍（Ｐ＜０．０１）及１．１１倍（Ｐ＜０．０５）,ＨＥＣＣＭ组周细胞３ＨＴｄＲ的掺入量、ＰＣＮＡ及αＳＭＡｃｔｉｎ的表达量分别是ＮＥＣＣＭ组的１．８倍（Ｐ＜０．０１）、１．１５倍（Ｐ＜０．０１）及１．１２倍（Ｐ＜０．０５）。结论低氧可直接或刺激内皮细胞分泌某些细胞因子促进肺血管周细胞增殖、并向平滑肌样细胞分化。肺血管周细胞的增殖、向平滑肌样细胞分化是低氧性肺动脉高压无肌细动脉肌化的重要细胞来源     

天年饮对亚急性衰老大鼠睾丸生精细胞增殖与凋亡的影响

目的　观察天年饮对亚急性衰老大鼠血清超氧化物歧化酶 (SOD)活性、睾酮含量及睾丸生精细胞增殖与凋亡的影响。方法　 D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型 ,检测各组大鼠天年饮灌胃前后血清 SOD的活性、睾酮的含量以及睾丸生精细胞增殖和凋亡的情况。结果　 D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清 SOD活性、睾酮含量及睾丸生精细胞 PCNA阳性表达率均明显下降 ,与正常组比较差异显著 (P<0 .0 1 ,P<0 .0 5) ;经天年饮灌胃后 ,三者均有明显提高。 D-半乳糖致亚急性衰老大鼠睾丸生精小管凋亡百分率及凋亡阳性细胞率均增高 ,与正常组比较差异显著 (P<0 .0 5) ;经天年饮灌胃后 ,二者均降低。结论　天年饮可显著提高亚急性衰老大鼠血清 SOD活性、睾酮含量及睾丸生精细胞 PCNA的表达水平 ,降低睾丸生精细胞的凋亡指数 ,因此 ,天年饮具有延缓性腺衰老的作用。     

粒细胞集落刺激因子对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对骨髓间充质干细胞（BMSC）增殖的影响及其在BMSC向神经元样细胞分化中的作用。方法取16只SD大鼠的骨髓,体外培养BMSC,采用差速贴壁法分离细胞,并进行鉴定。按不同浓度给予G-CSF,分为四组（G0-3组）,G0组不含G-CSF,设为阴性对照;G1～3组分别含G-CSF5、10、20ng/ml,按1×10^5/ml密度接种于平底96孔培养板中（每孔100μl）。MTT法测定各组加入G-CSF第1、3、5、7天吸光度（A值）的变化,观察G-CSF对BMSC增殖的影响。以碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）预诱导24h后,按神经胶质细胞衍化营养因子（GDNF）和不同浓度G-CSF组合分组（B1-5）进一步诱导,B1不含GDNF、G-CSF,镜下观察细胞形态变化。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测神经细胞标记物GFR-α1的表达。结果①在给予G-CSF第1、3、5、7天,G0组A值呈下降趋势（F=23.5083,P〈0.05）,G1～3组内A值呈上升趋势（F1=202.5940,F2=1301.8815,F3=1222.0091,均P〈0.05）;同一时间点组间A值比较,G2、G3组较G1组增高（P〈0.05）,G2与G3组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。②B2～5组细胞逐渐变成圆形、多角形,伸出树突,并且均表达GFR-α1,而B1组无类似改变,也不表达GFR-α1。比较各诱导组在同一时间点（诱导第1、3、7天）组间灰度比值,B2-5组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论G-CSF能促进大鼠BMSC的增殖,其适宜浓度为10ng/ml。联用GDNF和适宜浓度的G-CSF,比单用GDNF能更有效地诱导BMSC分化为神经元样细胞。     

黄芩苷对全脑缺血/再灌注大鼠海马神经干细胞增殖和认知功能的影响

目的探讨中药单体黄芩苷对全脑缺血/再灌注(I/R)大鼠海马神经干细胞(NSC)增殖和认知功能的影响及其作用机制。方法将45只SD大鼠,随机分为假手术组(S组)、全脑I/R组、全脑I/R+黄芩苷组(I/RB组),每组15只。全脑I/R模型采用双侧颈总动脉夹闭合并低血压。I/RB组在造模后2 h腹腔注射黄芩苷(200 mg/kg,1次/d),S组及I/R组在相同时间点给予相同体积的生理盐水腹腔注射。造模后14 d采用Morris水迷宫观察大鼠空间学习记忆能力,免疫组织化学法观察海马Brdu表达,Western印迹检测海马脑源性生长因子(BDNF)的表达。结果与I/R组相比,I/RB组改善了全脑缺血大鼠空间学习记忆能力的损伤(P<0.05),增加了海马齿状回(DG)Brdu阳性细胞的表达数目(P<0.01),同时明显上调了海马BDNF蛋白的表达水平(P<0.01)。结论黄芩苷能促进全脑缺血大鼠海马NSC的增殖和认知功能的改善,机制可能与上调全脑缺血后海马BDNF蛋白的表达有关。