胰液中K-ras基因突变检测对胰腺癌诊断效能的荟萃分析

目的：系统评价胰液中K-ras基因第12位密码子点突变对胰腺癌的诊断效能。
方法：电子检索获得胰液中K-ras基因突变诊断胰腺癌的研究文献。筛选文献并提取纳入研究中有关准确度的数据。采用MetaDiSc1.4软件检验研究间的异质性并进行荟萃（Meta）分析,Stata10.0软件评价发表偏倚的影响。
结果：共纳入文献15篇,异质性检验无阈值效应,研究间在不同点突变检测方法、随机化方法及实验盲法上无异质性。合并统计量,K-ras基因突变诊断胰腺癌的敏感度、特异度、诊断优势比分别为0.61（95％CI 0.56～0.66）,0.82（95％CI 0.77～0.86）和6.28（95％CI 4.42～8.91）;综合受试者工作特征曲线下面积AUC=0.8207,Q*=0.7542。失安全系数Nfs0.05=694.0108,发表偏倚对Meta分析结果的影响较小。
结论：胰液中K-ras基因突变检测对胰腺癌的诊断效能中等,作为胰腺癌的早期诊断或筛查指标尚嫌不足,但可作为细胞学、影像学、酶学等检查的重要补充。     

胰腺癌中p16基因甲基化改变及其蛋白表达分析

目的:探讨胰腺癌与癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的改变及其蛋白表达的特点,以及其与胰腺癌发生发展的关系。方法:分别采用免疫组化SP法及甲基化特异PCR(MSP)检测46例人胰腺癌和癌旁组织中p16基因表达及其甲基化的水平,并结合临床资料进行分析。结果:胰腺癌中p16蛋白表达率为41.3%(19/46),而癌旁组织表达率为95.7%(44/46),两者有差异显著性(P<0.01)。p16蛋白阳性的19例胰腺癌标本中均未检出基因甲基化;p16蛋白缺失的27例标本中有18例检出基因甲基化,甲基化率为39.1%。p16基因甲基化与蛋白缺失有明显关系(P<0.05)。p16基因表达及其启动子区甲基化的发生率与胰腺癌的大小,患者性别﹑年龄的差异无显著意义(P>0.05),但与组织分化程度﹑淋巴结转移﹑PTNM分期有显著意义(P<0.05)。结论:p16基因启动子的异常甲基化可影响p16蛋白的表达,它们与胰腺癌的发生发展有关;p16甲基化和蛋白表达可能成为胰腺癌诊断及预后的候选标志物之一。     

胰腺癌中p16基因甲基化改变及其蛋白表达分析

目的研究p16基因启动子区异常甲基化改变和p16蛋白表达在胰腺癌与癌旁组织中的表达特点,探讨其与胰腺癌发生发展与临床的关系。方法分别以免疫组化法(SP法)及甲基化特异PCR(MSP)检测46例胰腺癌及其癌旁组织中p16基因表达及其甲基化的水平,并结合临床资料进行分析。结果胰腺癌中p16蛋白表达率为41.3%(19/46),而癌旁组织表达率为95.7%(44/46),两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。p16蛋白阳性的19例胰腺癌标本,均未检出基因甲基化;p16蛋白缺失的27例标本,有18例检出基因甲基化,甲基化率为39.1%。基因甲基化与p16蛋白缺失明显相关(P<0.05),p16基因表达及p16基因启动子区甲基化的发生率与胰腺癌的大小、患者性别、年龄的差异无统计学意义(P>0.05),但在组织分化程度、有无淋巴结转移、PTNM分期上有统计学意义(P<0.05)。结论p16基因启动子异常甲基化改变可能影响p16蛋白的表达;p16甲基化、蛋白表达与胰腺癌的发生发展密切相关,p16甲基化和蛋白表达是胰腺癌患者诊断及预后的候选标志物之一。     

血浆K-ras基因突变检测对胰腺癌早期诊断价值的影响

目的 采用Meta分析方法系统评价检测血浆K-ras基因第12密码子点突变对胰腺癌早期诊断的价值。方法 由两名统计人员电子检索PubMed数据库、EMbase数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网,文献检索起止时间均为建库至2012年5月31日。按照纳入与排除标准筛选文献,同时逐篇进行质量评价和诊断准确度的资料提取。应用Meta-DiSc1.4软件进行Meta分析,Stata12.0软件进行发表偏倚评价。结果 共纳入10篇文献,包括690例研究对象。异质性检验无阈值效应,但是存在其他异质性。对PCR-RFLP亚组进行分析,敏感性为0.714（95% CI：0.649-0.773）,特异性为0.868（95% CI：0.781-0.930）,SROC中AUC=0.8544,Q*=0.7853。结论 现有资料表明检测血浆K-ras基因突变对胰腺癌早期诊断效能中等,单独作为胰腺癌早期诊断指标尚有不足,可以作为胰腺癌早期诊断检测方法的重要补充,是胰腺癌早期诊断的可选检查方法。     

外周血浆K-ras基因突变的检测在胰腺癌诊断中的作用

目的 探讨检测K－ras基因突变在胰腺癌诊断中的作用。方法 收集15例胰腺癌,33例非胰腺癌病人的外周血标本,提取血浆DNA。采用限制性酶切片段长度多态性- 多聚酶链反应（RFLP－PCR）方法检测突变的K－ras基因,直接测序方法测出K－ras基因的突变类型。结果 胰腺吕病人外周血浆K-ras基因突变率为73％（11／15）,非胰腺癌组中有2例胰头肿块型慢性胰炎患者发生K-ras基因突变,其余均为阴性;血浆K－ras基因突变与肿瘤部位、大小及分期无关。结论 检测外周血浆K－ras基因突变可用于胰腺癌的辅助诊断和胰腺癌高危人群的筛选。     

K-ras基因与胰腺癌诊断的研究进展

胰腺癌发病隐匿 ,是预后最差的恶性肿瘤之一。如能在发病初期及时、准确地作出判断 ,将大大增加手术切除的机会 ,提高 5年生存率 ,改善预后。ｒａｓ基因家族包含Ｈ ｒａｓ、Ｋ ｒａｓ和Ｎ ｒａｓ 3种功能基因。近年来研究发现 ,胰腺癌Ｋ ｒａｓ基因第 12密码子点突变率高达 6 0 9%～ 10 0 0 % [1～ 14 ] ,并认为是胰腺癌发生的早期事件[8,13～ 17] ,其较高的敏感性和特异性可以弥补目前临床诊断方法的不足 ,有望成为胰腺癌诊断的基因标志物 ,本文就近年来Ｋ ｒａｓ基因与胰腺癌诊断的研究进展作一综述。1　不同取材标本的Ｋ ｒａｓ基因突…     

胰腺癌SOCS-1基因异常甲基化研究

目的：探索人类胰腺癌中SOCS—1基因是否由于异常甲基化而表达抑制；查询此现象在胰腺癌的发生、发展中的意义。方法：采集25例胰腺导管腺癌病人的肿瘤标本及5例对应的正常胰腺组织，运用甲基化特异性PCR反应研究胰腺癌组织中SOCS—1基因CpG岛甲基化状态，同时运用实时定量PCR分析SOCS—1基因的表达。结果：25例胰腺导管腺癌病人中有9例（36％）SOCS—1基因呈CpG岛甲基化，而正常组织则无SOCS—1基因CpG岛甲基化；SOCS—1基因CpG岛甲基化组的SOCS—1基因表达量与无SOCS—1基因CpG岛甲基化组相比，其基因相对表达量明显减少（P〈0．05），证明SOCS—1基因CpG岛甲基化可以抑制SOCS—1基因表达。与病人临床病理特征相结合比较．发现SOCS—1基因CpG岛甲基化与年龄、性别、肿瘤体积、肿瘤分化程度及TNM分期等因素无关。结论：在胰腺导管腺癌中存在SOCS—1基因CpG岛甲基化，且由于CpG岛甲基化而促使基因表达抑制。SOCS—1基因CDG岛甲基化在胰腺癌的发生、发展中可能具有一定的作用。     

外周血K-ras基因突变和CA19-9的联合检测在胰腺癌诊断中的作用

目的 研究K-ras基因突变和CA19-9联合检测在胰腺癌诊断中的作用。方法 选择同期的15例胰腺癌和33非胰腺癌病人,同时行外周血K-ras基因突变和CA19-9的检测,利用统计学方法进行数据分析。结果 外周血K-ras基因突变和CA19-9联合检测诊断胰腺癌的敏感性、特异性分别为66．67％和97％,研究组和对照组之间差异具有显著性意义(P=0．001)。结论 外周血K-ras基因突变和CA19-9的联合检测显著提高了胰腺癌诊断的特异性,弥补了单一K-ras基因突变和CA19-9检测的不足,可用于胰腺癌的辅助诊断。     

胰液中端粒酶及亚单位检测对胰腺癌的诊断价值

目的　探讨检测胰液中端粒酶逆转录酶 (hTERT)mRNA表达和端粒酶活性对胰腺癌的诊断与鉴别诊断价值。方法　对比分析 2 4例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎患者胰液中的hTERTmRNA和端粒酶活性的检测结果。结果　hTERTmRNA在胰腺癌中表达阳性率为 87.5 % ( 2 1/ 2 4) ;慢性胰腺炎中阳性率为 2 1.4% ( 3 / 14 ) (P <0 .0 0 1)。胰腺癌与慢性胰腺炎胰液中端粒酶阳性检出率分别为83 .3 % ( 2 0 / 2 4) ,2 8.6% ( 4 / 14 ) (P <0 .0 0 1)。结论　胰液中检测hTERTmRNA表达和端粒酶活性对胰腺癌诊断与鉴别诊断有一定价值。     

胰腺癌p16基因mRNA异常表达的研究

我们应用逆转录 聚合酶链式反应(ＲＴ ＰＣＲ)检测胰腺癌中 ｐ16基因ｍＲ ＮＡ的表达情况 ,同时应用聚合酶链式反应 单链构象多态性分析 (ＰＣＲ ＳＳＣＰ)对其异常表达的原因进行分析 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.对象 :新鲜胰腺癌组织 10例取自中国医科大学第一临床学院普通外科手术切除的肿瘤标本 ,其中胰头癌 9例为胰头十二指肠手术切除 ,胰体尾癌 1例为胰体尾切除术切除。正常胰腺组织 7例为对照 ,取自十二指肠乳头癌和胆管末端癌行胰头十二指肠切除的正常胰腺。2 .ＤＮＡ和ＲＮＡ的提取 :酚 氯法提取上述样品ＤＮＡ ,紫外分…     

Significance of K-ras mutation and CEA level in pancreatic juice in the diagnosis of pancreatic cancer

The early diagnosis of pancreatic carcinoma is essential for increasing patient survival rates. In this study, 52 patients with suspected pancreatic diseases were examined to investigate the value of K-ras codon 12 point mutation, levels of carcinoembryonic antigen (CEA) and carbohydrate antigen (CA19-9), and cytology of pancreatic juice in the diagnosis of pancreatic carcinoma. Pancreatic juice was taken without secretin stimulation. K-ras mutation was detected by enriched polymerase chain reaction (PCR) restriction fragment length polymorphism (RFLP). K-ras mutation in pancreatic juice was more frequent in carcinoma than in benign diseases (P = 0.0448). The positive predictive value of K-ras mutation for the diagnosis of neoplastic disease was 83%. The CEA level in pancreatic juice in carcinoma was significantly greater than that in benign disease (P < 0.0001). When the cutoff level of CEA was set at 50 ng/ml, its accuracy for the diagnosis of carcinoma was 85%. A multivariate analysis showed that K-ras mutation and CEA level in pancreatic juice, as well as serum CA19-9 level and age of the patient were independent variables for the diagnosis of carcinoma, and the accuracy of diagnosis by this analysis was increased to 90%. In conclusion, both K-ras mutation and CEA level in pancreatic juice may be valuable for the diagnosis of carcinoma. Better discrimination was possible with a multivariate analysis. Received for publication on Dec. 12, 1998; accepted on July 19, 1999     

胰液端粒酶活性与K-ras检测对胰腺癌的诊断价值

目的　检测胰腺癌和慢性胰腺炎患者胰液中K ras基因突变和端粒酶活性 ,探讨端粒酶活性与K ras基因突变联合检测对胰腺癌患者诊断价值。方法　收集 2 4例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎患者胰液 ,K ras基因突变采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性 ( polymerasechianreaction -restrictionfragmentlengthpolymorphism ,PCR -RFLP)检测 ,端粒酶活性检测采用端粒末端重复序列扩增技术 (telomericrepeatamplificationprotocol ,TRAP)。 结果　胰腺癌中K ras基因突变率为 87.5 % ( 2 1/2 4) ,慢性胰腺炎中K ras基因突变率仅为 2 1.3 % ( 3 /14 ) ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;在 2 4例胰腺癌中端粒酶阳性检出率为 83 .3 % ( 2 0 /2 4) ;而 14例慢性胰腺炎胰液中端粒酶阳性检出率为 2 8.6% ( 4 /2 4) ,差异同样具有显著性 (P <0 .0 1)。K ras基因突变与端粒酶活性检测诊断胰腺癌的特敏感性分别为 87.5 % ,83 .3 % ;两者联合检测诊断胰腺癌的敏感性为 85 .5 % ,特异性达到 85 .7%。结论　联合检测胰液中K ras基因与端粒酶活性可提高胰腺癌诊断的敏感性和特异性 ,对胰腺癌筛查、诊断与鉴别诊断有一定临床意义     

大肠癌患者血清中p16基因启动子畸变甲基化的检测

目的　检测大肠癌患者血清DNA中p16基因启动子畸变甲基化 ,并探讨将它用于大肠癌早期诊断或作为一个预后因子的可能性。　方法　收集新鲜的大肠癌组织及其对应的血清标本5 2例 ,大肠腺瘤患者血清标本 34例 ,健康志愿者血清标本 10例。采用甲基化特异的PCR技术分别检测肿瘤组织DNA和血清游离DNA中p16基因启动子畸变甲基化的状况。分析血清中p16基因畸变甲基化与大肠癌临床病理特征的关系。　结果　 38% (2 0 / 5 2 )大肠癌组织出现p16高甲基化 ;与出现了高甲基化的组织标本对应的 2 0例血清标本中有 14例 (70 % )出现高甲基化 ,而其余 32例血清标本无一例检出高甲基化 (χ2 =30 7,P <0 0 1) ;34例大肠腺瘤患者和 10例健康志愿者的血清DNA中均未见p16高甲基化。血清p16基因高甲基化与大肠癌Dukes分期关系密切 (χ2 =5 7,P =0 0 3) ,但是与其它临床病理特征无关。　结论　大肠癌患者血清DNA中存在一定比例的p16基因启动子高甲基化。检测血清中p16基因的甲基化状况可能有助于大肠癌的早期发现或预后评估。     

十二指肠液K-ras、P53和P16基因联合检测在胆管癌诊断中的价值

目的 探讨十二指肠液标本中K-ras、P53和P16基因联合检测对胆管癌诊断的价值.方法 应用PCR-SSCP-银染法和PCR-RFLP法检测30例胆管癌患者和10例良性胆道疾病患者胆汁及十二指肠液标本中上清液及沉渣的K-ras、P53及P16基因突变状况.结果 胆管癌组胆汁标本的上清中K-ras、P53和P16基因突变及三基因联合检测的阳性率为56.7%、50%、33%和80%;相应的十二指肠液标本阳性率为43%、36%、20%和70%.良性胆道疾病组仅胆汁标本检出K-ras基因突变1例,良恶性疾病组比较有显著性差异(P＜0.005),胆管癌3种基因突变的检出率在上清组中明显高于沉渣组(P＜0.001),对于胆管刷检阴性的胆管癌患者,联合检测胆汁中3种基因突变的阳性率仍高达66.67%.结论 十二指肠液K-ras、P53和P16基因联合检测有助于胆管癌的诊断.     

癌组织K-ras基因突变和血清CEA的联合检测预测结直肠癌肝转移的意义

目的 观察结直肠癌组织中K-ras瑚基因突变,检测患者外周血清CEA水平,探讨两者与结直肠癌肝转移的关系.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法和基因测序技术检测100例结直肠癌组织中K-ras基因1号外显子12、13密码子突变,化学发光法检测患者血清CEA水平,结合其临床资料分析.结果 100例结直肠癌组织中K-ras基因突变者39例(39.0%),其中12号密码子突变31例,13号密码子突变8例.36例肝转移组中K-ras基因突变23例(23/36,63.9%);64例无肝转移组中K-ras基因突变16例(16/64,25.0%).36例有肝转移患者外周血清CEA水平为(66.79±127.46)μg/L,其中25例(25/36,69.4%)出现不同程度CEA升高;64例无肝转移患者外周血清CEA水平为(4.93±4.62)μg/L,其中24例(24/64,37.5%)CEA升高.两个指标联合检测,肝转移组的阳性率(22/36,61.1%)明显高于无肝转移组的阳性率(5/64,7.8%),P<0.01.其预测结直肠癌肝转移的敏感性及特异性分别为61.1%和92.2%.结论 K-ras基因突变、血清CEA水平与结直肠癌肝脏转移有密切相关,联合检测癌组织K-ras基因突变和血清CEA水平可预测结直肠癌肝转移.