7α-O-IA-DPN:特异性碘标记阿片配体的研制和评价

目的：研制和评价新碘标阿片受体显像剂７αＯｉｏｄｏａｌｙｌｄｉｐｒｅｎｏｒｐｈｉｎｅ（７αＯＩＡＤＰＮ）。方法：选用阿片肽拮抗剂ＤＰＮ经碘代锡烷标记法成功地获得了一个原始的碘标阿片肽类似物，并对其进行理化性能、药理作用和生物学功能评价。结果：体外和体内阿片受体结合分析表明这一新的阿片配体具有非常高的亲和力（Ｋｉ＝４×１０－４μｍｏｌ／Ｌ）。注药后２０ｍｉｎ动物脑内的特异性结合占６３％，且其在脑内滞留时间较长而有利于成像。阿片抑制试验和抗痛活性研究分别反映碘标７αＯＩＡＤＰＮ可能对３种阿片受体（μ，δ，κ）都有亲和力，并保持了原有的药理特性和生物学功能。结论：碘标７αＯＩＡＤＰＮ作为新阿片受体显像剂较适于今后ＳＰＥＣＴ阿片受体研究。     

激活δ—阿片受体同时保进ACTH,β—内啡肽和催乳素...

To evaluate a possible physiological and pathological role of brain delta-opiate receptor and endogenous ligands in the control of ACTH, beta-endorphin (beta-EP) and prolactin (PRL) release, a specific agonist of the delta-opiate receptor--[D-Pen2, D-Pen5]-enkephalin (DPDPE) was microinjected into the third cerebral ventricle (1 microgram or 3 micrograms/3 microliters/rat) in conscious freely-moving male rats. Plasma ACTH, beta-EP and PRL concentrations were measured by radioimmunoassay (RIA). Our results clearly indicate that third ventricular injection of DPDPE significantly elevates plasma ACTH, beta-EP and PRL levels in comparison with control values, and that the stimulatory effects of DPDPE on the release of the three hormones are dose-related at 1 and 3 micrograms. The data suggest that activation of the delta-opiate receptor may be a mechanism behind the concomitant release of ACTH, beta-EP and PRL during stress and certain pathologic conditions.     

阿片受体不可逆配体（α—CAO）药理作用的分子学基础

阿片受体不可逆配体(α-CAO)使小鼠大脑组织内cAMP含量呈双相变化,此变化分别与α-CAO给药初期的镇痛和持续作用后的成瘾效果相一致.进一步研究证明,在给予α-CAO急性期,见小鼠大脑组织中腺苷酸环化酶活性被抑制48％,且能被纳洛酮部分拮抗,在延迟相α-CAO能使小鼠大脑组织中AC活性显著增加,可能是产生成瘾作用机制之一.成瘾形成的调节因素可能是由于CaM含量的增加.     

[~(125)碘]单碘胰岛素的标记

激素受体的研究需要既有免疫活性,又有完好的生物活性的标记激素,70年代中期,国外开始研究[~125碘]单碘胰岛素的标记。1979年,Linde等用乳过氧化酶法标记,应用长柱聚丙烯酰胺凝胺圆盘电     

氨胺—T法和Iodogen法碘标记抗体的比较

本文比较了氯胺－Ｔ法和Ｉｏｄｏｇｅｎ法碘化标记单克隆抗体ＢＡＣ５在不同反应条件下的标记率，标记反应的时间与抗体免疫活性之间的关系。结果表明：这两种标记方法的最佳ＰＨ值为７－８；反应体积在１００－２００μｌ范围内均可以得到较好的结果；氯胺－Ｔ法反应３ｍｉｎ标记率已接近最大值，而Ｉｏｄｏｇｅｎ法要在１０ｍｉｎ后才有最大的产额。结果还表明：在本实验条件下，氨胺－Ｔ法和Ｉｏｄｏｇｅｎ法的反应时间分别小于２     

k—阿片受全的负性肌力作用及其对β—肾上腺素受体的调节

目的　研究 U 5 0 ,488H (选择性κ-阿片受体激动剂 )对心脏的负性肌力作用特点及对β-肾上腺素受体 (β- AR)的调节作用 .方法　 1整体动物实验 ,观察 U5 0 ,488H对家兔心率 (HR)、动脉压 (ABP)、左心室内压 (L VP)及其微分 (±dp/ dtmax)的影响 ;2利用 L angerdoff装置离体灌流大鼠心脏 ,观察 U 5 0 ,488H对 HR,L VP和± dp/ dtmax及β- AR正性肌力作用的影响 .结果　 1U5 0 ,488H可显著降低家兔的 HR,ABP,L VP及± dp/ dtmax;2 U5 0 ,488H对离体大鼠心脏的HR,ABP,L VP及± dp/ dtmax有降低作用 ;3在 U 5 0 ,488H存在的情况下 ,激动 β- AR所引起的 L VP的升高可被显著抑制 .结论　 1U5 0 ,488H对心脏具有负性肌力作用 ;2 U5 0 ,488H可抑制β- AR的正性肌力作用 ,提示κ-阿片受体对β-AR具有负性调节作用 .     

一种新的阿片受体显像剂125I-7α-O-碘烷-特培洛菲的制备及生物学评价

198 5年Frost等[1] 开始研制用碳 [11C]标记的甲芬基太尼 (11C carfentanil,11C CFN )和正电子发射断层显像术 (PET)首次对人脑阿片受体进行显像研究 ,之后陆续报道了11C 特培洛菲 (11C deprenorphine ,11C DPN ) [2 ] ,11C 哌替啶 (11C pethidine) [3] 及放射性标记的吗啡、海洛因和可待因等适用于PET的阿片受体配体 ,但因在恒河猴上或人体中的研究发现它们的特异性 /非特异性摄取比值较低而放弃或限制了其进一步的研究。不少学者进行了氟 [18F]标记的阿片配体的应用研究 ,如18F cyclofoxy用于正常人和癫痫疾患的研究[4 ] ,11C …     

放射性碘标记格列本脲的初步研究

目的:获得髙比活度的核素标记药物.方法:试用无水碘标记法标记磺脲类药物格列本脲,并应用放射配体结合分析法测定大鼠心肌组织膜磺脲类药物受体的特性.结果:所获得的125I-格列本脲放射比活度较高(111 GBq/mmol),放化纯度为95.6%,125I-格列本脲可和大鼠心肌组织膜上磺脲类药物受体结合.结论:无水碘标记法是非水溶性物质核素碘标记法的理想方法之一.     

碘—淀粉吸光系数标准化法检测α—淀粉酶的实验研究

为达到α－淀粉酶（α－ＡＭＳ）测定的最好的准确性和精密度，最大线性范围及与酶法的可比性，进行了碘－淀粉吸光系数标准化法测定淀粉酶的实验研究。底物浓度改为０．７９ｇ／Ｌ，底物缓冲液以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．０，３７℃，５０ｍｍｏｌ／Ｌ）为缓冲剂，并加入２．５ｍｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２和１００ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ以保证对α－ＡＭＳ的激活作用，酶促反应时间选为５ｍｉｎ，测定波长选定为７００（或８００／     

特异性阿片受体μ,κ和δ拮抗剂在IL—1β所致体温升高中的作用

下丘脑视前区前部（ＰＯＡＨ）是经典的体温调控中枢，并存在有阿片受体。本研究旨在了解细胞介素ＩＬ－１β所致的体温升高是否与产生的内源性阿片有关，以及通过何种类型的阿片受体介导此升体温效应。研究使用雄性Ｓ－Ｄ大鼠，于自由状态下向其ＰＯＡＨ区微量注射ＩＬ－１β，注射前３０ｍｉｎ先向该区分别注射特异性阿片受体μ的拮抗剂ＣＴＡＰ，受体κ的拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ，受体δ的拮抗剂ＮＴＩ以及通常的阿片受体拮抗剂Ｎａｌ，用Ｓａｌ做对照。结果：ＩＬ－１β单独给药引起剂量相关的体温升高；经ＣＴＡＰ或者ＮＴＩ处理后，使ＩＬ－１β所致的体温升高作用减弱；Ｎａｌ能完全阻断ＩＬ－１β的升体温效应；而ｎｏｒ－ＢＮＩ对ＩＬ－１β的升体温效应无影响。     

pH对心脏к—阿片受体调节Ca^2＋瞬变作用的影响

目的　研究 p H对κ-阿片受体调节心肌细胞内钙瞬变作用的影响 .方法　用光谱荧光法 ,以 Fura- 2为 Ca2 + 指示剂测定大鼠单个心肌细胞电刺激引起的钙瞬变 ,观察激动 κ-阿片受体对钙瞬变的影响及在不同 p H值时该作用的变化特点 .结果　当细胞外液 p H为 7.4时 ,U5 0 ,4 88H(κ-阿片受体选择性激动剂 )在 10μmol· L- 1 ～ 30μmol· L- 1 浓度范围内剂量依赖性地降低心肌细胞的钙瞬变 ,该作用具有时间依赖性 .当细胞外液的 p H为 6 .8时 ,U5 0 ,4 88H的作用曲线明显右移 ,表明其作用减弱 .当细胞外液的 p H为 8.0时 ,U5 0 ,4 88H的作用曲线明显左移 ,而且其最大效应提前发生 ,表明U5 0 ,4 88H的作用被加快和加强 .结论　 p H对κ-受体介导的钙反应具有调节作用 ;临床酸化血液可能对阿片中毒者具有抗毒效应 ,而碱化血液可能会加重阿片类药物的毒性作用     

氚标记阿片受体配基N-烯丙基-6,14-内乙烯撑基-7α-二(β-氯乙基)胺甲基四氢奥利文的制备

N-烯丙基-6,14-内乙烯撑基-7α-二(β-氯乙基)胺甲基四氢奥利文(简称A-α-CMO)是新设计合成的阿片受体不可逆配基。本文以蒂巴因为原料通过八步有机合成反应制得A-α-CMO的炔丙基前体(Ⅵ),然后通氚气部分还原反应制备~3H-A-α-CMO,经氚核磁共振测定,氚标记位置在N-烯丙基上。纯化后,~3H-A-α-CMO的放化纯度为96％以上,放射性比度为1.332TBq/mmol,初步放射受体分析显示,特异结合与非特异结合之比为5.6:1。     

rhG—CSF的^125I标记及其大鼠药代动力学

制备ｒｈＧ－ＣＳＦ的＾１２５Ｉ标记物，研究其大鼠的药代动力学。方法；采用氯胺Ｔ氧化法制备＾１２５Ｉ－ｒｈＧ－ＣＳＦ，并利用对大鼠进行静注３种剂量的药物代谢动力学试验。结果：＾１２５－Ｉ－ｒｈＧ－ＣＳＦ放射性比度为１３９１２０ＧＢｑ／ｍｍｏｌ，放射化学纯大于９５％。     

α-银环蛇毒素的分离提纯和碘标记

本文介绍了α-银环蛇毒素的分离提纯、碘标记和鉴定。用羧甲基葡聚糖C-50离子交换层析和葡聚糖G-25层析,从湖南银环蛇毒液中制备出纯α-银环蛇毒素。均质α-银环蛇毒素是用羧甲基纤维素CM-32重层析纯α-银环蛇毒素(第3峰)而获得。 用氯胶-T法进行125~I标记α-银环蛇毒素。经Sephadex G-25柱层析分离纯化,产品放射性比度为90～100Ci/mM,标记率40～50％,蛋白回收率40～60％,游离碘含量小于3％。用测定N-末端氨基酸,氨基酸成分,等电点和聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯α-银环蛇毒素的鉴定。以小白鼠毒性,神经肌肉阻断作用和结合胆硷能受体等测定α-银环蛇毒素的生物活性。     

新型阿片受体不可逆结合的激动剂—7α-二(β-氯乙基)胺基-6,14-乙烯撑基-四氢奥利文的合成

我们设计和合成了一个新的亲和标记配基:7α-二(β-氯乙基)胺基-6,14-乙烯撑基-四氢奥利文(简称α-CAO)。镇痛试验表明它的活性为吗啡的2～7倍,并具有作用时间长和毒性低等优点。经抑制豚鼠回肠纵肌(GPI)和小鼠输精管(MVD)收缩试验以及大鼠脑(去小脑)P_2膜制备的亲和力试验,发现其分别是吗啡的3、12和21倍,通过洗涤和纳洛酮反转试验证实α-CAO为阿片受点不可逆结合的激动剂。     

氨胺－T法和Iodogen法碘标记抗体的比较

本文比较了氯胺－Ｔ法和Ｉｏｄｏｇｅｎ法碘化标记单克隆抗体ＢＡＣ５在不同反应条件下的标记率，标记反应的时间与抗体免疫活性之间的关系。结果表明：这两种标记方法的最佳ｐＨ值为７～８；反应体积在１００～２００μｌ范围内均可以得到较好的结果；氯胺－Ｔ法反应３ｍｉｎ，标记率已接近最大值，而Ｉｏｄｏｇｅｎ法要在１０ｍｉｎ后才有最大的产额。结果还表明：在本实验条件下，氨胺－Ｔ法和Ｉｏｄｏｇｅｎ法的反应时间分别小于３ｍｉｎ和５ｍｉｎ时，其抗体的免疫活性可保留原来的９５％以上。