正交试验优化益骨颗粒的提取工艺

目的:优化益骨颗粒的提取工艺。方法:采用L_9(3~4)正交试验,以淫羊藿苷、龙胆苦苷、马钱苷酸转移率和出膏率的综合评分为评价指标,以乙醇体积分数、溶剂用量、提取次数、提取时间为考察因素,优化益骨颗粒的提取工艺并进行工艺验证。结果:优化的提取工艺为药材加10倍量60%乙醇回流提取2次,每次1 h。验证试验结果表明,淫羊藿苷、龙胆苦苷、马钱苷酸的平均转移率分别为81.28%、48.71%、59.82%(RSD分别为1.54%、2.37%、2.52%,n=3),平均出膏率为31.48%(RSD=1.97%,n=3)。结论:优化的益骨颗粒提取工艺稳定可行、重复性好,可为后续的生产工艺研究提供依据。     

HPLC法同时测定狭叶竹节参中4种皂苷成分的含量

摘要：目的:建立同时测定狭叶竹节参中人参皂苷Rb1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳ和竹节参皂苷Ⅳa4种皂苷成分含量的HPLC法。方法:采用Phenomenex Kinetex Biphenyl（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱流动相为乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）,梯度洗脱流速:1.0 ml·min-1,检测波长:203 nm,柱温:30℃。结果:人参皂苷Rb1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳ和竹节参皂苷Ⅳa分别在0.20～4.02μg、1.84～36.80μg、0.49～9.80μg和0.40～8.04μg范围内呈良好线性关系（r≥0.999 0）,平均回收率分别为102.20%,100.77%,100.51%,102.72%,RSD分别为1.71%,1.02%,1.38%,2.39%（n=9）。结论:该方法简便、准确,分离效果好,可为狭叶竹节参药材的质量控制提供参考。     

HPLC-DAD法测定参桂鹿茸丸中7个成分的含量和转移率研究

目的 建立同时测定参桂鹿茸丸中马钱苷、黄芩苷、莫诺苷、橙皮苷、川续断皂苷Ⅵ、芍药苷、龙胆苦苷含量的方法,并考察各成分在药材至制剂过程中的转移率。方法 以高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate XB-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,切换波长测定。结果 7个成分分离度良好,马钱苷、黄芩苷、莫诺苷、橙皮苷、川续断皂苷Ⅵ、芍药苷、龙胆苦苷进样量分别在0.0612～0.4896μg(r=0.9995);0.2839～2.2709μg(r=0.9996);0.0434～0.3469μg(r=0.9993);0.6254～5.0034μg(r=0.9997);0.0558～0.4466μg(r=0.9992);0.1208～0.9665μg(r=0.9993);0.0690～0.5519μg(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为96.93%～101.1%(RSD<2%)。从药材至制剂中,马钱苷、黄芩苷、莫诺苷、橙皮苷、...     

高效液相色谱法同时测定珠子参中4种化学成分的含量

目的建立不同产地加工珠子参中人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 4种化学成分的含量测定方法。方法采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以0.2%的磷酸溶液和乙腈进行梯度洗脱;柱温25℃;流速1 mL·min-1;检测波长203 nm。结果在HPLC法中,人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa的线性范围分别是:0.81¹6.20μg(r=0.999 9)、0.4616.20μg(r=0.999 9)、0.46⁹.20μg(r=1.000 0)、0.389.20μg(r=1.000 0)、0.38⁷.60μg(r=0.999 9)、0.167.60μg(r=0.999 9)、0.16³.20μg(r=0.999 9);平均回收率分别为100.3%、99.1%、100.1%、95.8%,RSD分别为2.6%、2.3%、2.5%、0.7%。结论该方法专属性强,重复性好,可用于不同加工方法珠子参的质量控制。     

艽龙胶囊制备中4种主化学成分的转移率研究

目的建立同时测定秦艽药材与艽龙胶囊中的马钱苷酸、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和龙胆苦苷含量的HPLC法,并探讨其在秦艽药材至艽龙胶囊成药间的转移率。方法采用HPLC法,选取10批秦艽药材,每批对应1批胶囊。结果建立同时检测药材与胶囊中4种成分的HPLC法;10批药材及其对应10批胶囊的马钱苷酸、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和龙胆苦苷转移率分别为48.90%～86.47%,87.23%～97.88%,21.34%～44.67%和81.47%～96.15%。结论该含量测定方法简便、准确、重复性好,可作为秦艽药材与艽龙胶囊中4种主成分的检测方法;龙胆苦苷为该胶囊主要成分且转移率高,表明该胶囊制备工艺良好,为胶囊的质量控制提供了保障。     

怀牛膝成分的分离与鉴定

目的进一步研究怀牛膝(AchyranthesbidentataBl.)的化学成分.方法反复利用正相和反相硅胶色谱进行分离和纯化,通过理化及波谱分析鉴定化合物结构.结果从正丁醇可溶部分中分离得到6个化合物,分别鉴定为齐墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(oleanolicacid3-O-β-D-glucuronopyranoside,1)、竹节参苷Ⅳa(chikusetsusaponinⅣa,2)、竹节参苷Ⅳa甲酯(chikusetsusaponinⅣamethylester,3)、竹节参苷Ⅳa丁酯(chikusetsusaponinⅣabutylester,4)、28-去葡萄糖牛膝皂苷D甲酯(28-deglucosylachyranthosideDmethylester,5)和牛膝甾酮(inokosterone,6).结论化合物1～5为首次从该植物中分离得到.     

龙胆药材中龙胆苦苷、马钱酸含量测定与其外观性状的相关性及质量等级标准研究

目的:建立同时测定龙胆药材中龙胆苦苷、马钱酸含量的方法,并考察其含量与外观性状的相关性及进行质量等级划分。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Ascentis Express C18,流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.4 mL/min,柱温为30℃,检测波长为240 nm,进样量为1μL。以药材长度、须根数及根直径为指标,考察龙胆药材的外观性状特征;采用SPSS 21.0软件分析药材中龙胆苦苷、马钱酸含量与其外观性状的相关性;采用SPSS 21.0软件进行k-均值聚类分析,并建立龙胆药材的质量等级划分标准。结果:龙胆苦苷、马钱酸检测质量浓度线性范围分别为0.5～3.0 mg/mL(r=0.999 9)、0.05～0.50 mg/mL(r=0.999 9);定量限分别为0.295、0.289μg/mL,检测限分别为0.082、0.081μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为97.56%～102.23%(RSD=1.56%,n=6)、97.58%～102.67%(RSD=1.86%,n=6)。相关性分析结果显示,药材中龙胆苦苷、马钱酸含量与其长度、须根数、根直径均呈正相关,且对含量的影响程度大小依次为须根数>长度>根直径。聚类分析结果显示,54批龙胆药材可分聚为2类,S4～S6、S13、S17～S23、S25、S28、S31～S34聚为一类;S1～S3、S7～S12、S14～S16、S24、S26、S27、S29、S30、S35～S54聚为一类。质量等级划分结果显示,54批龙胆药材可分为2个等级,其结果与聚类分析结果一致。结论:所建含量测定方法操作简便,稳定性较好,可用于同时测定龙胆药材中龙胆苦苷、马钱酸的含量;龙胆药材须根数越多、长度越长、根直径越粗,马钱酸和龙胆苦苷的含量越高,药材质量越好。     

怀牛膝成分的分离与鉴定

目的:研究传统中药怀牛膝(Achyranthes bidentata Blume.)的三萜皂苷类化学成分.方法:通过反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 和反相ODS等方法分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果:分离并鉴定了6个化合物,分别为齐墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 (oleanolic acid 3-O-β-D-glucuronopyranoside,1), Zingibroside R1 (2),竹节参苷Ⅳa ( chikusetsaponin Ⅳa,3),竹节参苷Ⅴ( chikusetsusaponinⅤ, 4), 竹节参苷Ⅴ甲酯( chikusetsusaponinⅤmethyl ester,5), 竹节参苷Ⅴ丁酯( chikusetsusaponinⅤbutyl ester, 6).结论:化合物2、5 和6 均为首次从该植物中分得.     

牛膝中萜类及糖类成分的分离与鉴定

目的更好地开发利用牛膝(Achyranthes bidentata Bl.)。方法采用硅胶吸附柱色谱、HPLC等手段进行分离;根据理化性质及NMR、MS谱数据进行结构鉴定。结果分离鉴定了8个化合物,分别为姜状三七苷R1(zingibroside R1,1)、竹节参皂苷Ⅳa(chikusetsusaponin Ⅳa,2)、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa(deglucose chikusetsusaponin Ⅳa,3)、齐墩果酸(oleanolic acid,4)、28-norolean-17-en-3-ol(5)、京尼平苷(geniposide,6)、蔗糖(sucrose,7)、葡萄糖(glucose,8)。结论化合物5、6为首次从牛膝中分离得到;化合物5、6的13C-NMR谱数据为首次进行归属。     

竹节参质量评价方法研究

目的探讨竹节参的质量研究方法。方法采用性状、显微、TLC法对竹节参进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定竹节参皂苷Ⅳa的含量。结果显微观察可见特定组织特征,TLC能检出竹节参皂苷Ⅳa和人参皂苷Ro,HPLC图谱中竹节参皂苷Ⅳa色谱峰与其他色谱峰分离良好,进样量在1.007 6~10.076 0μg范围内呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为103.5%,RSD为0.8%(n=6)。结论所建立的方法简便易行,可用于竹节参的质量评价。     

HPLC法同时测定复方龙胆碳酸氢钠片中3种龙胆特征性成分的含量

摘要：目的:建立HPLC法同时测定复方龙胆碳酸氢钠片中马钱苷酸、龙胆苦苷、獐牙菜苷3种龙胆特征性成分的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:Techmate C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:0.1%磷酸溶液-乙腈,梯度洗脱;检测波长:240nm;柱温:35℃;流速:1.0 ml·min-1;进样量:20μl。结果:马钱苷酸、龙胆苦苷、獐牙菜苷线性浓度范围分别为0.302～120.873μg·ml-1（r=0.999 9）,0.302～120.926μg·ml-1（r=0.999 8）,0.275～110.152μg·ml-1（r=0.999 9）,加样回收率分别为98.48%（RSD=1.2%,n=6）,98.06%（RSD=0.9%,n=6）,95.61%（RSD=0.9%,n=6）。结论:该方法专属性强,准确性好,灵敏度高,可用于同时测定复方龙胆碳酸氢钠片中3种龙胆特征性成分。     

新疆假龙胆的保肝活性部位环烯醚萜苷提取纯化工艺研究

目的利用响应面法优化新疆假龙胆中保肝活性部位环烯醚萜苷的提取工艺,并优选大孔吸附树脂分离纯化新疆假龙胆中环烯醚萜苷的工艺条件。方法以新疆假龙胆中主要的3种环烯醚萜苷的提取率为考察指标,采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法优化提取工艺,再通过考察静态和动态吸附、洗脱效果,筛选大孔吸附树脂分离纯化环烯醚萜苷的最佳工艺条件。结果新疆假龙胆环烯醚萜苷提取的最优条件为:乙醇体积分数为55%,提取时间为3.0 h,提取温度为50℃,料液比为1∶30,所得提取物环烯醚萜苷含量为52.67%(其中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量分别为32.47%,17.41%和2.79%)。选用NKA-9型大孔吸附树脂,树脂柱径高比为1∶5进行洗脱,上样液pH值为2,质量浓度为0.5 g·mL~(-1),上样量为10 mL,吸附2 h后的树脂柱先用5 BV蒸馏水洗脱,再分别用10 BV体积分数为10%和30%的乙醇以5 BV·h~(-1)的流速洗脱。结论该方法具有较好的分离纯化效果,环烯醚萜苷类成分含量可达到59.9%。该优选工艺操作简单、稳定可行,可显著提高新疆假龙胆中环烯醚萜苷的提取率。     

珠子参抗肝损伤药效的物质基础研究

目的探索珠子参抗肝损伤药效的物质基础。方法利用溶剂提取法、大孔树脂法及各种色谱技术,进行珠子参有效部位和化学成分的提取分离;采用CCl4所致小鼠化学性肝损伤模型,进行珠子参药效部位及有效成分筛选。将小鼠平均分为对照组、模型组、阳性对照组、珠子参不同剂量组,共9组。每天灌胃1次,连续7d。检测血清中AST和ALT含量的变化。结果珠子参总皂苷高剂量、中剂量可以降低ALT和AST含量,珠子参多糖低剂量组与模型组比较也可以降低ALT和AST的含量,而总皂苷高剂量有显著作用;竹节参皂苷Ⅳa各剂量组、人参皂苷Ro中、低剂量组均能降低ALT和AST的含量,与模型组对比,差异有统计学意义,竹节参皂苷Ⅳa低剂量效果显著。结论珠子参总皂苷为珠子参抗肝损伤的有效部位,主要化学成分竹节参皂苷Ⅳa为其抗肝损伤的主要有效成分。     

绞股蓝大孔树脂分离物对DPPH自由基的清除作用研究

目的:研究绞股蓝大孔树脂分离物对二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基的清除作用。方法:将绞股蓝水煮醇沉的提取物用大孔树脂分离,依次以H2O,40%乙醇,80%乙醇洗脱,得到相应的分离物;采用DPPH自由基体系法测定其抗氧化活性,并与没食子酸、抗坏血酸进行比较。同时,测定各分离物中总皂苷的相对含量。结果:绞股蓝80%乙醇,40%乙醇,H2O分离产物对DPPH自由基的半数抑制浓度分别为0.081 2,0.028 7,0.541 0g·L-1。40%乙醇分离物中皂苷的相对含量最高。结论:绞股蓝不同溶剂大孔树脂分离物均有抗氧化活性,其中40%乙醇分离物的抗氧化性最强。预示绞股蓝皂苷是降脂、降糖以及清除自由基的可能活性物质。     

HPLC测定麻花艽地上和地下部分的4种有效成分

采用HPLC法测定麻花艽地上和地下部位中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量.方法采用Eclipse XOB - C18色谱柱(150 mmm×4.6 mm,5μμn);流动相为甲醇-水(21:79);流速1mL·min-1;检测波长254 nm;柱温25℃.结果马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的线性...     

龙荟丸中栀子苷、龙胆苦苷、芦荟苷和黄芩苷的多波长HPLC法测定

建立了多波长HPLC法同时测定龙荟丸中的栀子苷、龙胆苦苷、芦荟苷和黄芩苷.采用C18色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为238 nm(栀子苷)、280 nm(龙胆苦苷和黄芩苷)和355 nm(芦荟苷).栀子苷、龙胆苦苷、芦荟苷和黄芩苷分别在0.19～1.90、0.08～0.80、0.30～3.0和0.10～1.0 μg范围内线性关系良好,回收率分别为99.5%、101.0%、99.3%和97.8%,RSD分别为1.46%、1.06%、1.72%和1.67%.     

高效液相色谱波长切换法测定不同产地龙胆饮片酒炙前后马钱苷酸与异荭草苷含量

目的建立同时测定龙胆饮片中活性成分马钱苷酸和异荭草苷含量的HPLC法,并对不同产地龙胆饮片酒炙前后马钱苷酸和异荭草苷的含量差异进行比较,根据含量水平对龙胆药材进行聚类分析。方法色谱柱:Welchrom C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.04%磷酸溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min~(-1);检测波长:0～21 min,236 nm(马钱苷酸)、21～25 min,350 nm(异荭草苷);柱温:25℃;进样量:10μL;采用IBM SPSS statistics 24.0软件进行聚类分析。结果马钱苷酸、异荭草苷分别在8.0625～258μg·mL~(-1)(r=0.9998),0.402～12.85μg·mL~(-1)(r=0.9997)与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.8%(RSD=0.94%)、98.2%(RSD=1.2%);聚类分析显示所测龙胆饮片大致分为两类。结论该方法简便准确,分离效果及重复性好,可为龙胆饮片的质量控制提供参考。不同产地龙胆饮片中马钱苷酸和异荭草苷含量存在显著差异,酒炙后两种成分含量大部分呈现下降趋势。     

龙胆药材中龙胆苦苷的提取工艺研究

目的:筛选龙胆药材中龙胆苦苷的提取工艺。方法:以龙胆苦苷为指标,利用正交试验法进行提取工艺优选,并以薄层扫描法测定龙胆苦苷的含量。结果:乙醇用量及提取次数对龙胆苦苷的提取有显著性影响(P<0.05)。结论:最佳提取工艺为60%乙醇回流提取3次,每次2h,乙醇用量为药材的18倍。     

糖智宁胶囊定性定量方法研究

目的建立糖智宁胶囊的定性定量方法。方法采用TLC法对糖智宁方中黄连进行定性鉴别,采用HPLC法测定糖智宁胶囊中葛根素和竹节参皂苷Ⅳa的含量。色谱柱为Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;柱温30℃;以0.2%磷酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;流速1 mL min-1;检测波长203 nm。结果薄层色谱鉴别中,特征斑点清晰、分离度好、专属性强、阴性样品无干扰;在HPLC法中,葛根素和竹节参皂苷Ⅳa线性范围分别是：0.122 4～1.836μg（r=0.999 9）、0.249 6～3.744μg（r=0.999 9）;平均加样回收率分别为98.3%、97.1%;RSD分别为1.0%、0.7%。结论所建方法专属性强,重复性好,可用于糖智宁胶囊的质量控制。     

黄芪中黄芪总皂苷的大孔树脂纯化工艺研究

目的优选出分离纯化黄芪中黄芪总皂苷的最佳工艺条件。方法采用动态吸附-解析法,用超高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量,优选出最佳纯化条件。结果 D101树脂对黄芪总皂苷的纯化最优,以2BV/h吸附速率吸附,5BV70%乙醇以3BV/h的流速进行洗脱效果最佳,黄芪甲苷的精制度为446.28%。结论 D101大孔吸附树脂可用于黄芪总皂苷的纯化。