何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、EGF表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠,随机分为正常组、模型组及何首乌饮干预预防组和治疗组,用SP免疫组化法检测下颌下腺NGF、EGF表达的改变。结果预防性实验各组间NGF、EGF表达均以正常组最高,模型组最低,且中剂量预防组效果最好(P0.01)。治疗性实验各组间NGF、EGF表达均以正常组最高,自然恢复组最低,且中剂量治疗组最高(P0.01)。结论何首乌饮可提高下颌下腺NGF、EGF的表达而达到延缓衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGF mRNA表达的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)基因表达的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠90只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,用原位杂交法检测各组大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGFmRNA表达的情况。结果预防性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以正常组最高,模型组最低,各预防组处于中间水平,其中预防中剂量组最高。治疗性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组处于中间水平,其中中剂量组最高。结论何首乌饮可在基因转录水平提高NGF、EGF的表达。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺EGF、EGF mRNA表达的影响

目的 观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及EGF mRNA表达的影响.方法 采用D-半乳糖衰老大鼠模型,何首乌饮干预分为治疗和预防两部分,用免疫组化及原位杂交法检测下颌下腺EGF、EGF mRNA阳性表达的改变.结果 预防性实验部分EGF、EGF mRNA表达以正常组最高,模型组最低,各预防组中预防中剂量组最高,组间比较有高度统计学意义(P＜0.01).治疗性实验部分以正常组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组最高,组间比较差异显著(P＜0.01).结论 何首乌饮可提高下颌下腺EGF、EGF mRNA的表达而达到抗衰老的作用.     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺凋亡的影响

目的探讨何首乌饮抗下颌下腺衰老的作用。方法分别在预防性和治疗性实验中应用何首乌饮,对D-半乳糖诱发的衰老大鼠模型应用不同剂量何首乌饮。通过TUNEL法检测凋亡细胞,观察下颌下腺凋亡细胞数量。结果预防性实验中下颌下腺细胞凋亡以衰老组最高,正常组最低,预防性应用何首乌饮后以预防中剂量组凋亡最少（P〈0．01）。治疗性实验中下颌下腺细胞凋亡以自然恢复组最高,阴性对照组最低,治疗性应用何首乌饮后以治疗中剂量组凋亡最少（P〈0．01）。结论衰老模型大鼠下颌下腺的凋亡细胞数增多,应用何首乌饮干预后下颌下腺凋亡细胞数减少。何首乌饮可能具有抗下颌下腺衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺磷酸化cyclinD1蛋白表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺磷酸化细胞周期素D1(cyclinD1)蛋白表达的影响。方法实验90只SD雌性大鼠,随机分为何首乌饮干预预防组和治疗组两大部分,采用免疫组化方法检测大鼠下颌下腺磷酸化cyclinD1蛋白的表达,并观察何首乌饮对其影响。结果磷酸化cyclinD1阳性产物散在分布于细胞质内,呈黄色或棕黄色,在各组大鼠下颌下腺的腺泡细胞、颗粒曲管及导管上皮细胞中均有表达(P0.01)。多重比较结果显示,以正常组最高,模型组最低,各预防组中以预防中剂量组效果最好。治疗各组间比较,以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最高。结论何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与提高磷酸化cyclinD1蛋白表达有关。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞转导通路相关蛋白的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞信号转导通路相关蛋白的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠50只,随机分为何首乌饮干预预防和治疗性实验两大部分,分为五组,每组5只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,Western印迹法检测p16、非磷酸化Rb蛋白含量。结果预防各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以模型组最高,正常组最低,各预防组处于中间水平,其中以预防中剂量组(Pm)最低(P0.01)。治疗各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以自然恢复组(S-R)最高,阴性对照组最低,各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最低(P0.01)。结论何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与激活Rb/p16通路有关。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺β-半乳糖苷酶表达的影响

目的 通过观察何首乌饮干预的衰老大鼠下颌下腺β-半乳糖苷酶(β-gal)表达的改变,探讨何首乌饮的抗衰老作用.方法 用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,检测β-半乳糖苷酶活性,观察下颌下腺衰老细胞数目改变.结果 预防性实验部分:模型组衰老细胞数目多于正常组和各预防性用药组;治疗性实验部分:用药各组与自然恢复组相比,衰老细胞数目明显减少,其中治疗中剂量组最低.结论 何首乌饮具有抗模型大鼠下颌下腺细胞衰老的作用.     

何首乌饮对实验性衰老大鼠下颌下腺T-AOC、MDA的影响

目的观察何首乌饮干预的衰老模型大鼠下颌下腺总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的改变,探讨何首乌饮的抗衰老作用。方法用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,观察下颌下腺T-AOC和MDA改变。结果预防性实验部分:T-AOC水平以正常组最高,模型组最低,各预防组处于中间水平(P<0.01);MDA水平以模型组最高,正常组最低,各预防组处于中间水平(P<0.01)。治疗性实验部分:T-AOC水平以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组处于中间水平(P<0.01);MDA水平以自然恢复组最高,阴性对照组最低,各治疗组处于中间水平(P<0.01)。结论何首乌饮具有抗模型大鼠下颌下腺衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺端粒酶活性的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺端粒酶活性的影响。方法选用8周龄清洁级SD雌性大鼠20只,随机分为正常组、模型组、何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组,每组5只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,采用端粒重复扩增-微孔板杂交法检测下颌下腺细胞端粒酶活性。结果衰老模型组大鼠下颌下腺端粒酶OD值表达最低,正常组最高,何首乌饮预防组低于正常组,但高于何首乌饮治疗组(P<0.01)。结论何首乌饮可提高衰老大鼠下颌下腺端粒酶活性,且以预防量效果较好。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺超微结构的影响

目的 观察实验性衰老大鼠下颌下腺超微结构的改变,探讨何首乌饮的干预作用.方法 用D.半乳糖制造衰老大鼠模型,用何首乌饮干预(预防和治疗),观察下颌下腺主要细胞器超微结构改变.结果 模型组大鼠下颌下腺细胞器的超微结构呈现明显的退行性变;何首乌饮预防组下颌下腺细胞器的超微结构退行性变的情况明显好于治疗组,治疗组改变程度较自然恢复组明显减轻.结论 D-半乳糖模型大鼠下颌下腺超微结构发生明显衰老改变,何首乌饮可改善衰老大鼠下颌下腺超微结构的衰老变化,预防用药效果更好.     

D-半乳糖致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子及其mRNA的表达

目的 观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)及NGF mRNA的表达.方法 选用SD雌性大鼠18只,随机分为正常组、模型组,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,用免疫组化及原位杂交法检测衰老大鼠下颌下腺NGF、NGFmRNA的阳性表达.结果 下颌下腺NGF阳性反应颗粒及NGF mRNA杂交反应产物为浅棕色或深褐色颗粒,NGF阳性反应颗粒主要分布于GCT细胞及纹状管细胞顶部胞质中,腺泡细胞为阴性;NGFmRNA杂交信号主要分布于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中,其上皮细胞胞质呈阳性,腺泡细胞为阴性,正常组NGF、NGF mRNA表达明显高于模型组(P＜0.01).结论 D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、NGFmRNA表达较正常大鼠明显减少.     

何首乌饮对亚急性衰老大鼠卵巢细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 探讨何首乌饮对亚急性衰老大鼠卵巢细胞凋亡和相关基因Fas和FasL及其蛋白表达的影响.方法 采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,同时以何首乌饮灌胃作为延缓衰老组;造模后应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠卵巢细胞凋亡情况;测定各组Fas和FasL的信使核糖核酸(mRNA)水平;SP免疫组化法检测卵巢细胞Fas和FasL蛋白的表达情况.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠卵巢细胞中有凋亡细胞数增多现象、Fas和FasL的mRNA和蛋白表达均显著增强(P＜0.01);延缓衰老组较模型组凋亡率明显下降(P＜0.01),并抑制Fas和FasL的表达,呈现量效关系,以何首乌饮高剂量组效果作用最佳.结论 何首乌饮方剂能延缓衰老大鼠卵巢细胞凋亡的发生,其作用机制可能是通过干预Fas/FasL的表达,阻止死亡信号的转导,抑制卵巢细胞凋亡.     

D-半乳糖致衰老模型大鼠脑组织Ach活性、NGF表达变化及山茱萸多糖的干预作用

目的 探讨山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老模型大鼠脑组织神经生长因子(NGF) mRNA表达的影响及其可能的作用机制.方法 选用Wistar大鼠46只,随机分组,每组雌雄各半,其中青年对照组12只、衰老模型组10只、山茱萸多糖组24只(小剂量和大剂量组各12只).采用D-半乳糖法制作衰老模型,造模成功后按照0.14 g/kg体重和0.28 g/kg体重经胃灌服山茱萸多糖水溶液,连续给药30 d.分光光度法测定脑脂褐素( lipofuscin,LP)含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,RT-PCR法检测脑组织NGF mRNA表达.结果 衰老模型组LP含量、AchE活性均较青年组明显增加(P＜0.01),而NGF mRNA表达明显低于青年组(P＜0.01);山茱萸多糖小剂最组和大剂量组NGF mRNA的表达明显高于衰老模型组(P＜0.01),而LP含量和AchE活性显著则明显低于衰老模型组(P＜0.05,P＜0.01),山茱萸多糖大剂量组上述作用明显好于小剂量组(P＜0.05).结论 山茱萸多糖可抑制脑的脂质过氧化,降低AchE活性、上调NGF mRNA表达而发挥抗衰老作用.     

何首乌饮对衰老大鼠抗氧化能力及血脂的影响

目的探讨何首乌饮的抗衰老机制。方法采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,测定何首乌饮灌胃后大鼠血清中血脂和丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果亚急性衰老模型组大鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、MDA含量明显升高,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、SOD、GSH-Px、T-AOC明显下降,与正常对照组大鼠比较差异显著（P〈0.05,P〈0.01）,经何首乌饮灌胃治疗后TG、TC、MDA含量下降,HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC含量升高均接近正常水平,与模型组大鼠有显著差异（P〈0.01）。结论何首乌饮明显提高衰老大鼠体内的HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC水平,降低TG、TC、MDA含量,何首乌饮具有抗衰老作用,其抗衰老作用可能与此有关。     

D-半乳糖诱发的衰老对大鼠下颌下腺端粒酶活性的影响

目的观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺抗氧化能力和端粒酶活性的改变。方法选用8周龄清洁级SD雌性大鼠10只,体重180²20 g,随机分为正常组和模型组,每组5只。采用D-半乳糖诱导大鼠衰老模型,观察下颌下腺谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)改变及采用端粒重复扩增-微孔板杂交法检测下颌下腺细胞端粒酶活性。结果衰老模型组大鼠下颌下腺GSH-Px、T-AOC及端粒酶OD值表达最低,正常组最高(P<0.01)。结论 D-半乳糖所致的大鼠下颌下腺细胞衰老与端粒酶活性降低相关。     

参苓散对脾阴虚痴呆模型大鼠海马区BDNF、NGF表达的影响

目的观察参苓散对脾阴虚痴呆(AD)大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)表达的影响。方法将48只体重(300±20)g的健康雄性大鼠,随机分成空白组(空白对照)、阴虚组(脾阴虚)、AD组(脾阴虚+AD)和治疗组(脾阴虚+AD+治疗),每组12只。通过病证结合的方法建立脾阴虚AD大鼠模型,治疗组给予中药参苓散灌胃,每日1 ml/100 g,持续10 d,其他各组每日予等体积生理盐水灌胃。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,用免疫组化(SP)方法观察大鼠海马区BDNF和NGF的表达。结果①造模后,阴虚组、AD组、治疗组与空白组对比逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数减少(P<0.05或P<0.01);给予参苓散治疗后,治疗组与阴虚组、AD组相比,大鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数增多(P<0.01);②与空白组比较,阴虚组、AD组大鼠海马BDNF、NGF表达明显下调(P<0.01);而治疗组大鼠海马BDNF、NGF表达与阴虚组、AD组比较明显上调(P<0.01)。结论参苓散能改善脾阴虚AD模型大鼠的学习记忆能力,增加其海马区BDNF、NGF表达。     

碟脉灵注射液对坐骨神经损伤后NGF mRNA表达的影响

目的探讨碟脉灵注射液对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法将72只SD大鼠分为碟脉灵注射液组（A组）;神经生长因子组（NGF,B组）和对照组（生理盐水,C组）,每组24只。麻醉下暴露右侧坐骨神经,在坐骨结节远侧0.8cm处造成坐骨神经挤压伤,术后A组损伤处给予碟脉灵注射液,B组给予NGF,C组给予生理盐水。术后2d、7d、2w、4w、8w,取紧邻挤压伤部位远侧神经干,应用原位杂交的方法和图像分析处理系统定量测定神经组织中神经生长因子 mRNA（NGF mRNA）的表达。结果A组和B组大鼠坐骨神经挤压伤后第2周起,坐骨神经组织中NGF mRNA表达明显增加,至伤后第4周达到高峰,对照组NGF mRNA表达低,A、B两组与对照组之间的差异具有显著性（P〈0.05）。结论碟脉灵注射液可以促进挤压伤后大鼠坐骨神经NGF mRNA表达,其作用与NGF相仿。     

Lactuside B对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响

目的探讨高翅果菊提取物Lactuside B(LB)对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,随机分为6组(8只/组)即模型组、假手术组、阳性对照组、LB高剂量、中剂量和低剂量组。采用大脑中动脉阻塞2 h再灌注24 h和72 h动物模型、各组在相应时间点处死一半动物,以RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段NGF mRNA的表达情况。结果模型组NGFmRNA在海马和纹状体表达明显增多,再灌注72 h海马和纹状样NGF mRNA表达显著下降;在海马,用药后LB各剂量组NGF mRNA表达增多,与模型组比较有显著差异(P<0.01);与阳性对照组比较中、低剂量组有显著差异(P<0.01),且中、低剂量组用药72 h时NGF mRNA表达较多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。在纹状体,LB各剂量组NGF mRNA表达同样增加,与模型组比较有显著差异(P<0.01),与阳性对照组比较其低、中、高剂量组均有显著差异(P<0.01或P<0.05),LB用药72 h时中、低剂量组NGF mRNA表达更多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。结论 LB对大鼠海马和纹状体的NGF基因产生了较大的影响,其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制可能与LB能够上调二部位的NGF mRNA有关。     

六味地黄丸对2型糖尿病大鼠坐骨神经组织胰岛素样生长因子-1 mRNA和神经生长因子mRNA表达的影响

目的观察六味地黄丸对2型糖尿病(T2DM)大鼠坐骨神经神经生长因子(NGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1 mRNA表达的影响,探讨六味地黄丸对糖尿病周围神经病变(DPN)保护作用的机制。方法雄性SD大鼠高脂高糖饲料喂养8 w后小剂量(20 mg/kg)腹腔注射链脲佐菌(STZ),成功诱导其成为T2DM大鼠模型,分成模型组、糖末宁组、六味地黄丸高、中、低剂量组。给药8 w后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠坐骨神经组织IGF-1 mRNA和NGF mRNA的相对表达。结果与空白对照组相比,模型组大鼠NGF-1 mRNA及IGF-1 mRNA相对表达明显减少(P<0.01);与模型组相比,六味地黄丸中剂量组和高剂量组NGF-1 mRNA及IGF-1 mRNA的相对表达均明显升高(P<0.01)。结论六味地黄丸对T2DM大鼠DPN保护作用的机制与促进NGF、IGF-1等神经生长因子的分泌有关。     

清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤Nestin、NGF表达的影响

目的研究清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤后巢蛋白(Nestin)、神经生长因子(NGF)表达的影响,探究清脑益元汤对缺血性脑损伤神经元保护作用的部分机制。方法将192只健康SD大鼠随机分为两大组,每大组再分为4个亚组:空白组(n=6)、假手术组(n=30)、模型组(n=30)、清脑益元汤组(n=30)。采用改良的Longa线栓法制备大鼠急性脑缺血损伤模型,除空白组外,假手术组、模型组及清脑益元组按缺血损伤后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d 5个取材时间点分为5个亚组。造模成功后取大鼠缺血侧脑组织,采用免疫组化法检测大鼠缺血侧皮质区Nestin、NGF表达,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测大鼠缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达。结果(1)免疫组化法:与假手术组相比,模型组、清脑益元组在缺血侧Nestin、NGF阳性细胞明显增多(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,清脑益元组Nestin、NGF阳性细胞表达明显增多(P<0.01,P<0.05);(2)Real-Time PCR法:与假手术组相比,模型组、清脑益元汤组大鼠脑组织缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达量增加(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,清脑益元汤组大鼠脑组织缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达量升高(P<0.01,P<0.05)。结论清脑益元汤可能通过上调脑缺血损伤后Nestin、NGF蛋白及mRNA表达,促进脑组织损伤修复、保护神经元,进而发挥脑保护的作用。