抗结肠肿瘤相关抗原单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备抗结肠肿瘤相关抗原的单克隆抗体(mAb)并对其进行初步的鉴定及功能研究。方法:将结肠癌细胞系或磨碎的结肠癌组织免疫小鼠,按常规方法进行细胞融合,采用活细胞周围花环形成的方法进行阳性克隆的筛选。用间接免疫荧光染色和流式细胞术分析及酶免疫组织化学的方法进行初步鉴定,并用抗体介导的补体依赖的细胞毒试验(CDC)进行初步的功能研究。结果:获得了2株分泌抗结肠肿瘤相关抗原mAb杂交瘤细胞株3A12和6A8。流式细胞仪检测,2株杂交瘤分泌的抗体均能在结肠癌细胞系中均为阳性。普通石蜡切片及组织芯片的免疫酶组织化学染色结果,显示2株mAb均在结肠肿瘤组织中有较高的阳性率。2株mAb分别与靶细胞及补体作用后,对于靶细胞的杀伤率分别为98.1%和42.4%。结论:成功地制备了2株识别结肠癌细胞表面抗原的mAb,在结肠癌的诊断和治疗中可能具有潜在的应用价值。     

大鼠抗胃癌单克隆抗体的制备及鉴定

本文用BGC823人胃癌细胞株为抗原,免疫LOU/M大鼠,取脾细胞与大鼠骨髓瘤细胞IR983F融合获得杂交瘤株1F_1。其Mc-Ab的Ig亚类为IgM。用PAP组织化学染色法检测,1F_1与3株胃癌细胞(BGC 823,MGC803,SGC7901)呈阳性反应。以免     

一种小鼠肿瘤相关膜蛋白单抗对DCS细胞生物学行为的影响

探讨一种小鼠肿瘤相关膜蛋白在ＤＣＳ细胞表达的意义。方法用该蛋白抗处理ＤＣＳ细胞,观察其对细胞生长速度,软琼脂克隆形成能力,粘附性,细胞运动能力,水解酶活性,侵袭性,体内转移率等生物学行为方面的影响。结论该细胞膜蛋白可能调控小鼠肿瘤细胞增殖能力。     

抗人肺癌细胞转移相关抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定

我们用人肺腺癌高转移细胞系Anip973和低转移细胞系AGZY-83-a分别免疫BA-LB/c小鼠,用免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系NS-1融合,得到一组特异性不同的单抗。应用间接免疫荧光方法,免疫酶组化     

抗人肺癌细胞转移相关抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定

用转移能力及其它生物学特性不同的2个人肺腺癌细胞系免疫BALB/c小鼠,制备出一组可与人肺腺癌细胞发生特异性反应,而与其它脏器肿瘤组织无交叉反应的单克隆抗体。经初步鉴定,其中的3个单抗分别识别低转移或高转移肺腺癌细胞系表面抗原。     

红细胞分化相关蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

应用杂交瘤技术和电泳迁移超滞留技术筛选和制备红细胞分化相关蛋白单克隆抗体，以阐明此类蛋白的生物学功能。用杂交瘤技术制备了５８０株针对终末分化期红细胞，包括人胚肝中，晚幼红细胞和氯高铁血红素诱导分化的人红白血病细胞核蛋白的单克隆抗体。     

抗大鼠树突状细胞单克隆抗体的研制及初步鉴定

树突状细胞是一种重要的抗原提呈细胞,在移植排斥反应中发挥重要作用。为了进一步研究该细胞的功能和寻找抗移植排斥反应的更有效途径,我们在分离大鼠树突状细胞获得成功的基础上,应用杂交瘤技术制备出5株抗树突状细胞单克隆抗体,分别命名为WZD1～5。杂交瘤细胞培养上清或腹水对新鲜分离的大鼠树突状细胞均显示不同程度的细胞毒性作用,且与腹腔Mφ及淋巴细胞无明显交叉反应。经间接免疫荧光染色测定,腹水中单抗的效价为2×10~(-2)。     

甲胺磷单克隆抗体制备及鉴定

目的：制备并鉴定甲胺磷农药单克隆抗体。方法：用500mg/mL PEG 4000作融合剂进行细胞融合，HAT（H，次黄嘌呤；A，氨基喋呤;T,鹃腺嘧啶）培养基选择性培养，自制的显微操作装置进行亚克隆。用间接ELISA（酶联免疫吸附测定）和间接竞争ELISA方法对2株细胞进行鉴定，并测定与其它农药的交叉反应率。结果：得到2株稳定分泌甲胺磷抗体的单克隆细胞株，命名为1C3和2C6；间接ELISA法表明2株细胞与载体牛血清蛋白质（Bovine serum albumin,BSA)和卵清蛋白质（Ovalbumin,OVA)反应成阴性；间接竞争ELISA法表明2株细胞上清液内的抗体可以竞争性地与甲胺磷结合；2株单克隆细胞均系IgG1亚类；1C3细胞诱导腹水纯化后的抗体与其它有机磷农药几乎没有交叉反应。结论：成功制备2株分泌抗甲胺磷抗体的单克隆细胞株，并可用于检测甲胺磷的研究。     

抗肿瘤相关糖抗原sTn单克隆抗体的制备及鉴定

细胞发生转化时,经常伴随着细胞膜表面糖脂或糖蛋白糖链的改变〔１〕。在肿瘤细胞,特别是腺癌细胞,其表面粘蛋白分子的糖链经常由于合成不全而缩短,形成肿瘤相关的简单粘蛋白糖抗原,ｓＴｎ即为其中的一种〔２〕。ｓＴｎ（ＮｅｕＡｃα２→６ＧａｌＮＡｃα１→ＯＳｅｒ／Ｔｈｒ）是一种二糖结构,可表达于各种腺癌组织,而在正常组织中则很少或不表达。血清、细胞或组织中ｓＴｎ的检测,主要依赖抗ｓＴｎ的单克隆抗体（ｍＡｂ）。我们应用富含ｓＴｎ侧链的绵羊颌下腺粘蛋白（ＯＳＭ）免疫制备了抗ｓＴｎ的ｍＡｂ〔３〕,目的在于为建立检测ｓＴ…     

心钠素单克隆抗体的制备及鉴定

本文将心房肽Ⅲ(APⅢ)与牛血清白蛋白(BSA)偶联成大分子复合物,免疫BALB/c小鼠制备出三株分泌心房肽Ⅲ-单克隆抗体(APⅢ-McAb),分别命名为A_1、A_2和A_3。所分泌的APⅢ抗体,行亚类鉴定为IgG_1型,琼脂双扩与BSA无出现沉淀线。应用APⅢ-McAb制备亲和层析柱,对心钠素有很高的亲和力,其洗脱峰值管,有明显的降压作用。     

C-myc单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备与鉴定鼠抗C-myc蛋白单克隆抗体。方法利用C-myc蛋白做免疫原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA法筛选、有限稀释法克隆、单克隆抗体Ig亚型鉴定,获得2株能够稳定分泌抗C-myc特异性抗体的杂交瘤细胞株,再将杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔诱使小鼠产生腹水。结果获得2株可稳定分泌抗C-myc抗体的杂交瘤细胞株,命名为SHH-1H11,SHH-2A9,Ig亚型分别为IgG1亚类和IgM。细胞培养上清效价分别为1:10240、1:5 120;小鼠腹水效价分别为1:64 000、1:32 000。结论制备的C-myc单克隆抗体仅与C-myc蛋白反应,与其他蛋白没有交叉反应,表明获得的单克隆抗体的特异性很高。     

BrdU单克隆抗体的制备及鉴定

ＤＮＡ的５－溴，２－脱氧尿嘧啶核苷（ＢｒｄＵ）标记法近年来作为一种新的、简便、敏感特异的检测方法，在肿瘤生物学、遗传学、分子生物学特别是细胞增殖动力学等领域得到广泛应用，在一定程度推动了相关学科的发展。为了满足广泛开展ＢｒｄＵ标记ＤＮＡ检测对Ｂｒｄ...     

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备特异性人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体单克隆抗体,为建立TRAIL酶联吸附检测方法奠定基础。方法以原核表达系统重组制备的可溶性人sTRAIL作为抗原,利用杂交瘤技术筛选获得抗人TRAIL?mAb杂交瘤细胞株。体内诱生法生产腹水,经间接ELISA方法检测腹水效价,Western?blot鉴定抗体特异性。结果制备获得一株可稳定分泌抗人TRAIL?mAb的杂交瘤细胞株,属IgG2b亚类;腹水效价达1:5×106以上,Western?blot鉴定结果显示可特异性识别人TRAIL,而与TNF-α和Fas-l无明显的交叉反应。结论制备了具有高特异抗原结合特性的TRAIL?mAb。     

大鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

目前抗人甲胎蛋白单克隆抗体(hAFPMcAb)均来自小鼠系统,主要应用于临床诊断和肝细胞癌的选择定位与导向治疗等方面。hAFP McAb的临床应用前景广阔,但国内开展尚不多。本文利用大鼠杂交瘤系统,并采用一种新的筛选方法,以建立分泌hAFP McAb的大鼠杂交瘤。 1 材料和方法 1.1 hAFP抗原 本室制备。     

抗乳癌细胞人单克隆抗体的制备及免疫组织学鉴定

肿瘤相关抗原的存在可诱导宿主产生免疫应答,继而产生自身抗体.为揭示恶性乳腺肿瘤患者中这类免疫识别的范围及探讨肿瘤相关抗原的分子特性,著者用杂交瘤技术进行人-鼠种间杂交,成功地制备出乳癌人单抗,并用免疫组化方法进行了组织切片的细胞抗原检测.实验是取转移乳癌患者腋下淋巴结手术标本,无菌条件下制备成单细胞悬液.而后用常规PEG法与小鼠骨髓瘤细胞系M5进行融合.24小时后加入HAT培液,15～18天     

大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的鉴定

根据小鼠胸腺冰冻切片免疫组织化学染色，将已获得的３０种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体分为８组：１．髓质胸腺基质细胞（ＴＳＣ）阳性，皮质ＴＳＣ阴性；２．髓质部分ＴＳＣ阳性，皮质ＴＳＣ阴性；３．皮、髓交界部分ＴＳＣ阳性；４．皮、髓质部分ＴＳＣ阳性；５．髓质ＴＳＣ阳性，皮质部分ＴＳＣ阳性；６．皮、髓质大部分ＴＳＣ阳性；７．被膜和血管内皮细胞呈阳性；８．髓质ＴＳＣ和皮质胸腺细胞为阳性。用这８组单抗对本室