C1-通道在溶血磷脂酸引起的血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的 探讨C1-通道在溶血磷脂酸(LPA)引起的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用.方法 采用细胞计数和氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验,并结合激光共聚焦显微镜上测定细胞内Ca2 浓度等技术,研究不同C1-通道阻断剂对LPA促大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响.结果 C1-通道阻断剂DIDS(二异硫氰酸二丙乙烯二磺酸,0.01～O.1mmol/L)可浓度依赖式的抑制溶血磷脂酸引起的血管平滑肌细胞增殖,其他C1-通道阻断剂如5-硝基苯丙氨基苯甲(NPPB)、4乙酰氨基4异硫氰酸2,2二磺酸(SITs)、二苯丙氨基2,2二羧酸(DPC)(浓度均为10-7～10-3mol/L)和速尿(浓度均为10-5～10-3mol/L)等均无此作用,且DIDS对电压依赖性钙通道没有直接的影响.结论 溶血磷脂酸可以开放DIDS敏感的C1-通道,且该通道可能在溶血磷脂酸引起的血管平滑肌细胞增殖的调控上起一定的作用.     

阿司匹林降低缺血性脑血管病患者血浆溶血磷脂酸水平

溶血磷脂酸(LPA)有促进动脉粥样硬化的作用。LPA增加血管内皮细胞的通透性、促进血管平滑肌细胞迁移、增殖,导致血管形态的重塑等。浓度并不很高的溶血磷脂酸可导致大鼠颈总动脉新内膜的明显增生。LPA是带有1—脂酰—甘油—3—磷酸形式的分子家族,LPA主要是由血小板活化而产生的。     

急性心肌梗死后溶血磷脂酸水平与心肌重塑的关系

目的　研究急性心肌梗死 (AMI)后溶血磷脂酸 (LPA)水平的变化及其与左室重塑的相关关系 ,及LPA在AMI后心肌重塑中的作用。方法　选择AMI患者 86例 ,分别于入院即刻及第 4天测定患者血浆溶血磷脂酸和Ⅲ型前胶原蛋白的水平 ,并于入院即刻和发病第 8～ 10天对患者进行心脏彩色超声的检查 ,测定左室舒张末期直径 (LVDEd)和左室射血分数 (EF) ,并计算心肌梗死占左室面积的百分比。正常对照 4 0例 ,测定其血浆溶血磷脂酸和Ⅲ型前胶原蛋白的水平。根据入院第 4天所测得的LPA水平把患者分为两组 :LPA水平较低组 (LPA <6 0 μmol/L)为A组 ,4 5例 ;LPA水平较高组(LPA≥ 6 0 μmol/L)为B组 ,4 1例 ,比较各组参数的差异性 ,分析它们的相关关系。 结果 (1)AMI后患者血溶血磷脂酸水平较正常对照明显升高 (5 1μmol/L± 1 1μmol/L和 6 4 μmol/L± 1 3μmol/Lvs 2 5μmol/L± 1 1μmol/L ,P =0 0 0 0 1) ;(2 )溶血磷脂酸水平较高组患者与溶血磷脂酸水平较低组患者相比其左室舒张末期直径较大 (5 4 0mm± 3 3mmvs 5 1 1mm± 2 7mm ,P <0 0 5 ) ,心肌梗死面积占左室总面积的百分比较高 (114 %± 6 %vs2 6 %± 12 % ,P <0 0 5 ) ,PCⅢ水平高 (136 μg/L± 10 μg/Lvs113μg/L± 12 μg/L ,P <0     

盐酸青藤碱通过C/EBPβ-COX-2通路抑制LPA诱导的肝癌细胞增殖

目的 观察溶血磷脂酸(LPA)对肝癌细胞CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)和环氧合酶-2(COX-2)表达及增殖的影响,并进一步探讨抗炎药物盐酸青藤碱(SIN)对其可能的作用.方法 采用人肝癌Huh7细胞系,分别用Real-time PCR和Western blot检测基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测细胞增殖.结果 用10μmol/L LPA处理Huh7细胞不同时间(0～6 h)后,C/EBPβ、COX-2的蛋白和mRNA表达水平呈时间依赖性升高;分别用不同浓度的LPA(0～10μmol/L)处理Huh7细胞6 h后,C/EBPβ、COX-2的蛋白和mRNA表达均呈浓度依赖性升高;SIN浓度依赖性抑制LPA所诱导的C/EBPβ、COX-2表达及细胞增殖.结论 LPA通过诱导C/EBPβ-COX-2通路表达促进人肝癌Huh7细胞增殖,而SIN能够通过下调C/EBPβ-COX-2表达抑制LPA所诱导的细胞增殖.     

血浆溶血磷脂酸的检测及临床意义

目的　探讨溶血磷脂酸 (LPA)的检测对预防缺血性 (心 )脑卒中发生的预警作用。方法　分别检测对照组 (3 0～ 50岁 )和实验组 (65岁以上老年人 )血浆LPA的浓度 ,并对结果进行临床分析。结果　共检测 60 2例 65～ 84岁的老年人血浆LPA〔(2 .3 4± 1.2 6) μmol/L〕 ,与对照组〔LPA值为 (1.0 7± 0 .80 ) μmol/L〕相比有显著性差异(P <0 .0 1)。实验组中有 14 5例血浆LPA浓度高于参考值上限 ,平均为 (3 .62± 0 .61) μmol/L。 结论　血浆溶血磷脂酸对缺血性 (心 )脑卒中的发生有重要的预警作用     

川芎嗪对溶血磷脂酸诱导的心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:观察溶血磷脂酸(LPA)对体外培养的心脏成纤维细胞(CF)增殖的影响,进一步研究中药川芎嗪单体对其的干预作用。方法:用消化法培养新生SD大鼠心脏成纤维细胞,用单四唑(MTT)比色法测定细胞增殖,羟脯氨酸碱水解法测定胶原合成,分别观察不同浓度LPA对CF增殖和胶原合成的影响及川芎嗪的干预作用。结果:随着LPA浓度的升高,MTT比色法A490值呈上升趋势。CF分泌的胶原随着LPA浓度和作用时间的增加呈递增趋势。20μg/m l的川芎嗪作用48 h即能明显抑制LPA(10-6μmol/L)诱导的细胞增殖作用(P<0.05)。结论:LPA具有促进SD新生大鼠CF增殖和胶原合成作用,而川芎嗪能对其产生明显的抑制作用,并呈浓度依赖性。     

溶血磷脂酸通过Gi通路促进卵巢癌细胞转移的初步研究

目的研究溶血磷脂酸(LPA)对卵巢癌细胞转移的影响。方法建立测定卵巢癌细胞转移的实验模型，用Tmnsweu板测量0．05、0．5、5、50、100μmol/L5种浓度的LPA的趋化作用，用化学抑制剂初步确定介导LPA促进卵巢癌细胞转移的通道。结果细胞发生最大趋化作用时的LPA浓度是50μmol/L，G通道抑制剂百日咳毒素完全阻断了IPA对卵巢癌细胞迁移的促进作用。结论Gi依赖型信号通路对IPA促进卵巢癌细胞的转移起重要作用。     

溶血磷脂酸促卵巢癌细胞增殖机制的研究

目的 探讨溶血磷脂酸(LPA)促进卵巢癌细胞增殖的机制。方法 体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV3,选用促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导通路特异性阻断剂PD98059,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定LPA和PD98059对SKOV3细胞增殖活性的影响;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定LPA单独或合用PD98059对SKOV3细胞表达环氧化酶-2(COX-2)的影响;应用流式细胞仪（FCM）测定细胞的凋亡及细胞周期的变化。结果 LPA(浓度＞10μmol／L)以剂量依赖方式促进SKOV3细胞增殖,PD98059抑制LPA促增殖作用（P＜0.05）。RT-PCR结果显示,LPA能促进COX-2的表达（P＜0.05）,而合用PD98059后COX 2的表达降低（P＜0.05）。FCM结果显示,LPA能促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加S期比率,而合用PD98059后LPA促增殖作用消失,且G0/G1期比率升高,S期比率降低。结论 LPA通过MAPK信号传导通路促进卵巢癌细胞增殖,且与COX-2表达有关。     

TRPC6介导血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞的增殖

目的 探讨瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用.方法 应用组织贴块法培养大鼠主动脉VSMC,用AngⅡ刺激VSMC建立细胞增殖模型,应用Western blot技术检测平滑肌细胞的TRPC6表达水平,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度的SKF96365(TRPC通道阻断剂)和不同浓度的flufenamic acid(TRPC6激动剂)对VSMC增殖的影响.结果 Western blot显示在VSMC中TRPC6通道蛋白表达水平很高.用SKF96365(10、50、100 μmol/L)阻断TRPC6通道后.经过72h的作用抑制AngⅡ诱导的VSMC的增殖,且呈剂量依赖性.用flufenamic acid(10、20、40 μmol/L)激动TRPC6通道,经过24 h的作用促进了VSMC的增殖.结论 在AngⅡ诱导大鼠的血管平滑肌细胞增殖中,TRPC6通道起着很重要的作用.     

缺血性脑血管病患者血浆溶血磷脂酸检测的临床研究

目的:观察短暂性脑缺血发作(TIA)和脑梗死(CI)患者血浆溶血磷脂酸(LPA)的变化,探讨其在缺血性脑血管病发生发展以及早期诊断中的临床意义.方法:采用有机溶剂抽提,进一步分离出溶血磷脂酸,以定磷方法测定.结果:短暂性脑缺血发作(TIA)组溶血磷脂酸水平最高(4.26±1.02) μmol/L,脑梗死组溶血磷脂酸次之(2.86±1.15) μmol/L,对照组溶血磷脂酸(1.24±0.69) μmol/L.结论:溶血磷脂酸是体内凝血和血栓形成过程早期释放的分子标记物,可作为缺血性脑血管病的预警因子.     

L-精氨酸及牛磺酸对溶血性磷脂酸诱导的血管平滑肌增殖的作用

目的 :观察牛黄酸 (TAU)及L -精氨酸 (L -Arg)对溶血性磷脂酸 (LPA)诱导的血管平滑肌 (VSMC)增殖的影响并探讨其可能的机制。方法 :贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC ;3H -胸腺嘧啶 (3H -TdR)掺入测定VSMCDNA合成 ;γ - 32 P -ATP标记的同位素法测定丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性。结果 :与对照组相比 ,LPA(10 - 8mol L)可分别使VSMC3H -TdR掺入和MAPK活性增高 5 8%和 16 4 % (P <0 .0 1)。L -Arg及TAU均能浓度依赖性地抑制LPA诱导的VSMC3H -TdR掺入和MAPK激活。混合应用牛磺酸和L -精氨酸对LPA诱导的VSMC增殖及MAPK活性的抑制作用显著大于单用L -Arg和TAU(P <0 .0 1)。结论 :L -Arg及TAU均能抑制LPA诱导的VSMC增殖和MAPK激活 ,而合用L -Arg及TAU对抑制LPA诱导的VSMC增殖及MAPK活性具有协同和叠加效应     

血管活性肽对同型半胱氨酸刺激平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 观察对兔主动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖起负调节作用的Ｃ－型利钠利尿肽（ＣＮＰ）、肾上腺髓质素（Ａｄｍ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、生长抑素（ＳＳＴ）和甲状旁腺素相关蛋白（ＰＴＨｒＰ）等活性肽对同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）刺激的ＶＳＭＣ增殖的影响。方法 ６只大耳白兔胸主动脉贴块法离体培养平滑肌细胞;分对照及Ｈｃｙ加不同处理因素组;＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入测定ＶＳＭＣ增殖;差速离心分离细胞膜、胞浆及胞     

缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的牛主动脉血管平滑肌增殖及迁移的影响

目的 :观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及缬沙坦对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移的作用。方法 :取新生小牛胸主动脉采用贴块法培养平滑肌细胞 ,分成对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、缬沙坦加AngⅡ组 ,干预后分别测定3 H 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入量和计数迁移的细胞。结果 :AngⅡ (1μmol/L)作用 2 4h能使VSMC的3 H TdR的掺入量、细胞迁移数较对照组增多 ;与AngⅡ组相比 ,AngⅡ加用缬沙坦 (10 0 μmol/L)使3 H TdR的掺入量与细胞迁移数明显减少 ;与对照组相比 ,单用缬沙坦使3 H TdR的掺入量亦明显减少。结论 :AngⅡ对VSMC有促增殖、迁移作用 ,能被缬沙坦拮抗 ,而且缬沙坦在没有AngⅡ作用时亦能单独发挥抗增殖作用     

降钙素基因相关肽对尾加压素Ⅱ诱导的血管平滑肌增殖的影响

目的 :观察降钙素基因相关肽 (CGRP)对尾加压素Ⅱ (UrotensionⅡ ,UⅡ )刺激的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及机制。方法 :贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC ;3 H -胸腺嘧啶 (3 H -TdR)掺入测定VSMCDNA合成 ;γ- 3 2 P -ATP标记的同位素法测定丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性。结果 :UⅡ (10 -8mol/L)显著促进VSMC3 H -TdR掺入和激活MAPK。与对照组比较 ,分别增加 4 8%和 2 2 6 % (P <0 .0 1)。CGRP有效抑制UⅡ诱导的VSMC3 H -TdR掺入和MAPK激活。与UⅡ组比较 10 -9、10 -8、10 -7mol/LCGRP分别使VSMC3 H -TdR掺入降低 18%、2 5 %和31% (P <0 .0 1) ,使MAPK活性分别降低 2 6 %、5 0 %和 6 4 % (P <0 .0 1)。结论 :CGRP抑制UⅡ诱导的VSMC增殖 ,其机制可能与CGRP拮抗UⅡ刺激的MAPK活性有关     

Effect of Calmodulin and Voltage-dependent Ca~(2+) Channel on the Proliferation of Heptoma Cells Induced by Epidermal Growth Factor

Epidermal growth factor(EGF) has been impli-cated as a hepatotrophic factor during liver regenera-tion.EGF plays a role in the proliferation of hep-atoma cells.In general,EGF induces tumor cells di-vision and proliferation through a series of signaltransduction by binding with EGF receptor(EGFR)and activate its thyrosine protein kinase and therebyinducing phosphoration of itself and its protein sub-strate[1] .This postreceptorsingnal transduction isas-sociated with phosphoylinositolpathw…     

天麻注射液对主动脉平滑肌细胞增殖的影响

在家兔主动脉血管平滑肌细胞离体培养基础上，应用细胞计数，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入及测定培养液中前列环素产物含量的方法。探讨天麻注射液及其有效成分天麻素对ＶＳＭＣ增殖的影响及作用机理。结果表明：天麻注射液能明显抑制ＶＳＭＣ数目的增长和细胞对＾３Ｈ－ＴｄＲ的摄取，并可增加ＰＧＩ２水解产物６－Ｋ－ＰＧＦ１α的释放，但天麻素却未发现上述抑制ＶＳＭＣ增殖作用，提示天麻注射液的抗ＶＳＭＣ增殖作用与天麻素无关，而ＰＧ     

维生素E抑制同型半胱氨酸介导的血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨在同型半胱氨酸诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中,活性氧(ROS)的作用和维生素E的影响.方法 [3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷掺人法测定细胞DNA合成率,锥虫蓝染色计数细胞数量,DCF-DA荧光探针测定细胞内ROS.结果 (1)同型半胱氨酸诱导VSMC的DNA合成增加,促进细胞增殖和ROS水平升高;尽管半胱氨酸诱导VSMC内ROS水平升高,但是对细胞DNA合成和增殖无影响.(2)过氧化氢酶抑制同型半胱氨酸介导的VSMC内ROS升高,而对VSMC增殖无影响.(3)α-生育酚、β-生育酚均可抑制同型半胱氨酸诱导VSNC内ROS水平升高,但是只有α-生育酚显著抑制VSMC增殖.结论 ROS升高不是同型半胱氨酸诱导的VSMC增殖的原因之一.维生素E降低同型半胱氨酸诱导的VSMC增殖可能与抑制蛋白激酶C活性有关,而与它的抗氧化性无关.     

川芎嗪对ET-1诱导的脐动脉平滑肌细胞增殖的作用

目的研究川芎嗪(TMPz)对内皮素(ET-1)诱导的人脐动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用。方法培养人脐动脉平滑肌细胞,应用ET-1建立平滑肌增殖模型,后加入TMPz,设立梯度浓度的TMPz分组,最后细胞计数以及氚-胸腺嘧啶核苷掺入方法检测药物效应。结果TMPz抑制VSMC的作用与药物的浓度梯度呈正相关。结论TMPz可抑制VSMC的增殖。     

川芎嗪对ET-1诱导的脐动脉平滑肌细胞增殖的作用

目的研究川芎嗪（TMPz）对内皮素（ET-1）诱导的人脐动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用。方法培养人脐动脉平滑肌细胞，应用ET-1建立平滑肌增殖模型，后加入TMPz，设立梯度浓度的TMPz分组，最后细胞计数以及氚-胸腺嘧啶核苷（^3H—TdR）掺入方法检测药物效应。结果TMPz抑制VSMC的作用与药物的浓度梯度呈正相关结论TMPz可抑制VSMC的增殖。     

血管外膜源一氧化氮对尾加压素Ⅱ诱导的血管平滑肌增殖的抑制作用

目的观察血管外膜生成的一氧化氮(NO)对尾加压素Ⅱ(UrotensionⅡ,UⅡ)刺激的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及机制。方法取大鼠胸主动脉,去除内皮,分以下几组进行组织孵育10h①完整外膜血管组;②单纯中膜组;③中膜与剥离的外膜共育组;④中膜与用L-N-硝基精氨酸(L-NNA)预处理的外膜共育组。每例胸主动脉剪为二段,分两个亚组UⅡ(10-7mol/L)组和对照组。3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法检测各组VSMC的细胞增殖。另取大鼠腹主动脉外膜,用10-8和10-7mol/LUⅡ刺激4h。Griess法测血管外膜生成的亚硝酸盐(NO2-)含量,3H-L-精氨酸(3H-L-Arg)标记的同位素法测定外膜一氧化氮合酶(NOS)活性。结果①各UⅡ亚组3H-TdR掺入比相应对照组分别增加62.9%～98.3%(均P<0.01)。②在10-7mol/LUⅡ刺激下,完整外膜组及中膜+外膜组的3H-TdR掺入分别比单纯中膜组低20.5%和20.3%(P<0.01);中膜+L-NNA预处理的外膜组3H-TdR掺入分别比中膜+外膜组及完整外膜组高27.1%和27.3%(P<0.01),而与单纯中膜组差异无显著性(P>0.05)。③与对照组相比,10-8和10-7mol/L的UⅡ使外膜NOS活性分别增加92.1%和177%(P<0.01);使外膜生成的NO2-含量分别增加88.7%和178%(P<0.01)。结论血管外膜生成的NO可抑制UⅡ刺激的VSMC的增殖,其抑制作用为UⅡ激活的血管外膜NOS/