子痫前期患者胎盘组织NK细胞及其表面KIR受体的配体HLA-G和HLA-E的表达及意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织天然杀伤(NK)细胞及其表面KIR受体的配体HLA-G和HLA-E的表达并探讨其临床意义。方法选择2011年7月至2012年12月在东南大学附属中大医院及东南大学附属江阴人民医院妇产科住院分娩的孕妇60例,包括子痫前期及正常妊娠孕妇各30例。采用免疫组化法检测胎盘组织NK细胞分布和数量以及NK细胞表面KIR受体的配体HLA-G和HLA-E蛋白表达情况;采用western blot法定量检测子痫前期患者和正常妊娠孕妇(各10例)胎盘组织HLA-G蛋白表达水平。结果 NK细胞主要分布在胎盘组织的蜕膜层。子痫前期组NK细胞数量显著高于正常妊娠组(P0.05);HLA-G表达水平显著低于正常妊娠组(P0.05);两组间HLA-E表达水平差异无统计学意义。结论子痫前期患者母胎界面NK细胞数量异常增高以及HLA-G的表达降低可能与子痫前期的发病相关。     

miRNA在重度子痫前期与正常妊娠胎盘组织中差异表达的研究

目的分别检测重度子痫前期和正常妊娠妇女胎盘组织中微小RNA(miRNA)的表达情况,并初步探讨miRNA的差异表达在重度子痫前期发生发展过程中的意义。方法在我院住院剖宫产分娩的产妇中,选取5例重度子痫前期患者(实验组),5例正常妊娠孕妇(对照组),通过miRNA芯片技术检测实验组与对照组胎盘组织中miRNA的表达情况。结果本实验共检测了391个miRNA的表达谱,实验组与对照组组间比较,差异表达的miRNA共有81个,其中表达上调的有80个,表达下调的有1个,主要涉及细胞分化、血管重塑、内分泌调节等多方面的功能。结论重度子痫前期患者胎盘组织中miRNA的表达失调可能参与了重度子痫前期的发病及病理生理过程。     

Galectin-1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的 探讨半乳糖凝集素-1(Galectin-1)在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其与微血管形成的关系。方法选择子痫前期患者40例[轻度子痫前期(轻度组)25例、重度子痫前期(重度组)15例]和正常妊娠孕妇(正常对照组)40例,采用半定量反转录-聚合酶链反应(SqRT-PCR)法检测胎盘组织中Galectin-1mRNA的表达水平,采用免疫组织化学SP法检测胎盘组织中Galectin-1的表达。通过CD34抗体标记血管内皮细胞,检测胎盘组织中的微血管密度。结果 轻度组、重度组胎盘组织中Galectin-1mRNA表达水平、Galectin-1阳性表达率均明显高于正常对照组(均P<0.05)。子痫前期胎盘组织中Galectin-1 mRNA表达水平与微血管密度值呈负相关(r=-0.416 3,P<0.05)。结论 Galectin-1在子痫前期患者胎盘组织中表达上调,可能参与子痫前期的病理过程。     

重度子痫前期胎盘微血管密度的研究

目的:探讨重度子痫前期胎盘微血管密度情况.方法:应用免疫组织化学法检测19例重度子痫前期孕妇胎盘组织中Ⅷ因子蛋白的表达情况,应用HE染色了解胎盘组织病理学改变,并以20例正常足月妊娠孕妇胎盘组织作为正常对照组.结果:重度子摘前期孕妇胎盘组织中微血管密度(32.83±2.04)明显低于对照组(103.96±2.68),差异有统计学意义(P<0.01);病理学表现:胎盘绒毛数及间质血管数减少,基底膜增厚,合体结节更明显,有典型的纤维素样坏死.结论:胎盘组织微血管密度降低,血管数减少与重度子痫前期的发生发展有关.     

水通道蛋白1和血管内皮生长因子在子痫前期胎盘中的表达与意义

目的:研究水通道蛋白1(AQP1)和血管内皮生长因子(VEGF)在子痫前期胎盘中的表达及关系。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测20例正常足月妊娠、20例子痫前期轻度组、20例子痫前期重度组孕妇的胎盘、胎膜组织中AQP1和VEGF的表达。结果:免疫组化显示AQP1和VEGF在3组胎盘、胎膜中均有表达,AQP1在子痫前期组胎盘上的表达较正常妊娠组上调,VEGF在子痫前期组胎盘上的表达强度弱于正常妊娠组。胎盘中AQP1和VEGF的表达不呈相关性(P>0.05)。而羊膜上的AQP1和VEGF的表达强度呈相关性(P<0.05)。结论:胎盘上AQP1的表达上调与VEGF的表达下降,可能参与子痫前期的发生和发展。     

可溶性人类白细胞抗原G与重度子痫前期的相关性研究

目的:在重度子痫前期患者血浆中的含量水平,探讨s HLA-G在早发型及晚发型重度子痫前期患者血浆中表达的差异性。方法:选择南京医科大学附属南京医院2013年07月至2014年04月间收治的6例早发型重度子痫前期患者(早发型组)、18例晚发型重度子痫前期患者(晚发型组)的临床资料,比较早发型组及晚发型组患者的一般临床情况;应用免疫组织化学染色法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),检测6例早发型组,18例晚发型组及32例正常足月妊娠者(正常对照组)的血清中s HLA-G的表达,并比较三组s HLA-G含量的差异。结果:1)早发型组与晚发型组的发病孕周,分娩孕周及期待治疗天数差异均有统计学意义(P0.05),而年龄差异无统计学意义(P0.05);2)早发型组与晚发型组的收缩压及舒张压差异均有统计学意义(P0.05);3)早发型组中s HL A-G含量均值为(4.284±1.932)ng/m L,晚发型组中s HL A-G含量均值为(7.036±1.623)ng/m L,正常孕妇组中s HLA-G含量均值为(10.399±3.168)ng/m L。正常对照组s HLA-G含量高于重度子痫前期组(P0.01),且早发型组低于晚发型组(P0.05)。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中VEGF与MMP-9表达水平与子痫前期病情的相关性

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的相关性。方法选取晚孕期正常孕妇53例(对照组)、轻度子痫前期患者61例(观察组Ⅰ)和重度子痫前期患者45例(观察组Ⅱ),比较3组VEGF、MMP-9的表达水平。结果对照组、观察组Ⅰ和观察组Ⅱ孕妇的胎盘组织中VEGF阳性表达率分别为86.79%、68.85%、40.00%,MMP-9阳性表达率分别为79.25%、67.21%、37.78%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论正常妊娠孕妇和子痫前期患者胎盘组织中均有VEGF及MMP-9表达,但是子痫前期患者VEGF及MMP-9表达水平均显著下降。子痫前期病情严重程度与VEGF及MMP-9表达水平有相关性。     

可溶性人类白细胞抗原G5在CD8~+和CD4~+T淋巴细胞亚群的分布状况与重度子痫前期的相关性

目的探讨可溶性人类白细胞抗原G5(HLA-G5)在CD8+和CD4+T淋巴细胞亚群的分布状况与妊娠期高血压疾病发生的相关性。方法选取北京军区总医院2010年3月至10月行剖宫产分娩产妇40例,其中重度子痫前期组20例,正常产妇组20例(对照组)。采用流式细胞术检测经双色荧光抗体染色的正常组和对照组产妇胎盘组织及外周血中HLA-G5的表达情况,比较两组之间的差异。结果重度子痫前期组患者胎盘组织中CD8+-HLA-G5+T淋巴细胞的表达率[(59.91±19.6)%]显著低于正常产妇组[(81.91±4.07)%],差异有统计学意义(P<0.05);CD4+-HLA-G5+T淋巴细胞的表达率[(2.64±2.64)%]与正常产妇组[(1.91±1.14)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。重度子痫前期组患者外周血中CD8+-HLA-G5+T淋巴细胞的表达率[(59.12±12.11)%]与正常产妇组[(64.94±7.46)%]比较,差异无统计学意义;CD4+-HLA-G5+T淋巴细胞的表达率[(27.39±8.34)%]与正常产妇组[(22.60±6.32)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结...     

子痫前期病人胎盘组织可溶性endoglin表达及意义

目的探讨可溶性endoglin（sEng）在子痫前期病人胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系。方法 2008年7月—2009年2月,选取在我科住院分娩的子痫前期病人67例,其中轻度31例（轻度子痫前期组）,重度36例（重度子痫前期组）。选取同期正常晚期妊娠妇女39例为对照组。酶联免疫吸附试验检测各组血清中sEng水平;采用RT-PCR、免疫印迹法分别检测各组胎盘组织中sEng mRNA以及蛋白表达水平。结果轻度及重度子痫前期组血清sEng水平、胎盘组织sEng mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组（F=133.54~779.63,q=13.26~53.88,P〈0.01）,且重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组（q=8.59~16.79,P〈0.01）。轻度及重度子痫前期组血清sEng水平与胎盘组织sEng mRNA及蛋白表达水平呈正相关（r=0.781~0.888,P〈0.01）。结论子痫前期病人胎盘组织sEng mRNA及蛋白表达上调,导致血清sEng水平升高,从而参与子痫前期的病理生理过程。     

子痫前期患者胎盘骨桥蛋白及整合素ανβ3的表达及意义

目的探讨骨桥蛋白（OPN）及其受体整合素ανβ3在子痫前期（preeclampsia,PE）患者胎盘组织中的表达及其意义。方法2008年11月-2009年9月,采用免疫组织化学方法检测20例PE患者（轻度及重度PE各10例）和14例正常足月孕妇（对照组）胎盘组织中OPN及ανβ3蛋白表达水平。采用RT-PCR检测各组孕妇胎盘组织中的OPN、αν和β3的mRNA的表达水平。结果PE组孕妇胎盘组织中OPN及ανβ3蛋白表达低下,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;重度PE组OPN及ανβ3蛋白表达水平更低,与轻度PE组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。PE组孕妇胎盘组织中OPNmRNA水平明显低于对照组,两组差异有统计学意义（P〈0.05）;重度PE组OPNmRNA水平显著降低,与轻度PE组比较,两组差异有统计学意义（P〈0.05）;但αν和β3mRNA的表达水平三组间比较差异无统计学意义。结论OPN及其受体整合素ανβ3在PE胎盘组织中的低表达可能在子痫前期的发病过程中起重要作用。     

肝癌患者外周血单个核细胞HLA-G表达研究

目的了解肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMC）人类白细胞抗原G（HLA—G）的表达水平。方法收集38例HCC患者、25例肝硬化患者和40名健康查体者的PBMC,分别用逆转录一聚合酶链反应（PCR）和流式细胞术（FCM）检测其HLA—GmRNA和HLA—G蛋白表达水平。结果HCC组、肝硬化组和健康对照组PBMCHLA—GmRNA表达率分别为94．7％、84．0％和87．5％,差异无统计学意义（P=0．359）;HCC组HLA—G蛋白表达率高于肝硬化组和健康对照组,差异有统计学意义（P=0．002）。HCC组PBMCHLA—G蛋白主要表达于CD4^＋细胞上。结论HCC患者PBMCHLA—G蛋白表达率升高,其机制与临床意义尚待进一步研究。     

Color Doppler waveforms of maternal cervical internal carotid arteries in normotensive and preeclamptic gravidas.

The objective of this study was to investigate and determine fitted percentiles of blood flow resistance of cervical internal carotid arteries in normal pregnancies from gestational weeks 20 to 42 and to compare the resistance indices and mean velocities of the these arteries in normotensive and preeclamptic gravidas. A duplex color apparatus with pulsed Doppler ultrasound scanner (7.5 MHz) was used to determine the resistance index and mean velocity values of maternal cervical internal carotid arteries in 310 healthy singleton gravidas (group 1) and 74 singleton preeclamptic gravidas (group 2). The resistance index and mean velocity values of the maternal cervical internal carotid arteries decrease as the gestational age increases in normal gravidas, whereas in preeclamptic pregnancies these values are no different from those in normal gravidas during the second half of the gestational period.     

人白细胞抗原G 14bp插入/缺失多态性和血浆可溶性人白细胞抗原G表达水平与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的检测系统性红斑狼疮（SLE）患者人白细胞抗原G（HLA-G）14bp插入/缺失（ins/del）多态性和血浆可溶性HLA-G（sHLA-G）水平,并分析它们与SLE的关联性。方法聚合酶链式反应（PCR）检测231例SLE患者及367名健康体检者的HLA-G 14bp ins/del多态性的基因型分布,酶联免疫吸附法（ELISA）检测其中96例SLE患者及74名健康体检者血浆sHLA-G水平。结果HLA-G14bp ins/del多态性位点和基因型频率分布在正常人组和SLE组均无统计学意义（P均〉0.05）,血浆sHLA-G水平在SLE患者组为（230.2±192.2）U/ml,明显高于正常人组的（118.3±38.1）U/ml（P=0.0001）;血浆sHLA-G水平增高的SLE患者易出现中枢神经系统受累（P=0.007）,且较血浆sHLA-G水平正常的患者病情更重（P=0.027）。进一步分析血浆sHLA-G水平增高和正常SLE患者的HLA-G 14bp ins/del多态性位点和基因型分布,未发现两组间有差异（P=0.675）。结论血浆sHLA-G水平在SLE患者中明显增高提示sHLA-G可能参与到SLE发病机制中,其水平高低主要取决于SLE病情严重性及活动性,而与HLA-G1 4bp ins/del多态性无关。     

白细胞抗原G与白细胞介素10联合检测在婴幼儿巨细胞病毒肝炎诊断中的应用价值

目的探讨巨细胞病毒(CMV)肝炎患儿中白细胞抗原G(HLA-G)与白细胞介素10(IL-10)联合检测的临床价值。方法选取2013年1月至2017年1月该院CMV肝炎患儿122例作为患儿组,另选取同期健康儿童116例为对照组,采用ELISA法检测两组血浆HLA-G和IL-10水平,分析其相关性和诊断价值。结果患儿组血浆HLA-G、IL-10水平明显于高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);根据月龄分组,1~6月龄患儿血浆HLA-G、IL-10水平最高;血浆HLA-G水平与IL-10水平呈正相关(r=0.445);受试者工作特征曲线分析结果显示血浆HLA-G与IL-10联合检测的曲线下面积最大,诊断效能最高。结论血浆HLA-G和IL-10联合检测可提高CMV感染诊断的准确性,有重要的临床意义。     

Dissociation between increased apoptosis and expression of the tumor necrosis factor-alpha system in term placental villi with preeclampsia

OBJECTIVE: To analyse in situ the placental expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), its receptors TNFRp55 and TNFRp75, and apoptosis in normotensive and preeclamptic pregnancies. DESIGN AND METHODS: We simultaneously analyzed the immunostaining of TNF-alpha, its receptors and apoptosis in term placentas of 15 patients with preeclampsia and 15 normotensive pregnant women as controls. RESULTS: In normotensive villi TNF-alpha and TNFRp75 were expressed more in syncytiotrophoblasts than cytotrophoblasts or stromal cells, and were almost absent in endothelial cells. TNFRp55 was expressed uniformly in all types of placental cells. Apoptosis was more marked in syncytiotrophoblasts than cytotrophoblasts. In preeclamptic trophoblasts apoptosis was exaggerated whereas expression of TNF-alpha and its receptors remained unchanged. CONCLUSIONS: Placental expression of TNF-alpha and TNFRp75 appear inter-adaptative and follow the same pattern, whereas TNFRp55 and TNF-alpha appear independent. In addition, the exaggerated apoptosis of preeclamptic trophoblasts may be dependent on factors other than the TNF-alpha system alone.     

3项指标联合检测对儿童原发传染性单核细胞增多症的诊断价值

目的探讨血浆人类白细胞抗原G(HLA-G)、可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)、EB病毒(EBV)-DNA载量对儿童原发传染性单核细胞增多症(IM)的诊断价值。方法将60例IM患儿作为观察组,并以同期非IM的发热儿童60例作为对照组。检测并比较两组血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量及联合检测对儿童IM的诊断效能。结果观察组血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量联合检测诊断儿童IM的曲线下面积(0.958)高于HLA-G(0.886)、sHLA-G(0.789)、EBV-DNA载量(0.904)单项检测。结论血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量水平可作为诊断儿童IM的重要指标,联合检测的特异度和准确度更高。     

宫颈癌患者高危型HPV感染状况及与血清HLA-G、TGF-β1表达的相关性

目的 分析宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染状况与血清人白细胞抗原-G(HLA-G)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平表达.方法 回顾性选取2018年1月至2020年2月大连市妇女儿童医疗中心(集团)收治宫颈癌患者83例为宫颈癌组,同期纳入宫颈上皮内瘤变宫颈上皮内瘤变(CIN)77例为癌前病变组,健康检查...     

体外缺血缺氧条件下人主动脉平滑肌细胞中 1-磷酸鞘胺醇的表达变化

目的:探讨缺血缺氧条件下1-磷酸鞘胺醇(S1P)在人主动脉血管平滑肌细胞(T/G HA-VSMC)收缩中的作用机制。方法:将传代培养的T/G HA-VSMC分为正常对照组和缺血缺氧组。缺血缺氧组采用低氧条件培养T/G HA-VSMC细胞来模拟蛛网膜下腔出血(SAH)所致的缺血缺氧环境;采用QT-PCR检测人鞘胺醇激酶1(SphK1)基因的m RNA表达;Western-blot法检测人SphK1基因的蛋白表达;ELISA法测定T/G HAVSMC细胞上清液和细胞内S1P浓度;慢病毒载体shRNA介导的T/G HA-VSMC细胞内SphK1基因表达沉默;采用钙离子荧光探针Fluo-3/AM检测T/G HA-VSMC细胞内Ca~(2+)浓度。结果:与正常对照组相比,缺血缺氧条件下人T/G HA-VSMC细胞内SphK1基因表达上调,且缺血缺氧组细胞培养液和细胞裂解液中S1P浓度均显著升高。缺血缺氧可诱导T/G HA-VSMC细胞内Ca~(2+)离子浓度增加,并且外源性S1P显著上调T/G HA-VSMC细胞内Ca~(2+)浓度;与正常对照组相比,shRNA干扰技术沉默SphK1基因表达和SphK1特异性抑制剂二甲基鞘胺醇(DMS)均显著抑制低氧诱导的T/G HA-VSMC细胞内S1P和Ca~(2+)浓度上调。结论:缺血缺氧可导致T/G HA-VSMC细胞内SphK1基因表达上调,进而促进S1P的合成代谢,而高浓度的S1P通过某种机制导致细胞内Ca~(2+)浓度水平增加导致血管收缩。     

Upregulation of ENDOU in cytotrophoblasts from placenta complicated with preeclampsia and fetal growth restriction

Placental hypoplasia is associated with the pathophysiology of fetal growth restriction and preeclampsia. The placenta consists of differentiated trophoblasts, including cytotrophoblasts, syncytiotrophoblasts, and extravillous trophoblasts. Cytotrophoblasts are thought to have stem-like characteristics and the ability to differentiate into syncytiotrophoblasts and extravillous trophoblasts. However, it is poorly understood whether isolated cytotrophoblasts derived from hypoplastic placentas have specific features compared with those in normal placentas. This study aimed to determine the features of cytotrophoblasts in hypoplastic placentas. Differentially expressed proteins between isolated cytotrophoblasts from hypoplastic placenta with fetal growth restriction and those from the normal placenta were determined by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Among 6,802 proteins, 1,253 and 2,129 proteins were more than 2-fold upregulated and downregulated, respectively. Among them, ENDOU (endonuclease, poly(U) specific), which has high homology with the coronavirus endoribonuclease nonstructural protein 15 (Nsp15), showed a significantly increased expression in cytotrophoblasts from the placenta with fetal growth restriction related to preeclampsia compared with those in normal control placenta. These results provide insight into the pathological mechanisms of placental hypoplasia and additional information on preeclamptic symptoms in cases of SARS-CoV-2 infected placenta, although further investigation is needed.