洛沙坦对大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的干预作用

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2的表达和心室重塑、心功能变化的关系及洛沙坦干预的影响。方法:实验于2004-09/2005-08在华中科技大学协和医院心血管研究所实验室进行。①取180只SD大鼠,随机取8只为假手术组(不结扎冠状动脉),其余172只大鼠结扎冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型。②将造模成功的67只大鼠随机分成洛沙坦组[灌胃洛沙坦30mg/(kg·d),1次/d]和模型组(灌胃等量生理盐水),两组分为术后1,7,14,28d4个亚组。③应用反转录-聚合酶链反应法及免疫组化方法检测基质金属蛋白酶2,金属蛋白酶组织抑制因子2及Ⅰ/Ⅲ胶原的表达,超声心动图评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程。结果:75只大鼠进入结果分析。①基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2蛋白表达:模型组除术后1d基质金属蛋白酶2表达与假手术组无差异外,其他各时间点表达均高于假手术组(P<0.05);洛沙坦组术后7,14,28d金属蛋白酶2表达均低于模型组(P<0.05)。②基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2mRNA表达:模型组各时间点均高于假手术组(P<0.05),洛沙坦组术后1,14,28d基质金属蛋白酶2mRNA表达均低于模型组(P<0.05)。③心肌Ⅰ/Ⅲ胶原比例:术后14,28d,模型组显著高于假手术组(P<0.05),洛沙坦组低于模型组(P<0.05)。④超声心动图显示模型组大鼠在术后7,14,28d时心功能明显低于假手术组(P<0.01),洛沙坦组14,28d时心功能指标均较模型组明显改善(P<0.05)。结论:大鼠心肌梗死后心肌间质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2表达增高,非梗死区Ⅰ/Ⅲ胶原比例升高可能是心室重塑和心力衰竭发生发展的原因之一。洛沙坦可通过抑制金属蛋白酶2表达,逆转Ⅰ/Ⅲ胶原比例改善心肌梗死后心室重塑及心力衰竭。     

洛沙坦对大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的干预作用

目的：观察大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2的表达和心室重塑、心功能变化的关系及洛沙坦干预的影响。 方法：实验于2004-09／2005-08在华中科技大学协和医院心血管研究所实验室进行。①取180只SD大鼠，随机取8只为假手术组（不结扎冠状动脉），其余172只大鼠结扎冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型。②将造模成功的67只大鼠随机分成洛沙坦组[灌胃洛沙坦30mg／（kg&;#183;d），1次／d]和模型组（灌胃等量生理盐水），两组分为术后1，7，14，28d4个亚组。③应用反转录-聚合酶链反应法及免疫组化方法检测基质金属蛋白酶2，金属蛋白酶组织抑制因子2及Ⅰ/Ⅲ胶原的表达，超声心动图评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程。 结果：75只大鼠进入结果分析。①基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2蛋白表达：模型组除术后1d基质金属蛋白酶2表达与假手术组无差异外，其他各时间点表达均高于假手术组（P〈0．05）；洛沙坦组术后7，14，28d金属蛋白酶2表达均低于模型组（P〈0．05）。②基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2mRNA表达：模型组各时间点均高于假手术组（P〈0.05），洛沙坦组术后1，14，28d基质金属蛋白酶2mRNA表达均低于模型组（P〈0．05）。③心肌Ⅰ/Ⅲ胶原比例：术后14，28d，模型组显著高于假手术组（P〈0．05），洛沙坦组低于模型组（P〈0．05）。④超声心动图显示模型组大鼠在术后7，14，28d时心功能明显低于假手术组（P〈0．01），洛沙坦组14，28d时心功能指标均较模型组明显改善（P〈0．05）。 结论：大鼠心肌梗死后心肌间质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2表达增高，非梗死区Ⅰ／Ⅲ胶原比例升高可能是心室重塑和心力衰竭发生发展的原因之一。洛沙坦可通过抑制金属蛋白酶2表达，逆转Ⅰ／Ⅲ胶原比例改善心肌梗死后心室重塑及心力衰竭。     

心肌间质转化生长因子β1在心肌梗死大鼠缬沙坦干预过程中的表达特点

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌间质转化生长因子β1蛋白及mRNA的表达及缬沙坦对其的影响。方法:实验于2004-12/2005-06在华中科技大学协和医院心血管研究所实验室进行。①在110只SD雄性大鼠中随机取10只为假手术组(只行开胸手术不结扎冠状动脉),剩余100只结扎冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型,将造模成功的50只大鼠随机分成模型组和缬沙坦组,缬沙坦组灌胃给予缬沙坦40mg/(kg·d),模型组给予等量生理盐水。②模型组和缬沙坦组分别于给药后7,14,28d取8或9只,应用超声心动图评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程,然后处死取心脏,用RT-PCR及免疫组化方法检测转化生长因子β1 mRNA和蛋白表达情况。假手术组于术后28d处死,检测项目同上。结果:58只大鼠进入结果分析。①转化生长因子β1 mRNA表达:模型组7,14,28d时高于假手术组(P<0.05);缬沙坦组7,14,28d时低于模型组(P<0.05)。②转化生长因子β1蛋白表达:模型组7,14,28d时高于假手术组(P<0.05);缬沙坦组7,14d时低于模型组(P<0.05)。③超声心动图显示模型组大鼠在术后7,14,28d时心功能明显低于假手术组(P<0.05),缬沙坦组14,28d时心功能指标均较模型组明显改善(P<0.05)。结论:心肌间质转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达在心肌梗死后均增高,缬沙坦抑制其增高,并改善心室重塑,提示缬沙坦影响转化生长因子β1的表达可能是改善心肌梗死后心室重塑的机制之一。     

组织追踪成像结合MMP-9评价心力衰竭大鼠心肌收缩功能及心室重塑

目的 应用组织追踪成像(TTI)结合基质金属蛋白酶-9(MMP-9)评价心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌局部收缩功能及心室重塑.方法 70只雄性SD大鼠随机分为4组:手术4周组、手术8周组、假手术组及正常组.应用TTI技术定量评价大鼠心肌局部收缩功能,并用Rt-PCR法测定各组实验大鼠心肌MMP-9的mRNA表达.结果⑴手术4周组左室前壁及室间隔的基底段和中间段的Ds明显小于正常组及假手术组 (P<0.05),而下壁及侧壁的基底段和中间段的Ds与正常组及假手术组比,差异无统计学意义(P>0.05).手术8周组中,所有节段的Ds较手术4周组相应节段的Ds明显下降(P<0.05).⑵手术4周组MMP-9的表达较正常组和假手术组明显增加(P<0.01),手术8周组明显高于手术4周组(P<0.01).结论 TTI技术能从长轴方向上准确定量评价心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌局部收缩功能的改变.心肌组织MMP-9有望成为防治心力衰竭的新靶点.     

接受骨髓间充质干细胞移植的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶及抑制剂的变化

背景:Ⅰ型及Ⅲ型胶原含量与比例的变化是促使心脏几何形态改变、心肌收缩和舒展功能的重要因素,基质金属蛋白酶2及抑制剂是胶原代谢的主要调节物质。心肌梗死后心力衰竭大鼠接受骨髓干细胞移植后,心肌组织中这些指标会发生哪些变化?目的:观察接受骨髓干细胞移植治疗的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠,心肌组织中胶原含量与比例、基质金属蛋白酶2及抑制剂的变化。设计:随机对照实验。单位:解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系。材料:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成。实验动物由北京医科大学动物实验中心提供,选取4周龄清洁级雄性SD大鼠用于骨髓间充质干细胞的制备,200~250g清洁级雌性SD大鼠14只用于心肌梗死后心力衰竭模型的制备,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。方法:采用梯度离心法与贴壁培养法分离纯化、扩增骨髓间充质干细胞。结扎雌性SD大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死后心力衰竭模型。造模成功4周后将14只大鼠随机分为2组:移植组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受雄性SD大鼠来源的5×106骨髓间充质干细胞。对照组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受等体积磷酸盐缓冲液。每组7只。主要观察指标:移植治疗后21d:①以苏木精-伊红染色和Masson染色评价左心室形态。②以免疫组织化学分析心肌基质金属蛋白酶2及抑制剂与瘢痕区Ⅰ型及Ⅲ型胶原的变化。③以Western杂交检测基质金属蛋白酶2及抑制剂蛋白的变化。结果:14只大鼠均进入结果分析,无脱失值。与对照组大鼠比较,骨髓间充质干细胞移植大鼠心肌梗死瘢痕区Ⅰ型胶原增加,Ⅲ型胶原降低,心肌组织基质金属蛋白酶抑制剂表达增加,基质金属蛋白酶2表达降低,心室壁增厚,心室腔缩小,心功能增强。结论:骨髓间充质干细胞移植心力衰竭大鼠后,基质金属蛋白酶2及抑制剂发生了动态变化,进而影响瘢痕区胶原比例重建,逆转心力衰竭心脏异常的胶原平衡。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达及益气活血法的影响

目的:肾间质纤维化是肾脏疾病进展到肾功能衰竭的共同通路。通过观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法分为模型组、西药蒙诺组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组和假手术组。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术,假手术组打开大鼠腹腔后,分离其左侧输尿管,不结扎即关闭腹腔。益气活血法中药制剂主要由生黄芪,当归,赤白芍,丹参,黄芩,车前草,牛膝等组成。西药组、中药小剂量组、中药中剂量组和中药大剂量组于手术前2d开始灌胃给药,1次/d,其药量分别为:西药组蒙诺10mg/(kg·d)、小剂量组0.018mL/(kg·d)、中剂量组0.036mL/(kg·d)、大剂量组0.072mL/(kg·d),连续给予2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾脏病理改变,并用免疫组织化学方法检测肾组织对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,通过医学病理图像分析系统对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。肾组织切片免疫组织化学方法结果显示:基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2主要表达部位在肾小管上皮,少量表达在肾间质和肾小球。基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3在模型组的表达较假手术组明显减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组显著增强,积分光密度差异有显著性意义(P<0.05)。金属蛋白酶组织抑制因子2在模型组的表达较假手术组显著增强,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组有所减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药小剂量组无论基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3还是金属蛋白酶组织抑制因子2的表达与模型组相比均较为相似,两组间积分光密度比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:大鼠输尿管梗阻后呈现出的病理损害可能和肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制因子2的表达失衡有关,益气活血法可以上调基质金属蛋白酶2,基质金属蛋白酶3的表达,下调金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,显示在抑制或延缓肾间质纤维化的进程中具有一定的作用。     

低能量体外心脏震波对急性心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶系统及缺血心肌毛细血管密度的影响

背景:研究表明震波治疗能明显改善心肌梗死后心室重塑.低能量体外心脏震波治疗是近年来新兴的血管新生治疗方法.基质金属蛋白酶系统及其抑制因子是影响心室重构过程的重要调节因子.目的:观察低能量体外心脏震波治疗对猪急性心肌梗死后的心肌基质金属蛋白酶系统影响.方法:将滇南小耳猪随机分为心脏震波治疗组,对照组和假手术组.心脏震波治疗组和对照组均建立急性心肌梗死模型,建模成功后震波治疗组接受3次低能量体外震波治疗(0.09 mJ/mm2,每点治疗200击,共9点),1个月后通过左心室造影评价左心室重塑情况,对照组建模成功后给予相同操作,但不施以震波及能量.假手术组不建模,震波治疗方法同对照组.用RT-PCR法检测各组动物心肌组织梗死交界区血管内皮生长因子,基质金属蛋白酶1,2,基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达水平,用免疫组织化学法检测备组动物缺血心肌毛细血管密度.结果与结论:与对照组相比,心脏震波治疗组梗死心肌局部血管内皮生长因子mRNA表达水平上调(P<0.05),促进局部心肌组织新生毛细血管增生,基质金属蛋白酶1 mRNA表达水平下调(P<0.05),基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA水平升高(P<0.05),左心室造影评价显示心室重塑指标改善,心脏震波治疗组缺血心肌毛细血管密度增高(P<0.05).结果显示体外心脏震波通过有效诱导急性缺血区血管新生,上调促血管新生因子表达水平,并重建局部心肌微循环.     

单侧输尿管梗阻肾间质纤维化模型大鼠与川芎嗪的干预

背景:肾间质纤维化与组织基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达失衡有关。目的:建立单侧输尿管梗阻肾纤维化模型,观察川芎嗪治疗后肾间质病理变化及肾组织组织基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达变化。方法:24只雌性SD大鼠分为3组,除假手术组外,模型组及川芎嗪组均在无菌条件下行左侧输尿管结扎建立单侧输尿管梗阻模型,川芎嗪组于术前1d开始灌胃给药,40mg/(kg·d),1次/d,连续2周。术后14d处死各组大鼠,留取梗阻侧肾组织行苏木精-伊红染色和Masson染色以观察肾组织病理改变,免疫组化和反转录-聚合酶链反应方法检测肾组织基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2的表达水平。结果与结论:川芎嗪组可明显减轻肾小管的扩张和萎缩,减轻肾间质纤维组织增生及炎性细胞浸润。与假手术组相比,模型组基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2蛋白和mRNA基因表达均明显增加(P<0.01);川芎嗪组上述物质表达较模型组明显减少(P<0.01)。提示川芎嗪通过下调基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,从而改善单侧输尿管梗阻大鼠的肾间质纤维化。     

大鼠心肌梗死后非梗死区心肌基质金属蛋白酶基因表达及其活性与辛伐他汀的干预效应

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶2,9基因表达及其活性的变化以及辛伐他汀对其表达的影响。方法:①实验于2003-09/2004-07在华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科实验室完成。选用健康清洁级雌性Wistar大鼠34只,其中24只大鼠结扎冠状动脉前降支制成心肌梗死模型,随机分为2组:辛伐他汀干预组和心肌梗死对照组,每组12只;其余10只为假手术组(不结扎冠状动脉前降支)。②辛伐他汀组术前1h给予药物辛伐他汀(40mg/kg)灌胃,以后每天按上述剂量灌胃持续4周,假手术组和心肌梗死对照组给以等量清水灌胃。③实验4周后,各组大鼠称质量后经尾静脉抽血,采用全自动生化分析仪检测血脂。左心室非梗死区心肌基质金属蛋白酶2和9mRNA表达和心肌基质金属蛋白酶2和9活性分别采用反转录聚合酶链反应法和明胶酶法测定。④各组均数间比较方差齐性检验、方差分析。结果:大鼠34只均进入结果分析。①大鼠非梗死区心肌基质金属蛋白酶2和9mRNA表达:心肌梗死对照组和辛伐他汀干预组明显高于假手术组(基质金属蛋白酶2mRNA表达:1.21±0.22,0.82±0.16,0.51±0.13,P<0.05;基质金属蛋白酶9mRNA表达:0.98±0.20,0.65±0.14,0.43±0.13,P<0.05);辛伐他汀干预组明显低于心肌梗死对照组(P<0.05)。②大鼠非梗死区心肌基质金属蛋白酶2和9活性:心肌梗死对照组和辛伐他汀干预组明显高于假手术组(基质金属蛋白酶2活性:310±31,180±24,100,P<0.05;基质金属蛋白酶9活性:280±29,160±22,100,P<0.05);辛伐他汀干预组明显低于心肌梗死对照组(P<0.05)。③血脂测定结果:3组差别不明显(P>0.05)。结论:①大鼠急性心肌梗死4周后左心室心肌基质金属蛋白酶2,9活性及mRNA表达均较假手术组明显升高。②辛伐他汀可减少大鼠心肌梗死后4周左心室心肌基质金属蛋白酶2,9的mRNA表达及其活性,此改变不依赖其降脂作用。     

结缔组织生长因子在急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌中表达与洛沙坦的调节

目的:观察结缔组织生长因子在急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌中的表达特点和洛沙坦对其调节作用。方法:实验于2004-01/2005-03在华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管病实验室完成。选择健康雌性SD大鼠60只,50只大鼠通过结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死后心力衰竭模型,术后6h存活的44只大鼠随机数字表法分为心力衰竭对照组24只,洛沙坦干预组20只。另设假手术组10只,相当于冠脉结扎部位穿线,但不结扎,然后立即缝合。洛沙坦干预组每天直接灌胃给予洛沙坦10mg/kg,2次/d;心力衰竭对照组及假手术组大鼠灌等量自来水,共计8周。治疗8周后行高频多普勒超声、血流动力学、心脏重塑指标、左室非梗死区心肌结缔组织生长因子蛋白免疫印迹测定。结果:纳入大鼠60只,去除死亡及梗死面积<35%和>55%的大鼠,最终进入结果分析32只。①大鼠左室结构和功能比较:多普勒超声检查提示,心力衰竭对照组的左室舒张末期内径、左室舒张末期容积、E峰、E峰减速度及E/A显著高于假手术组(P<0.01),左室短轴缩短率和射血分数显著低于假手术组(P<0.01)。洛沙坦干预组左室舒张末期内径、左室舒张末期容积、E峰、E峰减速度及E/A显著低于心力衰竭对照组[分别为(7.0±0.5),(8.7±0.6)mm;(421±26),(521±27)μL;(72±6),(95±7)cm/s;(26.5±2.6),(32.1±3.5)m/s2;4.9±0.5,10.3±0.8,P<0.01],左室短轴缩短率和射血分数显著高于心力衰竭对照组[分别为(26±4)%,(21±4)%;(39±4)%,(31±4)%,P<0.01]。②大鼠血流动力学和心室重塑指标改变:心力衰竭对照组平均动脉压明显低于假手术组(P<0.01),左室舒张末压、左心室心肌肥厚指数、右心室心肌肥厚指数和心肌胶原容积分数均显著高于假手术组(均为P<0.01)。洛沙坦干预组左室舒张末压、左心室心肌肥厚指数、右心室心肌肥厚指数和心肌胶原容积分数显著低于心力衰竭对照组[分别为(10.2±1.9),(20.1±2.5)mm Hg;2.30±0.11,2.45±0.12;0.69±0.07,0.92±0.11;(4.7±1.1)%,(8.2±1.2)%,P<0.01]。③大鼠左室心肌结缔组织生长因子蛋白表达的变化:心力衰竭对照组结缔组织生长因子蛋白表达高于假手术组(P<0.01)。洛沙坦干预组结缔组织生长因子蛋白表达低于心力衰竭对照组(分别为0.72±0.21,1.21±0.23,P<0.01)。结论:急性心肌梗死后心力衰竭大鼠左室非梗死区心肌结缔组织生长因子蛋白表达明显升高,洛沙坦对结缔组织生长因子蛋白表达的增加有抑制作用,并能明显减轻左室重塑和延缓心力衰竭进展。     

心力衰竭大鼠左心室非同步化与心肌基质金属蛋白酶-9表达的关系

目的 探讨心力衰竭大鼠左心室非同步化与心肌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的关系。 方法 将70只雄性SD大鼠随机分为4组:手术4周组、手术8周组、假手术组及正常组。应用定量组织速度成像(QTVI)评价大鼠左心室非同步运动。用Western Blot法检测各组实验大鼠心肌MMP-9表达。 结果 ①随着时间推移,心功能逐渐下降,手术大鼠左心室非同步指标逐渐延长而假手术组大鼠的变化不明显。②手术4周组和手术8周组大鼠心肌MMP-9的表达较正常组及假手术组明显增加(P<0.01),且手术8周组MMP-9的表达高于手术4周组(P<0.05)。 结论 心力衰竭大鼠左心室非同步化程度与心肌MMP-9表达程度密切相关。     

Myostatin expression in ventricular myocardium in a rat model of volume-overload heart failure

BACKGROUND: Mechanical stress increases myocardial myostatin expression. However, the expression of myostatin in chronic heart failure resulting from volume-overload and after treatment with beta-blockers is little known. The authors hypothesize that myostatin plays a role in the failing myocardium because of volume-overload. MATERIALS AND METHODS: Aorto-caval shunt was created over a 4-week period in adult Sprague-Dawley rats to induce volume-overload heart failure. RESULTS: Heart weight and body weight ratio significantly increased after shunting. The left ventricular end-diastolic dimension also significantly increased. Treatment with carvedilol in the shunt group reversed the increase in heart weight and ventricular dimension to the baseline values. Myocardial and skeletal myostatin proteins were up-regulated in the shunt group. The mRNA of myocardial myostatin also increased in the shunt group. Treatment with carvedilol reversed both protein and mRNA of myocardial myostatin to the baseline values. Treatment with N-acetylcysteine and doxazosin partially decreased myostatin mRNA and protein expression as compared with the shunt group. Carvedilol normalized the increased immunohistochemical labelling of myocardial myostatin in the shunt group. CONCLUSION: Myocardial myostatin mRNA and protein expression were up-regulated in the rat model of volume-overload heart failure. Treatment with carvedilol is associated with a limitation of increased myostatin expression in the failing ventricular myocardium.     

腺病毒介导的β2-AR过表达对心力衰竭大鼠心肌细胞IL-18分泌的影响

目的研究β2-AR过表达对心力衰竭大鼠心肌细胞IL-18分泌的影响。方法采用腹主动脉缩窄法建立慢性心力衰竭大鼠模型,胶原酶消化法分离大鼠心肌细胞,用携带β2-AR基因的重组腺病毒转染大鼠心肌细胞,培养48h后,Westem blot法检测心肌细胞β2-AR蛋白的表达及ELISA法测定IL-18的含量。经筛选后心力衰竭大鼠随机分为心力衰竭对照组（HF组）、转染EGFP组（HF＋EGFP组）、转染β2-AR-EGFP组（HF＋β2组）;假手术组也相应随机分为对照组（sham组）、转染EGFP组（sham＋EGFP组）、转染β2-AR-EGFP组（sham＋β2组）。结果与假手术组相比,心力衰竭组左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）均升高（P〈0．05）,左心室短轴缩短率（FS）及射血分数（EF）均降低（P〈0．05）。Western blot结果显示HF＋β2组心肌细胞β2-AR蛋白表达量高于HF＋EGFP组及船组（P〈0．05）。与sham组相比,HF组IL-18含量显著升高（P〈0.05）;HF＋β2组IL-18含量明显低于琊＋EGFP组及HF组（P均〈0．05）。结论心力衰竭大鼠心肌细胞分泌炎症因子IL-18增加,β2-AR过表达后能抑制心肌细胞IL-18的分泌。     

Favorable left ventricular remodeling following large myocardial infarction by exercise training. Effect on ventricular morphology and gene expression.

Continued adverse remodeling of myocardium after infarction may lead to progressive ventricular dilation and heart failure. We tested the hypothesis that exercise training in a healed myocardial infarction-dysfunction rat model can favorably modify the adverse effects of ventricular remodeling including attenuation of abnormal myosin gene expression. Sprague-Dawley rats were subjected to either proximal LAD ligation or sham operation. At 5 wk after the operation, animals were randomly assigned to sedentary conditions or 6 wk of graduated swim training, creating four experimental groups: infarct sedentary (IS), infarct exercise (IE), sham sedentary (SS), and sham exercise (SE). At 11 wk all rats were sacrificed and analyzed. Compared to sedentary infarct controls, exercise training attenuated left ventricular (LV) dilation and allowed more hypertrophy of the non infarct wall. The exercise-trained hearts also showed a reduction in the estimated peak wall tension. Northern blot analysis showed an increase in beta-myosin heavy chain expression in the hearts of the sedentary infarction group soon after infarction when compared to sham controls. However, with exercise training, there was a significant attenuation of the beta-myosin heavy chain expression in the myocardium. Exercise training in a model of left ventricular dysfunction after healed myocardial infarction can improve the adverse remodeling process by attenuating ventricular dilation and reducing wall tension. The abnormal beta-myosin expression was also attenuated in the exercise trained group. This is evidence that abnormal gene expression following severe myocardial infarction dysfunction can be favorably modified by an intervention.     

Metalloproteinases 2 and 9 are increased in plasma of patients with heart failure

BACKGROUND: Progression of heart failure is associated with interstitial changes in the heart and in areas distant from the heart. Enhanced expression of metalloproteinases 2 and 9 and of metalloproteinases tissue inhibitors 1 and 2 have been found in ventricular tissue of patients with heart failure. Our aim was to determine whether increased activity of metalloproteinase-2, metalloproteinase-9 and of metalloproteinases tissue inhibitor-1 and metalloproteinases tissue inhibitor-2 were also present in plasma of patients with heart failure. DESIGN: Levels of metalloproteinase-2, metalloproteinase-9 and of metalloproteinase tissue inhibitor-1 and metalloproteinases tissue inhibitor-2 were measured in venous blood of 51 patients with heart failure, and were compared with levels of 52 control subjects. Samples collected from patients and control subjects were assayed for gelatinolytic activity (zymography) and for protein levels. RESULTS: Compared with the control subjects, the patients with heart failure had a significant increase in activity levels (mean +/- SE, ng mL(-1)) of prometalloproteinase-9 (95.1+/-11.2 and 38.9+/-4.5*), activ. metalloproteinase-9 (18.4+/-2.5 and 10.9+/-1.3*), and of prometalloproteinase-2 (571.4+/-26.1 and 456.8+/-21.1*) (respectively: patients and control subjects; *P<0.05). Metalloproteinases tissue inhibitor-1, but not metalloproteinases tissue inhibitor-2 protein values were higher in the patients. Among the patients, clinical status and New York Heart Association (NYHA) class did not correlate with the metalloproteinase concentrations. Positive correlations with left ventricular volumes, and negative correlations with lipid values were obtained for prometalloproteinase-2; positive correlations with total number of white cells and neutrophils were obtained for prometalloproteinase-9; and positive correlations with lactate dehydrogenase, serum fibrinogen, aspartate transaminases were found for activ. metalloproteinase-9. CONCLUSIONS: Regardless of the clinical phase of heart failure, elevated levels of activity and of circulating metalloproteinase protein levels suggest the presence of persistent extracellular remodeling in patients with heart failure.     

卡维地洛在治疗顽固性心力衰竭的疗效观察

目的：评价第三代β受体阻滞剂卡维地洛治疗顽固性心力衰竭的临床疗效。方法：26例顽固性心力衰竭患者随机分为卡维地洛组和对照组。卡维地洛从1．56～3．125mg开始使用，1次／d，如能耐受，渐递增到6．25～12．5mg，2次／d，长期维持。检测治疗前后顽固性心力衰竭患者心功能和超声心动图的变化。结果：治疗3个月后，治疗组心脏功能分级较对照组明显改善（P〈0.05）；超声心动图检查示卡维地洛治疗前后左心室射血分数（LVEF，％）、短轴缩短率（FS，％））明显增加（P〈0．01），毒心室收缩末期内径（LVESd，mm）、左心舒张末期内径（LVEDd，mm）明显减小（P〈0．01）。和对照组比较，治疗后LVEF（％）、FS（％）差异有统计学意义（P〈0.05）；两组治疗后LVESd、LVEDd差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：在病情相对稳定的适当时机，从小剂量开始服用卡维地洛，并逐渐增加剂量，长期坚持能够改善顽固性心力衰竭患者左室。心功能，逆转左心室重构。     

瑞舒伐他汀对急性心肌梗死模型大鼠MMP-9、TNF-α的影响

目的观察瑞舒伐他汀对急性心肌梗死（AMI）大鼠血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,探讨其防治AMI后心室重构的作用机制。方法40只SD大鼠随机选取10只作为假手术组,剩下30只结扎左前降支建立 AMI动物模型,将术后24 h 存活的20只大鼠随机分为模型组和瑞舒伐他汀组,4周后分别检查各组大鼠血流动力学指标和血清 MMP-9、TNF-α含量。结果模型组的平均动脉压（MAP）、左心室内压最大上升速度（＋dp/dtmax ）、左心室内压最大下降速度（-dp/dtmax ）降低,左心室舒张末压（LVEDP）及血清 MMP-9、TNF-α升高,与假手术组比较差异均有显著性（P ＜ 0.01）;瑞舒伐他汀组 MAP、＋dp/dtmax、-dp/dtmax升高,LVEDP、MMP-9、TNF-α降低,与模型组比较差异均有统计学意义（P＜ 0.05或P＜ 0.01）。结论瑞舒伐他汀可减轻 AMI后的心室重构,其作用机制可能与调节血清 MMP-9、TNF-α水平变化有关。     

尼可地尔对缺血性心力衰竭大鼠心功能的保护作用及机制

目的探讨尼可地尔对缺血性心力衰竭大鼠心功能和左室重构的保护作用及相关机制。方法将40只大鼠随机分为空白对照组(Con组)、尼可地尔组(NIC组)、生理盐水组(NS组)及假手术组(Sham组),每组10只,分别采取不同处理方式。记录各组大鼠体重、呼吸模式、活动量和毛色差异。术后8周所有大鼠行超声心动图检查。实验结束后对大鼠左心室前壁组织进行HE染色及电镜观察。检测心肌组织中p-Akt、Bcl-2、Bax蛋白的相对表达量。结果与Con组及Sham组相比,NS组及NIC组左心室射血分数(LVEF)、速度最大值(E)/心房收缩心室充盈速度最大值(A)(E/A)降低,NS组LVEF下降最多,差异有统计学意义(P<0.05)。左心室舒张末期容积(LVEDV)则呈相反趋势,3组间存在差异,NS组LVEDV最高,差异有统计学意义(P<0.05)。NS组左心室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期内径(LVIDd)和左室收缩末期内径(LVIDs)高于NIC组和Sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。Sham组大鼠心肌细胞排列规则,横纹清晰;NS组心肌细胞排列紊乱,形状不规则,同时还表现出明显的纤维组织增生。Sham组、NIC组的左心室/体重比值(LVW/BW)和肺脏重量指数(Lungw/Bw)均低于NS组,差异有统计学意义(P<0.05)。与Con组及Sham组相比,NS组p-Akt、Bcl-2及Bax蛋白相对表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。NIC组p-Akt、Bcl-2蛋白相对表达量高于NS组,但Bax蛋白表达量下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论尼可地尔可通过改善心功能和左室重塑对缺血性心力衰竭大鼠起到保护作用,这可能与抑制Bax蛋白表达有关。     

人血管内皮生长因子165和人组织基质金属蛋白酶抑制剂1基因过表达对心肌梗死大鼠的作用

目的探讨携带人血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165, VEGF165)的重组腺病毒(Ad-hVEGF165)和携带人组织基质金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1)的重组腺病毒(Ad-hTIMP-1)对心肌梗死大鼠的作用及可能机制。方法健康雄性清洁级8周龄Wistar大鼠30只,采用随机数字表法随机分为5组,假手术组(Sham),空载病毒对照组(Ad-Track),Ad-hVEGF165组,Ad-hTIMP-1和双基因组(hVEGF165+hTIMP-1),每组6只。除Sham组外,各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,以心电图出现ST段弓背抬高,Q波或T波倒置,局部心肌变白为模型成功。分别在心肌梗死区域四点注射相应重组腺病毒病毒生理盐水稀释液100 μL(1×1010 VP/100 μL);Sham组未予任何处理。4周后实验动物完成超声心动图检测后处死取心脏组织。免疫组织化学检测大鼠心肌组织hVEGF165和hTIMP-1基因表达;实时荧光定量PCR检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子mRNA表达;免疫组织化学检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子蛋白表达。正态分布计量资料多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果超声心动图检测结果显示:Ad-Track组心率(heart rate,HR)(480.83±24.09)次/min、左室舒张末径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)(6.88±0.44)mm、左室收缩末径(left ventricular end-systolic dimension,LVESD)(4.85±0.42)mm均较Sham组(433.16±17.86)次/min、(6.20±0.45)mm、(4.06±0.70),增加(P<0.05),左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)(62.70±3.17)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)(29.52±1.88)%均较Sham组(72.78±5.44)%、(37.20±4.71)%显著降低(P<0.01);hVEGF165-hTIMP-1组LVEF(71.50±6.23)%、LVFS(36.17±5.27)%均显著高于Ad-Track组(P<0.01),LVEDD(6.22±0.39)mm、LVESD(4.13±0.23)mm均低于Ad-Track组(P<0.05);hVEGF165-hTIMP-1组LVEF、LVFS均高于Ad-hVEGF165组(64.65±4.00)%、(30.95±2.57)%(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示:hVEGF165-hTIMP-1组心肌组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bal-xl/Bcl-2相关死亡促进因子(Bad)mRNA表达均较Ad-Track组降低(P<0.01或P<0.05),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)mRNA表达均较Ad-Track组升高(P<0.01);hVEGF165-hTIMP-1组心肌组织Bax、Caspase-3 mRNA表达较Ad-hVEGF165组降低(P<0.05)。hVEGF165-hTIMP-1组心肌组织Bax、Caspase-3、Bad、Bcl-2 mRNA表达与Sham组差异无统计学意义(均P>0.05)。免疫组织化学结果显示:hVEGF165-hTIMP-1组Bax和Caspase-3蛋白表达较Ad-hVEGF165组、Ad-hTIMP-1组及Ad-Track组显著降低(均P<0.01),Bcl-2蛋白表达较Ad-hVEGF165组、Ad-hTIMP-1组及Ad-Track组升高(均P<0.05)。与Sham组比较,hVEGF165-hTIMP-1组Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论联合hVEGF165和hTIMP-1基因过表达可改善大鼠心肌梗死后心脏收缩功能,其机制可能与抑制心肌细胞凋亡相关,且hVEGF165和hTIMP-1联合可能具有协同作用。     

β肾上腺素能受体在左室机械辅助减负荷模型中的表达

目的 研究β肾上腺素能受体在左室机械辅助减负荷模型中的表达及其意义,探讨左室减负荷后心肌分子水平的变化.方法 选用Lewis大鼠,结扎冠状动脉左前降支(LAD)诱导心力衰竭(心衰);4周后,心脏移植组将心衰后的心脏及右肺移植到受体大鼠的腹部(通过供体的升主动脉与受体的降主动脉吻合);移植2周后,评价全心重量、左室重量、心肌细胞直径及心肌纤维化程度,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测β肾上腺素能受体mRNA的表达.以7只正常Lewis大鼠为对照.结果 心衰后增大的心脏、左室重量、左室心肌细胞直径在移植后趋于正常.心衰组左室β1、β2肾上腺素能受体mRNA表达较正常组明显降低(0.09±0.03比0.18±0.04,0.07±0.06比0.12±0.02,均P<0.05);移植组β2肾上腺素能受体mRNA 表达(0.11±0.05)接近正常组(P>0.05),而β1肾上腺素能受体mRNA表达(0.08±0.06)仍低于正常组(P<0.05).结论 左室减负荷后,心肌逆向重构的过程伴随着心肌细胞分子水平改变,如β肾上腺素能受体表达的改变,可能与左室机械辅助后心脏功能的恢复有关.

Abstract：

Objective To study the expression and significance of β adrenergic receptors mRNA in a model of left ventricular mechanical unloading,and explore the change in cardiomyocyte in molecular level after left ventricular unloading.Methods Heart failure was reproduced in Lewis rats by ligating left anterior descending(LAD)artery.After 4 weeks,the failing hearts and right lungs were heterotopically transplanted into the abdomen of the recipients by anatomizing their ascending aorta to the recipients'descending aorta in the heart transplantation group.Two weeks after transplantation,heart weight,left ventricular weight,myocyte diameter and myocardial fibrosis were determined,and β adrenergics receptors mRNA expression was essayed by real-time polymerase chain reaction(PCR).Seven normal Lewis rats served as control.Results The weight of the enlarged heart,left ventricular weight and myocyte diameter of the failing hearts were decreased to normal after transplantation.The levels of β1-and β 2-adrenergic receptors mRNA expression were significantly lowered in heart failure group compared with that of normal group(0.09±0.03vs.0.18±0.04,0.07±0.06 vs.0.12±0.02,both P<0.05).The level of β2-adrenergic receptor mRNA expression in heart transplantation group(0.11±0.05)rose to normal(P>0.05),but β1-adrenergic receptor mRNA expression(0.08±0.06)was lower in heart transplantation group than that in normal group (P<0.05).Conclusion Myocardium reverse remodeling after left ventricular unloading is accompanied by the change in cardiomyocyte in molecular level,such as the change in β adrenergic receptors,which may involve in the improvement of heart function after being supported by left ventricular assist device.