caspase 3在细胞因子调节急性白血病细胞凋亡中的变化

目的 研究ｃａｓｐａｓｅ３在粒细胞集落刺激因子（Ｃ－ＣＳＦ）和粒巨洚细胞集落因子（ＧＭ－ＣＳＦ）调节白血病细胞系ＮＢ４细胞凋亡过程中的变化及其意义。方法 利用细胞这、流式细胞仪分析及ＤＮＡ片段化比率测定,检测Ｇ－ＣＳＦ及ＤＭ－ＣＳＦ对ＮＢ４细胞凋亡的影响,应用荧光分光光度法检测ｃａｓｐａｓｅ３活性变化,并利用ＡＥ－ＤＥＶＤ－ＣＲＯ进行ｃａｓｐａｓｅ３抑制试验。结果 Ｇ－ＣＳＦ能诱导ＮＢ４细胞凋亡,     

反义基因逆转肿瘤细胞多药耐药诱导细胞凋亡的研究

目的：探讨克服肿瘤细胞多药耐药（ＭＤＲ）的方法，提高化疗效果。方法：采用多药耐药反义基因（ｍｄｒ－１－ＡＳＰＳ－ＯＤＮ）逆转Ｋ５６２／ＡＤＭ肿瘤细胞的ＭＤＲ，而诱导肿瘤细胞凋亡。结果：ｍｄｒ－１－ＡＳＰＳ－ＯＤＮ诱导Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞产生大量ＤＮＡ断片，流式细胞仪检测发现几乎全部ｍｄｒ－１＋Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞发生凋亡。结论：ｍｄｒ－１－ＡＳＰＳ－ＯＤＮ能有效、特异地抑制ｍｄｒ－１基因表达，逆转肿瘤细胞的ＭＤＲ，促进阿霉素诱导Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞凋亡，为其临床应用提供理论依据。     

反义Fas阻断激活T细胞凋亡的研究

目的：探索阻断激活Ｔ细胞凋亡的途径，增加激活的Ｔ细胞数量，提高肿瘤免疫治疗的疗效。方法：应用ＣＤ３诱导Ｊｕｒｋａｔ细胞的凋亡作为激活的Ｔ细胞凋亡模型，应用逆转录病毒载体将反义Ｆａｓ转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，观察反义Ｆａｓ对ＣＤ３及抗Ｆａｓ单克隆抗体（单抗）对Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡的影响。结果：构建一个反义Ｆａｓ的逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ－反义Ｆａｓ，并转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，发现Ｊｕｒｋａｔ细胞Ｆａｓ蛋白表达量下降，并部分阻断ＣＤ３及抗Ｆａｓ单抗诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡。结论：应用反义技术阻断Ｆａｓ基因表达，可部分阻断ＣＤ３及抗Ｆａｓ单抗诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡。     

粒—巨噬细胞集落刺激因子对Vp16诱导白血病细胞凋亡的调控作用

目的：探讨粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｖｐ１６诱导白血病细胞凋亡的调控作用，指导白血病临床治疗中正确使用ＧＭ－ＣＳＦ。方法：在构建高效表达ＧＭ－ＣＳＦ的逆转录载体Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ＧＭ－ＣＳＦ表达系统的基础上，对转ＧＭ－ＣＳＦ基因和未转ＧＭ－ＣＳＦ基因的白血病ＨＬ－６０细胞进行研究。结果：未转ＧＭ－ＣＳＦ基因及转空载体Ｎ２Ａ的ＨＬ－６０细胞经Ｖｐ１６处理后均出现凋亡的特征性表现：ＤＮＡ电泳呈梯状；流式细胞仪ＤＮＡ直方图上呈现特征性的亚二倍体（亚Ｇ１）峰；透射电镜观察细胞形态可见凋亡的特征性改变。结论：Ｖｐ１６具有诱导白血病细胞发生凋亡的作用，而ＧＭ－ＣＳＦ能够抑制Ｖｐ１６诱导的细胞凋亡。以上结果表明，白血病临床治疗中为预防和改善化疗所致骨髓抑制而应用ＧＭ－ＣＳＦ时，应谨慎地选择时机，在化疗前和化疗期间不宜使用，以避免白血病细胞对抗癌药物诱导的凋亡产生抵抗而导致耐药。     

反义技术与自体骨髓体外净化

利用反义技术体外净化自体骨髓是一种新颖而有效的方法。细胞凋亡在反义技术用于体外净化中起着重要作用。ｂｃｒ／ａｂｌ被证明是一种抑制凋亡基因。反义技术在体外净化中常用的靶基因有ｂｃｒ／ａｂｌ、ｃ－ｍｙｂ、ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因。用ｂｃｒ／ａｂｌ、ｃ－ｍｙｂＡＯ净化骨髓已在临床试用，但ｂｃｒ／ａｂｌ反义治疗的特异性尚有争议。今后仍需寻找真正特异性序列的靶基因。     

夏枯草对SGC—7901细胞的影响

目的 探讨夏枯草注射液（ＩＰＶ）对人胃腺癌ＳＧＣ－７９０１细胞增殖凋亡的影响。方法 通过生长曲线测定ＩＰＶ对ＳＧＣ－７９０１细胞生长增殖的影响,ＨＥ染色形态学观察及流式细胞术（ＦＣＭ）研究ＩＰＶ诱导ＳＧＣ－７９０１细胞凋亡的情况。结果 显示５％浓度的ＩＰＶ细胞生长明显被抑制,ＳＧＣ－７９０１细胞在５％ＩＰＶ作用２４ｈ后ＨＥ染色见明显细胞皱缩、细胞核固缩深染,且ＦＣＭ测定见明显亚二倍体凋亡峰。结论     

三苯氧胺对卵巢癌细胞生长抑制作用的探讨

采用细胞培养、免疫组化ＳＡＢＣ法和凋亡原位检测技术，分别检测与三苯氧胺（最终浓度为：０．１μＭ、１μＭ、１０μＭ），培养４天后，人卵巢癌细胞系ＨＯ－８９１０细胞的ＰＣＮＡ表达和凋亡情况。结果：三苯氧胺对细胞生长抑制和诱导细胞发生凋忘掉人有剂量依赖性。低剂量（≤１μＭ）的三苯氧胺对ＰＣＮＡ的表达影响不大，高剂量（１０μＭ）可明显降低ＰＣＮＡ表达。提示：三苯氧胺抗肿瘤作用机理与其剂量有关。低剂量通过诱     

一氧化氮合酶在缺血预处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤保护中的作用

目的：探讨一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在缺血预处理对大鼠肾脏缺血－再灌注损伤保护中的作用。方法：将大鼠随机分为对照组（ＣＯＮ）、缺血－再灌注组（ＩＲ）和血预处理后血－再灌注组（ＩＰＣ）。光镜下观察并行肾小管评分,用免疫组化法检测各组中不同灌注时间的３种ＮＯＳ的变化。结果：不同缺血－再灌注时间点病理组织学肾小管评分ＩＰＣ组均低于ＩＲ组,而ＩＰＣ组和ＣＯＮ组之间无显著性差异;诱导型ＮＯＳ在ＩＲ组中的表达明显     

苯乙酸对胶质瘤细胞C6的C-myc基因蛋白水平表达的抑制作用及意义

目的 观察诱导分化剂苯乙酸对胶质瘤细胞Ｃ６的增殖分化过程中癌基因Ｃ－ｍｙｃ的蛋白水平变化。方法 〖＾３Ｈ〗ＴｄＲ掺入法测细胞增殖率,免疫组化ＳＰ法检测Ｃ－ｍｙｃ基因蛋白水平的表达。结果 应用苯乙酸后,细胞ＣＰＭ降低;Ｃ－ｍｙｃ基因胞浆阳性表达显著下降。结论 苯乙酸对胶质瘤细胞存在剂量依赖性抑制作用机制可能为直接抑制胞浆中ＲＮＡ合成。这些作用与苯乙酸抑制Ｃ－ｍｙｃ基因对细胞恶性增殖的转录调节作用有关     

生长抑素及Octreotide对急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的作用机制

目的：探讨生长抑素（ＳＳ）及其类似物（Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）治疗小鼠急性胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｂａｘ，ｐ５３的作用。方法：以雨蛙肽诱导ＣＤ－１小鼠急性胰腺炎模型，并应用细胞凋亡原位标记检测（ＴＵＮＥＬ）染色，免疫组化技术等检测胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｂａｘ，ｐ５３的蛋白表达，以及生长抑素及其类似物治疗后对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｂａｘ和ｐ５３蛋白表达的影响。结果：ＨＥ染色见胰腺组织中典型的