外阴恶性肿瘤中P21~(WAF1/CIP1) P53及HPV6/11 HPV16/18的检测和意义

目的　探讨P2 1WAF1/CIP1,P5 3及HPV6/11,16/18与外阴恶性肿瘤的关系。方法　P2 1WAF1/CIP1,P5 3用免疫组化SP法检测 ;HPV6/11,16/18用原位杂交法 (ISH)检测。结果　P2 1WAF1/CIP1,P5 3在外阴恶性肿瘤组、外阴上皮内瘤变 (VIN)组、正常对照组中的阳性检测率分别为 40 .0 0 % (12 /3 0 )、63 .3 3 % (19/3 0 ) ,5 2 .3 8% (11/2 1) ,47.62 % (10 /2 1) ,0 (0 /10 )和 0 (0 /10 ) ;外阴病变各组P2 1WAF1/CIP1,P5 3与正常组比较差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;HPV6/11、16/18在外阴恶性肿瘤组、VIN组中的阳性检测率分别为 60 .0 0 % (18/3 0 )和 3 3 .3 3 % (10 /3 0 ) ,42 .86% (9/2 1)和 2 8.5 7% (6/2 1) ,正常对照组没有检测出 ;HPV 6/11阳性率外阴恶性肿瘤组、VIN组与正常组比较差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;外阴恶性肿瘤组HPV16/18阳性率与正常组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　P2 1WAF1/CIP1P5 3及HPV感染在外阴恶性肿瘤的发生发展中可能起一定的作用     

HPV6／11相关尖锐湿疣皮损中P53和P21蛋白的表达

目的：了解P53和P21在HPV6/11相关尖锐湿疣（CA）皮损中的表达和意义。方法：用免疫组化SP法检测经PCR法证实HPVDNA6/11阳性的27例CA皮损和10例正常皮肤。结果：（1）CA皮损基底细胞和棘细胞表达P53较正常皮肤显著增加；（2）CA皮损棘细胞表达P21与正常皮肤无显著差异。结论：（1）P53可能刺激和促进HPV6/11相关CA皮损的细胞增殖；（2）P21在抑制CA的细胞增殖中无重要作用。     

光线性角化病皮损细胞的P21ras蛋白定量及DNA倍体分析

ras癌基因编码的 P21ras蛋白是参与细胞浆膜内面刺激细胞生长信号传递的主要物质,当 ras癌基因发生突变时可导致基因活化,使基因产物 P21ras蛋白呈现过度表达 [1]。我们应用流式细胞免疫荧光技术对光线性角化病（ actinic keratosis,AK）皮损细胞的 P21ras蛋白相对含量进行了定量分析 ,以探讨 P21ras蛋白与该病的联系。 一、材料和方法 （一） 标本来源：采用 1972～ 1995年我院保存的石蜡包埋组织块, AK 27份、正常皮肤 4份、高分化皮肤鳞癌 8份,并把 8份符合下列条件的 AK归为异型增生较重的 AK,①表皮层次及细胞极性有较严重…     

细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白D1和p21WAFI/CIPI在尖锐湿疣中的表达

我们采用免疫组化SP法检测细胞周期蛋白(Cyclin)E、CyclinD1和p21^WAFVCIPI在尖锐湿疣组织中的表达情况,同时应用原位杂交技术检测尖锐湿疣组织中HPV DNA的表达,旨在探讨CyclinE、CyclinD1和p21^WAFVCIPI在尖锐湿疣发生发展中的作用,以揭示尖锐湿疣组织增生机制。     

细胞周期蛋白A,p21~(WAF1)及C-myc在皮肤瘢痕及瘢痕癌中的表达及意义

目的探讨细胞周期蛋白A(CyclinA),p21WAF1和C-myc在病理性皮肤瘢痕和瘢痕癌中的表达及意义。方法采用免疫组化(SP)法分别检测正常皮肤、皮肤瘢痕和瘢痕癌中CyclinA,p21WAF1和C-myc蛋白的表达,采用原位杂交技术分别检测CyclinA mRNA,p21WAF1 mRNA的表达,并对数据进行统计学分析。结果 CyclinA,p21WAF1及其mRNA在瘢痕癌组织中呈强阳性表达,与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但其在正常皮肤组与瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05);C-myc蛋白在正常皮肤、皮肤瘢痕和瘢痕癌组织中的表达分别为弱阳性、阳性和强阳性,差异均有统计学意义(P<0.01)。瘢痕癌中CyclinA与CyclinA mRNA;Cy-clinA与p21WAF1,C-myc;CyclinA mRNA与p21WAF1 mRNA的表达均呈正相关。结论 CyclinA,C-myc的高表达与皮肤瘢痕癌的发生有相关性,这两种因子在瘢痕癌的发生中发挥协同作用;C-myc蛋白的表达可作为皮肤瘢痕癌变早期诊断的一个指标。p21WAF1在瘢痕癌中高表达的意义尚有待于进一步论证。     

P53,CyclinD1和Ki67蛋白在外阴HPV相关疾病中的表达及意义

目的探讨P53,CyclinD1和Ki67蛋白在外阴HPV相关疾病尖锐湿疣、外阴上皮内瘤变、外阴鳞状细胞癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测30例尖锐湿疣;60例外阴上皮内瘤变;20例外阴鳞状细胞癌标本中P53,CyclinD1,Ki67的表达情况,并与10例正常组织进行对照。结果 P53在尖锐湿疣组,外阴上皮内瘤变(VINⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级)组,外阴鳞状细胞癌组,正常组的阳性表达率分别为63.66%,43.48%,52.63%,61.11%,70.00%和0。CyclinD1的阳性表达率分别为43.33%,34.78%,47.37%,55.56%,60.00%和0。Ki67的阳性表达率分别为46.67%,47.83%,57.89%,72.22%,85.00%和0。P53与Ki67蛋白阳性表达呈正相关(P<0.05),Ki67与CyclinD1蛋白阳性表达呈正相关(P<0.05),P53与CyclinD1蛋白阳性表达无相关性(P>0.05)。三者均表达随外阴上皮恶变的进展而增加。结论 P53,CyclinD1和Ki67蛋白在外阴HPV相关疾病的发生,发展中起一定作用。     

皮肤鳞状细胞癌中p16蛋白、细胞周期蛋白D1的表达及其意义

皮肤鳞状细胞癌(以下简称鳞癌)的发生发展是一个多因素、多阶段逐渐演进的过程。其中包括多种癌基因和抑癌基因的异常表达。p16蛋白、细胞周期蛋白(cyclin)D1表达异常在多种肿瘤的发生过程中起重要作用。为了检测p16蛋白、细胞周期蛋白D1在皮肤鳞癌组织中的表达情况及其相互关系．笔者应用免疫组化方法对40例原发性皮肤鳞癌组织和10名正常人皮肤组织进行研究分析，现将结果报告如下。     

细胞周期素E、p21、转录因子E2F-1在尖锐湿疣中的表达

目的　探讨细胞周期相关因子细胞周期素E(cyclinE)、p2 1(WAF1/CIP1)、核转录因子E2F 1在尖锐湿疣 (CA)皮损中的变化及其意义。方法　应用原位杂交技术检测HPV 6/ 11相关CA ,应用SP免疫组化技术检测 3 8例HPV 6/ 11阳性CA患者皮损和 13例正常人皮肤中cyclinE、p2 1、E2F 1与分布。 结果　①CA皮损中cyclinE、p2 1、E2F 1的表达均较正常皮肤增强 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,阳性信号主要分布于表皮棘层和颗粒层。②CA皮损中cyclinE与p2 1的表达间存在正相关性 ,cyclinE与E2F 1、p2 1与E2F 1间无相关性。 结论　HPV 6/ 11CA可能通过细胞周期调控蛋白的相互协调与制约 ,引起角质形成细胞的过度增殖     

罗格列酮对HaCaT细胞增殖及β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨罗格列酮对体外培养的角质形成细胞株HaCaT细胞体外增殖的影响.方法 用不同浓度的罗格列酮处理HaCaT细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HaCaT细胞增殖活性;蛋白免疫印迹法测定HaCaT细胞β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1表达水平.结果 不同浓度的罗格列酮对HaCaT细胞体外增殖均具有抑制作用,药物作用48 h后对HaCaT细胞体外增殖的抑制率分别为18.9％、23.7％、35.1％、44.6％,与溶媒组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).罗格列酮处理HaCaT细胞后,β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1表达明显下调.结论 罗格列酮抑制HaCaT细胞的体外增殖的机制可能与β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1的表达下调有关.     

P16、P21WAF1/CIP1、PCNA和cyclin E在脂溢性角化病中的表达及其意义

目的：研究脂溢性角化病皮损组织中P16、P21^WAF1/CIP1、PCNA、cyclinE四种细胞周期素相关因子的表达及意义。方法：应用免疫组化PV法（改进的SP法），对50例脂溢性角化病病人和10例正常人皮肤进行P16、P21^WAF1/CIP1、PCNA、cyclinE四种细胞周期素相关因子的测定。结果：脂溢性角化病患者中这四种因子的表达阳性率分别为：78％、68％、70％、46％；而正常对照组的阳性率仅为：40％、30％、50％、10％。结论：P16、P21^WAF1/CIP1、PCNA、cyclinE四种细胞周期素相关因子在脂溢性角化病的发病中可能起重要作用。     

细胞周期蛋白D1和磷酸化Rb蛋白在小汗腺汗孔癌和小汗腺汗孔瘤中的表达

小汗腺汗孔癌(eccrine porocarcinoma,EPC),以往被称为恶性小汗腺汗孔瘤,是最常见的恶性汗腺肿瘤.好发于老年患者的下肢、躯干、头皮和上肢,男女发病率为1.3:1.小汗腺汗孔瘤(eccrine poroma,EP)是一种好发于足底、足侧缘等部位的呈孤立结节的良性汗腺肿瘤.组织学上,认为它们起源于末端汗管的外层细胞和真皮上部的小汗腺导管.国内外有关EPC和EP的发病机制的研究报道较少,有报道p53和p16/Rb与这两种小汗腺来源的良恶性有关[1-2].     

BAG-1蛋白在皮肤恶性黑素瘤皮损中的表达及其与P53、Bcl-2的关系

目的 探讨皮肤恶性黑素瘤组织及黑素瘤细胞株中BAG-1蛋白、P53、Bcl-2的表达及意义。方法 免疫组化法检测32例皮肤恶性黑素瘤、20例色素痣皮损石蜡包埋标本中BAG-1蛋白、P53和Bcl-2的表达情况，并结合患者临床资料进行分析；免疫细胞化学法检测BAG-1蛋白在黑素瘤细胞株M14和B16F10细胞的表达情况。结果 BAG-1蛋白在32例皮肤恶性黑素瘤组织中25例阳性，阳性表达率为78%；色素痣组20例中阳性3例，阳性表达率为15%，两组比较，差异有统计学意义（P < 0.001）。BAG-1蛋白在皮肤恶性黑素瘤组织中的表达与Clark分级呈正相关（r = 0.47，P < 0.05），与P53、Bcl-2表达无显著相关性（r 值分别为0.05和0.11，P > 0.05）。BAG-1蛋白在黑素瘤细胞株M14、B16F10细胞均呈阳性表达。结论 BAG-1蛋白在皮肤恶性黑素瘤组织中的表达显著升高，并与肿瘤的Clark分级呈正相关。     

细胞周期G1调节因子在尖锐湿疣皮损中的表达

目的 探讨细胞周期G1调控点（check point）相关调节因子细胞周期素D1(CycliD1)、周期素依赖性蛋白激酶4（CDK4）、多重肿瘤抑制因子（P16^MTS1)及视网膜母细胞瘤蛋白（PRb）在HPV6／11相关尖锐湿疣（CA）皮损中的表达和意义。方法 采用SP免疫组化染色技术检测27例经PCR检测含HPV6／11DNA的CA皮损和10例正常人皮肤（包皮）中CyclinD1、CDK4、P16^MTS1及PRBb的表达和分布。结果 ①正常人皮肤及CA皮损均无CyclinD1表达。②CA皮损基底细胞表达CDK4（均数2．19）较正常人皮肤（均数4．8）降低（P＜0．01）。③CA皮损棘细胞表达P16^MTS1（均数1．33）较正常人皮肤（均数0）增强（P＜0．05）。④CA皮损基底细胞和棘细胞表达PRb（均数各为0．89、0．44）较正常人皮肤（均数均为0）均增强（P＜0．05）。结论 HPV6／11CA相关皮损的细胞周期G1调控点无明显异常，可能是这类CA皮损不易恶变的原因之一。     

Expression of c-Kit, p-ERK and cyclin D1 in malignant melanoma: an immunohistochemical study and analysis of prognostic value

Background

The mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway is one of the major cascades that are crucial for the initiation and progression of melanoma; however, the influence of these signaling molecules on patient survival has not been clarified.

Objective

The purpose of this study was to analyze the protein expression of MAPK signaling molecules in melanoma, and to correlate the expression status with clinicopathologic parameters.

Methods

Expression of c-Kit, phosphorylated ERK (p-ERK), and cyclin D1 was examined by immunohistochemistry in 78 primary melanomas, 24 metastatic lesions, and in 42 benign nevi. The following clinicopathologic variables were evaluated: age, gender, histologic type, tumor site, Breslow thickness, Clark's level, ulceration, and survival period. Statistical analyses were performed for assessment of associations and melanoma-specific survival.

Results

The expression of c-Kit, p-ERK, and cyclin D1 was significantly higher in primary melanomas than in nevi. c-Kit immunoreactivity was highest in thin (Tis-pT2) melanomas, and showed a significant reduction with tumor progression and metastasis. The expression of p-ERK was high in all stages of melanoma. Cyclin D1 positivity increased significantly according to tumor progression, but decreased in metastases. A significant correlation between p-ERK and cyclin D1 expression was observed. Survival analysis failed to detect any trends towards shorter or longer survival among patients expressing either c-Kit, p-ERK or cyclin D1.

Conclusions

The expression of c-Kit, p-ERK, and cyclin D1 might help to differentiate thin melanoma from melanocytic nevus, but it appears to lack prognostic potential.