自拟抗弓形虫汤对小鼠急性弓形虫感染的治疗机制研究

目的 观察自拟抗弓形虫汤对急性弓形虫感染小鼠的治疗作用及其作用机理。方法 将昆明雌性小鼠随机分三组（A中药抗弓形虫汤组、B复方SMZ组、C模型组），将弓形虫RH株速殖子感染小鼠，2h后灌胃给药，A组给予中药配伍0．5ml（18mg／m1），B组给予0．5ml复方SMZ悬浊液（12mg／m1），治疗组疗程14d，观察至30d，记录小鼠存亡情况；肝组织病理切片采用HE染色；在感染后第3d、6d和第20d用羟胺法分别检测各组小鼠的血清、心、肝和肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果 A（16．55d）、B（23．20d）组小鼠存活时间均较C（7．85d）组差异有极显著性（P〈0．01），其中，A组与B组比较，差异有显著性（P〈0．05）；病理检查A组及B组有不同程度肝细胞肿大、炎症细胞浸润等病变，但与C组相比损伤程度明显减轻，差异有极显著性意义（P〈0．01），A组与B组比较，差异有显著性（P〈0．05）；A、B组小鼠各部位SOD活性较C组差异有极显著性（P〈0．01），但A组与B组比较，差异无显著性（P〉0．05）。结论 自拟抗弓形虫汤有显著的抗弓形虫作用，它从推迟小鼠死亡时间，保护肝细胞，增强抗氧化损伤等方面发挥重要作用。     

弓形虫热休克蛋白70诱导建立弓形虫感染小鼠急性肝损伤模型研究

[目的]通过给弓形虫感染小鼠腹腔注射给予弓形虫热休克蛋白70(T.g.HSP70)建立急性肝损伤模型,观察T.g.HSP70诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤的作用机制.[方法]将20只KM雌性小鼠随机分为正常对照组、感染组、T.g.HSP70组及模型组(感染+T.g.HSP70).于弓形虫感染第7d,腹腔注射给予小鼠T.g.HSP70.次日处死小鼠,取血液,分离血清,取肝脏组织.测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.[结果]模型组小鼠ALT,AST,MDA水平较其他组明显升高(P<0.01),SOD水平明显降低(P<0.05).[结论]T.g.HSP70可诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤,其机制可能与T.g.HSP70加重弓形虫感染小鼠肝组织的脂质过氧化有关.     

常山醇提取物的小鼠体内抗弓形虫作用

[目的]探讨常山醇提取物的体内抗弓形虫作用.[方法]取健康雌性昆明种小鼠,随机分为正常组、弓形虫组、螺旋霉素组和常山醇提取物组(100 mg/kg给药).建立急性弓形虫感染模型,除正常组外均感染RH株弓形虫,给予药物治疗4 d后对小鼠腹腔内弓形虫进行计数,并测定ALT、AST、GSH和MDA含量.[结果]与弓形虫组比较,常山醇提取物组小鼠腹腔内弓形虫数量明显减少(P<0.05),血清中ALT、AST含量明显降低(P<0.05),肝匀浆中GSH、MDA含量无明显差异(P>0.05).[结论]常山醇提取物对急性弓形虫感染有治疗作用.     

牛蒡苷对弓形虫热休克蛋白70诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤的保护作用

[目的]探讨牛蒡苷(ARC)对弓形虫热休克蛋白70(T.g.HSP70)诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制.[方法]将KM雌性小鼠随机分为正常组、模型组、ARC组、磺胺嘧啶钠阳性对照(PC)组.于弓形虫感染后第4d起给予药物治疗,连续5d.感染后第7d腹腔注射给予T.g.HSP70,次日末次给药4h后采集颈动脉血处死小鼠,取肝称质量,计算肝脏指数;采用比色法测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法测定细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定血小板活化因子(PAF-AH)mRNA的表达水平.[结果]与正常组比较,模型组ALT,AST水平和肝脏指数明显升高(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,ARC组和PC组ALT,AST水平和MDA,IL-1β,TNF-α含量及PAF-AH mRNA表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性明显升高(P<0.05).ARC组与PC组上述各项指标间差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]ARC对T.g.HSP70诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化及抑制炎症介质的产生有关.     

小鼠过继转移致敏小肠IEL抗弓形虫感染

目的研究分离自弓形虫RH株速殖子经口感染小鼠后不同时间点的小肠上皮内淋巴细胞(intraepitheliallymphocyte,IEL)过继转移抗弓形虫感染作用,探讨其作用机制。方法BALB/c鼠经口感染弓形虫速殖子5×104个/只或未感染,作为供体提供IEL。同品系受体鼠分为实验组(IEL7组、IEL9组、IEL11组、IEL13组和IEL15组)和对照组(IEL0组),每组6只小鼠。受体鼠经尾静脉分别接受分离自供体鼠经速殖子感染后第7、9、11、13、15天的致敏IEL或未致敏的IEL3×105/0.2ml只。各组小鼠过继转移后第4天,用弓形虫速殖子灌胃攻击,攻击后第13天分离纯化脑、肺、脾组织弓形虫速殖子并计数,测定肠液IgA含量。结果致敏IEL过继免疫可使受体鼠脑、肺、脾组织内弓形虫速殖子数显著减少,接受感染后第13天IEL的小鼠组织内速殖子数减少最为显著(P<0.01)脑、肺和脾组织内速殖子数比对照组分别减少81.13%,58.43%和70.97%。致敏IEL过继转移使肠道IgA水平升高,IEL11组和IEL13组显著高于IEL0组(P<0.01)。结论致敏IEL过继转移能上调肠道黏膜的免疫应答,导致黏膜特异性IgA分泌增加,诱导黏膜抗体的保护性免疫应答。IEL的这种保护作用具有致敏的时间依赖性,感染后第13天分离的致敏IEL对弓形虫感染具有最大的保护作用。     

（＋）-松萝酸治疗小鼠急性弓形虫病的初步研究

目的 探索治疗弓形虫病的有效药物;初步观察( )-松萝酸治疗小鼠急性弓形虫病的疗效.方法 小鼠腹腔接种RH株弓形虫速殖子500个,建立急性弓形虫病动物模型;设立( )-松萝酸治疗组(50mg/kg,每日2次)、乙酰螺旋霉素治疗组(50mg/kg,每日2次)、DMSO及淀粉对照组(含1%DMSO的5%淀粉溶液0.5ml,每日2次),分别于感染2h后灌胃,每日2次,连续10d,观察对比疗效.结果 50mg/kg( )-松萝酸治疗组明显延长了小鼠的存活时间,最长存活时间达15d,平均存活时间为10.63d;而螺旋霉素治疗组小鼠最长存活时间为10d,平均为7.37d;对照组仅5.42d.( )-松萝酸治疗组与螺旋霉素治疗组及对照组之间均有显著性差异.结论 ( )-松萝酸具有治疗急性弓形虫病的潜在作用,并且疗效优于螺旋霉素.     

霍乱毒素佐剂联合弓形虫ESA鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染作用

目的 观察霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂和弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用。方法 6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为3组,每组20只。分别用PBS 20μl、ESA 20μg或CT 1.0μg+ESA 20μg每只滴鼻免疫2次,间隔2周。末次免疫后14 d,用4×104个弓形虫速殖子每只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康及死亡情况。速殖子攻击后30 d,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子。结果 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠的健康状况明显好于PBS组和ESA组,存活率(95%)也显著高于PBS组(55%)。与PBS组相比,CT+ESA组肝和脑组织内速殖子数分别减少了80.19%(P0.001)和78.24%(P0.005)。CT作为佐剂联合ESA滴鼻免疫小鼠诱导了高水平的黏膜免疫应答和系统免疫应答。结论 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答可有效抵抗弓形虫速殖子攻击。     

脂糖舒对D-半乳糖衰老模型小鼠器官指数和自由基代谢的影响

目的观察脂糖舒对D-半乳糖衰老模型小鼠器官指数和自由基代谢的影响。方法采用D-半乳糖制备小鼠衰老模型,同时灌胃不同剂量脂糖舒(Ⅰ组5g/kg、Ⅱ组10g/kg),1次/d、连续6周,并取健康小鼠10只作正常对照。6周末检测各组小鼠的器官指数和血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果模型组小鼠除心肌外,肝、脑、肾等器官指数明显降低,血浆SOD活性显著降低,MDA含量显著升高(较正常组P<0.05或0.01);而脂糖舒二剂量组均能够提高小鼠的脑指数和肾指数,提高血浆SOD活性,降低MDA含量(较模型组P<0.05或0.01),但脂糖舒二剂量组间心、肝、脑、肾指数及血浆MDA含量无显著差异(P>0.05),而血浆SOD活性差异显著(P<0.01)。结论脂糖舒具有一定的延缓衰老作用。     

自拟弓形虫汤对弓形虫感染小鼠脾细胞IL-2的影响

目前,弓形虫病的治疗仍以磺胺嘧啶或乙胺嘧啶为首选药物,但其毒副作用大,且复发率较高,使用受到限制[1]。迄今尚无理想的抗弓形虫的药物。因此,迫在眉睫的是要找到一种新的高效低毒,能广泛应用的抗弓形虫的药物。本实验以黄芪、白术、青蒿、白花蛇舌草、槟榔、甘草等中药自拟汤剂进行小鼠体内抗弓形虫感染脾细胞分泌IL-2进行研究,现报道如下:1材料与方法1.1材料1.1.1动物健康昆明小鼠,雌性,体重18～22g,由江西中医学院动物实验中心提供。1.1.2虫株弓形虫RH强毒株自中山大学中山医学院寄生虫学教研室引进。1.1.3药物中药购自江西省中医院,…     

重组弓形虫SAG1蛋白免疫小鼠抗弓形虫攻击保护作用

目的 评价重组弓形虫表面抗原1(rTgSAG1)蛋白皮下免疫小鼠诱导的免疫应答及抗弓形虫攻击的保护作用. 方法 6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为5组,分别以100 μl PBS、20 μg、40 μg、60 μg或80 μg rTgSAG1(溶于100 μl PBS)/只皮下注射免疫小鼠3次,间隔14 d.末次免疫后14 d,以RH株弓形虫速殖子1×104个/只灌胃攻击所有小鼠,每日观察小鼠健康状况.攻虫后第28天,处死小鼠.分离并计数肝和脑组织内速殖子,分离并计数脾淋巴细胞和小肠上皮内淋巴细胞(IEL),ELISA法检测血清IgG和小肠冲洗液IgA抗体水平. 结果攻虫后6-14 d,小鼠出现不同程度的被毛粗糙、采食饮水减少,PBS组存活率最低(33.3%),40 μg组最高(75%).40 μg组肝(79.60)和脑组织内荷虫数(16.88)低于PBS组(分别为94.43和19.48)(均P<0.05),脾淋巴细胞数(10.31)和IEL数(4.25)高于PBS组(6.24,1.64)(均P<0.01);40 μg组(P<0.01)、20 μg组和60 μg组(P<0.05)血清IgG抗体水平显著高于PBS组;各组肠液IgA抗体水平无明显变化. 结论 rTgSAG1蛋白皮下免疫小鼠能诱导产生抗弓形虫感染保护性免疫,40 μg为免疫的最适剂量.     

不同剂量熊胆粉对小鼠常压下耐缺氧能力及抗氧化作用的影响

目的研究熊胆粉对小鼠常压下耐缺氧能力及抗氧化作用。方法将小鼠随机分为高剂量组(2.8 g/kg),中剂量组(1.4 g/kg),低剂量组(0.7 g/kg),红景天组(2.8 g/kg)及空白给药组,连续灌胃给药15 d,每日1次,观察各组小鼠常压下耐缺氧时间及血清、心、肝、脑组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)活力及丙二醛(Model driven architecture,MDA)含量。结果高中剂量组常压下耐缺氧时间得到明显延长,高中低剂量组均对提高小鼠肝脏内SOD、GSH-PX酶活力及降低MDA含量有明显作用,高剂量组对提高小鼠血清、心脏、脑组织中SOD、GSH-PX酶活力及降低MDA含量有明显效果。结论通过动物实验初步确定熊胆粉对小鼠常压下耐缺氧能力及抗氧化能力有一定的提高作用。     

黄芪在体内抗氧化作用的实验研究

目的:探讨黄芪水提物抗氧化、清除体内自由基的生物活性。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组和黄芪低、中、高剂量组,每组10只。连续灌胃给药7天,采血后,迅速取出肝组织,制成匀浆。测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)含量。结果:黄芪可减少MDA含量,增强SOD活力。结论:黄芪可有效清除体内的氧自由基,具有减少氧化应激引起的器官损伤和延缓机体衰老的作用。     

大蒜素对弓形虫感染小鼠黏膜免疫应答的影响

目的通过对大蒜素治疗弓形虫感染小鼠黏膜部位SIgA、IgG含量测定，研究黏膜在弓形虫感染免疫中所起作用。方法将雌性小鼠分成治疗、感染和对照3组，用5×10^4个，只RH株弓形虫速殖子经口感染小鼠后大蒜素治疗，每天1次，于治疗后第0．2、4、6、8、10、12周断颈处死，冲洗上呼吸道、下呼吸道、肠道、阴道、子宫黏膜，夹心ELISA法测定SIgA、IgG抗体含量。结果在观察的时间段内SIgA治疗组高于对照和感染组，治疗后4、6、8周差异具有显著性（P〈0．05）。结论大蒜素治疗经口感染弓形虫速殖子小鼠，能提高黏膜、特别是消化道黏膜产生SIgA抗体，保护机体抵御病原体感染。     

三叶青多糖抗肝损伤作用的研究

目的测定三叶青中多糖的含量,并研究三叶青多糖抗四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤的作用。方法采用硫酸-苯酚法测定三叶青多糖的含量,然后将ICR小鼠随机分为5组,即空白组、模型对照组、阳性对照组,三叶青多糖高、低剂量组,分别灌胃等容积的生理盐水、联苯双酯和三叶青多糖,给药一段时间后给小鼠腹腔注射四氯化碳致其肝损伤,检测其血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果三叶青中多糖的含量为8.69%;与模型组比较,三叶青多糖治疗组ALT、AST及MDA含量均明显降低(P<0.01),而SOD水平显著提高(P<0.01)。结论三叶青多糖对CCl4造成的小鼠急性肝损伤具有阻抗作用。     

生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清SOD活性和MDA含量的影响

目的：观察生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的影响。方法：雄性Balb/cd,鼠随机分为4组：生黄合剂组（注射CVB3后灌胃给与生黄合剂），抗病毒口服液组（注射CVB3后灌胃给与抗病毒口服液）、病毒组（仅注射CVB3）和正常组；分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测各组小鼠血清SOD活性和MDA含量。结果：给药后第10d，生黄合剂组小鼠的生存率明显高于病毒对照组和抗病毒口服液组（P〈0．01）；生黄合剂可明显提高病毒性心肌炎小鼠血清中SOD活性和降低MDA含量（P〈0．01），且效果优于抗病毒口服液（P〈0．01）。结论：生黄合剂可提高病毒性心肌炎小鼠的抗氧化能力，对病毒性心肌炎有一定的治疗作用。     

抑制剂对弓形虫感染鼠黏膜免疫影响

目的通过对地塞米松抑制小鼠感染弓形虫后黏膜部位SIgA含量测定,研究黏膜在弓形虫感染免疫中所起作用。方法将小鼠分成正常对照组（不进行特殊处理）,感染组（经口感染5×10^4个/只RH株弓形虫速殖子小鼠）和抑制感染组（在接种前48 h开始肌肉注射地塞米松2 mg/kg/d,48 h后用5×10^4个/只RH株弓形虫速殖子经口感染小鼠）,分别在0 d、5 d、10 d、15 d、20 d、30 d、50 d处死小鼠,冲洗上呼吸道、下呼吸道、肠道黏膜,夹心ELISA法测定SIgA抗体含量。结果在观察的时间段内SIgA抑制感染组低于感染组,分别在5 d、10 d、15 d、20 d差异具有显著性（P〈0.05或0.01）。结论地塞米松抑制组小鼠感染弓形虫黏膜部位SIgA含量降低,特别是消化道黏膜减少明显,地塞米松对黏膜免疫有抑制作用。     

西梅汁抗氧化作用动物实验研究

目的:研究西梅汁对自然衰老小鼠抗氧化能力的影响。方法:选用老龄小鼠作为自然衰老模型,按体重和血中MDA水平随机分为1个老龄模型组和3个西梅汁剂量组。灌胃45d后,对各实验组的血中MDA含量、SOD活性和GSH-Px酶活性进行测定及比较。结果:西梅汁可显著降低血液中MDA的含量,提高SOD和GSH-Px酶活性。结论:摄入适量的西梅汁能有效增强老龄小鼠体内的抗氧化能力,有助于延缓小鼠的自然衰老。     

枸杞多肽对D-半乳糖诱导小鼠的抗衰老作用及其可能机制

目的 研究枸杞多肽对D-半乳糖（D-gal）衰老模型小鼠的影响及其可能作用机制。方法 ICR小鼠60只,随机分为正常对照组、衰老模型组、 枸杞多肽200,400, 800 mg/（kg·d）剂量组和100 mg/（kg·d）维生素E（VitE）组。除正常组外均采用D-gal 10 mg/kg颈背部皮下注射,每日1次,连续注射5周,同时枸杞多肽和VitE组按20 ml/（kg·d）灌胃给药。观察各组小鼠的行为学及学习记忆改变,并于5周后检测小鼠血清、心脏、肝脏、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量及端粒酶活性。结果 与正常对照组相比,衰老模型组小鼠体重增加明显减少,小鼠跳台错误次数明显增多,小鼠血清、心脏、肝脏和脑SOD和端粒酶活性降低,MDA含量增加（P<0.01）。与模型组相比,枸杞多肽组和VitE组小鼠体重增加升高（P<0.01）,小鼠跳台错误次数减少（P<0.05）,小鼠血清、心脏、肝脏和脑组织SOD活性升高,MDA含量减少（P<0.05）;枸杞多肽200 mg/(kg·d)剂量组及VitE组小鼠血清端粒酶活性有升高的趋势,但差异不显著;400和800 mg/(kg·d)剂量组小鼠血清和心脏端粒酶活性升高（P<0.01）,VitE组小鼠心脏端粒酶活性也明显升高;而各治疗组小鼠肝脏和脑组织端粒酶活性无明显变化。结论 枸杞多肽对D-gal诱导衰老模型小鼠有抗衰老作用,其机制可能与提高小鼠血清、心脏、肝脏和脑组织SOD活性,减少MDA含量,以及提高血清和心脏端粒酶活性有关。     

应用氯化锶对小鼠卵母细胞孤雌活化的研究

根据弓形虫P30基因序列设计二对引物分别进行了PCR一次扩增和套式扩增，结果这两对引物在一次扩增和套式扩增中分别出现预期的扩增片段914bp,522bp和522bp；套式扩增出现的条带比一产供销扩增出现的条带亮度明显增强，提示套式扩增比一次扩增具有更高的敏感性，用外引物进行扩增后，最低可以检测到1pg的弓形虫DNA，说明所建立的反应体系具有高度的敏感性。用内引物对人工感染弓形虫的ICR小鼠血液，组织进行弓形虫DNA的检测，结果均扩增出522bp的扩增带。根据B1基因序列设计的弓物进行PCR一次扩增和半套式扩增。结果均出现预期的扩增片段619bp,362bp和362bp；用半套式扩增检测感染弓形虫形虫的ICR小鼠血液，组织时可扩增出522bp的619bp,362bp和362bp；用半套式扩增检测感染弓形虫的ICR小鼠血液，组织时可扩增出522bp的扩增带，半套式扩增比一次扩增更敏感。     

复方蜂参口服液对衰老小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响

目的 探讨复方蜂参口服液对衰老小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响。方法采用多因素多水平对比研究。以小鼠碳粒廓清指数为指标观察复方蜂参口服液对小鼠单核吞噬细胞系统吞噬功能的影响，以血清和肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量为指标来评价复方蜂参口服液对小鼠抗氧化能力的影响。结果复方蜂参口服液连续灌胃给药3周后，小鼠的碳粒廓清能力明显提高。复方蜂参口服液连续灌胃6周后血清和肝SOD明显升高、MDA明显降低。结论复方蜂参口服液对衰老小鼠单核吞噬细胞系统的吞噬功能有促进作用，并且能增强衰老小鼠的抗氧化能力。