新烯二炔类大分子抗肿瘤抗生素C1027的分子构成与活性关系

C1027是含烯二炔发色团的大分子肽类新抗肿瘤抗生素,由一个蛋白和一个烯二炔发色团两部分构成。后者是活性部分,对肿瘤细胞有强杀伤作用,蛋白对发色团的活性有保护作用。蛋白和发色团在一定条件下可以重新组建成完整的C1027。C1027分子内的二硫键有辅助蛋白保护发色团的作用,当二硫键被还原后,C1027活性丢失加快。C1027被链霉蛋白酶降解产生一个分子量为3～5kDa的中间产物,此产物对肿瘤细胞的杀伤作用与完整C1027相同,表明C1027是可以裁剪的,保护发色团的最小肽段为3～5kDa。     

烯二炔类新抗生素C1027的抗肿瘤作用研究

从我国湖北潜江县壤分离的一株链霉菌生产的Ｃ１０２７是大分子肽类抗生素，其发色基团是新的烯二炔化合物。研究表明，抗生素Ｃ１０２７对肿瘤细胞有强烈杀伤作用。Ｃ１０２７在精原细胞法检测中显示高度活性，比阿霉素、丝裂霉素Ｃ等强５００倍。由发色基团和蛋白质两部分构成的Ｃ１０２７分子可以拆分与重建；而重建的Ｃ１０２７分子同样具有很强的活性。在可耐受剂量，Ｃ１０２７对移植性小鼠结肠癌２６以及对移植于裸鼠的人体肝     

烯二炔类抗癌抗生素的前药研究

近年,在微生物代谢产物的探索研究中,发现了许多新抗癌抗生素,其中最引人注目的是1985年前后相继发现的具有环状烯二炔结构的新型抗生素,包括Calicheamicin、Esperamicin、Dyne-micin A、Neocarzinostatin、C-1027和Kedarcidin(图1),严格来讲,Neocarzinostatin的发色团不含(Z)-烯二炔结构,但由于其作用方式与前几种相同,故仍然被归人该类.由于这类抗生素(1)具有非常强的抗肿瘤活性,(2)其分子中的共轭环状烯二炔结构在天然化合物中是前所未见的,(3)具有经活化形成芳二游离基,迅速夺取两个来自DNA的氢原子,使DNA断裂的新颖抗癌作用机制(图2)等特住,引起世界关注,正在进行多方面的研究.其中,有关烯炔类模型化合物及有关前药的合成研究已有许多报道,并取得不小     

烯二炔类大分子抗肿瘤抗生素C1027抗肿瘤研究进展

烯二炔类抗肿瘤抗生素Ｃ１０２７是迄今已报道的活性最强的大分子蛋白类抗肿瘤抗生素之一。本文综述了Ｃ１０２７抗肿瘤活性，分子作用机制，活性基团与活性关系以及Ｃ１０２７与单克隆抗体的高效偶联物的研究。     

烯二炔类大分子抗肿瘤抗生素C1027抗菌与抗肿瘤活怀差异的研究

Ｃ１０２７具有极强杀伤肿瘤细胞活性，作用靶点在ＤＮＡ，但Ｃ１０２７的抗菌活性不强，如能了解差别出现的原因，就可进一步掌握Ｃ１０２７的抗菌作用机制，并为将来在临床上确定其应用范围打下良好基础。对Ｃ１０２７的抗肿瘤活性与抗菌活性的差异的初步研究结论如下：大分子Ｃ１０２７与小分子博莱霉素Ａ５相比，对肿瘤细胞抑制作用明显高于后者；对细菌的抑制作用却明显低于博莱霉素Ａ５；对支原体的抑制作用略大于博莱霉素Ａ５     

烯二炔类抗肿瘤抗生素的研究进展

烯二炔类抗生素是一种有着全新结构的高效抗肿瘤抗生素,本文对其抗肿瘤活性、作用机制、代表性药物力达霉素以及免疫偶联物的研发等方面的研究近况进行了阐述。     

烯二炔类高效抗肿瘤抗生素研究进展

近年来一种全新结构的烯二炔类高效抗肿瘤抗生素正在兴起,它具有独特的分子结构、新颖的作用机制和强烈的生物学活性,是迄今为止已发现的活性最强的抗肿瘤物质。研究者常把烯二炔称作enediyne,也有人称作diynene、bicyclodiynene或bicyclic enediyne等。目前已发现并确定为烯二炔结构的抗生素有calicheamicins、esperamicins、dynemicins、新制癌菌素(neocarzinostatin,NCS)、kedarcidin以及C1027。 1 烯二炔类物质的抗肿瘤活性     

烯二炔类抗肿瘤抗生素全合成研究Ⅱ.抗生素C-1027a发色团烯二炔单元开链衍生物的合成

以卤代环戊烯酮１或２出发，经５步反应，制得了烯炔醛化合物１２，再与由膦叶立德１９出发，经４步反应制备的碘代烯炔１５反应，生成了具有与环戊烯共轭骈连的烯二炔结构的目标化合物１６。它脱保护后，得到了抗肿瘤抗生素Ｃ－１０２７发色团及ｋｅｄａｒｃｉｄｉｎｅ发色团中烯二炔单元的开链衍生物１７。     

抗癌抗生素C1027与单克隆抗体Fab片段偶联物的抗肝癌作用

抗人肝癌单克隆抗体(单抗)3A₅用木瓜蛋白酶消化得到Fab片段。单抗3A₅和Fab片段分别与抗癌抗生素C1027偶联,偶联物经克隆生成法测定对肝癌细胞有很强的杀伤作用,C1027,Fab-C1027和3;3A₅-C1027的IC₅₀分别为6.5×10^-16,8.6×10^-16和4.2×10^-14mol·L^-1;Fab-C1027偶联物对非靶细胞(KB)的IC₅₀值为1.4×10^-13mol·L^-1,与靶细胞(BEL-7402)的IC₅₀值相比,两者相差160倍。说明Fab-C1027的杀伤活性强于3A₅-C1027,并对靶细胞呈选择性杀伤作用。给皮下移植人肝癌的裸鼠iv剂量0.1 mg·kg^-1,结果C1027和Fab-C1027的抑瘤率分别为59和85%,说明Fab片段与C1027偶联物比游离C1027的疗效更高。     

新抗癌抗生素C1027及其单克隆抗体组装偶联物的抗肿瘤活性

C1027是链霉菌株产生的大分子肽类新抗癌抗生素,对肿瘤细胞具有显著的杀伤作用,它由一条肽链和一个发色团组成,后者是主要活性部分。本研究用甲醇拆分C1027并重新组建,重建的C1027与天然C1027活性相似;C1027的重建是特异的,肽链与发色团的结合不受BSA竟争影响。肽链不能与表阿霉素组建;单抗H16(IgG_1)不能与发色团组建。我们用不同的方法分别制备了C1027与抗人肝癌单抗H16直接偶联物和组装偶联物(单抗与肽链连接后再加入发色团);克隆形成测定,前者IC_(50)为42pmol·L~(-1),后者为5.5pmol·L~(-1);C1027与无关抗体M3组装偶联物的IC_(50)为240pmol·L~(-1)。结果表明H16-C1027组装偶联物对肝癌细胞的抑制作用比直接偶联物明显增强,并具有选择性杀伤作用。     

新抗癌抗生素C1027及其单克隆抗体组装偶联物的抗肿瘤活性

C1027是链霉菌株产生的大分子肽类新抗癌抗生素,对肿瘤细胞具有显著的杀伤作用,它由一条肽链和一个发色团组成,后者是主要活性部分。本研究用甲醇拆分C1027并重新组建,重建的C1027与天然C1027活性相似;C1027的重建是特异的,肽链与发色团的结合不受BSA竟争影响。肽链不能与表阿霉素组建;单抗H16(IgG₁)不能与发色团组建。我们用不同的方法分别制备了C1027与抗人肝癌单抗H16直接偶联物和组装偶联物(单抗与肽链连接后再加入发色团);克隆形成测定,前者IC₅₀为42pmol·L^-1,后者为5.5pmol·L^-1;C1027与无关抗体M3组装偶联物的IC₅₀为240pmol·L^-1。结果表明H16-C1027组装偶联物对肝癌细胞的抑制作用比直接偶联物明显增强,并具有选择性杀伤作用。     

抗癌抗生素力达霉素与抗IV型胶原酶单链抗体的基因工程组装融合蛋白

目的　以IV型胶原酶为靶点,研制兼具有抗肿瘤侵袭转移和强烈杀伤肿瘤细胞的新型单抗导向药物。方法　力达霉素(LDM)分子由力达蛋白(LDP)和力达发色团(LDC)两部分组成。从基因工程转化菌中提取融合蛋白（LDP-Fv）并与LDC 组装重建,制备高效抗癌抗生素力达霉素与单链抗体的组装融合蛋白（LDM-Fv）。通过ELISA、酶谱分析、Boyden 小室体外侵袭实验及克隆形成测定,观察其生物学活性。结果　LDM-Fv能特异性与肿瘤细胞的IV型胶原酶结合并抑制其活性,LDP-Fv有阻断肿瘤细胞侵袭的能力,但无细胞毒性,加入LDC制成的组装融合蛋白LDM-Fv对肿瘤细胞有强烈的杀伤作用,并明显强于丝裂霉素和阿霉素。结论　LDM-Fv可能成为一种新型高效、小型化抗肿瘤导向药物。     

抗癌抗生素力达霉素与抗IV型胶原酶单链抗体的基因工程组装融合蛋白

目的　以IV型胶原酶为靶点 ,研制兼具有抗肿瘤侵袭转移和强烈杀伤肿瘤细胞的新型单抗导向药物。方法　力达霉素 (LDM)分子由力达蛋白 (LDP)和力达发色团 (LDC)两部分组成。从基因工程转化菌中提取融合蛋白 (LDP Fv)并与LDC组装重建 ,制备高效抗癌抗生素力达霉素与单链抗体的组装融合蛋白 (LDM Fv)。通过ELISA、酶谱分析、Boyden小室体外侵袭实验及克隆形成测定 ,观察其生物学活性。结果　LDM Fv能特异性与肿瘤细胞的IV型胶原酶结合并抑制其活性 ,LDP Fv有阻断肿瘤细胞侵袭的能力 ,但无细胞毒性 ,加入LDC制成的组装融合蛋白LDM Fv对肿瘤细胞有强烈的杀伤作用 ,并明显强于丝裂霉素和阿霉素。结论　LDM Fv可能成为一种新型高效、小型化抗肿瘤导向药物     

阿霉素与胃癌单克隆抗体交联物的体内外抗肿瘤作用

以氧化葡聚糖法制备了阿霉素(ADM)与胃癌单克隆抗体(MoAb)3H11的交联物3H11-DEX-ADM,ADM与3H11克分子比为73:1。经ELISA法测定,交联物的抗体活性保留86%。体外细胞毒试验显示,3H11-DEX-ADM对胃癌细胞BGC823的杀伤作用比游离ADM明显增强,其IC₅₀分别为1.0μg/ml及3.75μg/ml。在荷瘤裸鼠治疗实验中3H11-DEX-ADM能显著抑制肿瘤生长,抑制率为51.5%(P<0.05),明显高于ADM组及其非特异性抗体交联物(NI gG-DEX-ADM)组,后者的抑制率分别为21%及24%。表明3H11-DEX-ADM对肿瘤具有选择杀伤作用。将3H11-DEX-ADM与丝裂霉素C(MMC)-3H11交联物(3H11-HSA-MMC)联合应用,细胞素实验未能显示协同或相加作用;游离ADM与MMC联合亦呈相似结果。     

抗肿瘤抗生素(C-1027)产生菌Streptomyces geobisporus质粒pSGLI的分离及限制性内切酶图谱的构建

在抗肿瘤抗生素(C-1027)产生菌球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)中发现一新的质粒pSGL1,其分子量为7.40Kb。 采用Katz等的方法分离提取了质粒pSGL1,pSGL1经单酶切实验证明:PvuⅡ,PstⅠ、XbaⅠ、XhoⅠ和KpnⅠ为单切点;SmnaⅠ为双切点;SalⅠ和BamHⅠ为四切点;而EcoRⅠ、HindⅢ、BgⅢ和PvuⅠ则没有切点,经一系列双酶切实验,构建了质粒pSGLⅠ的限制性内切酶图谱。     

棒烷肽抗生素G0069A的抗肿瘤作用

体外用MTT法和动物移植性肿瘤模型研究棒烷肽抗生素G0069A的抗肿瘤活性。结果表明,G0069A对多药抗药性肿瘤细胞显示高度的杀伤活性,与阿霉素、长春新碱无交叉抗药性。G0069A经iv或ip给药对小鼠肉瘤180和肝癌22有显著疗效;用小鼠可耐受剂量,对肉瘤180和肝癌22的抑制率分别达87%和74%。提示G0069A是天然来源的具有明显抗肿瘤作用的棒烷肽。