HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测方法的建立及应用

目的建立HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测的酶免疫检测方法,用于HIV感染的实验室诊断,缩短HIV感染的检测窗口期。方法制备抗HIVP24单克隆抗体和多克隆抗体,联合使用基因工程HIV1/2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的HIV1/2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物,建立联合检测HIV1/2抗体和P24抗原的ELISA方法,并对其特异性、敏感性和稳定性进行鉴定。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0.2ng/ml;检测187份HIV阳性血清、210份其他疾病患者血清和520份正常人血清,其敏感性和特异度分别为100%和99.62%。同时重复12次检测4份HIV阳性血清,变异系数均小于10%。结论本方法可以在1.5h内一步同时检出特异性HIV-1/2抗体和HIVP24抗原,缩短了HIV感染的检测窗口期,具备快速、简便、特异、敏感等优点,适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。     

第四代HIV抗原抗体检测试剂在血液筛查中的应用

目的研究第四代HIV抗原抗体检测试剂在血液筛查中的应用价值。方法对第四代HIV抗原抗体检测试剂进行灵敏度和重复性实验;分别采用第三代HIV抗体检测试剂和第四代HIV抗原抗体检测试剂对血液样本进行初复检,对第三代试剂检测阴性第四代试剂检测阳性的样本采用HIV核酸检测方法进行确认。结果第四代HIV抗原抗体检测试剂最低抗原检出浓度为1.25 U/mL,孔间精密度为3.2%;2009年10月²011年3月,共筛查样本23 480例,其中13例第三代试剂结果阴性而第四代试剂结果阳性,经HIV核酸检测的方法进行确认,全部结果均为阴性。结论在血液筛查中引入第四代HIV检测试剂的试剂功效尚待进一步验证,在已经广泛开展HIV抗体检测的基础上,引入第四代HIV抗原抗体检测试剂还是引入核酸检测具有更好的成本效益比,是一个值得待探讨的课题。     

第4代HIV抗原抗体联合检测试剂在无偿献血群体筛查中的应用

目的对第4代HIV抗原抗体联合检测试剂在无偿献血人群中的检测性能进行评估比较,给今后的HIV抗体检测策略提供帮助与参考。方法采用某第3代HIV诊断试剂与某第4代HIV诊断试剂对44 689份无偿献血样本进行平行检测,并对其结果进行统计分析。结果金豪试剂（第3代HIV诊断试剂）和上海梅里埃试剂（第4代HIV抗原抗体联合检测试剂）的敏感性均为100.00%,特异度分别为99.98%和99.96%,功效率分别为99.98%和99.96%,阳性预期值分别为50.00%和29.20%;金豪试剂（第3代HIV诊断试剂）的特异度高于上海梅里埃试剂（第4代HIV抗原抗体联合检测试剂）（P〈0.05）。结论目前第3代HIV诊断试剂的检测性能能满足预期要求,而第4代HIV抗原抗体联合检测试剂并不一定优于第3代HIV诊断试剂,现阶段采供血机构选择采用一遍第3代HIV抗体诊断试剂,一遍第4代HIV抗原抗体联合检测试剂的策略更为合理。     

国产艾滋病病毒抗体检测试剂临床应用研究

为了解国产HIV抗体初筛试剂盒的使用现状 ,促进国产HIV抗体初筛试剂盒质量的提高 ,增强我省各实验室HIV抗体检测质量 ,1 999年 1 2月对五种国产试剂进行了临床应用评估。五种国产试剂为参评试剂 ,一种进口试剂为参比试剂 ,同时检测 1 83份标本 ,其中 65份为已知阳性标本和不确定标本 ,1 1 8份为未知标本。进口试剂检出了全部 76份阳性标本 ,敏感性为 1 0 0 % ,国产试剂有 2～ 3份标本未检出 ,敏感性为 96 .1～ 97.3 %。未检出标本主要为弱阳性标本。提示象血站、医院输血科使用检测试剂时须慎重 ,以杜绝漏检。 1 0 4份阴性标本 ,进口试剂有 1份未检出 ,特异性为 99.0 % ;国产试剂有 1～ 6份未检出 ,特异性为 94.2～1 0 0 %。     

HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实验室质控和试剂评价探讨

目的探讨HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实验室质控和试剂评价。方法确认阴性血清梯度稀释HIV抗体确认阳性血清,系列的最高稀释度应含HIV抗体确认实验不确定结果,用第三代双抗原夹心法HIV抗体ELISA检测试剂进行检测,寻找稀释度与OD值间的关系,然后应用于实验室质控和试剂评价。结果在一定稀释度范围内-log[稀释度]与OD值呈线性关系。实验系列用于质控,各实验室均正确报出样品的阴阳性结果,但灵敏度(回归曲线斜率/残差标准差)不同,依此对实验室进行排序;同时,没能正确报出检测结果的试剂其确定系数和灵敏度较底。结论HIV抗体阳性血清梯度稀释系列可用于实验室质控和试剂评价。但灵敏度的合适范围还需继续探讨。     

间接免疫荧光试验在HIV抗体检测中的应用

目的：评价间接免疫荧光试验（IFA）作为一种确认实验在HIV抗体检测中的应用。方法：用T嗜性的HIV毒株感染MT4细胞制备抗原片,并与不同稀释度的免疫血清相结合,再滴加荧光素标记的羊抗人IgG,在荧光显微镜下检测特异性免疫荧光,结果：用IFA检测43分血清样本（其中包括17份WB阳性血清,14份阴性血清和12份ELISA阳性或WB出现可疑条带但按标准不能判为阳性的可疑血清）,除HIV－2血清呈阴性反应外,其余检测结果与WB相符,IFA对HIV－1抗体检测的敏感性和特异性均达到100％,HIV－1阳性血清抗体最高滴度达到1：10240。结论：IFA可用于HIV－1抗体检测的确认,它可作为Western Blot的一种补充或替代实验。     

HIV抗体筛查实验室弱阳性血清的制备及其应用

[目的]探索HIV抗体弱阳性对照血清简便、易行、准确的制备方法及HIV抗体室内质控图的应用。[方法]用另一种试剂的阴性对照血清梯度稀释该试剂的阳性对照血清,制备出弱阳性血清。[结果]用双抗原夹心ELISA法进行HIV抗体检测后找出S/CO值在2~3倍之间的血清稀释倍数,连续检测12次,制出室内质控图。[结论]制作弱阳性对照血清时,逐渐降低阳性血清抗体滴度能准确简便地找出若阳性对照血清孔数。     

不同方法对3例HIV早期感染者的血清追踪检测

目的比较5种方法及8种试剂对艾滋病(HIV)早期感染者的血清动态检测,探讨HIV早期感染血清初筛检测的最佳方案。方法应用3代ELISA、4代ELISA、胶体硒标、化学发光4代试剂及免疫印迹法(Western blot)5种方法,对3例HIV早期感染者血清进行追踪检测,分析其不同时期血清检测的动态变化。结果 5种方法的阳性检出率排序依次为化学发光4代试剂最高,其次为4代ELISA和胶体硒,3代ELISA、Western blot最低。结论初筛实验室应该用2种方法同时进行HIV抗体检测,以此排除不同试剂灵敏性差异的缺陷,或可应用4代抗原抗体联合检测试剂进行初筛,对不确定或可疑样本不轻易报告阴性,进一步用蛋白印迹法或核酸检测进行辅助诊断。     

登革热病毒感染后NS1抗原检测的应用评价

目的通过使用不同的检测方法及检测试剂,评价本地区登革热病毒感染后NS1抗原检测的应用价值。方法收集2014年-2015年确诊的登革热阳性病例血清标本127例及相应的对照样本155例,同时采用酶联免疫及real-time RT-PCR法,针对登革热病毒NS1抗原、Ig M抗体和核酸3种靶标进行检测,判断NS1抗原检测的价值。结果登革热病毒感染早期(5 d),核酸检测及抗原检测阳性率高于抗体检测,差异有统计学意义(χ2=77.537,P=0.000)。急性期过后(≥10 d)抗体检测阳性率较高,差异有统计学意义(χ2=14.797,P=0.002)。进口Panbio Dengue Early ELISA(Pan-E)试剂特异性(100.00%)高于国产试剂(92.30%),同时国产试剂敏感性(86.61%)高于进口Pan-E试剂(83.46%)。结论本地区登革热病毒感染后NS1抗原检测具有较高的敏感性和特异性,相对抗体检测可以有效提前诊断时间,2种方法的联合应用可以提高阳性检出率。     

几种国产HIV抗体酶免法检测试剂的质量评价

目的 考察国产艾滋病抗体酶免法试剂盒的质量，为部队选择质量好的艾滋病诊断试剂盒提供依据。方法 对7种主要的国产人免疫缺陷病毒(HIV)抗体酶免法试剂盒进行质量考核。以1种进口HIV抗体酶免法试剂为参比试剂，用7种考评试剂对300份血清标本进行了统一的检测。300份血清标本都经过免疫印迹方法确认，其中包括国家艾滋病参比实验室提供的50份血清和本实验室的250份血清。结果 参比试剂可以检测出全部125份阳性血清，敏感性为100％；国产试剂A、B、C、D和E可以检测出全部125份阳性血清，敏感性为100％；国产试剂F和G可以检测出124份阳性血清，敏感性为99．3％。在153份阴性血清中，参比试剂将1份错判为阳性，特异性为99．3％。国产考评试剂有1-6份错判为阳性，特异性为96．1％。99．3％。结论 国产酶免疫法HIV抗体检测试剂大部分已经达到或接近进口试剂质量水平，可以作为部队艾滋病初筛试验的诊断试剂盒。     

睡眠的探测

介绍了近年来探测睡眠的各种方法和装置,并提出了当前睡眠探测所存在的问题,展望了未来睡眠探测的发展方向。     

表面声波快速检测技术在化工职业危害检测中的应用

目的对便携式色谱-表面声波检测技术与国家标准采样检测方法进行比较。方法将便携式色谱-表面声波检测仪(GC-SAW检测仪)设定一定的色谱、声波检测器工作条件,并将识别出的主要化合物用国家标准方法进行采样、实验室分析,比较两种不同检测方法所得结果之间的符合程度。结果不同采样点存在的有机化合物种类、浓度各异,普遍在国家职业卫生标准的允许浓度之下,最高检出毒物环己烷浓度为1.7mg/m3,主要存在烷烃类物质、氯代烃类、苯系物、酚类化合物等。现场快速检测结果与实验室国标检测结果符合程度较高。结论利用便携式GC-SAW检测技术可较快速准确的计算出化合物的浓度,并与国标方法结果无显著差异。     

空气中1，2-二氯乙烷气体检测管的应用评估

采用5 L气体采样袋配制1,2-二氯乙烷标准气体系列，经气相色谱法测定建立定量评估标准曲线。分别配制低、中、高浓度空气加标样品，评价气体检测管检测结果的准确度和精密度。设计干扰实验验证气体检测管特异性。结果显示，气体检测管平均回收率98.0%～104.1%，相对标准偏差4.3%～5.3%。1,1-二氯乙烷等不干扰气体检测管显色。静态配气-气相色谱法适用于1,2-二氯乙烷快速检测的定量评估，经验证气体检测管定量结果准确稳定、特异性强。     

杀鼠剂敌鼠钠的快速检验

敌鼠钠是目前使用较普遍的一种抗凝血灭鼠剂,因该药引起的中毒事件时有发生。为能迅速查明中毒原因和及时抢救中毒患者,建立一种简便快捷的敌鼠钠检验方法非常必要。为此,我们对食物中毒样品采用的敌鼠钠薄层层析法进行了改进研究,结果报告如下。     

Sib-based detection of QTLs

Association and transmission/nontransmission analyses were used in a split sample design to identify disease susceptibility alleles at two loci. Sib-pair analysis on various subsets of the data identified an additional four regions that yielded signals of disease predisposing quantitative trait loci (QTLs). Three of these four regions represented Type I errors. A new simulation indicates that a multiplex sampling strategy would substantially improve QTL detection for this oligogenic transmission model. © 1995 Wiley-Liss, Inc.     

3种霍乱弧菌检测方法在外环境标本中的应用研究

目的：通过改进霍乱弧菌检测的技术手段，提高外环境标本中霍乱弧菌的检出率。方法：将常规分离鉴定法、PCR检测法和胶体金免疫层析试验法同时用于检测霍乱流行期间的外环境标本，并对其现场应用结果进行比较分析。结果：3种方法检测80份外环境标本霍乱弧菌的结果显示：它们均未出现假阳性，3种方法各有优势，且结果相互符合性好，但也存在各自弱点。结论：只用单一种方法来检测外环境标本霍乱弧菌存在明显不足。建议在外环境霍乱监测中选用胶体金法进行初筛，再用常规法和PCR法检测。最大限度减少漏检的可能性。     

分子生物学检测在α-地中海贫血中的应用

α-地中海贫血是一组由于α-珠蛋白基因缺失或功能障碍导致α-珠蛋白链完全缺如或合成不足所引起的遗传性溶血性疾病,是我国长江以南各省发病率最高、影响最大的遗传病之一。目前对α-地中海贫血尚无理想的治疗方法。通过加强人群、婚前、产前筛查及基因诊断,防止重型地贫儿出生,是最有效的预防措施。因此快速实用、准确有效的基因诊断技术是人群、婚前、产前筛查及诊断的有力保障。本文对α-地中海贫血的分子机制、生物学检测及应用等方面进行综述。