丙泊酚对仔鼠海马磷酸化tau蛋白及β-淀粉样蛋白(1-42)表达的影响*

目的探讨怀孕大鼠注射丙泊酚对其后代空间认知探索能力及海马磷酸化tau蛋白(P-tau)、β-淀粉样蛋白(1-42)[Aβ(1-42)]沉积表达的影响。方法3个月龄24只雌鼠与8只雄鼠按雌雄比3:1合笼受孕。怀孕后按随机数字表法将孕鼠分为早期组(E组)、中期组(M组)、晚期组(L组)和对照组(C组),各6只。E组、M组、L组经腹腔注射丙泊酚80 mg·kg-1·d-1,连续注射7 d。C组注射同体积的0.9%氯化钠溶液代替丙泊酚。在孕鼠子代30日龄时进行Morris水迷宫实验,取其海马分别采用免疫组织化学和酶联免疫吸附实验,检测丝氨酸202位点磷酸化tau蛋白及Aβ(1-42)表达情况。结果与C组(65.60±7.23) s相比,E组(51.20±8.11) s、M组(36.00±6.44) s、L组(47.20±12.30) s,仔鼠空间学习记忆能力下降,均差异有统计学意义(P＜0.05)。免疫组化检测显示M组仔鼠海马Aβ(1-42)和P-tau含量较E组、L组、C组高[Aβ(1-42):(27.38±5.90)比(12.65±2.08),(13.79±3.37),(65.60±7.23);P-tau:(26.35±5.83)比(13.65±3.46),(14.56±3.82),(8.49±1.20)]。酶联免疫吸附实验检测亦显示M组仔鼠海马Aβ(1-42)和P-tau含量较E组、L组、C组高[Aβ(1-42):(88.6±7.43)比(71.60±6.79),(13.79±3.37),(65.80±6.28);P-tau:(230.13±8.22)比(210.42±2.20),(210.95±1.75),(200.65±1.57)],均差异有统计学差异(P＜0.05)。结论孕期多次注射丙泊酚损伤仔鼠空间学习记忆能力,孕中期暴露致损伤最为明显,其机制可能与海马P-tau、Aβ(1-42)沉积过度表达有关。     

磷酸化tau蛋白及其与总tau蛋白比对创伤性脑损伤病人病人预后的预测价值

目的探讨磷酸化tau蛋白(P-tau)及其与总tau蛋白(P-tau/T-tau)比对预测创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)病人6个月内死亡和预后情况的诊断效能。方法 2017年6月～2019年6月收治的TBI病人90例。采用格拉斯哥预后评分(GOS)记录病人随访6个月后死亡和预后情况,由此将病人分为死亡组、存活组、预后良好组、预后不良组,采用Logistic回归分析死亡相关因素,分析伤后6小时内P-tau、P-tau/T-tau与GOS评分相关性,绘制ROC曲线评估前二者对死亡和预后的预测效能。结果最终纳入86例,死亡组发病至入院时间、P-tau、P-tau/T-tau均高于存活组,格拉斯哥昏迷评分(GCS)低于存活组,差异有统计学意义(P0.05);P-tau和P-tau/T-tau为死亡危险因素(P0.05);预后良好组GOS评分高于预后不良组,P-tau和P-tau/T-tau低于预后不良组,差异有统计学意义(P0.05);P-tau和P-tau/T-tau均与GOS评分呈负相关(r=-0.773、-0.745,均P=0.000);P-tau和P-tau/T-tau预测病人死亡的AUC分别为0.767与0.873、0.968与0.961,两者预测死亡(91.30%和91.34%)和预后(94.11%和91.24%)的敏感性无明显差异(P0.05)。结论 P-tau水平和P-tau/T-tau值可有效预测TBI病人6个月内死亡和预后情况。     

Tau蛋白与认知功能

Tau蛋白为正常的生理蛋白,其高度磷酸化对认知功能有影响.围术期存在多种因素可以通过蛋白激酶和蛋白磷酸酶相对活性失衡引起tau的磷酸化,从而影响术后认知功能.     

Tau蛋白与认知功能

Tau蛋白为正常的生理蛋白,其高度磷酸化对认知功能有影响。围术期存在多种因素可以通过蛋白激酶和蛋白磷酸酶相对活性失衡引起tau的磷酸化,从而影响术后认知功能。     

氯胺酮对幼年大鼠海马神经元tau蛋白磷酸化水平的影响

目的 探讨氯胺酮对幼年大鼠海马神经元tau蛋白磷酸化水平的影响.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为2组(n=30):对照组(C组)和氯胺酮组(K组).K组腹腔注射氯胺酮40 mg/kg,待翻正反射恢复时追加1/2首剂量,共追加3次,C组给予等容量生理盐水.各组于给药后1、7、21 d取10只大鼠行Morris水迷宫实验,测定其学习、记忆功能,并于末次Morris水迷宫实验结束后1 h断头取脑,采用免疫组化法测定海马苏氨酸231位点磷酸化tau蛋白(Tau-pThr231)和丝氨酸404位点磷酸化tau蛋白(Tau-pSer404)表达.结果 与C组比较,K组给药后1、7 d学习、记忆功能降低,海马神经元Tau-pThr231表达升高(P＜0.05);与给药后1 d比较,K组给药后7 d记忆功能增强,21 d学习、记忆功能均增强(P＜0.05或0.01);与给药后1 d和7 d比较,K组给药后21 d海马神经元Tau-pThr231表达降低(P＜0.05).光镜下各组大鼠海马神经元结构均未见异常.结论 氯胺酮可导致幼年大鼠短暂认知功能减退,可能与海马神经元Thr231位点tau蛋白磷酸化有关.     

术后认知功能障碍老龄大鼠海马神经元缝隙连接蛋白36表达的变化

目的 评价术后认知功能障碍老龄大鼠海马神经元缝隙连接蛋白36(Cx36)表达的变化.方法 健康雄性SD大鼠90只,20月龄,体重500～600 g,按随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):正常对照组(C组)、假手术组(S组)和术后认知功能障碍组(POCD组).采用脾脏切除术制备老龄大鼠术后认知功能障碍模型,分别于脾脏切除术后1、3、7 d(T1-3)时每组各取10只大鼠,经旷场分析和Y型迷宫实验测试大鼠认知功能,随后处死大鼠取海马,采用免疫组化法检测海马神经元Cx36的表达.结果 与C组比较,S组各项认知功能指标和海马神经元Cx36表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),POCD组中央格停留时间延长,跨格次数、站立次数和正确反应次数减少,全天总反应时间增加,海马神经元Cx36表达水平降低(P＜0.05);与S组比较,POCD组大鼠T1时中央格停留时间延长,跨格次数、站立次数和正确反应次数减少,全天总反应时间增加,海马神经元Cx36表达水平降低(P＜0.05),T2,3时各项认知功能指标及海马神经元Cx36表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 术后认知功能障碍可能与老龄大鼠海马神经元Cx36表达下调有关.     

脾切除术对大鼠海马tau表达的影响

目的 评价脾切除术对大鼠海马tau表达的影响.方法 SD大鼠105只,随机分为3组,正常对照组(A组,n=15)不给予任何处理,麻醉组(B组,n=45)仅吸入1.5%异氟醚2 h,手术+麻醉组(C组,n=45)吸入1.5%异氟醚(吸入2 h)麻醉下实施脾切除术.B组和C组分别于麻醉后或术后1、3、7 d时处死15只大鼠,取海马组织,测定海马IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、TNF-α、总tau、苏氨酸第205位点磷酸化tau(pT205 tau)、丝氨酸第396位点磷酸化tau(pS396 tau)、总糖原合成酶-3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达水平.结果 与A组比较,B组各时点IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、TNF-α、总tau、pT205 tau、pS396 tau、GSK-3β和p-GSK-3β的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),C组术后IL-1βmRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、pT205 tau和pS396 tau的表达上调,p-GSK-3β表达下调(P＜0.05或0.01).结论 手术创伤可导致大鼠海马tau磷酸化,其机制与手术创伤诱发炎性反应,从而激活GSK-3β有关.     

Tau蛋白与认知功能

Tau蛋白为正常的生理蛋白,其高度磷酸化对认知功能有影响.围术期存在多种因素可以通过蛋白激酶和蛋白磷酸酶相对活性失衡引起tau的磷酸化,从而影响术后认知功能.     

七氟醚麻醉对淀粉样前体蛋白转基因小鼠认知功能及海马神经元tau蛋白磷酸化水平的影响

目的 探讨七氟醚麻醉对淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠认知功能及海马神经元tau蛋白磷酸化水平的影响.方法 雄性APP基因突变小鼠,体重18～22 g,8～12周龄,取APP转基因阳性(APP+)小鼠44只,采用随机数字表法,将其分为2组:七氟醚组(AS组,n=28)和对照组(AC组,n=16);取APP阴性(APP)小鼠44只,采用随机数字表法,将其分为2组:七氟醚组(S组,n=28)和对照组(C组,n=16).AS组和S组吸入3％七氟醚4h,AC组和C组吸入纯氧4h.吸入七氟醚或纯氧后24 h,进行水迷宫实验.AC组和C组于吸入纯氧后1 d(T1)时,AS组和S组于吸入七氟醚后1、3和7 d(T1-3)时采用Western blot法检测海马神经元tau蛋白Ser262位点[tau(S262)]和Ser396位点[tau(S396)]的磷酸化水平.结果 与C组比较,S组和AC组潜伏期延长,平台所在原象限停留时间百分比降低,S组tau(S262)和AS组tau(S262)、tau(S396)磷酸化水平增强(P＜0.05);与S组比较,AS组潜伏期延长,平台所在原象限停留时间百分比降低,tau(S262)和tau(S396)磷酸化水平增强(P＜0.05);与AC组比较,AS组潜伏期延长,平台所在原象限停留时间百分比降低,tau(S262)和tau(S396)磷酸化水平增强(P＜0.05).结论 七氟醚麻醉可加重APP+小鼠认知功能损伤,其机制与增强海马神经元tau(S262)和Tau(S396)磷酸化水平有关.     

海马腺苷酸活化蛋白激酶水平与老龄大鼠脾切除术后认知功能障碍的关系

目的 评价海马腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平与老龄大鼠脾切除术后认知功能障碍(POCD)的关系.方法 健康雄性老龄SD大鼠63只,体重480～550 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=21):对照组(C组)、麻醉组(A组)和手术组(S组).S组于术前、术后1、3、7d、A组和C组于相应时点进行Morris水迷宫实验,记录逃避潜伏期和游泳距离.术后1、3、7d水迷宫实验结束后随机取7只大鼠,处死后取海马组织,采用Western blot法测定海马AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)的表达水平.结果 与术前相比,S组术后1、3d逃避潜伏期和游泳距离延长(P＜0.05);与C组相比,S组术后1、3d逃避潜伏期和游泳距离延长,术后1、3、7d海马AMPK表达上调,术后1、3 d p-AMPK表达上调(P＜0.05),A组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 海马AMPK水平升高是老龄大鼠脾切除术后认知功能障碍形成时机体的适应性调节机制.     

七氟醚对老年大鼠术后认知功能及海马miR-132表达的影响

目的 探讨七氟醚对老年大鼠认知功能及海马miR-132表达的影响.方法 雄性SD大鼠60只,18～20月龄,行水迷宫训练5d后,按随机数字表法分为对照组(C组)和七氟醚组(S组),每组30只.S组2％七氟醚,C组纯氧处理后6h、1d、3d、7d进行水迷宫实验,记录逃避潜伏期和游泳总距离.各时点水迷宫实验结束后处死大鼠取海马组织,采用实时定量聚合酶链反应检测海马组织内miR-132的表达.结果 与C组比较,S组麻醉后6h、1d、3d、7d水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显延长,海马miR-132表达(0.41±0.03、0.43±0.04、0.51±0.03、0.62±0.05)明显降低(P＜0.05).S组内,与麻醉后6h比较,麻醉后1d及以后时间点水迷宫测试的逃避潜伏期[(69±10)、(61±11)、(43±9)s]明显缩短(P＜0.05);麻醉后3、7d水迷宫测试的游泳总距离[(1 424±198)、(1 052±134) cm]明显缩短(P＜0.05),海马miR-132的表达明显增加(P＜0.05).S组内,麻醉后7d与麻醉后各时间点比较,水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显缩短(P＜0.05),海马miR-132的表达明显增加(P＜0.05).结论 七氟醚可导致老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与其抑制海马组织内miR-132表达有关.     

去势雌性大鼠海马区Tau蛋白Alzheimer样磷酸化的变化

目的探讨去势雌性大鼠海马区Tau蛋白Alzheimer样磷酸化的变化。方法建立大鼠双侧卵巢切除(OVX)模型,分别于术后1、2、3、4和8周取大鼠海马组织,WesternBlot检测Tau蛋白的磷酸化程度。结果与假手术组相比,OVX组去势后4和8周在海马区的PHF1位点异常磷酸化Tau蛋白显著升高(P<0.01),而相同时间点和相同区域的Tau1位点非磷酸化Tau蛋白的水平显著降低(P<0.01)。结论雌激素缺乏可导致雌性大鼠海马区Tau蛋白Alzheimer样过度磷酸化。     

石杉碱甲预处理对老年大鼠七氟醚麻醉后认知功能的影响

目的 探讨石杉碱甲(huperzine A,Hup A)预处理对老年大鼠七氟醚麻醉后认知功能的影响. 方法 24只健康SD大鼠,采用随机数字表法分为两组:对照组(C组),HupA组(H组),每组12只.H组老年大鼠每日1次经口灌胃0.15 mg/kg剂量的Hup A,C组经口灌胃等量蒸馏水,两组大鼠均吸入3％七氟醚100 min/d,连续5d.采用Morris水迷宫实验及旷场试验测定大鼠认知功能,记录逃避潜伏期、穿越平台次数、跨格次数、直立次数及中央格停留时间. 结果 H组老年大鼠逃避潜伏期较C组缩短,穿越平台次数[(2.3±0.8)次]较C组[(2.0±0.5)次]增多,差异均有统计学意义(P＜0.05);H组老年大鼠跨格次数[(66±18)次]较C组[(38±9)次]增多,中央格停留时间[(15±4)s]较C组[(35±8)s]明显减少,直立次数[(8.2±2.1)次]较C组[(4.0±1.3)次]明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 Hup A预处理可以改善老年大鼠七氟醚麻醉后认知功能.     

右美托咪定对老龄大鼠术后海马脑源性神经营养因子及胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的评价右美托咪定对老龄大鼠术后海马脑源性神经营养因子(BDNF)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)的影响。方法老年雄性SD大鼠144只,18~20月龄,体重450~500g,随机分为三组:正常对照组(C组,n=48),骨折复位模型组(M组,n=48)和右美托咪定组(D组,n=48)。D组于骨折复位手术开始前20min输注右美托咪定负荷剂量3.0μg/kg,之后以3.0μg·kg-1·h-1持续输注至手术结束。术前1d、术后1、3、7d进行Morris水迷宫测试,记录逃避潜伏期和游泳总距离。各时点水迷宫实验结束后处死取海马组织,采用ELISA法检测海马BDNF和ChAT的含量,采用免疫组化法测定海马BDNF和ChAT的表达。结果与C组比较,M组术后1、3d和D组术后1d水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显延长,海马BDNF和ChAT的表达明显降低(P0.05)。与M组比较,D组术后1、3d水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显缩短,而海马BDNF和ChAT的表达明显增加(P0.05)。与术后1d比较,M组术后7d和D组术后3、7d水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显缩短,而海马BDNF和ChAT的表达明显增加(P0.05)。结论右美托咪定可改善老龄大鼠术后认知功能,其机制可能与其促进海马BDNF及ChAT的释放有关。     

异丙酚麻醉对电休克诱发抑郁大鼠海马Tau蛋白过度磷酸化的影响

目的 探讨异丙酚麻醉对电休克诱发抑郁大鼠海马Tau蛋白过度磷酸化的影响.方法 选取Open-field测试总分为30～120分的雌性WKY大鼠32只,24周龄,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=8):对照组(C组)、异丙酚组(P组)、电休克组(E组)和异丙酚+电休克组(PE组).C组腹腔注射生理盐水5ml;P组腹腔注射100 mg/kg异丙酚5ml;E组腹腔注射生理盐水5ml,15 min后施行电休克治疗;PE组腹腔注射100 mg/kg异丙酚5ml,15 min后施行电休克治疗.电休克治疗结束24h时,采用Morris水迷宫测定大鼠认识功能.认知功能测试完毕6h时,处死大鼠,取海马组织,检测磷酸化Tau蛋白的表达.结果 与C组比较,P组、E组和PE组逃避潜伏期延长,游泳时间缩短,P组海马磷酸化Tau蛋白表达下调,E组海马磷酸化Tau蛋白表达上调(P＜0.05),PE组海马磷酸化Tau蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);与E组比较,PE组逃避潜伏期缩短,游泳时间延长,海马磷酸化Tau蛋白表达下调(P＜0.05).结论 异丙酚麻醉改善电休克诱发抑郁大鼠认知功能障碍的机制与抑制海马Tau蛋白过度磷酸化有关.     

帕金森病患者行下腹或下肢手术全麻苏醒质量及认知功能的变化

目的观察帕金森病患者行下腹或下肢手术全麻苏醒苏醒质量及认知功能的变化。方法选择择期在全身麻醉下行下腹或下肢手术的帕金森病患者26例(PD组)和在全身麻醉下行下腹或下肢手术的无帕金森病病史患者26例(NP组),于术前1d采用简易精神状态量表(MMSE)对认知功能评分。两组均使用咪达唑仑、芬太尼、顺阿曲库铵、丙泊酚行麻醉诱导,术中丙泊酚以5mg·kg-1·h-1和瑞芬太尼6μg·kg-1·h-1为起始输注速度,并根据BIS和MAP调节两种麻醉药物输注速度维持适宜麻醉深度,记录低血压发生次数和升压药物用量。术毕停止丙泊酚和瑞芬太尼的输注,观察并记录首次睁眼时间、拔管时间、达OAA/S评分5分时所需时间及术后24h的MMSE评分。结果 NP组术中瑞芬太尼和丙泊酚用量明显多于PD组(P0.05),NP组血压下降次数和去氧肾上腺素用量明显少于PD组(P0.05);NP组的首次睁眼时间、拔管时间、达OAA/S评分5分时所需时间明显短于PD组(P0.05);NP组术后24h的MMSE评分明显高于PD组(P0.05)。多元线性回归分析显示:帕金森病(β=0.513,t=3.350,P0.05)是影响达到OAA/S 5分所需时间的显著预测变量(R2=0.256,回归模型F=3.163,P0.05)。其余因素均为不显著的预测变量。帕金森病(β=0.468,t=3.203,P0.05)也是影响术后24h MMSE评分的显著预测变量(R2=0.325,回归模型F=4.430,P0.05)。其余因素均为不显著的预测变量。结论帕金森病患者较非帕金森病患者的全身麻醉苏醒时间延长,术后24h认知功能显著低于非帕金森病患者。     

乌司他丁复合帕瑞昔布钠对老年患者髋关节置换术后早期细胞免疫及认知功能的影响

目的探讨乌司他丁联合帕瑞昔布钠对老年患者单侧髋关节置换术后早期细胞免疫及认知功能的影响。方法选择择期行单侧髋关节置换术患者100例,性别不限,年龄65~80岁,随机分为四组:乌司他丁组(W组)、帕瑞昔布钠组(P组、乌司他丁联合帕瑞昔布钠组(WP组)和生理盐水对照组(C组),每组25例。W组于切皮前、手术结束即刻分别给予乌司他丁5 000U/kg;P组于麻醉诱导前给予帕瑞昔布钠40mg,之后40mg/12h,共6次;WP组于切皮前、手术结束即刻分别给予乌司他丁5 000U/kg,30min内泵注完毕,并于麻醉诱导前给予帕瑞昔布钠40mg,之后40mg/12h,共6次;C组于相同时点给予等量生理盐水。记录患者手术时间、术中出血量、自体血输注量和芬太尼总用量;于入室前(T_0)、术毕(T_1)、术后6h(T_2)、24h(T_3)及72h(T_4)采集外周静脉血,采用流式细胞术检测血T淋巴细胞(CD3~+、CD4~+、CD8~+),计算CD4~+/CD8~+值,同时采用ELISA法测定各时点血清IL-6、TNF-α、神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度和S100β蛋白含量。分别于T_0、T_4和术后7d(T5)时对患者进行简易智能状态量表(MMSE)评分。结果与T_0时比较,C、W和P组T_1~T_4时CD3~+、CD4~+细胞含量及CD4~+/CD8~+值明显降低,IL-6和TNF-α浓度明显升高,T_2、T_3时NSE浓度和S100β蛋白含量明显升高(P0.05);T_2、T_3时W和P组,T_1~T_4时WP组CD3~+、CD4~+细胞含量及CD4~+/CD8~+值明显高于,IL-6、TNF-α、NSE浓度和S100β蛋白含量明显低于C组(P0.05);T_2、T_3时WP组CD3~+、CD4~+细胞含量及CD4~+/CD8~+值明显高于,IL-6、TNF-α、NSE浓度和S100β蛋白含量明显低于W和P组(P0.05)。与T_0时比较,T_4、T5时C组MMSE评分明显降低(P0.05);T_4时W、P和WP组MMSE评分明显高于C组(P0.05);T_4时WP组患者MMSE评分明显高于W和P组(P0.05)。结论乌司他丁联合帕瑞昔布钠可改善老年患者单侧髋关节置换术细胞免疫功能及认知功能,较单独使用效果更好。     

全凭静脉麻醉与全程吸入麻醉对老年腹部手术患者心脏功能的影响

目的观察全凭静脉麻醉与全程吸入麻醉对老年患者行腹部手术时心脏舒缩功能的影响。方法择期行开腹肠道手术的老年患者40例,男23例,女17例,年龄65～80岁,ASAⅡ或Ⅲ级,随机分为两组:全凭静脉麻醉组(P组)和全程吸入麻醉组(S组),每组20例。P组诱导后泵注丙泊酚和瑞芬太尼维持麻醉,S组诱导后吸入七氟醚维持麻醉,两组均于诱导后静脉泵注右美托咪定0.5～1.0μg·kg~(-1)·h~(-1)。记录插管后即刻(T_0)、切皮后10 min(T_1)、手术结束时(T_2)的左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(FS)、经二尖瓣舒张早期血流速度(E)峰值及其与舒张晚期血流速度(A)峰值及其的比值(E/A)和E峰减速时间(EDT);记录术后不良反应发生情况。结果与T_0时比较,T_1时两组LVEF、FS、E峰值、E/A差异无统计学意义,T_2时两组LVEF、FS差异无统计学意义;T_2时S组E峰值、E/A明显升高,EDT明显缩短(P0.05)。T_2时S组E峰值、E/A均明显高于P组,EDT明显短于P组(P0.05)。两组均有2例(10%)恶心呕吐。结论与全凭静脉麻醉比较,全程吸入七氟醚可以更好地保护心脏舒张功能。