Effect of L-4F on monocyte chemoattractant protein-1 expression in 3T3-L1 adipocytes induced by oxidized low-density lipoprotein

目的 观察载脂蛋白A-I模拟肽L-4F对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)刺激下3T3-L1脂肪细胞分泌表达单核细胞趋化蛋白-1( MCP-1)的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 3T3-L1脂肪细胞促分化成熟后,oxLDL(50 μg/ml)刺激脂肪细胞,给予L-4F( 1-50 μg/ml),H-89( 10μmol/L)及H-89+ L-4F(50μg/ml)干预,收集细胞,测定脂肪细胞MCP-1上清液中的浓度和mRNA表达水平,以及脂肪细胞核因子C/EBPα、β的蛋白质水平;改良Boyden小室法检测不同干预组上清液对人外周血单核细胞趋化活性的影响.结果 OxLDL(50 μg/ml)刺激使分化成熟的3T3-L1脂肪细胞表达及分泌MCP-1明显增加,并使得诱导的单核细胞移动距离明显增加.L-4F以浓度依赖的方式减少脂肪细胞MCP-1的表达和分泌,降低单核细胞趋化活性;50 μg/ml L-4F使MCP-1 mRNA的表达降低(91±6)％(P＜0.01).PKA抑制剂H-89(10 μmol/L)干预oxLDL刺激的脂肪细胞后MCP-1 m RNA的表达也显著减少(P＜0.01),但是,在50μg/ml L-4F作用的基础上,H-89(10 μmol/L)的孵育并未使得MCP-1 mRNA的表达进一步降低(P＞0.05).50μg/ml oxLDL刺激对脂肪细胞C/EBPα的含量无明显影响,但增加C/EBPβ蛋白量,且该作用呈时间依赖性;L-4F和H-89干预均降低C/EBPβ的蛋白质含量.结论 OxLDL时间依赖性地诱导脂肪细胞C/EBPβ的蛋白合成,并增强脂肪细胞MCP-1的表达分泌,L-4F以浓度依赖的方式对抗oxLDL的致炎作用,cAMP/PKA-C/EBPβ信号通道可能是L-4F的作用途径之一.     

单核细胞趋化蛋白-1在急性出血坏死性胰腺炎大鼠模型中的表达

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）发病机制中的作用。方法采用胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠建立大鼠AHNP模型。48只雄性SD大鼠随机分为牛磺胆酸钠组和手术对照组，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测两组不同时间点胰腺组织和肺组织中MCP-1 mRNA表达的变化情况。结果牛磺胆酸钠组术后胰腺和肺组织MCP-1 mRNA的表达随着时间的延长逐渐增强，术后1、3h与手术对照组无明显差异，术后6、12h明显高于手术对照组（P〈0．05），且表达与胰腺组织的病理积分成正相关。结论MCP-1可能在AHNP发病过程及与AHNP相关的急性肺损伤中起了重要的作用。     

血红素氧化酶-1抑制氧化低密度脂蛋白诱导THP-1单核细胞表达单核细胞趋化蛋白-1 mRNA

目的:探讨血红素氧化酶(HO)-1对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1单核细胞上单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 m RNA表达的影响。方法:不同浓度(0、25、50、100、200 mg/L)ox-LDL,作用不同时间(0、12、18、24、48 h),刺激THP-1单核细胞;实时荧光定量(RT)-PCR检测MCP-1 m RNA表达。用锌原卟啉和钴原卟啉(Co PP)IX(均为10μmol/L)干预THP-1单核细胞12 h后,再用ox-LDL(100 mg/L)刺激24 h;RT-PCR分别检测MCP-1和HO-1 m RNA表达。结果:ox-LDL呈浓度-时间依赖性上调MCP-1 m RNA表达(P<0.01)。与对照组比,Co PP IX组HO-1 m RNA表达明显升高(P<0.01);与100mg/L ox-LDL组比,Co PP IX组MCP-1 m RNA表达明显下降(P<0.01)。结论:ox-LDL可上调THP-1单核细胞MCP-1的表达;诱导HO-1高表达可抑制ox-LDL诱导的THP-1源单核细胞MCP-1 m RNA表达。     

IgA肾病患者尿单核细胞趋化蛋白-1的检测

目的:探讨IgA肾病患者尿液单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte Chemoattractant Protein-1,MCP-1)水平及其与临床指标和病理的关系。方法:采用酶联免疫吸附法对50例IgA肾病患者及38例健康人的尿液MCP-1水平进行检测,并与临床指标及肾脏病理进行多因素相关分析。结果:IgA肾病患者尿液MCP-1水平(123.47±18.56)pg/ml高于正常人(20.74±3.73)pg/ml。结论:IgA肾病患者尿MCP-1水平增高。     

贵州地区汉族肺癌患者单核细胞趋化蛋白-1-2518 A/G基因多态性的研究

目的：研究贵州地区汉族人群中单核细胞趋化蛋白－1（MCP－1）－2518A／G位点是否存在基因多态性。探讨MCP－1－2518A／G基因多态性与肺癌的相关性。方法收集2013年3～12月在贵州省人民医院呼吸与危重症医学科住院治疗、无血缘关系的肺癌患者（实验组）90例及同期健康体检者（对照组）32例的血样。通过运用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性技术对MCP－1－2518A／G的基因型进行检测。结果贵州地区汉族人群中MCP－1－2518A／G存在基因多态性,健康人群中,3种基因型（ AA、AG、GG）的分布频率分别为：6．2％、46．9％、46．9％,实验组为26．7％、46．6％、26．7％。2．实验组和对照组中MCP－1－2518A／G 3种基因型分布差异具有统计学意义（P＝0．022）,AA基因型个体患肺癌的相对风险度高（OR＝5.455,P＝0．015）,GG基因型个体患肺癌的相对风险度低（OR ＝0．412,P＝0．035）,A等位基因在实验组和对照组的分布频率差异具有统计学意义（P＝0．005）,携带A等位基因的个体患肺癌的相对风险是携带G等位基因个体的2．368倍。结论贵州地区汉族人群中存在MCP－1－2518A／G基因多态性。 MCP－1－2518A／G基因多态性与肺癌的发病有相关性,A等位基因可能是肺癌发病的易感基因。     

肺结核患者单核细胞趋化蛋白-1的表达及其意义

目的 :研究单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP - 1)在肺结核患者血清及体外培养中的表达 ,初步探讨其在结核发病中的作用。方法 :收集 32例肺结核患者血清标本 ,ELISA方法测定不同类型病例MCP - 1的表达水平 ;分离培养结核患者及正常个体外周血单个核细胞 ,LPS刺激 ,ELISA方法测定上清中MCP - 1的含量。结果 :与健康对照组相比 ,初治型与难治型肺结核患者血清中MCP - 1的浓度显著升高 (P <0 .0 5 ) ,两组间MCP - 1的浓度差异也具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;细胞培养上清中患者与对照组的MCP - 1的浓度有明显差异(P <0 .0 5 )。结论 :PBMCs是血清中MCP - 1的来源之一 ,增高的MCP - 1水平可能涉及结核的发病机制以及常规化疗对结核的疗效。     

机械压力和维拉帕米对骨关节炎(OA)软骨细胞-琼脂糖凝胶三维模型释放单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)的影响

 目的  通过软骨细胞体外固态培养研究机械压力和维拉帕米对骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞释放单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的影响。方法  选择12例膝OA患者行膝关节置换后的胫骨平台软骨,分离软骨细胞并扩增,分别加入到低熔点琼脂糖培养基中进行固态培养,制作成软骨细胞 琼脂糖凝胶三维模型。随机分为维拉帕米组(40 μmol/L)和空白对照组,每组6例。在15、30、45 kPa的压力下,对照组分别施压0.5、1、2 h,实验组仅施压2 h。两组施压后均继续培养24 h,收集模型周围上清液,采用ELISA法检测上清液中MCP 1的浓度,对数据进行析因分析。结果  随着机械压力增加和施压时间延长,细胞培养液中MCP 1浓度无显著变化(P=0.88,0.31)。与空白对照组比较,维拉帕米组的MCP 1浓度显著降低(P=0.05)。结论  维拉帕米可抑制三维固态培养的OA软骨细胞释放MCP 1,可能为维拉帕米应用于OA的治疗提供理论依据。     

突变型单核细胞趋化蛋白-1构建及其对单核细胞趋化蛋白-1的干预作用

目的:构建表达N端2-8位氨基酸缺失的突变型单核细胞趋化蛋白-1(mMCP-1),并观察其对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的干预作用.方法:Megaprimer-PCR构建mMCP-1-pVAX1(pVMm).以脂质体将pVMm转染真核细胞系C2C12,ELISA分析mMCP-1的表达情况.采用趋化实验分析mMCP-1对病毒性心肌炎小鼠外周血单个核细胞(PMNCs)的趋化活性及其对MCP-1的干预作用.结果:①酶切和测序显示野生型MCP-1真核表达载体(pVM)和pVMm构建成功.pVMm在真核细胞C2C12中有效表达.②mMCP-1不具有趋化病毒性心肌炎小鼠PMNCs的活性.与单纯使用MCP-1相比,以不同浓度的mMCP-1和MCP-1同时行趋化实验,被趋化的细胞明显减少(P＜0.01),25 μg/L mMCP-1可阻断10 μg/L MCP-1对病毒性心肌炎小鼠PMNC的趋化活性.结论:小鼠MCP-1 N端2-8位氨基酸决定其趋化活性.mMCP-1可用于干预MCP-1的作用.     

单核细胞趋化蛋白-1在非肥胖糖尿病小鼠胰腺中的表达

目的 通过观察单核细胞趋化蛋白-1（Monocyte Chemoattractant Protein-1）在1型糖尿病动物模型NOD小鼠胰腺中的表达，探讨其在1型糖尿病胰岛炎发病机制中的作用。方法 应用免疫组化SABC法和免疫电镜评价MCP-1在NOD小鼠和BALB／C小鼠胰腺中的表达，应用H＆E染色光镜下评价胰岛免疫细胞浸润。结果 免疫组化结果表明：NOD小鼠胰腺中MCP-1呈阳性表达，而对照组无MCP-1表达。免疫电镜进一步显示：MCP-1由胰岛β细胞产生并存在于细胞质中。结论 MCP-1主要由胰岛β细胞产生。MCP-1通过招募单核／巨噬细胞浸润胰岛而在1型糖尿病发病机制中起重要作用。     

红豆杉多糖对 Beagle 犬心肌缺血再灌注模型心肌细胞凋亡 及单核细胞趋化蛋白-1 与 NO 表达的影响

目的 观察红豆杉多糖对 Beagle 犬心肌缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡及单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、NO 表达的影响。方法 将 30 只 Beagle 犬随机分为假手术组、模型组、红豆杉多糖 (89.5、357 mg/kg) 组、卡维地洛 (1mg/kg) 对照组,每组 6 只,分别给药 7 d 后,建立心肌缺血再灌注模型。TUNEL 染色法标记缺血再灌注区凋亡心肌细胞,计算凋亡指数 (AI);Western blotting 法检测缺血再灌注区心肌 MCP-1 蛋白表达;硝酸还原酶法检测心肌组织中 NO 水平。结果 模型组、红豆杉多糖低剂量组心肌细胞 AI 较假手术组显著升高 P＜0.01);红豆杉多糖高剂量组、卡维地洛组心肌细胞 AI 显著低于模 型组和红豆杉多糖低剂量组 (P＜0.05),与假手术组比较无显著差异 (P＞0.05)。模型组、红豆杉多糖低剂量组、卡维地洛组 MCP-1 蛋白表达较假手术组显著升高 (P＜0.05),红豆杉多糖低、高剂量组,卡维地洛组 MCP-1 蛋白表达较模型组显著下降 (P＜0.01),红豆杉多糖高剂量组 MCP-1 蛋白表达显著低于低剂量组和卡维地洛组 (P＜0.01)。模型组及各治疗组心肌组织 NO 水平较假手术组显著升高 (P＜0.01),红豆杉多糖高剂量组心肌 NO 显著低于模型组 (P＜0.05) 及低剂量组 (P＜0.01)。结论 红豆杉多糖可抑制缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡,其机制可能与降低心肌组织 MCP-1 蛋白表达及 NO 水平、抑制心肌细胞凋亡有关。     

Expression of Monocyte Chemoattractant Protein-1 in Monocytes and Effects of Native and Oxidized Very Low Density Lipoproteins

Itiswellknownthattherearetwokindsoffoamcellsderivedfrommonocytemacrophagesandsmoothmusclecellsrespectivelyinatheroscleroticplaques.Thepenetrationandaccumulationofmonocytemacrophagesderivedfoamcellsunderanintactendotheliumisoneofearlylesions,thusinvestigationonmechanismformonocytemigratingintosubendothelialspacesisveryimportant.Previousstudieshaveshownthatendothelialcellsandsmoothmusclecellsincultureconstitutivelyexpressmonocytechemoattractantprotein1[l].Monocytechemoattractantprotein--1(MCP-l…     

选择性血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对糖尿病大鼠血管单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的:研究选择性血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(缬沙坦)对STZ诱导的糖尿病大鼠血管组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响.方法:将SD大鼠随机分成三组:正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病 缬沙坦干预组(DV组).观察各组大鼠的血糖、体重、Hb1Ac,于8周时用RT-PCR和Westem blot的方法检测链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血管组织中MCP-1的表达的变化.结果:DM和DV组大鼠体重较NC组明显降低(均P＜0.01),DM和DV组间糖化血红蛋白(HbA1c)及血糖无显著性差异(P＞0.05);DM和DV组大鼠血管组织中MCP-1 mRNA的表达明显高于NC组(均P＜0.01),而DV组明显低于DM组(P＜0.01);DM和DV组大鼠血管组织中MCP-1蛋白的表达明显高于NC组(均P＜0.01),而DV组明显低于DM组(P＜0.01).结论:糖尿病SD大鼠血管组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达明显增加,缬沙坦通过降低血管组织炎症因子MCP-1表达,对糖尿病大血管并发症起防治作用.     

缬沙坦对肾小球硬化大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察缬沙坦对肾小球硬化大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨血管紧张素转化酶Ⅱl-型受体拮抗剂(AT1RA)对肾脏的保护作用。方法雄性SD大鼠36只随机分为对照组、肾小球硬化组和缬沙坦治疗组,每组12只。切除肾小球硬化组和缬沙坦治疗组大鼠左肾,1周后按5 mg.kg-1的剂量于尾静脉注射阿霉素,对照组行假手术及尾静脉注射等量生理盐水,注射阿霉素后次日始缬沙坦治疗组予缬沙坦20 mg.kg-1的剂量每日晨灌胃1次,对照组和肾小球硬化组仅灌以2 mL自来水。灌胃12周后处死大鼠,切取右肾用于肾脏病理分析,免疫组织化学法测定肾组织MCP-1。结果(1)形态学改变:对照组大鼠肾小管结构正常;肾小球硬化组多数肾小球呈节段性硬化,许多肾小球及肾小管受累;缬沙坦治疗组肾脏病变轻于肾小球硬化组,且肾小球硬化指数明显低于肾小球硬化组(P<0.01);(2)MCP-1的表达:对照组肾小管中有少量MCP-1的表达,在肾小球内几乎不表达,在肾小球硬化组和缬沙坦治疗组肾小球及肾小管内表达皆强于正常对照组(P<0.01)。缬沙坦治疗组MCP-1表达较肾小球硬化组弱(P<0.01)。结论缬沙坦可能通过阻断肾小球硬化大鼠肾素-血管紧张素系统,降低MCP-1在肾脏中的表达,抑制或减轻了巨噬细胞浸润,进而延缓肾小球硬化的进展。     

非诺贝特对氧化型低密度脂蛋白诱导的脂肪细胞肿瘤坏死因子-α分泌的影响

目的 探讨调脂药物非诺贝特对兔脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响及可能机制。方法 取新西兰兔皮下脂肪组织行脂肪细胞原代培养，分别给予不同浓度的氧化型低密度脂蛋白（OxLDL）及非诺贝特刺激。采用酶联免疫吸附法检测脂肪细胞培养液中TNF-α蛋白水平，半定量逆转录多聚酶链式反应测定脂肪细胞TNF-α和PPAR仅mRNA的表达。结果 较低剂量的OxLDL刺激脂肪细胞TNF-α分泌，呈剂量依赖性；不同浓度的非诺贝特呈剂量依赖性降低OxLDL诱导的脂肪细胞TNF-α分泌及mRANA表达，而相应的PPAR仅mRANA的表达则无显著变化。结论 非诺贝特可显著抑制OxLDL诱导的免脂肪细胞TNF-α分泌，这一作用可能有利于胰岛素抵抗的改善。     

人单核细胞趋化蛋白1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的：克隆表达具有重要生物功能的人单核细胞核细胞趋化蛋白１（ｈｕＭＣＰ－１）。方法：从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中提取ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ。将ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ插入融合表达载体ｐＧＥＸＩＮ,１ｍｍｏｌ／Ｌ异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导后获得高效表达。结果：Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ证明与ｈｕＭＣＰ－１单克隆抗体有明显交叉反应。结论     

贝尼地平对原发性高血压患者血清hs-CRP和MCP-1的影响

目的 观察贝尼地平对原发性高血压患者血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响.方法 选择60例轻、中度原发性高血压患者,随机分为两组各30例,分别用贝尼地平和双氢克尿噻治疗3个月,每组治疗前后均检测血清hs-CRP和MCP-1水平;比较两组降压程度和对血清hs-CRP和MCP-1水平有无影响.结果 治疗后两组血压水平下降明显,有统计学意义,贝尼地平组血清MCP-1和hs-CRP水平降低(P<0.01),双氢克尿噻组MCP-1和hs-CRP水平无明显改变.结论 贝尼地平能减轻轻、中度高血压患者机体的炎症反应且这种作用不依赖于其降压效果.     

科素亚和寿比山对高血压病降压疗效及单核细胞趋化因子-1的影响

目的 观测科素亚和寿比山治疗原发性高血压患者的降压疗效和血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响。方法 将62例年龄35～61岁轻中度高血压患者随机分为2组，1组服用科素亚，另1组服用寿比山，疗程共8周。分别评估两组治疗前后血压和MCP-1的变化。结果 两组均能有效降低血压，科素亚组治疗后MCP-1明显下降，而寿比山组治疗前后变化无统计学意义。结论 科素亚不仅和寿比山具有相同的降压疗效，而且还具有降低高血压病患者MCP-1的作用。