人参皂苷Rg3联合紫杉醇协同诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的:探讨人参皂苷Rg3联合紫杉醇是否具有协同诱导胃癌细胞凋亡的作用。方法:将人胃癌BGC—823细胞裸鼠移植瘤动物模型,随机分为4组(每组10只):人参皂苷Rg3组(GS-Rg3:10mg.kg-1.d-1灌胃),紫杉醇组(紫杉醇10 mg/kg腹腔内注入,每周2次),联合组(人参皂苷Rg3+紫杉醇,用法同上),对照组(生理盐水组)。连续用药三周。用药结束后脱颈处死裸鼠,统计各组抑瘤率;流式细胞仪检测移植瘤细胞凋亡率,RT-PCR测定凋亡关键因子Caspase-3水平,电镜观察肿瘤细胞凋亡状态。结果:联合组(人参皂苷Rg3+紫杉醇)抑瘤率明显大于人参皂苷Rg3组和紫杉醇组(P<0.01);联合组肿瘤细胞凋亡率明显大于紫杉醇及人参皂苷Rg3组(P<0.01),联合组Caspase-3水平最高,与紫杉醇组、人参皂苷Rg3组比较有显著差异(P<0.05和P<0.01)。结论:人参皂苷Rg3联合紫杉醇能协同诱导胃癌细胞凋亡,抑制肿瘤的生长。     

人参皂苷Rg3诱导淋巴管内皮细胞凋亡作用的研究

目的：探讨人参皂苷Rg3（20（R）-Ginsenoside Rg3）对淋巴管内皮细胞的抑制效应及凋亡诱导作用。方法：取健康猪的胸导管内皮细胞进行分离、培养;VIII因子对淋巴管内皮细胞进行鉴定。用含不同浓度人参皂苷Rg3处理淋巴管内皮细胞,采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态学改变;Hoechst 33258荧光染色检测淋巴管内皮细胞凋亡。结果：经VIII因子对培养的淋巴管细胞进行鉴定,为典型淋巴管内皮细胞。随着药物浓度的升高,作用时间的延长,人参皂苷Rg3对淋巴管内皮细胞的生长抑制率逐渐增高;在人参皂苷Rg3作用下,淋巴管内皮细胞呈凋亡改变,出现凋亡小体。结论：人参皂苷Rg3能诱导淋巴管内皮细胞凋亡,抑制淋巴管内皮细胞增殖。     

人参皂苷Rg3防治肿瘤作用及其机理的研究进展

从抑制肿瘤血管生成、降低肿瘤微血管密度、诱导肿瘤细胞凋亡、抗肿瘤转移、提高化疗药物疗效、增强患者免疫功能及降低某些肿瘤患者及高危人群对诱变剂的敏感性等多方面，对近年来国内关于人参皂苷Rg3防治肿瘤作用及其机理的研究进展进行了综述，认为人参皂苷虽具有广泛地防治肿瘤作用，但其确切地作用机理还有待进一步研究。     

人参皂苷Rg3通过干预细胞周期和诱导凋亡影响人食管癌Eca9706细胞生长

目的:研究人参皂苷Rg3对人食管癌细胞生长的抑制作用及其机制。方法:MTT法检测人参皂苷Rg3对人食管癌细胞Eca9706增殖的抑制,用流式细胞仪分别检测细胞周期和凋亡情况。结果:在25²00μg/ml范围内,不同浓度人参皂苷Rg3能抑制Eca9706细胞增殖,且呈剂量依赖性。53μg/ml、86μg/ml、141μg/ml人参皂苷作用Eca9706细胞48h,细胞周期在S期的比例明显增多,细胞凋亡率明显增加。结论:人参皂苷Rg3可能通过干预细胞周期和凋亡对食管癌Eca9706细胞增殖起抑制作用。     

人参皂苷Rg3诱导小鼠肝癌细胞凋亡及抑制肿瘤血管内皮生长因子生成的研究

目的观察人参皂苷Rg3对小鼠肝癌细胞凋亡的诱导作用,及肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)的变化,探讨Rg3抗肿瘤生长及抑制转移的机制。方法以Hca-F25//6A3-F(F)接种于615近交系小鼠,建立肝癌转移动物模型,分为5组:Rg3预防组(接种肿瘤前给Rg3)、Rg3治疗组(Rg3)、阳性对照组(PDD)、联合治疗组(Rg3 PDD)和阴性对照组(生理盐水),通过电镜及流式细胞仪分析肿瘤细胞的凋亡,并应用免疫组化方法检测VEGF的表达。结果人参皂苷Rg3预防组及治疗组电镜下可见较多细胞凋亡小体的形成;顺铂治疗组的形态改变以细胞破坏为主,凋亡的细胞较少;联合治疗组细胞的凋亡和坏死程度相当。流式细胞学检测分析结果为:Rg3预防组、治疗组及联合治疗组细胞凋亡的特征峰(5/5),而顺铂治疗组为(1/5),阴性对照组未见。应用Rg3各组均较未用药组VEGF表达减少。结论人参皂苷Rg3抗肿瘤生长及抑制转移的机制与诱导细胞凋亡、降低肿瘤血管生成有关。     

综述人参皂苷Rg3生产工艺研究进展

对近年来人参皂苷Rg3的生产工艺研究进展进行综述。其工艺包括物理法、化学水解法、微生物转化法、酶法、合成法等,为今后研究及获得人参皂苷Rg3提供参考基础。     

人参皂苷Rg3抗肿瘤实验研究进展

在肿瘤的中医治疗中,扶正培本是主要思路之一,人参以其大补元气、生津止渴、补气生血、安神益智之功而应用广泛。人参的有效成分主要是人参皂苷,已知的大约有40多种,其中日本学者北川勋于1980年首先制备出的20(R)-人参皂苷Rg3备受关     

人参皂苷Rg3抗肿瘤实验研究进展

在肿瘤的中医治疗中,扶正培本是主要思路之一,人参以其大补元气、生津止渴、补气生血、安神益智之功而应用广泛。人参的有效成分主要是人参皂苷,已知的大约有40多种,其中日本学者北川勋于1980年首先制备出的20（R）-人参皂苷Rg3备受关注,而20（S）-人参皂苷Rg3是它的同型异构体,20（R）-人参皂苷Rg2是它的降解产物,目前认为三者中以20（R）-人参皂苷Rg3的抗肿瘤作用最强。现经检索世界医学文献数据库（PUBMED）,对人参皂苷Rg3抗肿瘤的实验研究现状做一综述。     

人参皂苷Rg3抗肿瘤机制研究进展

人参皂苷Rg3是人参提取物中主要抗肿瘤成分,可通过多途径发挥作用,尤其抗肿瘤血管新生作用具有特色,被认为是中药血管新生抑制剂。目前该药的研究已初具规模,近年来已通过多角度研究阐述其部分作用机制,对该药抗肿瘤机制研究进展做一综述,以备临床参考。     

人参皂苷Rg2致突变作用研究

目的 :检测人参皂苷Rg2 是否有致突变作用。方法 :在动物急性毒性试验的基础上 ,采用体内微核技术、哺乳类细胞染色体畸变和Ames实验。结果 :从真核细胞及原核细胞水平检测人参皂苷Rg2 无致突变作用。结论 :人参皂苷Rg2 低毒、无致突变作用。     

人参皂苷Rg3与TRAIL联合应用对大肠癌细胞株HCE8693作用的实验研究

 目的将人参提取成分20(R)-人参皂苷Rg₃和肿瘤坏死因子(TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)基因,联合应用于人大肠癌细胞株HCE8693,来寻求传统中药与现代基因治疗对肿瘤治疗的新途径。方法将人参皂苷Rg₃联合重组腺病毒载体介导的TRAIL基因(Ad／GT-TRAIL)作用于大肠癌细胞株HCE8693。通过MTT比色法与流式细胞仪研究分析其对HCE8693细胞的作用效果。结果 单独应用浓度为0.01％,0.017％,0.025％,0.05％的人参皂苷Rg₃及2000MOI的Ad／GT-TRAIL对HCE8693细胞的生长抑制率分别为8.6％,8.6％,18.7％,21.9％和24.3％;凋亡诱导率分别为5.4％,7.6％,20.3％,20.9％和23.2％。联合应用后,对HCE8693细胞株的生长抑制率及凋亡率均有显著的增强作用,分别达17.8％,25.7％,37.3％,46.2％及18.9％,20.1％,46.2％,56.0％。人参皂苷Rg₃对HCE8693的生长抑制及促凋亡作用存在浓度依赖现象。结论一定浓度的人参皂苷Rg₃或TRAIL能有效抑制HCE8693的生长,人参皂苷Rg₃对HCE8693的生长抑制及促凋亡作用有浓度依赖性。联合应用后,其对HCE8693的生长抑制作用及凋亡诱导作用均明显增强,其协同作用的机制值得进一步探索。     

藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究

目的：研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌(TCCB)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法：用crocin处理后，四甲基偶氮唑盐（MTT）法分析其对T24细胞增殖的影响；流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率。建立人膀胱癌T24细胞株裸鼠移植瘤动物模型。随机分为对照组和处理组。50 mmol·L^-1 crocin处理后，观察其对肿瘤的抑制作用；电镜观察肿瘤组织形态改变；SP-免疫组织化学法分析Bcl-2，Bax，survivin，Cyclin D₁蛋白表达。结果：Crocin能明显抑制人膀胱癌T24细胞的生长，并使T24细胞呈明显的G₀/G₁ 期阻滞现象；T24细胞早期凋亡率随crocin作用时间的延长而逐渐增加。Crocin对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用，电镜观察可见细胞凋亡的形态学改变，免疫组化结果显示，经Crocin处理后Bcl-2, survivin,Cyclin D₁的表达下调，而Bax的表达上调。结论：Crocin对人膀胱癌T24细胞株的体内外增殖均具有良好的抑制作用，其机制可能是改变细胞周期分布和诱导细胞凋亡，作用机制与下调Bcl-2, survivin,Cyclin D₁基因表达和上调Bax的基因表达有关。     

Antiobesity effect of ginsenoside Rg3 involves the AMPK and PPAR-gamma signal pathways

Ginsenosides, the active component of ginseng, exerts antidiabetic and anticancer effects. This study investigated the molecular basis of ginsenoside Rg3, a red ginseng rich constituent, focusing on its ability to inhibit adipocyte differentiation in 3T3-L1 cells. The data show that ginsenoside Rg3 was effective in the inhibition of adipocyte differentiation. This inhibitory effect of ginsenoside Rg3 on adipocyte differentiation was accompanied by PPAR-gamma inhibition in rosiglitazone-treated cells. The study also tested whether AMP-activated protein kinase (AMPK) activation was involved in the inhibitory effects of ginsenoside Rg3. AMPK plays a role in maintaining health in the context of diseases such as type 2 diabetes, obesity and cancer. AMPK was reported to control nutritional and hormonal signal modulating. Rg3 significantly and time-dependently activated AMPK. Taken together, these results suggest that the antiobesity effect of red ginseng rich constituent, ginsenoside Rg3, involves the AMPK signaling pathway and PPAR-gamma inhibition.     

人参皂苷Rg1促进体外培养神经干细胞 增殖的研究

目的:考察人参皂苷Rg_1对体外培养神经干细胞增殖的影响及其可能机制.方法:体外培养14 d大鼠胎鼠神经干细胞,培养液中掺入终浓度为10 mg·L~(-1)的5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU),在培养液中分别加入1,10μmol·L~(-1)的人参皂苷Rg_1,同时设置空白组.通过免疫荧光染色标记,计数BrdU阳性细胞数目;利用实时荧光定量RT-PCR方法检测神经干细胞负性分化调节基因Hesl和正性分化调节基因Mashl mRNA表达.结果:与空白对照组比较,10 μmol·L~(-1)人参皂苷Rg_1可显著性增加BrdU阳性细胞数目(40.5±10.9 vs 26.2±6.0,P＜0.01),上调Gesl基因表达(1.00±0.11vs1.28±0.14,P＜0.05);1 μmol·L~(-1)人参皂苷Rg_1同时上调了Hesl和Mashl基因表达(1.00±0.11 vs 1.28±0.14,1.01±0.17 vs 1.25±0.23,P＜0.05),但BrdU阳性细胞数目无显著性差异(26.2±6.0vs24.7±9.3).结论:人参皂苷Rg_1可以促进体外培养的神经干细胞增殖,这种促增殖作用可能是通过上调Hesl基因表达实现的.     

人参皂苷Rg3对人肺鳞癌裸鼠移植瘤生长及VEGF bFGF表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞裸鼠移植瘤的生长及血管生成相关因子VEGF、bF-GF表达的影响。方法:通过皮下种植SK-MES-1细胞建立人肺鳞癌裸鼠移植瘤模型,成瘤后随机分为4组:对照组(生理盐水,0.5ml.d-1)、低剂量Rg3组(0.5mg·kg-1.d-1)、中剂量Rg3组(1mg·kg-1.d-1)和高剂量Rg3组(2mg·kg-1.d-1),每日灌胃1次,共28次。测量各组裸鼠移植瘤体积,光镜下观察移植瘤组织的形态;应用免疫组织化学和原位杂交法研究裸鼠移植瘤组织VEGF、bFGF的表达变化。结果:人参皂苷Rg3可显著抑制移植瘤的生长,各实验组抑瘤率分别达到41.47%、61.29%和80.14%,与对照组相比,肿瘤生长明显受抑,且具有剂量依赖性,各实验组移植瘤体积与对照组间比较P0.05,有统计学意义。Rg3能够抑制移植瘤VEGF、bFGFmRNA和蛋白表达,具有剂量依赖性,各实验组与对照组间比较均有统计学意义。结论:人参皂苷Rg3具有显著的抗肺鳞癌移植瘤作用,其机制可能与下调VEGF、bFGF表达有关。人参皂苷Rg3作为一种新的抗肺鳞癌药物,其作用机制有待于进一步研究。     

姜黄素作用PTEN/PI3K/AKT通路诱导膀胱癌EJ细胞凋亡

目的:研究姜黄素抗癌作用的分子机制。方法:以人膀胱癌细胞株EJ为模型,采用MTT法、流式细胞术,检测姜黄素对EJ细胞生长和凋亡的影响,并通过Western Blotting法检测姜黄素对EJ细胞PTEN/PI3K/AKT通路凋亡相关蛋白表达的影响。结果:姜黄素以浓度及时间依赖的方式抑制EJ细胞的增殖;流式细胞仪检测发现姜黄素作用于EJ细胞24 h后凋亡率呈剂量依赖性增加。Western Blotting显示50μM姜黄素作用EJ细胞后,PTEN、GSK-3β、C-raf、Bad、caspase-9、caspase-3的活性增强,PARP的裂解增加和Akt、PDK1的表达水平降低。结论:姜黄素能增加EJ细胞PTEN的表达,进而抑制PI3K/Akt信号通路的激活,继之激活下游GSK-3β,caspase-9和Bad等多种促凋亡分子的表达,诱导EJ细胞发生凋亡。该研究表明PTEN/PI3K/Akt信号通路在姜黄素诱导的EJ膀胱癌细胞凋亡中起了重要作用。     

人参皂苷Rg1对LPS诱导的BT325细胞株脑啡肽酶表达的影响

目的 :探讨人参皂苷Rg₁对LPS诱导的BT325细胞株脑啡肽酶表达的影响。方法 :应用MTT比色法检测一定剂量LPS和不同浓度人参皂苷Rg1对BT325细胞存活率的影响 ,应用RT PCR观察细胞中脑啡肽酶(neprilysin ,NEP)表达的变化。结果 :一定剂量LPS作用于BT325细胞株 ,BT32 5细胞存活率下降 ,细胞内NEP的表达降低。人参皂苷Rg₁能提高LPS诱导的BT325细胞的存活率 ,使细胞内NEP的表达增高。结论 :一定剂量的LPS能造成细胞损伤和细胞内NEP表达降低的模型 ,人参皂苷Rg₁对LPS造成的细胞毒性具有一定的保护作用 ,并可以增高细胞内NEP的表达。     

土荆皮乙酸B对膀胱癌5637细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究二萜类化合物土荆皮乙酸(pseudolaricc acid B)诱导膀胱癌5637细胞凋亡的作用,探讨其作用机制.方法:MTT法测定不同浓度土荆皮乙酸作用后5637细胞的生长情况;流式细胞术检测细胞周期情况;AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术观察土荆皮乙酸作用后细胞的凋亡情况;免疫印迹法检测survivin和caspase-3蛋白表达的变化.结果:土荆皮乙酸能诱导5637细胞凋亡,并明显抑制survivin的表达,同时对caspase-3有上调作用.结论:土荆皮乙酸在体外可抑制5637细胞增殖,诱导其发生凋亡.土荆皮乙酸诱导5637细胞发生凋亡的生物学效应可能与survivin的表达下降,caspase-3的表达上升有关.     

人参皂苷Rg2的排泄试验研究

目的:研究静脉给予大鼠人参皂苷Rg_2后,其在胆汁、粪便和尿液中的排泄.方法:采用反相高效液相色谱(HPLC)-紫外检测器(UVD)法测定大鼠胆汁、粪便和尿液中的人参皂苷Rg_2;Dikma Diamonsil~(TM) C_(18) 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇4%磷酸水溶液(65:35)为流动相,检测波长为203 nm.结果:HPLC-UVD测定方法的标准曲线线性关系、样品回收率和日内、日间精密度均符合生物样品分析要求.给大鼠静脉注射人参皂苷Rg_2后,5.5 h内胆汁中原形人参皂苷Rg_2累积排泄量为给予剂量的27.2%,24 h内粪便中原形人参皂苷Rg_2累积排泄量为给予剂量的22.6%;尿液中未检出人参皂苷Rg_2.结论:静脉给予大鼠人参皂苷Rg_2,原形药物主要通过胆汁和粪便途径排出体外.     

Enrichment of the less polar ginsenoside (Rg3) from ginseng grown in New Zealand by post-harvest processing and extraction

Background: Previous studies showed that New Zealand-grown ginseng contains an abundance of ginsenosides and that rare less polar ginsenosides, such as Rg3, exhibit more pharmacological activities than polar ginsenosides, which are the major components of ginseng. Methods: The ginsenoside profile of New Zealand-grown Panax ginseng was manipulated by treatment with acetic acid, sodium hydroxide, pH, and high temperature. The abundance of 23 ginsenosides extracted by different treatments was quantified using high-performance liquid chromatography. Results:Treatment with 0.5 mol/L acetic acid can stimulate the degradation of polar ginsenosides to less polar ginsenosides (5.6％Rg3 was accumulated, P<0.0001). Furthermore, when ginseng root was treated at 121 ℃ for 100 min in a pH 3.0 acetic acid aqueous solution, the majority of the polar ginsenosides were converted into less polar ginsenosides. Specifically, 83.46 ± 3.69％(P= 0.0360) of the less polar ginsenosides and 41.01 ± 2.39％(P=0.0412) of Rg3 were enriched. In contrast, alkali treatment did not convert the polar ginsenosides into less polar ginsenosides at mild temperature and less conversion was observed compared with acid treatment at high temperature. Conclusion: This is the first attempt to manipulate the ginsenoside profile of New Zealand-grown ginseng. The conditions (high temperature with low pH) may be modified to produce and enrich the less polar ginsenoside fraction (especially Rg3) from the total ginseng extract.