艾恒与传统化疗药物在不同分化程度胃癌细胞株中敏感性的研究

目的:探讨不同分化程度胃癌细胞对艾恒、5-FU、MMC和VP-16的敏感性。方法:将不同浓度的化疗药物与两株不同分化程度的胃癌细胞株共同温育,采用MTT方法检测化疗各药物对胃癌细胞增殖的影响。结果:四种化疗药物对两株胃癌细胞的增殖均具有显著的抑制作用,MKN45细胞株对各化疗药物敏感性顺序为:MMC>VP-16>艾恒>5-FU,而SGC7901细胞株对各化疗药物敏感性顺序为:MMC>艾恒>VP-16>5-FU。中分化的SGC7901对艾恒、MMC、VP-16的敏感性均显著高于低分化的MKN45,而MKN45对5-FU的敏感性高于SGC7901。结论:不同分化程度的胃癌细胞对药物的敏感性不同。     

大葱提取液抗人胃癌作用的细胞周期特点

目的观察大葱提取液抗胃癌作用的细胞周期特点。方法将大葱提取液作用于体外培养的人胃癌细胞MGC803后,采用电镜观察MGC803细胞超微结构变化;应用流式细胞仪分析MGC803细胞DNA含量及周期分布,检测其分化与凋亡情况。结果(1)透射电镜下观察:大葱作用后的癌细胞细胞膜完整,出现分化和凋亡的形态学变化。(2)流式细胞仪检测:1.25%大葱提取液作用MGC803细胞24h、48h、72h、96h,凋亡率分别为0.6%、1.6%、6.1%、13.5%,二倍体比例分别为0%、0.3%、35.8%、93.9%;1.25%、2.5%、5.0%、10.0%大葱提取液作用24h,凋亡率分别为0.6%、4.1%、6.2%、24.9%,二倍体比例分别为0%、10.6%、34.7%、72.2%。低浓度组以诱导分化作用为主,高浓度组同时可诱导细胞凋亡,呈剂量和时间依赖性。实验组细胞随大葱液浓度和作用时间增加,异倍体细胞比例逐渐减少,细胞凋亡率逐渐增加。DNA含量出现二倍体峰和亚二倍体峰~凋亡峰。大葱提取液抑制胃癌细胞可发生在G0/G1期、S期和G2/M期,无周期特异性。结论大葱提取液能明显抑制体外培养的胃癌细胞生长增殖,既可诱导胃癌细胞分化,又可诱导胃癌细胞凋亡,抗癌作用无周期特异性。     

老年胃癌腹腔内温热灌注化疗

目的:探讨老年胃癌根治术中及术后腹腔内温热灌注化疗的临床疗效及对肝功及血液系统的影响。方法:在均行化疗德基础上,将术中、术后腹腔温热灌注化疗的60例老年胃癌患者(治疗组)与未行腹腔内温热灌注化疗的71例患者(对照组)的腹腔游离癌细胞检出率(ICC)、肝功能、血细胞分析进行对比。结果:治疗组和对照组的游离癌细胞检出率分别是3.8%和32.6%,术后肝功能、血液细胞分析两组相比无明显差异(P>0.05),治疗组术后1、2、3年内生存率分别为100%、85%、64.2%;对照组则为95%、51.3%、32.4%,两组2、3年生存率相比有显著意义(P<0.01)。结论:术中及术后腹腔内温热灌注化疗在老年胃癌患者可明显杀灭腹腔游离癌细胞,降低复发率,提高生存率。     

桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的抑制增殖及诱导凋亡作用

[目的]观察桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的抑制增殖及诱导凋亡作用.[方法]选用人胃癌细胞株BGC-823进行体外培养,用MTT法测定桦褐孔菌提取物对BGC-823细胞株的增殖抑制率,应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、AO/EB双染色荧光显微镜及透射电子显微镜等仪器观察桦褐孔菌提取物对肿瘤细胞形态结构的影响.[结果]10,20,40,80 mg/L桦褐孔菌提取物对胃癌BGC-823细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度依赖关系.HE染色在光学显微镜下可见桦褐孔菌组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或形成块,部分细胞膜形成凋亡小体;在倒置显微镜下可见桦褐孔菌组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力明显减弱;在AO/EB双染色荧光显微镜下可见桦褐孔菌组肿瘤细胞胞核染色质呈橘红色,胞质内的橘红色或橘黄色荧光消失,细胞周围有呈亮绿色的荧光凋亡小体;在透射电子显微镜下可见80 mg/L桦褐孔菌提取物组肿瘤细胞核染色质固缩边集,胞质内可见有空泡,凋亡小体凸出于细胞表面.[结论]桦褐孔菌提取物可抑制人胃癌BGC-823细胞株的增殖,诱导肿瘤细胞凋亡.     

maspin诱导不同分化的胃癌细胞凋亡及可能的作用机制

目的探讨maspin诱导胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45凋亡的作用及可能的作用机制。方法重组质粒pCD-NA3.1-maspin分别转染胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Westernblotting)检测maspin基因表达,末端标记细胞凋亡法(TUNEL)检测细胞凋亡,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的改变。结果重组质粒pCDNA3.1-maspin导入SGC-7901和MKN-45细胞株后,maspin的mRNA和蛋白表达均明显增强(P<0.05),两种细胞均出现明显的细胞凋亡,且两种细胞中的Bax蛋白均上调,而Bcl-2蛋白均下调。结论 maspin基因可能通过上调Bax蛋白和下调Bcl-2蛋白诱导胃癌细胞凋亡。     

茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株的诱导凋亡及抗增殖作用

[目的]探讨茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株的诱导凋亡、抗增殖作用及凋亡后bcl-2基因表达的影响.[方法]利用组织细胞培养技术及MTT法,通过电泳分析及多种细胞染色等方法.观察茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株的凋亡及抗增殖情况.[结果]茜草提取物质量浓度在0.2～1.0 g/L范围内对胃癌MGC-803细胞株均具有抑制增殖作用,且呈浓度依赖性;形态学观察结果显示,各剂量实验组胃癌细胞均有凋亡形态学改变;TUNEL法检测结果见,茜草提取物质量浓度在0.2～1.0 g/L范围内对胃癌MGC-803细胞株均具有诱导凋亡作用,肿瘤细胞凋亡率(AI)随药物浓度增高而上升,当药物作用48 h时AI达到高峰;DNA电泳检测结果表明,用0.4 g/L茜草提取物作用24 h时可见梯形电泳条带出现;增殖细胞核抗原(PCNA)检测结果显示,PCNA阳性表达率随药物质量浓度的增高及作用时间的延长而降低;凋亡相关基因bcl-2的蛋白表达检测结果显示,0.8 g/L茜草提取物作用于胃癌MGC-803细胞48 h后,bcl-2基因蛋白阳性表达率明显下降.[结论]茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株具有诱导凋亡和抑制增殖作用,其诱导凋亡作用可能与下调凋亡抑制基因bcl-2的表达有关.     

维甲酸对宫颈癌耐药细胞株分化及凋亡影响的研究

目的研究全方式维甲酸（ATRA）对宫颈癌耐药细胞株HeLa/MMC诱导分化及凋亡的影响。方法采用MTT法检测HeLa/MMC细胞生长速度;集落形成实验观察ATRA对HeLa/MMC细胞集落形成能力的影响;在透射电镜下观察ATRA对HeLa/MMC超微结构的影响;TUNEL法检测HeLa/MMC细胞实验组与对照组细胞凋亡率;半定量RT-PCR检测凋亡相关基因bax的表达。结果通过实验观察到ATRA联合MMC能明显抑制HeLa/MMC细胞的增殖;ATRA作用后的HeLa/MMC细胞出现成熟细胞的特征、细胞集落形成能力降低;ATRA能促进细胞凋亡,上调HeLa/MMC细胞bax基因的表达。结论表明ATRA能有效的诱导宫颈癌耐药细胞株HeLa/MMC分化,并促进其凋亡。诱导凋亡相关基因bax基因的表达上调是ATRA作用的分子机制之一。     

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法：以As2O3处理卵巢癌细胞株SKOV3，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定As2O3对SKOV3生长的抑制作用，并绘制剂量－效应曲线；通过透射电镜观察细胞超微结构的变化；应用流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期并测定凋亡特征酶caspase-3的活性变化。结果：0．5－4．0μmol/L三氧化二砷明显抑制SKOV3细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性；透射电镜观察可看到较为典型的细胞凋亡的形态学改变；细胞核固缩，染色质凝集，呈新月状紧贴于核膜周边，凋亡小体形成等；流式细胞仪检测出现DNA含量小于G1峰的亚二倍体凋亡峰，同时出现G2／M期阻滞；SKOV3在As2O3作用下，caspase-3是实现凋亡的效应因子，它的激活必然导致凋亡细胞最终的各种表型变化。结论：As2O3对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有明显的抑制作用，诱导凋亡是其主要作用机制之一。     

进展期胃癌术后早期腹腔温热灌注化疗的临床研究

目的:比较进展期胃癌术后早期腹腔温热灌注化疗和静脉化疗的临床疗效.方法:将68例进展期胃癌术后化疗按前瞻、随机、对照的原则分为治疗组(腹腔温热灌注化疗)33例及对照组(静脉化疗)35例,比较两组冶疗的不良反应发生率、腹腔内复发率、肝转移率、腹腔外器官转移率、3年无瘤生存率、3年生存率的差异.结果:两组差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组的胃肠反应率、骨髓抑制率、腹腔内复发率、肝转移率低于对照组,而3年无瘤生存率和3年生存率较对照组高,治疗组的腹腔外器官转移率偏高.结论:进展期胃癌术后腹腔温热灌注化疗对预防中晚期胃肠道癌术后腹腔内复发、肝脏转移有明显疗效,可提高生存率,且方法安全、简单、实用,不良反应少,但其控制腹腔外器官转移较静脉化疗差,后期腹腔内形成牯连,减弱了其灌注效果,粘连性肠梗阻的发生对病人的生活质量有一定的影响.     

AHVAC-Ⅰ对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制

目的:探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AHVAC-Ⅰ)对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制。方法:AHVAC-Ⅰ处理SGC-7901细胞。CCK-8法检测其生长抑制作用,光镜观察细胞形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:AHVAC-Ⅰ抑制SGC-7901细胞的生长增殖,并呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为58.197μg/ml;镜下可见SGC-7901细胞悬浮、胞核固缩等典型凋亡形态学变化;TUNEL法显示凋亡指数随浓度增加而增加。结论:AHVAC-Ⅰ对人胃癌细胞株SGC-7901具有生长抑制作用,诱导凋亡可能是其主要的作用机制之一。     

顺铂或奥沙力铂联合热疗对人胃癌细胞系BGC-823抑制作用的比较

目的：比较顺铂或奥沙力铂联合热疗对人未分化胃腺癌细胞系BGC-823增殖的抑制作用。方法：使用MTY法检测细胞增殖，确定顺铂和奥沙力铂对BGC-823抑制的工作浓度，并以该浓度进行化疗或与热疗联合应用，根据Veleriote法判断热、化疗联合应用后24h或48h的作用效果，并将顺铂和奥沙力铂联合热疗的作用进行比较。结果：以20％～30％抑制率的药物浓度作为试验的工作浓度，确定顺铂和奥沙力铂的工作浓度分别为1μg／ml和5μg／ml。单纯43℃热疗1h后，在24h时和48h时对BGC-823的抑制作用无统计学意义（P〉0．05）；应用顺铂1μg／ml和奥沙力铂5μg／ml后24h对BGC-823无显著的抑制作用（P〉0．05），48h时呈现显著的抑制作用（P〈0．01）。应用两药联合43℃热疗1h，在24h和48h对BGC-823均有显著的抑制作用（P〈0．05），随着时间的延长，对BGC-823的抑制作用增强（P〈0．05）。单药化疗在24h或48h时，两药的抑制作用无统计学差异（P〉0．05），顺铂联合热疗对BGC-823的抑制作用在24h和48h时均比奥沙力铂联合热疗的抑制作用强（P〈0．05）。根据Veleriote法判断：顺铂1μg／ml联合热疗在24h和48h时均呈明显的协同作用；奥沙力铂5μg／ml联合热疗在24h时产生次加作用，在48h产生协同作用。结论：顺铂或奥沙力铂联合热疗在24h和48h时呈现次加或协同作用，两种药物相比，顺铂比奥沙力铂作用更强。     

槐耳清膏联合顺铂改变胃癌SGC7901细胞周期分布的实验研究

目的观察槐耳清膏联合顺铂（DDP）作用于人胃腺癌SGC7901细胞后细胞周期的变化,并探讨其可能的作用机制。方法通过细胞流式实验,观察不同浓度槐耳清膏、DDP及两药联合作用于胃癌SGC7901细胞24h后细胞周期的变化情况,并通过Westernblot检测不同浓度的槐耳清膏、DDP及两药联合作用于胃癌SGC7901细胞后,细胞周期相关蛋白ATM、H2AX、cdc-2、CyclinB1等的表达情况。结果细胞流式实验结果显示,槐耳清膏能够阻滞SGC7901细胞于G2/M期,DDP能够阻滞SGC7901细胞于S期,而两药联用后S期和G2/M期都有阻滞。Westernblot实验结果显示,槐耳清膏、DDP均可上调p-ATM、γ-H2AX蛋白表达,同时下调CyclinB1蛋白表达,且两药联用后效果更加明显。结论槐耳清膏、DDP能够通过调节细胞周期相关蛋白的表达改变细胞周期,抑制细胞增殖,与槐耳清膏联用可提高DDP对胃癌的疗效。     

腹腔灌注化疗联合高频透热治疗进展期胃癌

目的报告应用腹腔灌注化疗联合高频透热治疗进展期胃癌的临床疗效。方法进展期胃癌患者共47例,分为治疗组24例及对照组23例。均采用LFMP化疗方案(四氢叶酸 5-氟脲嘧啶 丝裂霉素 顺铂)。治疗组24例,通过人工腹水法大容量腹腔灌注化疗,再用国产NRL-001型差频电容场肿瘤热疗系统加温腹腔;对照组23例,采用常规静脉滴注法进行全身化疗。结果客观疗效治疗组5417%,对照组2609%,P<005。结论腹腔灌注化疗联合高频透热治疗进展期胃癌有效率高,毒副反应小,对于改善生活质量、延长生存期有较显著的临床意义。     

区域动脉灌注联合腹腔内化疗及热疗治疗进展期胃癌疗效学观察

目的研究区域动脉灌注联合腹腔内化疗及热疗治疗进展期胃癌疗效。方法治疗组应用区域动脉灌注联合腹腔内化疗及热疗治疗进展期胃癌19例,对照组17例,采取全身化疗（FOLFOX4方案）。结果治疗组有效率（CR＋PR）为68．42％,对照组的有效率（CR＋PR）为35．29％,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论区域动脉灌注联合腹腔内化疗及热疗能提高进展胃癌疗效。     

不同给药途径的新辅助化疗对胃癌患者的术前影响

目的新辅助化疗在胃癌的治疗中占有重要地位,不同给药途径的化疗方案在疗效以及化疗不良反应上存在较大差别。文中探讨术前动静脉结合的新辅助化疗对胃癌患者的术前影响。方法 32例临床诊断为Ⅲ、Ⅳ期的局部进展期胃癌患者接受术前动静脉结合的FLEEOX方案:氟尿嘧啶370 mg/m2,缓慢静脉滴注,第1至第5天;亚叶酸钙200 mg,静脉滴注,第1至第5天;奥沙利铂120mg/m2、表柔比星30mg/m2、足叶乙甙70mg/m2,动脉介入注射到癌肿所在部位,第6、20天,每5周重复1次,共治疗2个疗程。同期收治的18例Ⅲ、Ⅳ期局部进展期胃癌患者接受XELOX方案:奥沙利铂130mg/m2,4h内静脉滴注,第1天;口服卡培他滨850 mg/m2,2次/d,持续2周,每3周重复1次,共治疗2个疗程。根据美国国家癌症研究所CTC3.0版标准评价化疗毒性反应,观察比较不同治疗方案对胃癌患者生活质量、不良反应、临床症状及营养状况等影响。结果 FLEEOX组患者化疗后的前清蛋白、体重指数(body mass index,BMI)均显著高于XELOX组患者;进食哽咽、食欲不振等临床症状也较XELOX组患者有明显改善;在肝肾功能损害、骨髓造血功能抑制、恶心、呕吐等化疗相关毒性反应方面,2组患者差异无统计学意义。结论 2组进展期胃癌患者均可耐受新辅助化疗方案的毒性反应。FLEEOX方案可更加有效地改善肿瘤患者营养状况及相关临床症状,提高术前的生活质量。     

二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞的作用机制。方法采用MTT法和流式细胞仪检测不同浓度的DADS对MGC803细胞的生长抑制作用和细胞周期分布影响。结果随着DADS浓度的增加,MGC803细胞的生长抑制率逐渐上升;细胞的G0/G1期比率下降,G2/M期比率逐渐上升。结论抑制癌细胞生长和诱导癌细胞周期阻滞于G2/M期是DADS的抗肿瘤机制之一。     

奥曲肽联合长春新碱对胃癌细胞的抑制作用

目的：探讨生长抑素类似物-奥曲肽（OCT）联合细胞毒化疗药物长春新碱（VCR）对胃癌细胞系SGC一7901的抑制作用和机制。方法：用M1Tr比色法和免疫组化法分析OCT、VCR和OCT联合VCR对胃癌细胞生长、细胞凋亡调节基因p53表达的影响。结果：当OCT为1×10^-5g／L时,对胃癌细胞的抑制作用最明显;OCT联合VCR对胃癌细胞的抑制高于VCR组（P〈0．05）;OCT上调p53的表达,也可以协同VCR上调p53的表达vs对照组,P〈0．05）。结论：OCT可以通过上调p53的表达诱导胃癌细胞凋亡,联合应用可以增强VCR对胃癌细胞的抑制作用。     

人胃癌MGC803细胞紫杉醇耐药细胞系初步建立的实验研究

目的：探讨胃癌MGC803对紫杉醇的耐药机制,初步建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系,研究耐药过程中的变化。方法：采用逐步递增紫杉醇浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,做相关检测;MTT法测定药物敏感性;光学显微镜、电子显微镜、MTT法等方法观察其生物学指标的改变。结果：经过4个月建成人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,2、3、4个月的耐药指数分别为5.12、11.46、15.98,并且与其他多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性,MGC803/PA的细胞形态逐渐发生改变,生长曲线逐渐改变。结论：MGC803/PA细胞具有耐药表型,且耐药性能稳定,MGC803/PA的增殖能力逐渐下降,MTT法及其电镜可以较早地提示MGC803/PA的耐药特征。     

柴胡皂苷D对胃癌SGC-7901细胞生长、迁移抑制作用和Norrin、Livin的影响

目的探讨柴胡皂苷D对胃癌SGC-7901细胞生长、迁移抑制作用和Norrin、Livin水平的变化。方法实验分为对照组（正常培养SGC-7901细胞）、低剂量组（SGC-7901细胞+5滋mol/L柴胡皂苷D）、中剂量组（SGC-7901细胞+10滋mol/L柴胡皂苷D）和高剂量组（SGC-7901细胞+20滋mol/L柴胡皂苷D）。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞24、48、72h细胞增殖情况;采用TUNEL法检测各组细胞凋亡情况;采用Transwell检测各组细胞迁移能力;采用real-timePCR对各组细胞中Norrin及Livin的表达进行检测;采用Westernblot检测各组细胞Norrin、Livin、CDC25A、cyclinA2、p21和cyclinD1表达。结果与对照组比较,低剂量组对SGC-7901细胞生长、凋亡和Norrin、Livin、p21及cyclinD1的表达未产生明显影响（P＞0.05）,但可减低SGC-7901细胞CDC25A、cyclinA2表达（P＜0.05）;中、高剂量组SGC-7901细胞生长抑制作用明显,荧光TUNEL显示凋亡率高于对照组（P＜0.05）,Norrin及LivinmRNA表达减少（P＜0.05）,CDC25A及cyclinA2表达具有抑制作用（P＜0.05）,且具有剂量依赖性,对p21及cyclinD1无明显影响（P＞0.05）。结论柴胡皂苷D可能通过Norrin、Livin的表达、干扰肿瘤细胞生长周期、介导肿瘤细胞凋亡等作用,抑制人胃癌SGC-7901细胞生长、迁移能力。     

5-氮杂-2＇-脱氧胞苷对人胃癌细胞株BGC803生长及死亡相关蛋白激酶基因表达的影响

目的：探讨去甲基化药物5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人胃癌细胞BGC803增殖、凋亡及对死亡相关蛋白激酶（DAPK）mRNA表达水平的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理BGC803细胞,设立不含5-Aza-CdR的对照组及3个实验组：5-Aza-CdR 1μmol/L组、5-Aza-CdR 5μmol/L组、5-Aza-CdR 10μmol/L组。CCK-8检测细胞的增殖情况,AnnexinⅤ/PI双染及流式细胞术检测药物处理后细胞凋亡的情况,RT-PCR检测用药前后DAPK mRNA的表达水平变化。结果实验组BGC803细胞增殖速度显著低于对照组,细胞凋亡率显著升高（P〈0.05）。RT-PCR结果显示,BGC803细胞中DAPK基本无表达,5-Aza-CdR处理后,细胞中DAPK mRNA表达量显著高于对照组（P〈0.05）。结论5-Aza-CdR抑制BGC803细胞增殖,并促进细胞凋亡,可能与其诱导DAPK基因表达有关。