微小按蚊不同发育期蛋白质和同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电点聚焦电泳法,比较研究了微小按蚊(广义)卵、二龄和四龄幼虫、蛹及雌性成虫蛋白质和酯酶同工酶电泳图谱。微小按蚊(广义)不同发育期蛋白质等电点pH值,卵、幼虫、蛹和成虫显带区在pH4.1～9.5,其中在酸性区显带最多,碱性次之;酯酶同工酶等电点pH值显带区在pH4.2～7.8,其中酸性区显带最多,中性次之。并对微小按蚊复合体作了讨论。     

美洲大蠊几项生化指标在发育中的变化

美洲大蠊卵、若虫和成虫经等电点聚焦后用考马斯亮蓝Ｒ２５０染蛋白质，分别显带为２３、２５和３０条；用ＰＡＳ染糖，分别显带为１８、２０和２３条；用Ｎｉｌｅ＇ｓ蓝染脂，分别显带为５、７和１０条。３个发育阶段的蛋白质、糖和脂，以成虫期显带最多，若虫次之，卵最少。各发育阶段所显区带由纯蛋白、糖蛋白、脂蛋白、糖脂蛋白和单糖组成。另外，卵、若虫和成虫酯酶同工酶经坚固蓝染色分别显带６、１１和１３条。     

温带臭虫和热带臭虫生活史各期蛋白质和酯酶的初步分析

本文利用等电点聚焦电泳技术报道了温带臭虫和热带臭虫生活史各期蛋白质和酯酶的初步分析。实验结果表明:(1)蛋白质带谱:温带臭虫雌成虫、若虫和卵各呈现28、30和29条;热带臭虫雌成虫、若虫和卵各呈现32、33和29条;(2)酯酶同工酶谱:温带臭虫雌成虫、若虫和卵各显示12、12和11条;热带臭虫雌成虫、若虫和卵各显示18、12和11条;(3)热带臭虫生活史各期的蛋白质及酯酶带数目皆比温带臭虫生活史各期为多;(4)两种臭虫若虫期的蛋白质带数目皆比各自其它生活史各期为多。     

家蝇蛋白质、糖、脂的等电点聚焦电泳初步研究

家蝇各发育阶段经等电点聚焦后用考马斯亮蓝R250染蛋白质,雌性成虫、雄性成虫、蛹、幼虫和卵分别显带23、30、23、17和30条;用PAS染糖,分别显带13、13、9、8和9条;用Nile's蓝染脂,分别显带6、12、9、5和8条。四个发育阶段的蛋白质、糖和脂,以成虫期显带较多。各发育阶段所显区带由纯蛋白、糖蛋白、脂蛋白、糖脂蛋白和多糖组成。     

人体与猪体内囊尾蚴蛋白质和同工酶的初步研究

报道人体与猪体内囊尾蚴的蛋白质组分及酯酶同工酶(EST)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)的带谱。人和猪脑囊尾蚴液的蛋白质PAGE区带各见10和9条,猪囊尾蚴仅有1条主带,而入囊尾蚴具有2条主带;头节囊壁蛋白质PAGE区带各见18和16条,二者带谱基本相似。肌肉皮下囊尾蚴囊液蛋白质区带各有12条,猪囊尾蚴有4条带,人囊尾蚴仅有2条主带,且迁移率也有明显差别。人体和猪体内囊尾蚴囊液的LDH酶带各有4条,其迁移率略有差异;EST各见1条酶带,酶谱基本一致。肌肉皮下囊尾蚴头节囊壁LDH各见2条,EST则见3条,其迁移率也有不同。同时将两种同工酶的活性作了比较。     

温带臭虫和热带臭虫生活史各期等电点聚焦电泳蛋白质和酯酶的初步分析

本文利用等电点聚焦电泳技术报导了温带臭虫和热带臭虫生活史各期蛋白质和酯酶的初步分析。实验结果表明:(1)蛋白质带谱:温带臭虫雌成虫、若虫和卵各呈现28、30和29条;热带臭虫雌成虫、若虫和卵各呈现32、33和29条。(2)酯酶同功酶谱:温带臭虫雌成虫、若虫和卵各显示12、12和11条;热带臭虫雌成虫、若虫和卵各显示18、12和11条;(3)热带臭虫生活史各期的蛋白质及酯酶带数目皆比温带臭虫生活史各期为多。(4)两种臭虫若虫期的蛋白质带数皆比各其它生活史各期为多。在我国嗜吸人血的臭虫有温带臭虫和热带臭虫两种。虽然臭虫在自然界的传病作用尚不明瞭,但它频繁的叮咬、吸血和骚扰,影响人们的休息和工作。温带臭虫主要分布于世界温带地区,也遍布我国各地;热带臭虫的分布以热带、亚热带为主,在我国则以粤、桂、闽诸省为多见。两种臭虫的形态相似。生态习性基本相同,防制措施亦差别不大。本文试用等电点聚焦电泳技术,初步分析两种臭虫不同发育阶段蛋白质和酯酶的变化,以便今后进一步开展臭虫的生物化学、抗性机理等方面的研究。     

两种粉螨的酯酶同工酶和相关蛋白质电泳的研究

目的 探讨粉螨的酯酶同工酶和相关蛋白质在分类及生化遗传学上应用价值。方法 应用等电聚焦电泳（IEFE）研究腐食酪螨（Tyrophagus putrecentiae)和粉尘螨（Dermatophagoides farinae) 的酯酶同工酶和蛋白质,并将两者进行了比较。结果 腐食酪螨的酯酶同工酶可见8条带,分布在pH3．62－5．20范围内,第2,6条明显深染,为主带;粉尘螨的酯酶有7条带,分布在pH4．68－5．42范围内,可见3条主带;腐食酪螨和粉尘螨蛋白质均出现22条带,但腐食酪螨有2条特别明显的深染主带,粉尘螨可见3条明显深染主带。结论 两种粉螨的酯酶同工酶及相关蛋白质的电泳谱可在一定程度上反映出科、属、种的差别,酯酶同工酶具多态性,可应用于种属鉴定和遗传变异的探讨。     

血清非特异性酯酶测定对几种肝脏疾病诊断价值的探讨

以α-醋酸萘酯为底物,用比色法和聚丙烯酰胺凝胶电泳-电脑光密度扫描法对比测定了100例正常人和82例肝脏病人血清非特异性酯酶活力及其同工酶。正常人血清酯酶总活力878±116Iu/L,电泳有6条酯酶带(E_1～E_6);原发性肝癌(32例)血清酯酶总活力降低约1/3(514±114Iu/L),同工酶E_1无改变,E_2～E_5降低,E_6轻度降低,其中甲胎蛋白阴性病人中有上述酯酶改变者达85.7％;肝硬化(30例)病人血清酯酶活力大幅度降低(339±100In/L),同工酶E_1～E_6全下降;而良性肝肿瘤(10例)、转移性肝癌(10例)酯酶总活力及其同工酶与正常人比无明显差异。     

应用盘状电泳和等电聚焦对三种革螨的酯酶同工酶与蛋白质的研究

本文应用盘状电泳和薄层等电聚焦技术对三种革螨——茅舍血厉螨、兵广厉螨和羽腹巨螯螨,作了酯酶同工酶和蛋白质的生化分析,进行了比较研究。结果表明,它们各自的酯酶同工酶酶带和蛋白电泳带都有明显的差别。盘状电泳酯酶同工酶的酶带,茅舍血厉螨有3条,兵广厉螨有4条,羽腹巨螯螨为2条,同时测定了三者酶带的Rf值和相对活性;用等电聚焦电泳分析酯酶同工酶,上述三种螨分别显示11、9、7条亚带,并测定了各亚带的等电点。蛋白质盘状电泳,茅舍血厉螨蛋白带为12条,兵广厉螨为5条,羽腹巨螫螨为5条;在等电聚焦电脉时,上述三种螨分别为24、9、22条蛋白带。     

三种革螨的酯酶同工酶和蛋白质的研究

本文应用等电聚焦电泳对3种革螨的酯酶同工酶和蛋白质研究结果显示,酯酶同工酶:格氏血厉螨有14条亚带,鼠颚毛厉螨和溜下盾螨均为12条亚带.蛋白质:格氏血厉螨和鼠颚毛厉螨可见22条亚带,溜下盾螨为24条亚带。所有亚带的等电点均有差别,反映3个种属间的差异,证明等电聚焦电泳对革螨虫种鉴定及遗传变异研究有价值.     

三种革螨同工酶的比较研究

本文应用聚丙烯酰胺盘状电泳对格氏血厉螨、鼠颚毛厉螨和溜下盾螨的酯酶、乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶同工酶进行了比较研究。结果显示格氏血厉螨、鼠颚毛厉螨和溜下盾螨的酯酶同工酶分别显带6、7、6条;乳酸脱氢酶同工酶为4、2、4条;苹果酸脱氢酶同工酶为6、3、6。所有的检测指标除出现的带数有差别外,其主带、迁移率及光密度扫描结果也各异,反映出三个种属间的差异。证明同工酶的检测对革螨虫种的鉴定、亲缘关系的探讨以及遗传变异的研究具有重要的意义。     

不同产地桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹图谱鉴别研究

目的 建立不同产地桔梗药材的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)指纹图谱鉴别方法.方法 蛋白质(Pro)、过氧化物酶同工酶(POD)、酯酶同工酶(EST)PAGE指纹图谱分析.结果 不同产地桔梗的Pro-PAGE图谱差异极小;POD-PAGE与EST-PAGE图谱在谱带分布及数量上均具有显著性差异,分别具有各自的鉴别谱带.结论 POD-PAGE与EST-PAGE指纹图谱可作为鉴别不同产地桔梗的有效方法.     

我院1985年度科技成果获奖项目

江苏省人民政府二等奖 1.不同地理株中华按蚊同工酶和糖、脂、蛋白质的比较研究(寄生虫学教研室:叶炳辉;复旦大学遗传所等) 2.家族性高胆固醇血症患者的低密度脂蛋白(LDL)受体突变(病理生理学教研室:蔡海江等)     

近交系小鼠血清和组织中酯酶同工酶谱分析

同工酶是在同一生物种属中,由不同基因位点或等位基因编码的产物,是一种重要的生化标记,已广泛用于分子生物学的研究。小鼠血清和组织酯酶(Est)同工酶的研究日益受到重视。1959年Markert等用淀粉凝胶电泳法从小鼠组织中分离出10种酯酶同工酶;1966年Ruddle同类似方法从小鼠肾组织的水溶性提取液中分离出20～30条酯酶活性带。本研究组用聚丙烯酰胺阶段梯度凝胶电泳法对4个品系(DBA/2、C_(57)BL/6 J、BALb/c和昆明)小鼠的血清和组织的Est同工酶进行分离,比较各种组织Est同工酶的特征,企图寻找不同品系之间的差别,探讨该方法作为遗传监测手段的可能性。     

不同发育期致倦库蚊乳酸脱氢酶和酯酶同工酶的比较研究

应用琼脂糖电泳技术研究了致倦库蚊四龄幼虫、蛹和成蚊虫体匀浆的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶和酯酶(EST)同工酶。幼虫、蛹的LDH同工酶均表现为单一的酶带,成蚊为两条酶带。EST同工酶谱被分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组区带,幼虫和蛹的Ⅰ、Ⅲ区带仅各有一条酶带,Ⅱ区带有两条酶带。成蚊无Ⅰ区带。各发育阶段ESTⅡ区带中Rm值为0.67和0.76的酶带均恒定出现。     

美洲大蠊酯酶同工酶酶谱及三种速效杀蟑剂对其抑制试验

用等电聚焦法查得美洲大蠊雌虫成虫全虫酯酶同工酶谱共有13条,其等电点为6.9～4.6,以PI5.6、5.2、5.0、4.7、4.6为主带。初步证实PI6.9、6.6、6.4、6.2、6.0为胆碱酯酶。三种杀蟑剂对胆碱酯酶有不同程度抑制,其中以巴沙最为明显,但氯戊菊脂对羧酸酯酶和芳族酯酶也有一定抑制作用。     

中美猪型旋毛虫株不同发育阶段同工酶的电泳分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)和UVP凝胶分析仪系统 ,分析比较了中、美猪型旋毛虫成虫和幼虫的酯酶 (EST)同工酶及乳酸脱氢酶 (LDH)同工酶的带谱。结果表明 :猪型黑龙江株旋毛虫成虫和幼虫的EST同工酶酶带均为 2条 ,猪型美国株旋毛虫成虫和幼虫EST同工酶酶带分别为 3条和 2条 ;中、美猪型旋毛虫成虫的LDH同工酶无酶带 ,而幼虫则各具 1条酶带 ,且其迁移率也不同。结果提示 :来自不同地域的旋毛虫在遗传学上存在差异 ,同时 ,不同发育阶段同工酶酶谱也有明显不同。     

草珊瑚种子遗传多样性的酯酶同工酶研究

目的:研究草珊瑚不同种源间的遗传多样性及亲缘关系,并根据酶谱特征,提供种子真实性鉴定依据。方法:采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对15个群落的草珊瑚种子进行酯酶同工酶测定和谱带分析,用Ntsys2.10软件计算遗传相似性系数,通过UPMA法进行聚类分析,评价不同种源的亲缘关系。结果:种子酯酶同工酶共出现12个谱带类型,分为3个区,即A区(0.17～0.36),B区(0.46～0.66)和C区(0.75～0.82)。其中Rf=0.36、Rf=0.59和Rf=0.66为3条特征酯酶谱带。草珊瑚不同种源间遗传相似度在0.50～1.00间。结论:种子酯酶同工酶谱带能大致区分的草珊瑚种子的来源,并有效地鉴定出种子真实性。草珊瑚种源亲缘关系较近,与产地没有必然联系。15批种子样品划可分为四个类群,遗传关系呈现多样性。     

泡球蚴组织及囊液同工酶初步分析

应用 PAGE 法对多房棘球绦虫的泡球蚴囊液、全囊、原头蚴及囊壁组织的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)和酸性磷酸酶(AP)的同工酶进行了分析.结果 LDH 同工酶仅囊液与全囊各出现4条酶带.EST 同工酶全囊、囊液、原头蚴和囊壁分别出现14、17、3和13条酶带;而 AP 同工酶4种样品的酶带则分别是2、4、1和1条.3种同工酶的酶带数均以囊液样本为多且染色深,提示囊液可能是泡球蚴物质代谢的一个重要场所.     

致乏库蚊、微小按蚊和大劣按蚊酯酶同工酶谱及八种杀虫剂对其抑制作用的实验研究

本文报告用等电点聚焦电泳查得致乏库蚊雌性成蚊全虫酯酶同工酶谱有16条酶带,酶谱中有胆硷酯酶、羧酸酯酶和芳族酯酶;微小按蚊酯酶谱有酶带10条,酶谱中有胆硷酯酶和羧酸酯酶;大劣按蚊酶谱有9条酶带,酶谱中有胆硷酯酶和羧酸酯酶.八种杀虫剂中,敌百虫、巴沙、5602、氯戊菊酯、S~2和Pb对上述三种蚊虫的胆硷酯酶和羧酸酯酶均有抑制作用,对前者的抑制尤为明显.