siRNA干扰LOX基因对乳腺癌细胞株侵袭性影响的研究

目的检测赖氨酰氧化酶（LOX）基因在低侵袭性乳腺癌细胞MCF-7和高侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达差异,并探讨LOX基因对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法 RT-PCR扩增MCF-7和MDA-MB-231LOX基因,采用SYBR G reen I实时荧光定量RT-RCR技术相对定量两种细胞的LOX基因表达。瞬转MDA-MB-231,并于转染后24、48、72 h行体外运动试验侵袭实验,观察干扰LOX基因表达后对MDA-MB-231侵袭的影响。结果 MDA-MB-231较MCF-7高表达LOX基因（P〈0.05）。MDA-MB-231细胞中LOX mRNA在转染48 h表达下降明显。干扰LOX表达后,体外运动实验结果显示RNA i组中MDA-MB-231细胞穿过微孔滤膜到达下室面的细胞数少于未转染组和阴性对照组（P均〈0.05）。结论 MDA-MB-231细胞高表达LOX基因,干扰其LOX基因表达后细胞的侵袭运动能力明显减弱。     

乳腺癌细胞中E1AF、MMP-2、VEGF的表达及意义

目的探讨乳腺癌发生侵袭和转移的分子机制。方法应用免疫细胞化学技术检测雌激素受体阳性（ER＋）乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性（ER-）乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435s中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、血管内皮生长因子（VEGF）表达,采用RT-PCR法检测细胞株中E1AF mRNA表达。结果 MDA-MB-231中E1AF mNA、MMP-2及VEGF表达水平均明显高于MCF-7和MDA-MB-435s,且E1AF表达与MMP-2、VEGF呈正相关。结论 MMP-2、VEGF与E1AF在肿瘤细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用,其机制可能在转录水平调节基因表达,增加肿瘤侵袭性。E1AF可能是乳腺癌侵袭转移的重要因子。     

miR-183靶向DDR1调控乳腺癌细胞迁移侵袭的分子机制

目的研究miR-183对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹检测乳腺癌细胞MDA-MB-231、正常细胞MCF-10A中miR-183、盘状结构域受体(DDR)1的表达;将miR-183组(转染miR-183 mimics)、miR-con组(转染miR-con)、si-TCF7组(转染si-TCF7)、si-con组(转染si-con),miR-183+pcDNA组(共转染miR-183 mimics和pcDNA)、miR-183+pcDNA-DDR1组(共转染miR-183 mimics和pcDNA-DDR1)均用脂质体法转染至MDA-MB-231细胞;MTT和Transwell法检测各组细胞增殖、迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与正常细胞MCF-10A相比,乳腺癌细胞MDA-MB-231中miR-183表达显著降低,DDR1表达显著升高(P0.05);过表达miR-183、敲减DDR1均可明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭;miR-183可靶向负调控DDR1表达;过表达DDR1可逆转miR-183对MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-183可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向DDR1有关,可为乳腺癌的治疗提供新靶点。     

慢病毒介导SOX4表达下调对乳腺癌细胞生长及迁移能力的影响

目的研究慢病毒介导的性别决定区Y框蛋白(SOX)4表达下调对乳腺癌细胞生长及迁移能力影响。方法以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,用含有SOX4 siRNA的重组慢病毒和阴性对照慢病毒感染MCF-7细胞,qRT-PCR和Western印迹方法检测细胞中SOX4表达变化。噻唑蓝(MTT)方法测定增殖变化,碘化丙啶(PI)单染法测定细胞周期分布变化,Transwell小室检测侵袭和迁移能力变化,Western印迹检测细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、上皮性钙黏附素(E-cadherin)、MMP-2、p21蛋白表达水平。结果 SOX4 siRNA重组慢病毒感染可以抑制乳腺癌细胞中SOX4基因的表达和转录。敲减SOX4后的乳腺癌细胞的增殖能力显著降低,细胞G0/G1期比例显著升高,细胞侵袭和迁移能力显著下降,细胞中CyclinD1蛋白表达水平显著降低,p21蛋白表达水平显著升高,MMP-2、MMP-9、Vimentin蛋白表达水平显著下降,E-cadherin蛋白表达水平显著升高(均P0.05)。阴性对照慢病毒感染对MCF-7细胞中SOX4表达水平没有影响(均P0.05),并且对细胞增殖、周期分布、侵袭、迁移水平和细胞中CyclinD1、p21、MMP-2、MMP-9、Vimentin、E-cadherin蛋白表达水平均没有影响。结论敲减SOX4可以抑制乳腺癌细胞生长、侵袭和迁移,并将乳腺癌细胞周期阻滞在G0/G1期。     

抑制Cks1表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭转移能力的影响及机制探讨

目的观察抑制Cks1表达对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭转移能力的影响，并探讨其机制。方法将MCF-7细胞分为两组，观察组细胞经脂质体转染Cks1siRNA，对照组细胞转染ScrambledsiRNA；分别采用MTS法、Transwell小室实验观察MCF-7细胞的增殖及侵袭转移能力，采用Western blot法检测MCF-7细胞中的MMP-2、MMP-9蛋白。结果观察组转染60、84、108、132h后，MCF-7细胞的OD值分别为0．15±0．01、0．3±0．02、0．7±0．01、1．3±0．02，对照组分别为0．2±0．01、0．5±0．01、1．3±0．03、1．8±0．02，两组转染84、108、132h细胞OD值比较，P均〈0．05。观察组转染48h，侵袭细胞数为（150±17）个、转移细胞数为（210±22）个，对照组分别为（550±90）、（660±96）个，两组比较，P均〈0．05。转染后12h，观察组MMP-2、MMP-9蛋白表达量为0．05±0．002、0．104-0．002，对照组分别为0．95±0．020、0．98±0．030，两组比较，P均〈0．05。结论抑制Cksl表达可显著抑制MCF-7细胞的增殖、侵袭转移能力，该作用可能与MMP-2、MMP-9蛋白表达降低有关。     

miR-141-3p靶向CBX1抑制乳腺癌细胞增殖和细胞迁移侵袭

目的探讨miR-141-3p对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法实验设置miR-con组、miR-141-3p组、si-con组、si-染色体同源物(CBX)1组、anti-miR-con组、anti-miR-141-3p组、miR-141-3p+pcDNA组、miR-141-3p+pcDNA-CBX1组;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-141-3p和CBX1 mRNA的表达水平;Western印迹检测蛋白表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果与正常乳腺细胞HBL-100相比,乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和BT474中miR-141-3p的表达水平显著降低,CBX1的表达水平显著升高(P0.05);过表达miR-141-3p、沉默CBX1均可抑制SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭,抑制CBX1、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白的表达(P0.05)。miR-141-3p靶向调控CBX1的表达,过表达CBX1能逆转miR-141-3p对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论 miR-141-3p可能通过下调CBX1表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

Annexin a2对人乳腺癌MDA-MB-231增殖的影响及分子机制

目的研究Annexin a2的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、细胞周期分布和克隆形成能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法采用小干扰RNA（siRNA）技术下调人乳腺癌细胞中Annexin a2基因的表达,利用MTT比色法、流式细胞术、平板克隆形成实验观察Annexin a2表达水平下降后乳腺癌细胞增殖、周期分布和克隆形成能力的变化;利用免疫共沉淀和免疫荧光分析在MDA-MB-231细胞中与Annexin a2相互作用的蛋白。结果 Western blot证实siRNA干扰后MDA-MB-231细胞中Annexin a2蛋白表达水平明显下降;同时细胞增殖和克隆形成能力显著下降,细胞G0/G1期比例增高,G2/M和S期比例下降;免疫共沉淀发现Annexin a2与信号转导和转录激活因子3（STAT3）存在相互作用。结论 Annexin a2蛋白水平下降可以明显抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和克隆形成能力,Annexin a2与STAT3相互作用有可能参与乳腺癌细胞的增殖调节。     

miR-509-3p靶向BCL2基因调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的分子机制

目的探讨微小RNA-509-3p(miR-509-3p)调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的分子机制。方法 qRT-PCR检测miR-509-3p、B淋巴细胞瘤(BCL)2在乳腺癌组织及不同乳腺癌细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因实验检测miR-509-3p与BCL2之间的相互作用;噻唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测miR-509-3p对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡能力的变化情况;Transwell迁移及侵袭实验检测miR-509-3p对MDA-MB-231细胞迁移及侵袭行为的变化情况;Western印迹检测miR-509-3p对BCL2、细胞周期蛋白(CyclinD)1、p21、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白的调控情况。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中miR-509-3p的表达水平显著下调(P<0.05),与其他乳腺癌细胞相比,乳腺癌MDA-MB-231细胞中miR-509-3p表达最低,而BCL2的表达水平相反;上调miR-509-3p表达MDA-MB-231细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05),而细胞凋亡水平明显升高(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平明显降低(P<0.05),而p21表达水平明显升高(P<0.05);miR-509-3p可靶向调控BCL2表达;上调BCL2表达可逆转上调miR-509-3p表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的作用。结论 miR-509-3p能够靶向抑制BCL2而抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。     

过表达miR-769-5p对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响和机制

目的 探讨乳腺癌细胞中miR-769-5p的表达变化及其过表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力、迁移能力的影响及机制.方法 通过qRT-PCR法检测乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3、HCC1806和正常乳腺上皮细胞HBL-100中miR-769-5p的表达.通过脂质体转染技术对HCC1806转...     

EZH2抑制剂DZNeP对人乳腺癌细胞增殖、凋亡及相关信号通路的影响

目的探讨EZH2抑制剂DZNe P对人乳腺癌细胞增殖、凋亡及相关信号通路的影响。方法取对数生长期乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231,经2.5、5、10、20μmol/L DZNe P处理后(设不加DZNe P仅添加完全培养基组为对照组),采用四甲基偶氮唑盐比色法检测各组24、48、72 h的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测各组24、48 h的凋亡率,收集20μmol/L DZNe P处理72 h的MCF-7、MDA-MB-231细胞,采用Western印迹检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路和Wnt/β-连接素(β-catenin)通路中的蛋白变化。结果 DZNe P在2.5~20μmol/L范围内可抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖,且与对照组相比增殖抑制率升高(P0.05),该抑制效应呈浓度和时间依赖性;与对照组相比,DZNe P处理组的凋亡率均升高(P0.05),DZNe P各浓度处理48 h的凋亡率均高于24 h(P0.05);PI3K/Akt通路中,与对照组相比,20μmol/L DZNe P处理72 h后MCF-7、MDA-MB-231细胞的PTEN水平均升高,Akt水平均降低(P0.05);而在Wnt/β-catenin通路上,20μmol/L DZNe P处理72 h后两细胞株中的β-catenin、Cyclin D1和C-myc水平均降低(P0.05)。结论 DZNe P可抑制人乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡,可能与抑制肿瘤恶性行为相关的PI3K/Akt、Wnt/β-catenin通路有关,在乳腺癌治疗上有一定应用前景。     

全硫代反义寡核苷酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响

目的 本研究探讨全硫代反义寡核苷酸( PS-ASODN)对乳腺癌MDA-MB-231细胞端粒酶活性及细胞生长、迁移、侵袭的影响.方法 本实验将PS-ASODN经脂质体转染作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞,将实验分为空白对照组、对照正义全硫代寡核苷酸(PS-SODN)组和不同剂量的PS-ASODN组;脂质体介导的PS-ASODN和PS-SODN作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞后,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附法(EUSA)、流式细胞术、Transwell小室迁移、侵袭实验检测细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡、细胞迁移、侵袭能力的影响.结果 终浓度为1、3及5 μmol/L的PS-ASODN对MDA-MB-231细胞端粒酶活性及细胞的增殖均有抑制作用,与空白对照组比较差异显著(P＜0.01),并呈一定剂量依赖性;ELISA法检测结果,1、3及5μmol/L的PS-ASODN对MDA-MB-231细胞作用72 h后端粒酶皆为阴性,表明端粒酶PS-ASODN能够抑制端粒酶活性,对照组端粒酶皆为阳性.1、3及5μmol/L的PS-ASODN作用24h可以明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力(P＜0.01).结论 PS-ASODN能有效抑制人乳腺癌MDA-MB -231细胞的生长、促进凋亡、抑制其侵袭和迁移能力,其机制可能是通过PS-ASODN降低端粒酶活性而实现.     

中药扶正祛瘤对乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖、凋亡的影响及其机制的研究

目的探究中药扶正祛瘤对乳腺癌干细胞MDA-MB-231抑制增殖、凋亡的影响。方法体外富集培养乳腺癌干细胞MDA-MB-231,饲养小鼠并灌输中药获得含药血清;实验分为对照组、等药量组、1倍药量组、2倍药量组,MTT法检测每组乳腺癌干细胞MDA-MB-231细胞抑制率;在最适药物浓度条件下连续培养MDA-MB-23细胞5 d,MTT法测定每天细胞的抑制率,绘制乳腺癌干细胞MDA-MB-231抑制增长曲线;在最佳药物浓度及培养时间下培养细胞,用流式细胞仪检测乳腺癌干细胞MDA-MB-231的凋亡情况;q RT-PCR法检测中药扶正祛瘤处理后细胞MDA-MB-231中mi R-34a及其靶基因SIRT1的基因表达。结果含药血清对乳腺癌干细胞MDA-MB-231有不同程度的抑制,抑制率:2倍药量组1倍药量组等量药量组对照组;采用2倍药量的小鼠血清连续培养细胞,1～4 d内随处理时间增长细胞抑制率增加,第5天有下降趋势;含药血清处理后的细胞内mi R-34a基因表达量高于对照组,SIRT1基因表达量低于对照组;2倍药量的中药扶正祛瘤血清作用乳腺癌干细胞MDA-MB-231 4 d后与对照组相比出现大量的凋亡。结论中药扶正祛瘤能够效抑制乳腺癌干细胞MDA-MB-231的增殖,可能通过调控mi R-34a靶基因SIRT1的表达而抑制癌细胞的增殖凋亡。     

6-姜辣素对人乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探究6-姜辣素对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法不同浓度6-姜辣素处理人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,使用CCK-8法检测6-姜辣素对乳腺癌细胞增殖能力的影响;应用流式细胞仪检测6-姜辣素对乳腺癌凋亡的影响;6-姜辣素处理人乳腺癌细胞,应用Western印迹法检测促凋亡蛋白(Bad)、免抗人单克隆抗体(Bax)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白水平。结果 6-姜辣素抑制乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖能力,并呈浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞仪检测细胞凋亡率,提示6-姜辣素促进乳腺癌细胞凋亡发生;6-姜辣素处理乳腺癌细胞,促进Bad和Bax表达,而抑制Bcl-2表达;同时,6-姜辣素促进p-AMPK的表达,抑制p-mTOR的表达。结论 6-姜辣素通过激活AMPK/mTOR信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡,发挥抗肿瘤功能。     

CIK对地西他滨增敏乳腺癌MDA-MB-231细胞的杀伤机制探讨

目的 观察地西他滨（DAC）增敏细胞因子介导的杀伤细胞（CIK）对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的细胞毒作用,并探讨其增敏机制.方法 取对数生长期的乳腺癌MDA-MB-231及正常乳腺MCF-10A细胞,MMT法检测DAC及TRAIL对乳腺癌细胞的增殖抑制率,LDH法检测DAC单用或联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及CIK对乳腺癌细胞的杀伤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 DAC对乳腺癌细胞MDA-MB-231及正常乳腺上皮细胞MCF-10A无明显杀伤作用.TRAIL对MDA-MB-231有明显杀伤作用,作用24h的IC50约为100 ng/mL,然而对MCF-10A无明显促凋亡影响.5∶1、10∶1、20∶1效靶比的CIK对MDA-MB-231的杀伤率分别为10.7％±1.2％、17.8％±2.1％、37.2％±3.4％,对MCF-10A无杀伤作用.经50 μmol/L的DAC预处理乳腺癌细胞MDA-MB-231 24 h后,5∶1、10∶1、20∶1效靶比的CIK对MDA-MB-231的杀伤率分别为18.6％±2.6％、26.3％±4.5％、51.6％±6.6％,与相应单独效靶比的CIK杀伤作用比较,P均＜0.01.结论 DAC增敏CIK对乳腺癌MDA-MB-231细胞的杀伤敏感性,对正常的乳腺上皮细胞无影响,DAC联合CIK可能成为治疗乳腺癌患者的新途径.     

lncRNA LINC00958靶向调控miR-597-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00958影响乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用与机制。方法 定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00958和miR-597-5p在乳腺癌组织中的表达。MDA-MB-231细胞转染si-LINC00958或miR-597-5p或共转染si-LINC00958和anti-miR-597-5p。qRT-PCR检测LINC00958和miR-597-5p表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测MDA-MB-231细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。双荧光素酶报告实验分析LINC00958与miR-597-5p的靶向关系。结果 与癌旁组织比较,41例乳腺癌组织中LINC00958表达显著上调,miR-597-5p表达显著下调(P<0.05)。抑制LINC00958表达显著降低MDA-MB-231细胞增殖、Ki-67表达水平、迁移、侵...     

沉默LAIR-1表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭功能的影响

目的探讨白细胞相关免疫球蛋白样受体(LAIR)-1在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用RT-PCR方法检测乳腺癌细胞系和组织标本中LAIR-1 mRNA的表达情况。采用电穿孔转染法,将LAIR-1 siRNA转染MCF-7细胞,通过Western印迹检测LAIR-1在MCF-7细胞中的表达情况。通过四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)增殖实验检测LAIR-1对MCF-7细胞增殖的影响。通过伤Boyden小室检测LAIR-1对MCF-7细胞侵袭能力的影响。结果同癌旁组织相比,乳腺癌组织中LAIR-1 mRNA的表达量显著降低(P0.01);且同非转移性乳腺癌组织相比,转移性乳腺癌组织中LAIR-1 mRNA的表达量亦显著降低(P0.01)。转染LAIR-1 siRNA可显著抑制MCF-7细胞中LAIR-1的表达。抑制LAIR-1表达后,MCF-7细胞的增殖和侵袭能力均显著升高(P0.01)。结论 LAIR-1具有抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭的作用,乳腺癌组织中LAIR-1的低表达可能与乳腺癌的发生发展相关。     

腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用

目的观察鸟氨酸脱羧酶（ODC）在乳腺癌细胞中的表达及腺病毒介导的ODC反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用。方法采用western蛋白印迹法测定乳腺癌MDA-MB-231细胞（乳腺癌细胞）与正常乳腺MCF-10A上皮细胞（正常细胞）中ODC蛋白表达;将腺病毒介导的ODC反义RNA（rAd-ODC/Ex3as）感染乳腺癌细胞。检测转染后乳腺癌细胞ODC表达及增殖、侵袭能力。结果与正常细胞比较,乳腺癌细胞ODC蛋白明显升高;ODC蛋白表达及细胞增殖、侵袭能力明显降低。结论 ODC基因在乳腺癌细胞中呈高表达;rAd-ODC/Ex3as可抑制其表达。     

洛铂联合伊班膦酸对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的研究洛铂联合伊班膦酸对人乳腺癌MCF-7细胞体外培养增殖的抑制作用。方法采用MTT法检测单独应用洛铂、伊班膦酸及洛铂联合伊班膦酸对MCF-7细胞的抑制率。应用流式细胞仪检测不同药物作用下,细胞凋亡率及细胞周期变化。结果各给药组均对MCF-7细胞有抑制作用,且随着时间延长而增强(P<0.01)。联合用药组较单独用药组抑制作用更强(P<0.05)。流式细胞仪检测各给药组凋亡率均升高,较空白对照组差异有统计学意义(P<0.01)。各给药组G0/G1期比例升高,S及G2/M期比例下降,与空白对照组相差异均有统计学意义(P<0.01)。结论洛铂与伊班膦酸均能抑制体外培养的乳腺癌MCF-7细胞。洛铂与伊班膦酸联合应用具有协同作用。     

弓形虫ROP16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 探讨弓形虫Ⅰ型(RH)ROP16蛋白在人乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期及凋亡方面的作用。方法 以空载体(MCF-7-HBLV)和过表达ROP16蛋白的慢病毒(HBLV-RH ROP16)分别感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选出稳定表达ROP16的细胞株,Real time PCR、Western blot法检测MCF-7细胞中ROP16 mRNA和蛋白表达水平。CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡。Western blot法检测细胞周期及凋亡相关蛋白表达。结果 相比MCF-7-HBLV(空载体组)和MCF-7细胞组(对照组),MCF-7-RH ROP16细胞组中ROP16 mRNA和蛋白表达升高;细胞增殖率降低(P<0.01);S期细胞比例、细胞凋亡率升高(P<0.01)。促凋亡因子Bax、P53、Caspase-9、Caspase-3及细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子P21表达增高(P<0.01);抗凋亡蛋白Bcl-2及细胞周期蛋白A1(CyclinA1)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达均下降(P<0.01)。结论 弓形虫Ⅰ型(RH)ROP1...     

白藜芦醇通过c-FLIP蛋白影响乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长和侵袭

目的观察白藜芦醇(RES)抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231生长和侵袭的作用是否是通过抑制c-FLIP的表达来实现的。方法重组腺病毒载体Ad-c-FLIP的构建及鉴定、转染乳腺癌细胞,通过qRT-PCR、RT-PCR和Western印迹观察c-FLIP的表达情况;MTT比色法检测空白对照组;RES100μg/ml组;100μmol/L RES+Ad-GFP-c-FLIP组;Ad-GFP-c-FLIP组在24 h,48 h和72 h内对乳腺癌细胞增殖的影响;流式细胞仪和Transwell实验分别检测各组在作用48 h后乳腺癌细胞的凋亡和侵袭情况;Western印迹检测各组在作用48 h后caspase-3、-8、MMP-2、-9的表达情况。结果qRT-PCR、RT-PCR和Western印迹检测结果显示Ad-GFP-c-FLIP明显增强c-FLIP的表达,而与Ad-GFP-c-FLIP组比较RES+Ad-GFP-c-FLIP组明显抑制c-FLIP的表达;与Ad-GFP-c-FLIP组相比RES+Ad-GFP-c-FLIP组乳腺癌细胞的生长明显被抑制(P0.05),并且随时间的延长抑制作用明显加大;与Ad-GFP-c-FLIP组相比RES+Ad-GFP-c-FLIP组乳腺癌细胞的侵袭能力明显被抑制,而乳腺癌细胞的凋亡明显增加(P0.05);Western印迹检测结果显示,作用48 h后与Ad-GFP-c-FLIP组比较白藜芦醇+Ad-GFP-c-FLIP组MMP-2,-9表达被抑制,而caspase-3,-8表达被增强。结论 RES可以通过降低c-FLIP的表达来抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长和侵袭。