乙型肝炎患者CD4+、CD8+T淋巴细胞TRAIL增高与肝损伤相关性的研究

目的 探索乙型肝炎患者T淋巴细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)上调参与肝脏免疫病理一种新的发病机制。方法 采用流式细胞技术及夹心酶联免疫吸附法分析58例慢性肝炎患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞膜TRAIL及血清可溶性TRAIL(sTRAIL)表达水平，同时检测血清γ干扰素(IFN-γ)水平变化并与肝功能相关指标进行相关性分析。结果 各型慢性乙型肝炎患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞膜TRAIL表达水平，随疾病加重而明显增高；各型慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平高于正常对照，随疾病加重而下降(F=3．776，P=0.009)。CD4^ T淋巴细胞TRAIL表达与总胆红素(TBII)水平呈显著正相关(r=0．354，P=0．008)，与白蛋白(Alh)呈显著负相关(r=-0．276，P=0．044)；CD8^ T淋巴细胞TRAIL表达与丙氨酸氨基转移酶(ALT)(r=0．393，P=0．003)、TBil(R=0．522、P=0．000)及凝血酶原时间(R=0．385，P=0．004)呈显著正相关。各型慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ水平与外周血CD4^ T淋巴细胞(r=0．302，P=0.011)，CD8^ T(r=0．307，P=0．009)细胞膜TRAIL水平呈正相关；血清sTRAIL水平与乙型肝炎e抗原呈正相关(r=0．695，P=0.001)。结论 慢性乙型肝炎患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞TRAIL表达上调，与TBil、ALT、凝血酶原时间呈正相关，提示TRAIL表达增高与肝损害相关；TRAIL表达可能受病毒抗原及细胞因子IFN-γ诱导。     

各型乙型肝炎患者血清sIL-2R、IFN-γ和IL-l变化的研究

目的:探讨各型乙型肝炎患者血清sIL-2R、IFN-γ和IL-l变化及其临床意义。方法:收集急性肝炎、慢性肝炎、慢性重型肝炙和活动性肝硬变患者血清标本各16份,16例健康人血清标本作为正常对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各型乙型肝炎患者血清中sIL-2R和IFN-γ水平,采用MTT法检测各型乙型肝炎患者血清中IL-1水平,并与正常对照组进行比较。结果:急性肝炎患者血清sIL-2R、IFN-γ和IL-1水平均明显升高(P<0.01);慢性肝炎患者血清sIL-2R水平升高(P<0.05),IFN-γ水平无明显变化,IL-1水平稍降低;慢性重型肝炎患者血清sIL-2R和IFN-γ水平升高(P<0.05 and P<0.01 respectiveIy).但IL-1水平降低;活动性肝硬变患者血清sIL-2R和IFN-γ水平明显升高(P<0.01),但IL-1水平无明显变化。结论:血清sIL-2R、IFN-γ和IL-1参与各型乙型肝炎的发病机制,调整血清中细胞因子含量可能有助于乙型肝炎的治疗。     

IL-17在慢性乙型肝炎患者血清中的表达及其与肝炎肝硬化的相关性研究

目的研究IL-17在慢性乙型肝炎患者血清中的表达并探讨其与肝炎肝硬化的相关性。方法用双抗体夹心ELISA法测定34例慢性乙型肝炎、32例肝炎肝硬化、26例慢性重型乙型肝炎患者及20例健康对照者血清中的IL-17水平,同时检测不同Child-Pugh分级肝炎肝硬化患者血清IL-17的表达。结果各组患者与健康对照者血清IL-17的浓度均有显著性差异。肝硬化和慢性乙型肝炎组、重型肝炎组有显著差异(P<0.01),慢性乙型肝炎组与重型肝炎组之间无显著统计学差异(P=0.348);Child-PughB级、C级患者与A级患者相比,血清中IL-17的表达差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 IL-17与慢性乙型肝炎的发生以及肝纤维化之间可能有密切关系。     

乙型肝炎后肝硬化患者血清XCL1、IFN-γ及T细胞亚群的相关性分析

目的探讨XCL1、γ干扰素、T细胞亚群在乙肝病毒所致肝硬化中的水平变化及其临床意义。方法彩色腹部多普勒B超检查肝脏,测量脾脏厚度、门静脉宽度、有无腹水;全自动生化仪检测肝功能;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清XCL1、IFN-γ的水平;流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群。结果正常对照组、慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组XCL1水平分别为(8.29±1.82)ng/mL、(13.18±2.86)ng/mL、(11.86±2.47)ng/mL,IFN-γ水平分别为(19.98±2.92)pg/mL、(37.55±6.15)pg/mL、(31.26±5.44)pg/mL。慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组血清XCL1、IFN-γ水平显著高于正常对照组血清XCL1、IFN-γ水平(P0.01);慢性乙型肝炎组血清XCL1、IFN-γ水平显著高于乙型肝炎肝硬化组血清XCL1、IFN-γ水平(P0.01或0.05);XCL1水平与IFN-γ水平呈正相关(r=0.457,P0.01);XCL1水平与CD4+T细胞百分比呈负相关(r=-0.339,P0.01);IFN-γ水平与CD8+T细胞百分比呈正相关(r=0.330,P0.05)。结论 XCL1通过影响IFN-γ从而导致CD4+T/CD8+T比值失衡,引起肝细胞的慢性炎症参与肝硬化进程。     

辅助性T淋巴细胞1、2、17在慢性乙型肝炎病毒感染状态中的变化

目的 了解慢性HBV感染中辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2、Thl7产生的主要细胞因子的表达,以反映这3种细胞的功能状态.方法 ELISA测定34例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、26例原发性肝癌、22例慢性重型乙型肝炎患者及15例健康对照者m清中的1FN-γ、IL-4和IL-17水平,对数据进行t检验和Pearson相关分析.结果 IFN-γ/IL-4在慢性乙型肝炎患者(1.08±0.66)比健康对照者(2.60±0.60)降低(P＜0.01),在慢性重型乙型肝炎患者(4.81±0.87)比健康对照者升高(P＜0.01);IFN-γ/IL-17在慢性乙型肝炎(1.13±0.85,P＜0.01)、肝硬化(1.69±0.92,P=0.010)、肝癌(1.76±0.84,P=0.011)患者比健康对照者(2.66±0.70)降低,在慢性重型乙型肝炎患者(3.68±0.42)比健康对照者升高(P=0.004);IL-4/IL-17在肝硬化(0.72±0.38,P=0.026)、肝癌(0.63±0.19,P＜0.01)患者比健康对照者(1.04±0.23)降低.结论 慢性乙型肝炎患者IL-4的表达占优势;肝硬化、肝癌患者IL-17的表达占优势;慢性重型乙型肝炎患者IFN-γ的表达占优势.     

肝脏疾病患者血清细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10的检测

目的分析细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10在肝病患者血中的浓度改变及临床意义。方法应用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒体外检测不同类型肝病患者血清细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10的浓度。结果IL-4、TNF-α、IFN-γ在急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化及重型肝炎组患者外周血的浓度,较正常对照组,均显著升高（P〈0．001-P〈0．05）,而IL-10的肝病组与正常组之间、肝病组之间相比,均未有显著差别（P〉0．05）;IFN-γ在乙型肝炎肝硬化组中的浓度显著高于慢性乙型肝炎组（P〈0．01）和重型肝炎组（P〈0．05）;IL-4在重型肝炎组中的浓度显著高于急性（P〈0．05）、慢性乙型肝炎组（P〈0．05）。结论细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α在乙型肝炎病毒感染中起重要作用;细胞因子IL-4、TNF-α、IFN-γ分别参与乙型肝炎病毒感染中的促纤维化作用和抗纤维化作用;促炎因子 IFN-γ、TNF-α和抗炎因子IL-4共同参与重型肝炎的发病过程。     

乙型肝炎病毒感染者不同疾病阶段外周血T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1及血清细胞因子的表达

目的 探讨HBV感染后不同疾病阶段(免疫耐受期、免疫清除期、非活动携带状态)患者T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1(PD-1)和血清细胞因子的表达差异.方法 2011年4月至2011年9月无锡市第五人民医院住院或门诊的HBV感染者105例,HBV感染后免疫耐受期、免疫清除期、非活动携带状态患者各35例,另选20名健康人作为对照组.收集研究对象的外周血,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞表面PD-1的表达水平,ELISA检测血清IL-10、IFN-γ的表达水平.数据处理采用t检验,相关性分析采用Pearson相关分析.结果 HBV感染组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平为(12.35±3.48)％,高于健康对照组的(4.65±1.21)％(t=9.76,P＜0.01);HBV感染组CD4+T淋巴细胞表面PD-1表达水平为(4.95±2.87)％,健康对照组为(4.08±2.14)％,两组比较差异无统计学意义(t=1.29,P＞0.05).免疫耐受组、免疫清除组、非活动携带组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平分别为(15.87±3.18)％、(7.69±3.64)％和(10.12±2.84)％,均高于健康对照组(t值分别为15.12、3.61和8.17,均P＜0.01),免疫耐受组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平高于免疫清除组(t=10.01,P＜0.01).慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平与IL-10呈正相关(r=0.377,P＜0.05),与IFN-γ呈负相关(r=-0.620,P＜0.05).结论 慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达上调,PD-1水平与血清Th1细胞因子IFN-γ呈负相关,与血清Th2细胞因子IL-10呈正相关;HBV感染慢性化可能与PD-1高表达有关.     

肝癌患者乙型肝炎病毒基因变异的检测

目的了解肝癌患者HBV基因变异、机体免疫功能异常及肿瘤抑制基因P16蛋白失活的情况。方法运用基因芯片和核苷酸序列分析技术，对114份我院住院患者血清中HBVDNA（前C区1814、1896、BCP区1762、1764位）进行分析，流式细胞荧光染色检测患者外周血WBC中P16蛋白，流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群，ELISA法检测IFN-γ、IL-4水平。结果慢性乙型肝炎组（41份）、乙型肝炎肝硬化组（37份）、肝癌组（36份）血清中的HBV总突变率为58．5％、75．6％和88．8％，肝组织中肝硬化、肝癌分别为75．0％和100％；慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝癌组患者外周血WBC中P16蛋白阳性率分别为（43．09±8．08）％、（30．54±10．61）％和（16．29±6．86）％，正常人为（76．57±6．07）％；肝癌患者CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞绝对数均明显低于健康对照组（t＇1=8．83、t＇2=6．59、t＇3=9．84，P〈0．05）；肝癌患者IFN-γ、IL-4水平明显低于健康者（t＇1=6．67、t＇2=3．82，P〈0．05）。结论肝癌患者中HBV基因变异普遍存在，机体免疫功能低下，外周血WBC中P16蛋白表达明显低。     

Th细胞相关因子在慢性HBV感染患者中的表达及Th17与肝炎肝纤维化关系的研究

目的探讨Th细胞因子在肝纤维化发生、发展中的作用及机制.方法酶联免疫吸附试验测定34例慢性乙型肝炎(慢乙肝组)、32例肝硬化(肝硬化组)、22例慢性重型乙型肝炎(重肝组)及15例健康人(对照组)血清中Th细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17水平.同时检测不同的Child-pugh分级肝炎肝硬化患者血清IL-17的表达.结果慢乙肝组、肝硬化组IFN-γ均明显低于对照组,慢重肝组高于对照组;慢乙肝组IL-4高于其他各患者组,但无统计学差异.肝硬化组IL-17明显高于其他各组,P均＜0.05.IL-17水平与肝硬化分级密切相关.结论IFN-γ与IL-17水平可反映慢性HBV感染患者肝脏损伤程度及预后;IL-17可作为肝硬化程度的判断指标.     

慢性乙型重型肝炎患者外周血Th1/Th2,Tc1/Tc2的表达

分析慢性乙型重型肝炎患者外周血Th1/Th2,Tc1/Tc2的表达特点,探讨其与重型肝炎的关系.用流式细胞仪检测31例重型肝炎和20例正常对照者外周血T细胞胞内细胞因子IFN-γ、IL-4的百分率,发现1.重型肝炎Th1、Th2、Tc1分别为(27.41±4.88)%、(3.48±2.67)%、(43.85±12.98)%,显著高于正常对照,且以Th1和Tc1表达为主;2.重症期与恢复期相比,康复后Th1、Th2、Tc1显著下降,尤以Tc1下降更明显(P均＜0.01);3.生存组与死亡组比较,Th1、Tc1无显著性差异(P＞0.05).Th1、Th2、Tc1与重型肝炎的发生转归有密切关系,动态检测可作为监测病情和判断预后的指标.     

巨噬细胞移动抑制因子与慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化的关系

目的 了解慢性乙型肝炎(乙肝)及乙肝肝硬化患者血清细胞因子巨噬细胞移动抑制因子(MIF)表达水平,探讨血清MIF水平与Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的相关性.方法 选择44例慢性乙肝患者(肝炎组)、44例乙肝肝硬化患者(肝硬化组)和30名健康者(对照组),取静脉血并应用ELISA方法检测其血清中细胞因子MIF浓度,分析实验组血清MIF水平与PⅢP、TIMP-1相关性.两组间均数比较采用t检验,MIF水平与ALT、AST、TBil、PTA、PⅢP及TIMP-1关系采用直线相关分析.结果 慢性乙肝组及肝硬化组血清MIF、PⅢP及TIMP-1的浓度比健康对照组升高.差异均有统计学意义(t=12.87、5.28、10.98,t=11.22、14.84、11.17)均P<0.05),但该3种细胞因子在慢性乙肝及肝硬化患者之间差异无统计学意义(t=-1.05、1.52、-2.07;均P>0.05);MIF水平与ALT、AST、TBil及PTA均无相关性;HBeAg阳性和高病毒载量(>1×105拷贝/mL)慢性乙肝患者体内MIF水平高于HBeAg阴性和低病毒载量(≤1×105拷贝/mL)患者.MIF水平与PⅢP水平在慢性乙肝组和肝硬化组中均存在正相关(r=0.603,P<0.05;r=0.415,P<0.05);MIF水平与TIMP-1水平在慢性乙肝组中存在正相关(r=0.458,P<0.05),而在肝硬化组无相关性(r=0.210,P>0.05),PⅢ P与TIMP-1在慢性乙肝组及肝硬化组均存在相关性(r=0.649,P<0.05)r=0.424,P<0.05).结论 慢性乙肝及肝硬化患者体内MIF水平明显升高,MIF的早期生成可能与病毒复制有关,与肝功能无关;MIF参与了肝炎,肝纤维化及肝硬化形成过程,可反应肝硬化程度.     

慢性乙型肝炎外周血sCD62E水平与肝功能的关系

采用双抗体夹心ELISA法检测54例慢性乙型肝炎患者外周血可溶性选择素E（sCD62E)浓度变化并分析其与肝功能的关系。结果显示：慢性乙肝患者外周血sCD62E水平明显高于对照组（P＜0．001）。慢乙肝轻度、中度、重度三组sCD62E均显著高于对照组（P＜0．01）。轻为、中度、重度慢乙肝患者sCD62E逐渐升高且差异明显。sCD62E与ALT、AST、TBIL呈正相关，与ALB负相关。提示：sCD62E水平越高，肝功能损害越明显。sCD62E水平对衡量肝脏炎症程度和判断预后有重要临床价值。CD62E在HBV感染后引起的淋巴细胞浸润及肝细胞损伤机理中可能有重要作用。     

Association between TRAIL expression on peripheral blood lymphocytes and liver damage in chronic hepatitis B

AIM: To explore a novel mechanism for tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL), upregulation of CD4+ and CD8+T lymphocytes participating in the patho-physiological process of chronic hepatitis B (CHB). METHODS: The levels of serum soluble TRAIL (sTRAIL), serum IFN-γ and membrane-bound TRAIL expression on peripheral leucocytes from 58 CHB patients were examined by ELISA and flow cytometry respectively. The levels of TRAIL were compared with the baseline levels of 17 healthy controls, and correlation analysis was performed between ALT, TBIL, PT, morphological change in hepatic tissues, and serum IFN-γ. RESULTS: The results showed that TRAIL levels on membranes of CD4+, CD8+ T cells in CHB patients were much higher than those in healthy controls (P<0.001), and were correlated with serum TBIL (r=0.354, P= 0.008 for CD4+ and r= 0.522, P= 0.000 for CD8+, respectively), ALT (r= 0.393, P= 0.003 for CD8+), PT (r = 0.385, P = 0.004 for CD8+) and serum IFN-y level (r = 0.302, P= 0.011 for CD4+ and r= 0.307, P= 0.009 for CD8+). On the contrary to membrane-bound TRAIL expression, serum level of sTRAIL was not correlated with that of TBIL and PT, though it was higher than that of the normal population and was positively correlated with serum HBeAg expression (r= 0.695, P = 0.001). CONCLUSION: The expression level of TRAIL on the membrane of lymphocytes was upregulated and associated with the liver injury in CHB patients. These findings suggest that upregulation of TRAIL expression may be induced by virus antigen and inflammatory cytokine IFN-γ.     

慢性乙型肝炎患者白细胞介素-18、转化生长因子-β1、HBV DNA与肝脏损伤的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-18、转化生长因子(TGF)-β1、HBVDNA与肝功能损伤及肝纤维化发生发展的关系.方法 67例慢性乙型肝炎患者作为实验组,20例健康体检者作为健康对照组.双抗体夹心ELISA法及荧光定量PCR法检测外周血IL-18、TGF-β1和HBV DNA.48例患者行肝穿刺组织学检查.统计学处理采用方差分析,对方差不齐者采用秩和检验;各指标相关性采用偏相关分析.结果 乙型肝炎轻、中、重度及肝炎肝硬化组血清TGF-β1、IL-18及ALT、Tbil水平均不同程度高于健康对照组(P<0.01),IL-18、TGF-β1水平随CHB程度加重逐渐升高,TGF-β1各组间差异均有统计学意义(P<0.01),尤以肝硬化组升高显著.高病毒量组与低病毒量组ALT、Tbil比较差异无统计学意义.但与对照组比较差异均有统计学意义(F=10.970,F=7.528;F=14.698,F=13.395;均P<0.05);TGF-β1水平随纤维化分期SO～4逐步升高,除S3与S4比较无差异外,其余两两比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).IL-18仅S1期与其他各期有差异,HBV DNA在各期间均差异无统计学意义;偏相关性分析显示IL-18与ALT、Tbil呈正相关(r=0.480 6,r=0.5047,P<0.01),HBV DNA与lL-18、TGF-β1、ALT、Tbil无相关性.结论 血清IL-18、TGF-β1水平可作为判断肝脏损伤严重程度的指标.血清TGF-β1与肝炎肝硬化的程度密切相关.HBV DNA与肝脏损伤及纤维化关系不大.     

乙型肝炎患者血清高迁移率族蛋白-1含量的检测及临床意义

目的观察不同病情的乙型肝炎患者血清中晚期炎症介质高迁移率族蛋白-1（HMGB1）的含量，通过与肝炎病情评价指标TBil和PTA进行相关性比对，初步阐明晚期炎症介质HMGB1在慢性重型乙型肝炎患者肝衰竭发生中可能发挥的作用。方法收集慢性重型乙型肝炎患者23例，CHB患者31例，健康对照者10名，抽取外周血10ml，按常规方法检测肝炎病情指标TBil和PTA。超滤管去除血清中的大分子蛋白质，再浓缩血清小分子蛋白，然后用Western blot的方法检测样品中HMGB1。利用纯化出的GST-HMGB1融合蛋白进行相对定量，计算出不同患者血清中HMGB1的水平，最后与肝炎病情评价指标TBil和PTA进行相关性比对。结果23例慢性重型乙型肝炎患者血清中HMGB1检出率为100％（23／23），平均含量为（83．4±21．3）μg／L；10例重度CHB患者血清中HMGB1检出率为90％（9／10），平均含量为（78．1±19．5）μg／L；11例中度CHB患者的血清中HMGB1检出率为55％（6／11），平均含量为（60．6±14．3）μg／L；10例轻度CHB患者及12例恢复患者中均仅1例检出HMGB1，检出率分别为10％和8％，含量分别为28．9μg／L和39．7μg／L；健康对照者血清中未能检出HMGB1。血清中HMGB1的含量与TBil呈正相关，与PTA呈负相关。结论慢性重型乙型肝炎患者血清中HMGB1的含量与疾病的严重程度密切相关，晚期炎症介质HMGB1在慢性重型乙型肝炎患者肝衰竭的发生中可能起重要的作用。     

外周血单个核细胞TRAIL mRNA和血清sTRAIL水平与HBV感染肝损伤的相关性

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA及血清可溶性TRAIL(sTRAIL)水平与HBV感染肝损伤的关系.方法:采用TaqMan实时荧光定量RT-PCR(FQ- RT-PCR)检测58例慢性肝炎患者外周血PBMCs中TRAIL mRNA水平,采用夹心酶联免疫吸附法分析其血清sTRAIL水平,同时与血清HBV DNA滴度和肝功能相关指标,进行相关性分析.结果:除轻度慢性乙肝外,其他各型慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平均显著低于健康对照组(t=2.91,P<0.05),各型慢性乙肝之间无显著性差异,与白蛋白(ALB)呈显著正相关(r =0.426,P<0.05),与TBIL、ALT及HBV DNA滴度无相关性.各型慢性乙肝患者PBMCs中TRAIL mRNA水平显著高于健康对照组(t= 28.31.P<0.001),与肝功能指标及血清HBV DNA滴度无相关性.结论:血清sTRAIL水平降低与肝损伤相关,提示单个核细胞膜结合型TRAIL增高与肝损害及乙肝病程迁延不愈有关.     

替比夫定对慢性乙型肝炎患者血清中可溶性E选择素的影响

目的 观察替比夫定(LdT)治疗前后慢性乙型肝炎(CHB)患者HBsAg水平和血清中可溶性E选择素(sE-selectin)含量的变化.方法 107例CHB患者给予口服LdT 600 mg/d治疗,观察治疗前、治疗后第12、24和48周时患者HBsAg水平和血清中sE-selectin含量的变化,并进行相关性分析.结果 CHB患者血清sE-selectin含量明显高于健康对照组(P＜0.01).与治疗前相比,107例患者经LdT治疗后HBsAg水平和血清中sE-selectin含量均明显降低(P＜0.01).相关性分析表明,HBsAg水平和血清sE-selectin含量呈正相关(P＜0.01).结论 LdT可通过降低CHB患者血清中sE-selectin水平,提高免疫功能来抑制HBV复制.     

干扰素治疗前后慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体4水平的变化

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者干扰素治疗前后外周血单核细胞Toll样受体(TLR)4水平的变化及其意义.方法 用流式细胞仪检测30例健康人、65例CHB患者外周血单核细胞表面TLR4的表达,ELISA法检测上述患者血清白细胞介素(IL)-6的水平,鲎试验检测血清内毒素.结果 CHB患者组与正常对照组比较,外周血单核细胞TLR4表达水平、血清IL-6及内毒素水平均升高,具有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).患者应用干扰素针治疗12周时TLR4水平及IL-6水平均下降,但无显著性差异(P＞0.05),内毒素水平下降较明显(P＜0.05);治疗24周时,患者TLR4水平、血清IL-6水平及内毒素水平均明显下降,与治疗前比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).结论 外周血单核细胞TLR4表达水平与CHB的发病及治疗转归有关,且TLR4水平与IL-6及内毒素水平密切相关.     

Chronic hepatitis B serum promotes apoptotic damage in human renal tubular cells

AIM: To investigate the effect of the serum of patients with chronic hepatitis B (CHB) on apoptosis of renal tubular epithelial cells in vitro and to study the role of hepatitis B virus (HBV) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in the pathogenesis of hepatitis B virus associated glomerulonephritis (HBV-GN). METHODS: The levels of serum TGF-β1 were measured by specific enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and HBV DNA was tested by polymerase chain reaction (PCR) in 44 patients with CHB ,and 20 healthy persons as the control. The normal human kidney proximal tubular cell (HK-2) was cultured together with the sera of healthy persons, CHB patients with HBV-DNA nega-tive(20 cases) and HBV-DNA positive (24 cases) for up to 72 h. Apoptosis and Fas expression of the HK-2 were detected by flow cytometer. RESULTS: The apoptosis rate and Fas expression of HK-2 cells were significantly higher in HBV DNA positive serum group 19.01±5.85% and 17.58±8.35%, HBV DNA negative serum group 8.12±2.80% and 6.96±2.76% than those in control group 4.25±0.65% and 2.33±1.09%, respectively (P < 0.01). The apoptosis rate and Fas expression of HK-2 in HBV DNA positive serum group was significantly higher than those in HBV DNA negative serum (P < 0.01). Apoptosis rate of HK-2 cells in HBV DNA positive serum group was positively correlated with the level of HBV-DNA (r = 0.657). The level of serum TGF-β1 in CHB group was 163.05±91.35μg/L, significantly higher as compared with 81.40±40.75μg/L in the control group (P < 0.01). CONCLUSION: The serum of patients with chronic hepatitis B promotes apoptotic damage in human renal tubular cells by triggering a pathway of Fas up-regula-tion. HBV and TGF-β1 may play important roles in the mechanism of hepatitis B virus associated glomerulone-phritis.