p16和p15第二外显子HapⅡ位点在成人急性髓性白血病中的突变

目的 探讨p16和p15基因第二外显子HapⅡ位点在成人急性髓性白血病（AML）中的突变。方法 用甲基敏感和甲基敏感限制性内切酶切消化基因组DNA后，经PCR扩增和琼脂糖电泳研究31例AML中无p16/p15基因第二外显子缺失的患者中HapⅡ位点的突变情况。结果 在31例成人AML样本中，p16 E2的4个HapⅡ位点和p15 E2的6个HapⅡ位点均未发生突变。结论 本研究提示p16和p15基因第二外显子中因甲基化而引起的CCGG位点的突变在成人AML患者中不是主要失活方式。     

结直肠癌患者p16基因甲基化的研究

目的检测p16基因启动子区异常甲基化发生情况,探讨p16基因异常甲基化作为结直肠癌临床辅助诊断分子生物学标志物的可能性。方法应用甲基化特异性PCR（MSP）技术,检测结直肠癌患者肿瘤组织中p16基因的异常甲基化情况。结果应用MSP方法,DukesA、B期病人和DLlkes C、D期病人p16启动子区甲基化率分别为23．8%和59．4％。结论分析患者DNA的p16基因异常甲基化有可能成为辅助结直肠癌诊断的有效方法之一。     

抑癌基因p16突变与乳腺癌的相关研究

目的研究乳腺癌p16基因的状态。方法采用多重PCR分析法,单链构像多态性分析法(SSCP)对48例乳腺癌标本与相应的癌旁组织中p16基因突变情况进行了检测。结果48例乳腺癌标本中16例p16基因第2外显子缺失,相应的癌旁组织未检出。结论p16基因在乳腺癌中存在高频率缺失,其改变与乳腺癌发生发展有着密切联系。     

p16和p15第二外显子HapⅡ位点在成人急性髓性白血病中的突变

目的　探讨p16和p15基因第二外显子HapⅡ位点在成人急性髓性白血病 (AML)中的突变。方法　用甲基敏感和甲基非敏感限制性内切酶切消化基因组DNA后 ,经PCR扩增和琼脂糖电泳研究 3 1例AML中无p16/p15基因第二外显子缺失的患者中HapⅡ位点的突变情况。结果　在 3 1例成人AML样本中 ,p16E2 的 4个HapⅡ位点和p15E2 的 6个HapⅡ位点均未发生突变。结论　本研究提示p16和p15基因第二外显子中因甲基化而引起的CCGG位点的突变在成人AML患者中不是主要失活方式。     

p16基因的失活与肝癌生物学行为的关系

本研究采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法研究原发性肝细胞肝癌标本中p16基因的mRNA表达情况,采用免疫组化方法研究肝癌标本p16蛋白表达情况,探索该基因失活与肝癌的关系。     

人黑色素瘤细胞系MTS1／p16 CDK4基因的突变

为了探讨p16基因在人肿瘤细胞系中的突变，采用PCR-SSCP分析和基因序列测定技术，对人黑色素瘤细胞系(Bowes)中p16基因的突变进行检测。结果显示,Bowes细胞的p16基因第二外显子扩增产物在聚丙烯酰胺凝胶中电泳异常，表明其基因序列存在点突变。核酸序列测定证实第341号核苷酸发生T→C的颠挠。应用DNA重组技术构建的突变型p16基因重组质粒可作为基因探针用于检测p16基园的缺失。     

非何杰金氏淋巴瘤P16基因纯合性缺失及其临床意义

目的：探讨P16基因纯合性缺失与非何杰金氏淋巴瘤（NHL）的关系及其临床意义。方法：采用半定量多重PCR检测了51例非休杰金氏淋巴瘤病人P16基因纯合性缺失情况。结果：发现9例病人出现P16基因纯合性缺失，缺失率为17．6％，且低度恶性组与高度恶性组有显性差异（P＜0．05）。结论：P16基因纯合性缺失主要发生于恶性程度较高的HNL中，可作为判断NHL恶性程度高低和决定NHL治疗策略的一个参考指标。     

急性淋巴细胞白血病复发与p16蛋白表达缺失之间关系的临床研究

目的探讨急性淋巴细胞白血病的复发与患者体内p16蛋白表达缺失值之间的关系及其临床意义。方法收集2004年4月至2010年8月在沈阳市第四人民医院血液科门诊就诊、住院的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者40例;同期单纯性贫血患者40例(作为对照组)的临床资料,分别采集他们的少许骨髓样本,分离骨髓液中的淋巴细胞,应用APAAP法、免疫组化检测方法,来检测受检淋巴细胞内的棕色颗粒的多少,以确定其p16蛋白表达是否缺失。结果对照组和ALL不同病期患者p16蛋白表达(缺失)值不同,确诊为单纯贫血的患者p16蛋白表达值,均为阳性表达;急性淋巴细胞白血病(ALL)不同病期患者组的p16蛋白表达值,均为阴性表达;动态检测15例ALL患者的p16蛋白缺失值,发现ALL复发期的人体骨髓p16蛋白表达缺失值显著低于ALL完全缓解期的该值。结论 p16蛋白表达缺失在ALL复发机制中起着重要作用,动态检测完全缓解后患者的p16蛋白表达缺失值,能对预测、确诊其ALL是否出现早期复发提供依据。     

p16基因上游序列与急性白血病细胞核基质蛋白结合的实验研究

目的探讨p16基因上游序列-869bp中是否含有核基质结合元件,并分析p16基因上游序列在急性白血病细胞组与对照组内与核基质蛋白结合的情况。方法DNA-蛋白质杂交(Southwestern blot)技术。结果p16基因上游序列与核基质蛋白的结合在急性白血病组与对照组间存在差异。结论p16基因外显子1α上游–869bp片段可以与核基质蛋白结合,表明该片段存在MAR序列,对p16基因表达调控具有重要意义,急性白血病细胞核基质蛋白成分的改变影响其与p16基因外显子1α上游–869bp片段MAR序列的结合,提示核基质蛋白成分的改变可能抑制p16基因的表达,促进急性白血病的发生。     

p16基因缺失在成人ph阴性急性B淋巴细胞白血病中的临床意义

目的 探讨 p16基因缺失对成人 Ph阴性急性 B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者的临床特征及预后的影响。方法 回顾性分析210例初发成人ph阴性B-ALL患者的临床资料,根据初发时检测的p16基因状态分为p16基因缺失组 61例和无缺失组 149例。比较 p16基因缺失与无缺失组患者的临床、免疫表型、细胞遗传学、分子学特征及预后。结果 p16基因缺失组中伴 CD20表达者所占比例明显高于无缺失组（47.5% vs. 30.8%,χ2=5.238,P＜0.05）,2组患者间其余免疫表型和细胞遗传学分布差异无统计学意义。p16基因缺失组造血干细胞移植率和完全缓解率与无缺失组差异均无统计学意义,复发率明显高于无缺失组（χ2=12.027,P＜0.05）。79例复发患者中,4例患者初发时未检测出 p16 基因缺失,而复发时检测出 p16 基因缺失。p16 基因缺失组患者的 OS 和 DFS 明显低于无缺失组（Logrank χ2分别为 16.715、21.237,均 P＜0.05）。p16基因缺失组中接受造血干细胞移植患者的 OS和 DFS均优于化疗患者（Log-rank χ2分别为25.316、20.637,均 P＜0.05）。p16基因缺失组CD20阳性患者OS和DFS均明显低于CD20阴性者（Log-rank χ2分别为 7.782、5.733,均 P＜0.05）。结论 p16基因缺失患者 CD20阳性表达率高且预后差,造血干细胞移植能够明显改善p16基因缺失患者的预后。     

儿童急性白血病bcl-2、p16、PCNA表达研究

目的检测初诊儿童急性白血病bcl-2蛋白、p16蛋白和PCNA的表达,探讨细胞凋亡和增殖在白血病发生中的作用。方法运用免疫组织化学技术检测bcl-2、p16、PCNA在21例急性白血病患儿骨髓活检组织石蜡包埋切片上的表达,并与10例非白血病患儿表达情况作一对照。结果实验组bcl-2蛋白表达较对照组显著增高;实验组p16蛋白表达较对照组明显降低;实验组PCNA表达较对照组显著增高。结论bcl-2抑凋亡作用增强和p16抑增殖作用减弱在儿童白血病发生发展中具有重要作用,PCNA则可作为细胞增殖状态的标志。     

荧光原位杂交技术检测胃肠道外间质瘤p16基因改变的意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测胃肠道外间质瘤(EGIST)中p16基因缺失及17号染色体非整倍性的发生情况及其临床病理学意义。方法收集18例EGIST病例,采用p16/CSP17双色探针在石蜡切片上与瘤细胞杂交,所有病例同时用免疫组织化学技术检测P16蛋白的表达。结果FISH结果显示,p16基因缺失病例11例(61%),免疫组织化学检测到P16蛋白缺失病例13例(72%),基因缺失与蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.05);共检出17号染色体非整倍体EGIST病例5例(28%)。EGIST病例中p16基因缺失、17号染色体倍体改变与各临床病理学因素间差异无统计学意义(P>0.05)。结论EGIST中存在p16基因缺失和(或)17号染色体非整倍体改变。应用FISH技术检测二者改变对于EGIST生物学行为预测具有指导意义。     

非霍奇金淋巴瘤中p16基因异常的关系研究

目的研究p16基因异常在非霍奇金淋巴瘤发生发展中的作用。方法采用PCR-SSCP法对40例NHLs进行p16基因外显子2的点突变及纯合性缺失研究。结果40例NHLs中,p16基因点突变率为30%(12/40),纯合性缺失率为5.0%(2/40)。结论p16基因的突变及缺失与非霍奇金淋巴瘤发生发展的关系密切。     

p16和p53基因在乳腺癌和卵巢癌中表达水平的比较研究

目的研究乳腺癌和卵巢癌中p53和p16蛋白的表达,探讨它们之间的关系及其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法,检测38例乳腺癌和39例卵巢癌中p16、p53蛋白的表达。结果乳腺癌中p53和p16基因蛋白异常表达率分别为60．5%、63．2%,卵巢癌中两蛋白异常表达率分别为66．7%、64．1%;差异均无统计学意义（P＞0．05）。p53蛋白阳性率与组织学分级有相关性,随着组织学分级的增加而逐渐增高;p16的变化规律与p53蛋白阳性率的变化恰好相反。p53蛋白与p16蛋白表达率呈显著负相关（r= 79．68．P＜0．05）。结论p16蛋白的缺失表达及p53蛋白的高表达与乳腺癌的发生发展有关,可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。     

非小细胞肺癌患者血浆和肿瘤组织中p16基因结构异常的研究

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆及肿瘤组织中p16基因突变对该病发生、发展和预后的意义。方法应用聚合酶链反应特异性扩增p16基因第2外显子,并用单链构象多态性分析产物突变情况,再与性别、年龄、肿瘤分期等各生物学参数进行相关分析研究。结果32例NSCLC患者血浆中检测到14例p16基因突变（43．75％）,而组织中检测到17例（53．12％）。Ⅲ期及Ⅳ期NSCLC患者血浆和组织中p16基因突变率[分别为52．6％（10／19）和63．2％（12／19）]明显高于Ⅰ＋Ⅱ期[分别为30．8％（4／13）和38．5％（5／13）],差异有统计学意义（P〈0．05）。有淋巴结转移的NSCLC患者血浆和组织中p16基因突变率[分别为52．2％（12／23）和65．2％（15／23）]明显高于无淋巴结转移的患者[均为22．2％（2／9）],差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论血浆中DNAp16基因第二外显子突变在NSCLC中有较高的检出率。血浆p16基因第二外显子突变检出率与肿瘤组织中的突变检出率近似。NSCLC患者血浆中p16基因第二外显子突变与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关。检测患者血浆p16基因突变对NSCLC的诊断以及预后评估具有重要价值,方法较为简便。     

儿童急性白血病bcl-2、p16蛋白的表达及病理意义

目的研究初诊儿童急性白血病bcl-2、p16蛋白的表达及两者关系,探讨细胞凋亡和细胞增殖在急性白血病发生中的作用。方法采用免疫组化技术检测bcl-2和p16蛋白在29例初诊急性白血病患儿骨髓活检组织中的表达,并与19例非白血病患儿的表达作对照。结果实验组bcl-2蛋白表达显著高于对照组;实验组p16蛋白表达显著低于对照组;在儿童初诊急性白血病中p16与bcl-2表达呈负相关。结论bcl-2过度表达引起的细胞凋亡抑制增强和p16失表达引起的细胞增殖抑制减弱在急性白血病发生发展中发挥重要作用;细胞凋亡障碍和细胞增殖失控在多数白血病发病中可能存在某种协同作用,细胞凋亡抑制在部分白血病的发病中可能比细胞增殖失控起的作用更重要。     

p16基因甲基化与中国人群非小细胞肺癌发生关系的Meta分析

目的:应用Meta分析的方法评价p16甲基化与中国人群非小细胞肺癌(NSCLC)的关系。方法:检索1978~2013年在Medline、Pubmed数据库以及1994~2013年CNKI、中国生物医学文献数据库、万方和维普数据库收录的所有有关p16甲基化与肺癌研究的文献,并用Review Manager 5.2软件进行统计分析。结果:纳入国内外标准的文献10篇,共有549例NSCLC患者,对照513例。数据合并结果显示,p16甲基化病例组与对照组的比值比(OR)为6.76,95%CI为(4.79%~9.54%);经统计学分析有统计学意义(P<0.05)。结论:p16甲基化与NSCLC发生有密切关系。     

羟基喜树碱对系统性红斑狼疮患者单核淋巴细胞中p16基因表达和启动子甲基化修饰的影响

目的: 探讨羟基喜树碱(Hydroxycamptothecin, HCPT)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)甲基化敏感基因p16的表达和启动子甲基化修饰的影响。方法: 密度梯度离心法分离得外周血单个核细胞,使用浓度为0.25、0.5、1和2 mg·L^-1的HCPT处理SLE患者PBMC,24 h后收集细胞。MTT法检测处理后PBMC的活力。定量PCR检测p16及DNA甲基转移酶1(DNA Methyltransferase1,Dnmt1)基因mRNA 表达水平,2^-ΔΔct法分析结果。甲基化特异性PCR分析p16基因启动子区甲基化水平。结果: (1)HCPT处理24 h后,0.25、0.5和1 mg·L^-1HCPT处理组PBMC活力之间比较差异无统计学意义(P>0.05),2 mg·L^-1HCPT处理组PBMC活力与0.25、0.5和1 mg·L^-1HCPT处理组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)1 mg·L^-1HCPT处理组与对照组比较p16基因mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)1 mg·L^-1HCPT处理组与对照组比较Dnmt1基因mRNA表达水平降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)DNA甲基化水平检测显示HCPT处理组p16基因启动子甲基化水平较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论: HCPT通过降低Dnmt1基因表达水平,下调p16基因启动子甲基化水平,从而增加SLE患PBMC中p16表达水平。