基于大鼠原位肠-肝血管灌流模型研究甘草酸的代谢

目的研究甘草酸在大鼠体内的肠、肝中的生物转化。方法建立大鼠原位肠-肝血管灌流模型,采用LC-MS/MS方法测定灌流液中的甘草酸和甘草次酸。结果甘草酸在单向肠-肝血管灌流模型中稳态肠提取率和稳态肝提取率分别为(4.2±0.6)%和(28.0±3.0)%,灌流液中未发现代谢物甘草次酸;原位循环肠血管灌流模型中甘草酸的一级吸收速率常数为(0.33±0.06)min-1;甘草酸在大鼠十二指肠给药后,灌流液中主要活性代谢产物为甘草次酸,同时肠腔液也存在大量甘草次酸。结论甘草酸的首过效应明显,口服后其主要被肠道菌群或肝细胞代谢,在肠粘膜细胞仅少量代谢。大鼠原位肠-肝血管灌流模型适用于甘草酸的药动学研究。     

建立大鼠原位肠-肝灌流模型评价绿原酸的代谢

目的：建立大鼠原位肠-肝灌流模型，运用该模型研究绿原酸在大鼠肠、肝中的代谢转化。方法：采用液相色谱质谱联用（HPLC-MS）法测定大鼠原位肠-肝灌流模型灌流液中绿原酸及其代谢产物咖啡酸、阿魏酸和马尿酸。结果：绿原酸十二指肠给药后，灌流液中主要活性代谢产物为阿魏酸，同时在灌流液中也检测到少量活性代谢产物咖啡酸和大量代谢终产物马尿酸。结论：大鼠原位肠-肝灌流模型适用于绿原酸生物转化和代谢动力学的研究；绿原酸在肠中存在广泛的代谢。     

大鼠原位肠-肝灌流模型研究小补心汤总黄酮体内效应物质

<正>抗抑郁作用经典古方小补心汤由代赭石、旋复花、竹叶和淡豆豉4味中药组成,含有大量的黄酮类化合物。张有志等[1-2]研究结果表明,小补心汤乙醇提取物总黄酮(BX-2)具有良好的抗抑郁活性,且BX-2抗抑郁作用的效价强度比小补心汤明显提高,由于BX-2所含成分多,含量低,目前动物体内物质基础研究无法开展,为了研究其体内效应物质基础,本实验尝试用大鼠原位肠肝循环灌流模型对BX-2的体内效应物质基础进行初步研究。     

基于原位单向肠灌流模型研究没食子酸的肠吸收特性

目的考察没食子酸的肠道吸收特性,为提高鞣质类成分生物利用度提供理论依据。方法采用大鼠在体肠单向灌流模型、建立HPLC测定没食子酸的方法,并计算没食子酸在各肠段的吸收速率常数(Ka)及有效表观渗透率系数(Peff);分别研究吸收部位、药物浓度、时间、pH值、P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白-2(MRP2)抑制剂对没食子酸吸收的影响。结果没食子酸在不同肠段的Ka顺序为空肠>十二指肠>回肠≈结肠;随着药物浓度的升高,没食子酸的吸收差异无显著性;酸性环境(pH 5.5)有利于没食子酸的吸收;加入P-gp和MRP2抑制剂后,没食子酸的吸收与不加P-gp和MRP2抑制剂比较差异有显著性(P<0.05)。结论没食子酸在大鼠肠道内有较好的吸收,在空肠中吸收最好。初步判断其吸收机制为被动扩散。没食子酸的吸收受P-gp和MRP2的外排影响,可能为P-gp和MRP2底物。     

大鼠原位脑灌流实验技术方法的建立

原位脑灌流技术是研究物质跨血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)转运的一种快速、敏感、定量和可控的方法。它通过直接向通往脑部的颈动脉灌流可以取代体循环血液的灌流液,待研究物质以已知质量浓度混入灌流液中随其流动在一定时间内运送到脑部,到达预设时间,结束灌流,测定待研究物质的入脑量;由所测结果分析物质的入脑吸收动力学特征[1]。该操作比离体灌流法简单,且具有活体的真实性,灌流液中待研究物质质量浓度可控,便于研究物质跨BBB转运的动力学特征,并可阐明中枢神经系统(CNS)中毒与BBB功能的关系,促进新药研究与开发。尤其在研究…     

在体肠灌流模型研究灵仙新苷的大鼠肠吸收特性

目的:研究灵仙新苷在大鼠肠段的吸收特征。方法:以酚红为标示物,采用在体单向肠灌流模型,LC-MS/MS测定灵仙新苷在体肠灌流的浓度变化,研究灵仙新苷的吸收部位和吸收动力学特征。结果:灵仙新苷在大鼠小肠各肠段的吸收速率常数(Ka)、有效渗透系数(Peff)是十二指肠>空肠≈回肠,且十二指肠的Ka和Peff值与其他肠段存在显著性差异(P<0.05);灌流液中同一肠段不同浓度灵仙新苷的Ka和Peff均无统计学显著差异;盐酸维拉帕米和环孢素A均显著性降低对灵仙新苷的吸收(P<0.05)。结论:灵仙新苷在小肠有不同程度的吸收,其中在十二指肠吸收最好,药物浓度对灵仙新苷的Peff和Ka值无影响,其吸收机制为被动扩散,灵仙新苷可能不是P-糖蛋白底物。     

在体单向肠灌流模型研究槲皮素的大鼠肠吸收特性

目的考察银杏中活性黄酮成分槲皮素在大鼠肠道的吸收特性。方法以酚红为标示物,采用在体单向肠灌流模型,HPLC法测定槲皮素在体肠灌流的浓度变化,研究槲皮素在小肠内的吸收情况。结果槲皮素在（1．01～20．18ug／mL）浓度范围内其肠管通透率和血管通透率均基本保持不变,各浓度间无显著性差异（P〉0．05）。结论药物浓度对槲皮素通透率无影响,其吸收机制可能为被动扩散。     

大鼠小肠原位灌流与Caco-2细胞法研究柠檬苦素吸收机制

柠檬苦素广泛存在于柑橘类水果中, 具有抗菌、抗病毒、镇痛、抗炎和抗癌等活性, 但其口服生物利用度较低。本文意在研究柠檬苦素在肠道内的吸收机制, 为其今后的研究奠定基础。实验通过大鼠原位肠灌流和体外Caco-2细胞法进行。大鼠原位肠灌流结果显示, 柠檬苦素可能通过肠道促进扩散机制吸收, 吸收差且在全肠段都有吸收, 没有部位选择性。Caco-2细胞实验结果显示, 维拉帕米和酮康唑能显著提高柠檬苦素的吸收, 而丙磺舒的影响不明显。柠檬苦素吸收较低和生物利用度较差, 可能是P-gp外排以及CYP3A4代谢共同参与的结果。柠檬苦素的肠吸收机制研究将为其剂型设计和临床应用提供重要的参考。     

单向灌流模型研究木犀草素对大鼠在体肠的吸收

目的 研究木犀草素对大鼠在体肠的吸收情况.方法 运用单向灌流模型并采用HPLC法测定木犀草素在灌流液中的浓度.结果 灌流液中木犀草素浓度为2.556、5.112和10.22 μg/ml三个浓度时,有效吸收系数(Peff)无显著性差异(P＞0.05);木犀草素在肠道内无特定吸收部位,全肠段均有较好吸收.结论 灌流液中木犀草素在2.556、5.112和10.22 μg/ml三个浓度时,吸收无自身浓度抑制作用,在肠黏膜的转运为被动扩散过程,且无特殊的吸收窗.     

T2毒素在灌流大鼠肠肝中的首过效应和代谢动力学

建立并用大鼠在体肠-肝灌流标本研究了T2毒素在大鼠肠肝中的首过效应和代谢转化动力学,T2毒素在大鼠肠肝中的主要代谢产物是HT2,3′-OHHT2和其葡萄糖醛酸结合物,T2毒素具有显著的肠肝首过效应,当毒素(42μg·ml~(-1))由上肠系膜动脉恒速单次灌流(8 ml·min~(-1))肠-肝标本时,穗态肝、肠抽提率分别为0.978和0.454,总有效清除率为7.91 ml·min~(-1),T2毒素在循环灌流大鼠肠-肝标本中的消除半衰期为6.5min,主要代谢产物HT2,3′-OHHT2的生成半衰期分别为8.5和38.5 min,结果表明,T2毒素经消化道中毒后,在肠和肝的首过代谢下能很快地转化为产物,因此,毒素在体内的毒效作用主要由其代谢产物表现出来。     

Cyclosporin A and erythromycin: A study of a drug interaction in the in situ perfused rat liver model

Using the in situ perfused rat liver model, the effect of erythromycin (Ery) on the disposition of cyclosporin A (CyA) and the major human metabolite, AMl, was investigated. Prior to perfusion experiments, oral dosing was carried out for three days on three groups of male Sprague—Dawley rats (300–350 g), involving pretreatment with water (control and H₂O/Ery groups) or erythromycin (Ery oral group). On the fourth day, perfusion experiments took place using standard techniques, with the addition of 20 mg Ery to the H₂O/Ery and Ery oral groups, and 2.5 mg CyA to all groups. Perfusate and bile samples were collected and assayed for CyA and AMl by HPLC. Results indicated that inhibition of CyA metabolism had occurred as the CyA concentration in perfusate was significantly higher in both Ery groups at all times compared to the control group, and the levels of AMl in both perfusate and bile were significantly lower than in the control group. There was also a marked reduction in the apparent metabolic clearance of CyA in the Ery groups. It was concluded that AMl production had been inhibited by Ery, the most likely mechanism being inhibition of the isoenzyme CYP3A with which Ery forms a stable complex.     

Prediction of skin permeation of highly lipophilic compounds; in vitro model with a modified receptor phase

A skin permeation in vitro model for highly lipophilic compounds was developed, containing bovine serum albumin (BSA) in the receptor phase. Skin permeation rates of three homologous series of compounds varying within a wide range of hydrophobicity were measured. For the more water-insoluble compounds (log P_IM 3), it was demonstrated that the modified in vitro model proposed ensures a more efficient collection of the permeant in the receptor phase.     

离体大鼠肾脏灌流技术在发现和评价促尿酸排泄药物中的初步应用

目的为建立发现和评价促尿酸排泄药物作用的离体模型,采用离体大鼠肾脏灌流技术,观察尿酸在离体肾脏中排泄特点和丙磺舒对尿酸排泄影响。方法制备离体大鼠肾脏灌流模型,随机分为对照组和丙磺舒处理组,以含复方氨基酸和65g.L-1牛血清白蛋白的K-H灌流液循环灌流90min,定时收集导尿管流出液和灌流液,测定其中菊粉、钠、葡萄糖及尿酸含量,计算肾功能参数和尿酸排泄情况。结果离体灌流肾脏的肾小球滤过率,尿量,肾小管重吸收水、钠、葡萄糖百分率等肾功能参数在灌流的90min期间处于稳定的生理范围内;对照组灌流肾脏尿酸排泄分数、尿酸清除率及90min内总尿酸排泄量分别为30%、0.30ml.L-1和15μmol,与对照组比较,丙磺舒使离体肾脏尿酸排泄分别提高36%、54%和99%。结论离体大鼠肾脏灌流技术可用于发现和评价促尿酸排泄药物作用。     

T2毒素在原位灌流大鼠小肠中的吸收和代谢动力学

应用原位肠灌流标本研究了T2毒素在大鼠小肠中的吸收和代谢功力学,T2毒素对小肠标本进行血管灌流时消除半衰期为46.9 min.主要代谢产物HT2毒素的生成半衰期为12.9 min.当T2毒素由十二指肠注射后再进行灌流时,可同时发生吸收前和吸收后的小肠代谢转化,并主要以HT2,3’-OHHT2等代谢产物的形式吸收,此时毒素在小肠中的吸收和消除半衰期分别为33.0和25.6 min,实验结果表明肠道也是代谢消除T2毒素的主要器官,尤其在消化道中毒时,毒素将经历显著的肠道首过代谢.     

大鼠在体肠灌流模型对豆腐果苷在体吸收的初步研究

目的应用大鼠在体肠灌流模型对豆腐果苷吸收机制进行研究。方法该实验在建立豆腐果苷在Krebs-Ringer缓冲液中的检测方法,及应用752紫外分光光度计测定Krebs-Ringer缓冲液中酚红溶液浓度的基础上,应用大鼠肠灌流模型研究豆腐果苷的吸收情况。结果通过该模型对豆腐果苷在大鼠十二指肠上部至回肠下部肠段中2 h内吸收情况的研究发现,豆腐果苷吸收迅速,15～20 min吸收即可达到平台。结论该实验建立了大鼠小肠灌流模型,并且将该模型用于豆腐果苷吸收情况的初步研究,为揭示豆腐果苷体内处置情况奠定了基础。     

Comparison of benzo(a)pyrene metabolism in isolated perfused rat lung and liver

The metabolism of 1 mM benzo(a)pyrene was studied in isolated perfused lung and liver of 5,6-benzoflavone-pretreated rats. Benzo(a)pyrene metabolism by the liver was more rapid than by the lung, but total metabolite formation in the lung at the end of a 120-min perfusion period was comparable to that in the liver. Lung perfusate was characterized by high concentrations of free metabolites, with diols outweighing phenols; in liver perfusate free metabolite concentrations were low, and large quantities of metabolites were found as conjugates in the bile at the end of perfusion. The tissue concentrations of free diols and phenols including the precursors of the main DNA-binding secondary metabolites were higher in the lung than in the liver. These findings explain the similar level of covalent binding in perfused lung and liver previously described (Klaus et al. 1982).Abbreviations Used BP benzo(a)pyrene - 9,10-diol 9,10-dihydro9,10-dihydroxy-benzo(a)pyrene - 4,5-diol 4,5-dihydro-4,5-dihydroxy-benzo(a)pyrene - 7,8-diol 7,8-dihydro-7,8-dihydroxy-benzo(a)pyrene - 9-OH 9-hydroxy-benzo(a)pyrene - 3-OH 3-hydroxybenzo(a)pyrene - tetrols 7,8,9,10-tetrahydro-7,8,9,10-tetrahydroxy-benzo(a)pyrenes - BF 5,6-benzoflavone - TLC thin-layer chromatography - HPLC high-pressure liquid chromatography