应用RT—PCR技术检测人类甲六腺癌中ret癌基因活化的研究

目的 观察人类甲状腺癌中ｒｅｔ癌基因的活化及其意义。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术研究甲状腺癌新鲜组织中ｒｅｔ癌基因活化形式ＰＴＣ基因的表达。结果 ２５例甲状腺乳头状癌中有６例（２４％）ＰＴＣ基因表达阳性,主要分布于Ⅱ级以上肿瘤中;而甲状腺滤泡型癌、甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织中ＰＴＣ均为阴性。结论 ＰＴＣ基因是ｒｅｔ癌基因新的活化仅限于甲状腺乳头状癌类型中,可能是乳头状癌的特殊遗传事件,因此检测ＰＴＣ     

甲状腺癌中ret/ptc癌基因表达的研究

目的探讨ret原癌基因活化形式ret/ptc癌基因在甲状腺癌发病机制中的作用和判断其生物学行为。方法应用RTnPCR方法检测了37例甲状腺癌ret/ptc癌基因的表达,包括乳头状癌为26例,滤泡癌8例,髓样癌2例,未分化癌1例。结果26例甲状腺乳状癌中有11例表达为阳性,阳性率为42.3%,8例滤泡癌、2例髓样癌和1例未分化癌均表达为阴性。组织学观察显示,ret/ptc阳性组病例多伴有淋巴细胞浸润(63.6%),显著高于阴性组病例(20.0%,P<0.05),临床病理资料显示,患者发病年龄平均为28.9岁,显著低于阴性组病例的45.9岁(P<0.05),而与患者性别,肿瘤大小,淋巴结转移无显著相关性,随访结果表明在复发病例中无ret/ptc阳性表达病例。结论我们认为ret原癌基因的活化与甲状腺乳头状癌的发生有关,具有ret/ptc癌基因阳性表达的患者一般发病年龄较小,肿瘤恶性程度不高,患者预后相对较好,可作为临床上诊断及判断其生物学行为的参考指标。     

人类甲状腺乳头状癌中ret癌基因活化的研究

目的 观察人类甲状腺乳头状癌中ｒｅｔ癌基因的活化。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术研究甲状腺乳头状癌新鲜组织中ｒｅｔ癌基因活化形式ＰＴＣ基因的表达。结果 ２５例甲状腺乳头状癌中有６例（２４％）ＰＴＣ基因表达阳性,主要分布于Ⅱ级以上肿瘤中,而甲状腺滤泡型癌,甲状腺腺癌瘤和正常甲状腺组织中均为阴性。     

ret原癌基因与甲状腺癌关系的研究进展

目前认为在人类肿瘤中至少有10％的肿瘤的发病机制与基因的改变有关，包括染色体易位、基因重组、基因突变或基因的过表达等，这些改变都将某些特定的基因片段发生激活或失活。在甲状腺癌中，由于ret原癌基因突变会引起甲状腺乳头状癌(PTC)，多发性内分泌腺瘤2型(MEN2)及散发性甲状腺髓样癌(MTC)的发生，ret原癌基因在甲状腺乳头状癌中通过基因重排被激活，而在多发性内分泌腺瘤2型及散发性甲状腺髓样癌中的激活机制为点突变，其中在MEN2型中发生的点突变均为种系水平，故可遗传给后代，因此国际上现已开展对甲状腺髓样癌高危人群的ret原癌基因突变的筛查工作，并通过区别点突变发生在种系水平抑或体细胞水平分析是否会遗传给后代，本文现就ret原癌基因在甲状腺癌中的研究进展作一介绍。     

RET/PTC、P53及BRAF在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

近年来,甲状腺癌的发病率有逐年增高的趋势,尤以女性患者增加明显,增加最多的是乳头状癌.甲状腺乳头状癌（PTC）的分子生物学改变,主要是丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导异常,包括RET/PTC基因重排和酪氨酸激酶受体改变及RAS癌基因或BRAF基因点突变,p53蛋白在甲状腺癌的发生、发展过程中亦起到一定作用.     

甲状腺癌ret、ras、p53基因的表达及意义

目的通过对甲状腺癌ret、ras、p53基因研究,揭示其在甲状腺癌发病中的意义,为进一步进行甲状腺癌的防治奠定基础。方法用免疫组织化学方法检测66例甲状腺癌和102例甲状腺良性病变中ret、ras、p53基因的表达并进行比较。结果ret在甲状腺乳头状癌、滤泡状癌、未分化癌、结节性甲状腺肿、桥本病及甲亢中均有表达,在髓样癌和滤泡状腺瘤中未检测到;ras在各型甲状腺病中均有表达,但在乳头状癌、滤泡状腺瘤及桥本病中的阳性率明显高于其他类型,差异有统计学意义（P〈0．05）;p53在各型甲状腺癌中的表达率为20％～50％,良性病变中仅在1例滤泡状腺瘤和3例结节性甲状腺肿中呈阳性。ret、p53在甲状腺癌中的表达显著高于甲状腺良性病变,差异有统计学意义（P=0．001）;ras在甲状腺良恶性病变中均有较高表达,差异无统计学意义（P=1．000）。结论甲状腺癌的发病与癌基因ret、ras及抑癌基因p53的突变有密切联系。ret、p53在甲状腺癌中的表达显著高于甲状腺良性病变;ras在甲状腺良恶性病变中均有较高表达,但在乳头状癌、滤泡状腺瘤及桥本病中的阳性率明显高于其他类型。因此,甲状腺癌的防治除考虑高碘因素外,也应充分注意遗传因素的影响。     

neu癌基因在人类甲状腺癌中表达的研究

目的：观察人类甲状腺癌中neu癌基因p185蛋白和mRNA的表达及其关系。方法：应用免疫组化和同位素点杂交技术对新鲜冰冻甲状腺组织Neu癌基因p185蛋白和mRNA的表达进行研究。结果：26例甲状腺乳头状癌中17例p185癌蛋白表达阳性，而其他类型肿瘤和非肿瘤组织均未见p185表达。Neu癌基因mRNA表达研究显示，乳头状癌和淋巴结转移灶中mRNA的表达水平明显高于其他肿瘤和非肿瘤组织。本研究还证明石蜡包埋的乳头状癌标本中Neu癌基因蛋白表达率明显低于新鲜标本。结论：Neu癌基因p185蛋白的表达是甲状腺乳头状癌的一个特征性改变，Neu蛋白的表达与mRNA的表达相一致，Neu癌蛋白检测的稳定性取决于组织标本的质量。     

甲状腺乳头状癌中NTRK1基因重排的研究进展

甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）,是来源于甲状腺滤泡上皮最为常见的恶性肿瘤,约占甲状腺癌的80%。PTC的发生、发展与染色体重排、癌基因激活和基因突变等分子生物学改变关系密切,     

抑癌基因RAS启动子甲基化与乳头状甲状腺癌的关系

目的观察抑癌基因RAS在乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,分析其启动子甲基化与肿瘤发生的关系。方法 选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤(对照组,包括20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)患者,对2组患者手术获取的标本提取RNA后,反转录为cDNA,进行多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),检测RAS基因的表达情况;运用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测上述组织中RAS基因启动子区甲基化的情况,并对2种抑癌基因甲基化和未甲基化的组织随机进行测序。结果 PTC组患者中,有30例(60%)RAS基因启动子发生甲基化;对照组患者中,有10例(31.3%)RAS基因启动子发生甲基化;PTC组织RAS基因启动子甲基化率均显著高于对照组,差异有统计学意义(χ2=6.46,P<0.05)。乳头状甲状腺癌mRNA的半定量的值为0.56±0.10,对照组mRNA半定量的值为0.67±0.16,乳头状甲状腺癌mRNA的表达明显低于对照组,两者差异具有统计学意义(t=2.83,P<0.05)。经DNA测序证实,RAS基因启动子发生甲基化的其CpG岛的碱基未发生改变,仍为CG;未发生甲基化的,碱基由CG变为TG。结论 PTC患者RAS基因启动子甲基化发生率显著高于良性甲状腺肿瘤患者,而RAS基因mRNA的表达则较良性甲状腺肿瘤降低;推测RAS基因启动子甲基化可能与PTC的发生、发展相关。     

ECRG4在甲状腺乳头状癌组织中表达水平的研究

目的研究甲状腺乳头状癌组织中ECRG4基因的表达水平,及ECRG4在甲状腺乳头状癌中的作用。方法收取甲状腺乳头状癌组织30例作为病例组,选取相对应的20例正常甲状腺组织作为对照组,通过实时荧光定量PCR法(QRT-PCR)以及免疫组织化学法,检测ECRG4基因及其蛋白在甲状腺组织中的表达情况。结果 QRT-PCR检测结果显示,ECRG4 m RNA在甲状腺乳头状癌中呈现高表达,其表达水平明显高于对照组(P0.01);免疫组织化学结果也显示,甲状腺乳头状癌中ECRG4蛋白呈现出高表达,显著高于对照组(P0.01)。结论甲状腺乳头状癌组织中ECRG4基因及其蛋白呈现高表达,ECRG4在甲状腺乳头状癌中可能为一个促癌基因,其在甲状腺癌的发生及发展过程中起着重要作用。     

Galectin-3 mRNA在甲状腺肿瘤中的表达

目的探讨galectin 3mRNA在良性和恶性甲状腺肿瘤组织中的表达情况。方法对 8例甲状腺乳头状癌、4 5例良性腺瘤结节和 2 1例正常组织 ,采用Trizol抽提总RNA ,RT PCR扩增、凝胶电泳 ,检测galectin 3mRNA的表达 ,并进行统计学分析。结果galectin 3mRNA在甲状腺乳头状癌的表达为 10 0 % ,在良性腺瘤结节和正常组织的表达分别为 88.9%和 4 7.6 %。癌与腺瘤之间没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,癌和腺瘤与正常组织之间均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论galectin 3mRNA对于甲状腺癌的分子诊断不是一个适合的靶标 ,可作为甲状腺乳头状癌鉴定的辅助指标。     

Expression of ras oncogene product P21 in thyroid tumors: an immunohistochemical study

The p 21 product of ras oncogene has been detected immunohistochemically in normal, inflammatory, benign and malignant human thyroid tissues. With the monoclonal antibody SCI-oncogene I and an avidin-biotin-peroxidase complex (ABC), the expression of ras p 21 was evaluated in paraffin-embedded sections. The results showed that papillary and follicular adenocarcinomas of the thyroid had moderate to intense staining for ras p 21 in most cases. Cytoplasmic and apical surface staining were the most common patterns of immunoreactivity. Adenomas showed slight positive or negative staining in cytoplasm. Normal thyroid tissues and thyroiditis were uniformly negative. Grave's disease revealed slight to moderate staining in some cases. These findings suggest that ras oncogene is involved in carcinogenesis of thyroid carcinomas. Enhanced expression of ras p 21 may be useful in differentiation of thyroid adenocarcinomas from adenomas and may be a valuable parameter in evaluating biological behavior of tumors.     

甲状腺乳头状癌中促甲状腺激素受体与钠碘转运体mRNA的表达

目的钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要载体,其表达、定位与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)关系密切。文中主要研究甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)及癌旁组织中TSH受体(TSH receptor,TSHR)与NIS基因的表达。方法实时荧光定量PCR法测定36例PTC及癌旁组织,20例正常组织中TSHR mRNA及NIS mRNA的表达水平。结果 PTC及癌旁组织中TSHR mRNA表达水平明显低于正常组织,P<0.05;NIS mRNA表达水平在PTC组织中显著下降,P<0.05。结论 PTC组织中TSHR与NIS mRNA基因表达水平呈现同步下降趋势,可能与TSH-TSHR信号通路的调控有关。     

NIS、TSHR在桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌中的表达及其意义

目的：研究钠碘转运体（NIS）和促甲状腺激素受体（TSHR）在桥本甲状腺炎（HT）合并甲状腺乳头状癌（PTC）中的表达,探讨HT与PTC的关系。方法：选取PTC、HT各25例,HT合并PTC以及正常甲状腺各18例,通过免疫组化法,测定标本中NIS和TSHR的表达情况。结果：NIS与TSHR在这4组中的表达有显著差异（P〈0．01）,而二者在PTC和PTC合并HT2组中的表达无显著差异,在PTC组与PTC合并HT组中的表达均高于正常组,在HT组的表达高于正常组（P〈0．01）。结论：TSHR、NIS表达水平与PTC密切相关,HT是一种具有恶性潜能的病变,应引起高度重视。     

甲状腺乳头状癌c-erbB-2和PCNA的表达

目的 探讨甲状腺乳头状癌c-erbB-2、PCNA的表达及临床应用价值.方法 应用免疫组化S-P法对27例有颈淋巴结转移的甲状腺乳头状癌(PTC LNM),35例无颈淋巴结转移的甲状腺乳头状癌(PTC)和30例甲状腺腺瘤(TA)进行了c-erbB-2、PCNA检测.结果 62例甲状腺乳头状癌的c-erbB-2、PCNA表达阳性率分别为54.8%和87.1%,在甲状腺腺瘤分别是10%和20%,PTC LNM组的c-erbB-2、PCNA的共同表达阳性率显著高于PrC组和TA组.结论 c-erbB-2、PCNA在甲状腺乳头状癌的发生发展中有一定的相关性,联合表达与颈淋巴结转移密切相关,并在转移过程中起协同作用,联合检测在甲状腺乳头状癌与甲状腺腺瘤的鉴别诊断中有一定的临床价值.     

端粒酶基因hTRT在甲状腺乳头状癌的表达及意义

目的：探讨端粒酶基因hTRT在甲状腺乳头状癌的表达及其意义，方法：应用原位杂交方法检测端粒酶基因hTRT在30例甲状腺乳头状癌，19例甲状腺良性病变及16例癌旁正常甲状腺组织中的表达。结果：hTRTmRNA在甲状腺乳头状癌中的阳性率为（25／30，83．3％），显著高于甲状腺良性病变中的阳性率（3／19，15．8％）和正常甲状腺组织中的阳性率（0／16，0％），而且病期晚及有淋巴结转移者阳性率增高，结论：端粒酶基因hTRT为甲状腺乳头状癌恶性表型增高的标志，hTRTmRNA表达检测可望成为甲状腺乳头状癌辅助诊断和预后评估的一个手段。     

甲状腺乳头状癌组织中差异表达miRNA及其靶基因的筛选和预测

目的：分析甲状腺乳头状癌组织中差异表达小分子RNA（miRNAs）并预测其靶基因,寻找影响甲状腺乳头状癌（PTC）发生发展及可用于生物标志物的miRNAs。方法：选取经病理证实的甲状腺乳头状癌组织及配对正常组织切除标本,运用高通量基因芯片的方法对差异表达的基因和miRNAs进行筛选,采用KEGG通路分析差异表达基因的功能,通过预测网站对差异表达miRNA进行靶基因预测,并对分析结果进行qRT-PCR验证。结果：与同源正常组织比较,基因芯片检测出PTC组织有248个miRNAs（ P<0.01）和3 631个基因差异表达（P<0.05）。hsa-miR-101［靶基因：整合素3(ITGA3）］已验证,癌组织中hsa-miR-101表达(59.8%)低于正常甲状腺组织, ITGA3表达（100%）高于正常甲状腺组织,并且与正常组织比较,59.8%PTC组织hsa-miR -101表达下调,同时ITGA3表达上调。结论：hsa-miR-101的靶基因可能为ITGA3,两者在PTC的发生发展中可能发挥重要作用。