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1.
急性早幼粒细胞白血病(APL)具有染色体易位t(15;17)而产生的特异的融合基因PML-RARα。本研究应用二次聚合酶链反应(boster-PCR)技术检测了APL细胞系HL60细胞中PML-RARα融合mRNA。结果表明,HL60细胞系中同时具有二种PML-RARα融合mRNA异构体(L型和S型)。本实验的敏感度可达10^-6个细胞水平,同时检测了结果具有高度的特异性。提示本方法可作为今后检测 相似文献
2.
急性早幼粒细胞白血病(APL)具有染色体易位t(15;17)而产生的特异的融合基因PML-RAR_α。本研究应用二次聚合酶链反应(boosterPCR)技术检测了APL细胞系HL_(60)细胞中PML-RAR_α融合mRNA。结果表明,HL_(60)细胞系中同时具有二种PML-RAR_α融合mRNA异构体(L型和S型)。本实验的敏感度可达10 ̄(-6)个细胞水平,同时检测了结果具有高度的特异性。提示本方法可作为今后检测APL微量残留白血病细胞一种灵敏、有效的手段。 相似文献
3.
应用热启动RT PCR 方法检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML RARαm RNA,与传统“巢式”PCR 比较,仅需1 对引物而获10- 4 的敏感性。对7 例APL患者,分别在诊断时及缓解后进行PML RARαm RNA的动态监测。这些患者分别接受如下治疗:2 例仅给予全反式维甲酸(ATRA) 治疗;其余5 例接受ATRA 联合化疗药物治疗。所有缓解后患者均进一步接受强化治疗。每月均对骨髓及外周血标本进行PML RARαmRNA 的检测,发现仅予ATRA 可获血液学缓解,但不能达到PCR 缓解,骨髓及外周血仍存在PML RARαmRNA;而接受ATRA 联合化疗药物治疗获缓解后,骨髓及外周血PCR 结果均阴性,显示了对恶性克隆的有效根除。2 例患者PCR 结果持续阳性,并在6 个月后复发。PCR方法不仅可评价化疗效果,指导临床用药,更可以预测复发。 相似文献
4.
RT-PCR检测氧化砷治疗APL复发患者的PML-RARα融合基因 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨急性早幼粒细胞性白血病(APL)患者在氧化砷(As2O3)治疗过程中,PML-RARα融合基因的变化。方法:应用RT-PCR技术动态观察14例APL复发患者在As2O3治疗过程中,骨髓单个核细胞中PML-RARα转录本的改变。结果:检测的11例诱导缓解患者中,9例存在阳性PML-RARα转录本,随访的6例患者中,3例呈现PML-RARα转阴,但2例分别在缓解后5、7个月转阳。结论:RT-PCR检测PML-RARα转录本可能在一定程度上为氧化砷的疗效及预后判断提供依据 相似文献
5.
目的:探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα融合基因异构体及其临床关系。方法:用逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)检测21例初诊APL患者细胞中PML-RARα融合基因转录本,并分析其对临床特征的可能不同影响。结果:在ATRA诱导治疗过程中,短型PML-RARα异构体APL组的早期死亡和复发率(4/8)(50%)高于长型PML-RARα异构体组(2/13)(15.4%);与长型异构体相反,存活期2月至2年患者含短型异构体的比例(75%)大于存活期2年以上组(33.3%);未观察到患者血液学参数改变与不同PML-RARα异构体有关。结论:与长型PML-RARα异构体组APL患者相比,短型PML-RARα异构体组的预后可能更差。 相似文献
6.
目的研究急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞PML-RARα(早幼粒细胞白血病基因-维甲酸受体基因α)融合基因的表达对维甲酸诱导分化作用的影响,探讨PML-RARα融合基因与维甲酸治疗作用间的关系。方法用反义核酸来阻断PML-RARα融合基因的表达并用逆转录-聚合酶链式反应检测。NB4细胞的生长、分化及功能。通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及NBT(硝基四氮唑蓝)还原试验进行判定,细胞周期应用流式细胞仪进行分析。结果反义核酸阻断PML-RARα表达后使维甲酸对NB4细胞的生长抑制作用增强,S期细胞由52%降至29%,同时NBT还原能力提高,细胞表面标志变化明显,提示对维甲酸敏感性增加。结论PML-RARα融合基因的表达不仅与APL的发病有关,而且钝化了维甲酸对APL细胞的诱导分化作用。 相似文献
7.
应用筑巢式逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测23例急性早幼粒白血病(APL),早幼粒白血病基因PML维甲酸受体α融合基因(PML-RARα),肯定了2例与急非淋白血病M2不易鉴别的不典型APL。15例缓解在2年以内APL此融合基因均阳性,其中L型8例,S型7例,L型中尚发现一个变异型。8例缓解在3年以上APL,此融合基因4例阳性,其中L型3例,S型1例,L型1例已有复发倾向,而缓解超过4年APL此融合基因均为阴性。 相似文献
8.
灵芝多糖(GL—B)对肿瘤坏死因子α和γ干扰素产生及其mRNA表 … 总被引:14,自引:0,他引:14
探讨灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞,肿瘤坏死因子α,脾细胞γ干扰素的产生及其mRNA表达的影响。方法;采集小鼠PM和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清。生物法测定TNFα,ELISA测定IFNγ;RT-PCR方法检测mRNA的表达。结果;GL-B25-400mg.L^-1使正常小鼠PM培养上清中TNFα活性升高,并呈剂量依赖关系,24h在高峰,72h后开始减少。 相似文献
9.
维甲酸和三氧化砷对急性早幼粒细胞性白血病细胞组织因子表 … 总被引:3,自引:1,他引:2
目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)在体内外对急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞组织因子(TF)表达的意义。方法 利用复钙时间测定、ELISA和RT-PCR等方法,分别检测了ATRA和As2O3治疗前后APL患者(23例)骨髓单个核细胞的促凝活性、TF抗原及其mRNA的转录水平,同时还检测了使用ATRA和As2O3处理APL细胞株NB4-R1细胞以及转染PML-RARa融 相似文献
10.
应用筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测23例急性早幼粒白血病(APL)早幼粒白血病基因PML维甲酸受体α融合基因(PML-RARa)肯定了2例与急淋白血病M2不易鉴别的不典型APL,15例缓在2年以内APL此融合基因均阳性,其中L型8例,S型7例,L型中尚发现一个变异型,8例缓解在3年以上APL,此融合基因4例阳性,其中L型3例,S型1例,L型1例已有复发倾向,而缓解超过4年APL此 相似文献
11.
采用免疫组化、原位杂交方法,测定28例急性早幼粒白血病(APL)患者的抗凋亡基因bcl-2蛋白/mRNA表达水平,并分析APL融合基因异构体分型与bcl-2基因表达、临床预后的关系。结果表明,异构体之间的bcl-2蛋白/mRNA表达水平差异无显著性(P〉0.05)。提示PML-RAPα转录构型不影响临床特征和预后。 相似文献
12.
应用聚合酶链反应方法,测定20例急性早幼粒白血病患者的抗调亡基因bcl-2mRNA表达水平,并分析基因与急性早幼粒白血病PML-RARα融合基因异构体的关系。结果表明,异构体之间的bcl-2mRNA表达水平差异无显著性(P>0.05)。提示PML-RARα转录本构型不影响临床特征和预后 相似文献
13.
应用聚合酶链反应方法,测定20例急性早幼粒白血病患者的抗凋亡基因bcl-2mRNA表达水平,并分析基因与急性早幼粒白血病PML-PARα融合基因异构体的关系。结果表明,异构体之间的bcl-2mRNA表达水平差异性无显著性(P〉0.05),提示PML-RARα转录本构型不影响临床特征和预后。 相似文献
14.
幽门螺杆菌在不同培养基上生长情况的比较 总被引:2,自引:0,他引:2
探讨灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides B, GL-B)对小鼠腹腔巨噬细胞(peritonealmacrophage,PM)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNFα)、肿细胞 γ干扰素(interferon-γ,IFNγ)的产生及其mRNA表达的影响。方法;采集小鼠PM和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清。生物法测定TNFα。ELISA测定IFNγ;RT-PCR方法检测mRNA的表达。结果:GL-B25~400mg·L~(-1)使正常小鼠PM培养上清中TNFα的活性升高,并呈剂量依赖关系,24 h达高峰,72 h后开始减少。 GL-B对小鼠 PM的 TNFα mRNA表达有显著促进作用。GL-B12.5~200mg~(-1)明显增加正常小鼠脾细胞培养上清中IFNγ产生。24h内随培养时间的延长而增加,48 h后开始减少。GL-B对IFNγmRNA的表达有促进作用。结论:灵芝多糖GL-B明显促进小鼠PM及脾细胞 TNFα和 IFNβ mRNA的表达,增加 TNFα和 IFNβ的产生。 相似文献
15.
羊裔明 《四川大学学报(医学版)》1997,(3)
为研究髓细胞白血病(AML)细胞白介素-2受体(IL-2R)基因及IL-2在AML中的作用,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对41例AML患者化疗前白血病细胞IL-2RαmRNA和IL-2RβmRNA进行检测,并对部分IL-2R基因阳性表达细胞用3H-TdR掺入法测定其对重组人IL-2(rhIL-2)的反应。结果显示,AML细胞IL-2Rα和IL-2β基因表达是一普遍现象,41例中白血病细胞有IL-2RαmRNA和IL-2RβmRNA表达分别为28例(68.3%)和32例(78.0%),IL-2RαmRNA和IL-2RβmRNA同时表达者21例(51.2%)。IL-2R基因阳性表达细胞对rhIL-2的体外反应呈不均一性,表现为细胞增殖、受抑或不反应,8例中仅1例M5型患者细胞呈增殖反应。本研究表明AML细胞IL-2R基因表达是一普遍现象,这些细胞在体外对rhIL-2的反应呈不均一性,大多表现为无反应或受抑。 相似文献
16.
头孢地秦对细胞因子及细胞因子mRNA表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨头孢地对正常及金黄色葡萄球菌感染的败血症小鼠腹腔巨噬细胞(PM)肿瘤坏死因子与白细胞介素6(IL-6)分泌及其mRNA表达的影响。方法:采集小鼠PM,体外给药,分离细胞培养上清。生物检测法测定TNFα,ELISA法测定IL-6;RT-PCR方法检测mRNA的表达。结果:头孢地秦使正常小鼠PM培养上清中TNFα的活性降低,使金黄色葡萄球菌感染小鼠PM48h2上清中TNFα活性升高。200m 相似文献
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急性髓细胞白血病细胞IL—2受体基因的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
羊裔明 《华西医科大学学报》1997,28(3):288-292
为研究髓细胞白血病(AML)细胞白介素-2受体(IL-2R)基因及IL-2在AML中的作用,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对41例AML患者化疗前白血病细胞IL-2Rα mRNA和IL-2RβmRNA进行检测,并对部分IL-2R基因阳性表达细胞用^3H-TdR掺入法测定其对重组人IL-2(rHIL-2)的反应。结果显示,AML组织IL-2Rα和IL-2β基因表达是一普遍现象,41例中白血病 相似文献
18.
目的 研究凝血酶、TNF-α、IFN-γ等对U937细胞表达uPAR mRNA的影响,观察凝血系统、炎症介质与纤溶功能变化间的关系。 方法 建立并应用逆转录PCR(RT-PCR)法测定培养U937细胞的uPAR mRNA。 结果:1.经测定批间变异系数(CV间)确认了RT-PCR法测定uPAR mRNA的稳定性;2.以不同浓度凝血酶刺激24h,对U937细胞表达uPAR mRNA有抑制和促进两种不 相似文献
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目的:探讨头孢地秦对正常及金黄色葡萄球菌感染的败血症小鼠腹腔巨噬细胞(PM)肿瘤坏死因子α(TNFα)与白细胞介素6(IL6)分泌及其mRNA表达的影响。方法:采集小鼠PM,体外给药,分离细胞培养上清。生物检测法测定TNFα,ELISA法测定IL6;RTPCR方法检测mRNA的表达。结果:头孢地秦使正常小鼠PM培养上清中TNFα的活性降低,使金黄色葡萄球菌感染小鼠PM48h培养上清中TNFα活性升高。200mg/L的头孢地秦对正常小鼠PM的TNFαmRNA表达有显著抑制作用,但对感染小鼠TNFαmRNA表达没有明显影响。头孢地秦抑制正常小鼠PM48h培养上清中IL6的产生,明显增加金黄色葡萄球菌感染小鼠PM培养上清中的IL6。头孢地秦对IL6mRNA表达的影响与细胞因子的改变一致。结论:头孢地秦对正常和感染状态下小鼠TNFα和IL6产生的影响不同,其对mRNA表达的影响与细胞因子的检测结果一致 相似文献
20.
TNFα在重症急性胰腺炎致病机制中的作用 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨重症急性胰腺炎病情加重机制中TNFα的作用。方法 将40只SD大鼠,随机分成4组。A组,PMN-弹力蛋白酶处理组;B组,单纯诱模组,C组,MDL27324治疗组;D组,假手术组,各组动物6h后处死。取胰腺标本观察病理变化。采用酶联免疫法测定血浆PMN-弹力蛋白酶含量的变化。RT-PCR方法测定外周血细胞中TNFαmRNA的表达水平。结果 A、B、C组胰腺组织有不同程度的胰腺腺泡坏死。炎性 相似文献