羊栖菜多糖对离体小鼠NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响

目的观察羊栖菜多糖对离体小鼠NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响。方法10、30、100mg/L浓度的羊栖菜多糖分别作用小鼠脾细胞6、12和18h,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性;10、30、100mg/L浓度的羊栖菜多糖分别作用小鼠腹腔巨噬细胞16、24和48h,测定其所分泌的一氧化氮（NO）量。结果10、30mg/L浓度组的羊栖菜多糖作用6、12h对离体小鼠NK细胞活性有明显的促进作用,以30mg/L浓度羊栖菜多糖作用组效果最为显著（P〈0.01）;10、30mg/L浓度组的羊栖菜多糖促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO作用更为明显,以10mg/L浓度组作用48h效果最为显著（P〈0.01）。结论羊栖菜多糖能明显增强离体小鼠NK细胞活性,促进巨噬细胞释放NO。     

实验性糖尿病对大鼠胸腺巨噬细胞和交错突细胞的影响

目的 探讨糖尿病对大鼠胸腺巨噬细胞和交错突细胞的影响及其在胸腺退化中的作用。方法 采用四氧嘧啶型糖尿病动物模型，应用酶组织化学、免疫组织化学和透射电镜方法，对糖尿病大鼠胸腺巨噬细胞和交错突细胞进行定性和半定量分析及形态学观察。结果在糖尿病大鼠胸腺中，巨噬细胞呈ACP、NSE强阳性组化反应及呈Ly、AACT强阳性免疫反应，细胞数量明显增多，大量聚集于皮质和皮髓质交界区，皮质尤为明显。交错突细胞呈S-100蛋白强阳性免疫反应，细胞数量则明显减少，主要分布于髓质和皮髓质交界区。电镜观察皮质巨噬细胞胞质含有被吞噬的凋亡细胞或小体，而皮髓质交界区巨噬细胞胞质则含有囊泡和颗粒。结论 糖尿病大鼠胸腺巨噬细胞数量明显增多，酶活性明显增强，在酶活性、形态结构和功能上存在异质性变化。交错突细胞数量则明显减少。两者均在胸腺退化的过程中起重要作用。     

小鼠对大鼠异种皮肤移植耐受的诱导

目的探索更为温和的适合临床应用的诱导异种移植耐受的方案。方法给小剂量照射（ 300 rad）的 C57BL/6 (B6)小鼠静脉注射抗小鼠 CD4单抗 0.5 ml后输注 Lewis大鼠骨髓细胞 ,并联合应用腹腔注射环磷酰胺诱导耐受。于耐受诱导后 30 d对受体小鼠作耐受状态的检查,包括供体特异性皮肤移植、混合淋巴细胞反应（ MLR）及迟发型超敏反应（ DTH）。并通过过继转移实验、外源 IL- 2对耐受小鼠供体特异性 MLR的影响等进一步探讨耐受形成的机制。结果 Lewis大鼠的皮肤移植物在耐受 B6小鼠中存活期特异性延长, MLR及 DTH检查证明 B6小鼠对 Lewis大鼠的脾细胞产生特异性耐受,对无关第三者 DA大鼠及 BALB/c小鼠的脾细胞仍表现出强烈的免疫应答。体内外过继转移实验表明 ,耐受不能被转移 ,未发现抑制细胞的存在。耐受小鼠供体特异的 MLR可以被外源 IL- 2逆转 ,说明耐受主要不是克隆排除,而与克隆不应答有关。结论应用低剂量照射、骨髓移植、环磷酰胺及抗 CD4单抗等方法法可以有效诱导出小鼠对大鼠的移植耐受。     

皮肤NK/T细胞瘤的皮肤护理

目的 探讨NK/T细胞淋巴瘤的护理方法.方法 对皮肤的结外NK/T细胞淋巴瘤患者的皮硼酸湿敷进行局部清洁、硼酸湿敷、氦-氖激光照射、聚维酮碘封包综合等护理.结果 患者皮肤溃疡坏死好转出院.结论 硼酸湿敷配合氦-氖激光照射、聚维酮碘封包,辅以细致、有效的护理工作可以促进溃疡的愈合,有效地控制病情,减轻患者的痛苦.     

免疫细胞在小鼠→大鼠心脏移植排斥反应中的作用

目的 :探讨T细胞、巨噬细胞 (MΦ)和自然杀伤细胞 (NK)细胞在小鼠→大鼠心脏移植反应中的作用 .方法 :动物随机分 4组 :对照组、环孢素A(CsA)组、环磷酰胺 (CyP)组和CsA +CyP组 .排斥后取移植心脏作病理学检查 .用免疫组织化学法检测CD4 ,CD8,CD5 7和CD6 8在移植物中的沉积 .结果 :单用CsA (2 .6± 1.5 )d或CyP(3.2± 1.6 )d均不能显著延长异种移植物的存活时间 ,联用CsA和CyP使移植心脏存活 (4 .7± 1.4 )d (P <0 .0 5 ) .病理检查发现被排斥心脏中大量细胞浸润 ,所有被排斥心脏中均有大量NK细胞和MΦ浸润 ,但未见CD4 +和CD8+T细胞浸润 .结论 :NK和MΦ在小鼠→大鼠心脏移植反应中起重要作用 ,而与T细胞无明显相关 .     

登革病毒感染对T细胞和NK细胞表达细胞因子的影响

【目的】 本文探讨登革病毒体外感染人外周血单个核细胞后对T细胞和NK细胞表达细胞因子的影响,并初步探讨登革病毒感染引起的免疫效应。【方法】用登革2型病毒(DEN-2)感染健康人外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测登革2型病毒后T细胞和NK细胞的表型及细胞因子的表达水平。【结果】 DEN-2感染18 h后,T细胞明显表达CD69、IFN-γ、TNF-α和perforin,NK细胞表达CD69、IFN-γ和perforin;随着感染复数(MOI)增加,表达perforin和IFN-γ的T细胞数及表达perforin的NK细胞数上升;随着感染时间的延长,表达perforin和IL-4的T细胞数及表达perforin的NK细胞数逐渐上升,而表达IFN-γ的T细胞数及表达IFN-γ的NK细胞数逐渐下降;表达perforin的T细胞亚型主要为CD8+T细胞。【结论】 发现登革病毒在体外能够诱导T细胞表达CD69、IFN-γ、TNF-α、perforin和IL-4,及 NK细胞表达CD69、IFN-γ和perforin,提示T细胞、NK细胞可能在抗登革病毒感染或免疫损伤中起着重要的作用。     

5例皮肤NK／T细胞淋巴瘤患者的护理

目的总结皮肤NK／T细胞淋巴瘤患者的皮肤护理方法。方法对5例皮肤NK／T细胞淋巴瘤患者的皮肤予以硼酸湿敷、氦-氖激光照射、聚维酮碘封包等综合护理。结果5例患者皮肤红斑、丘疹缩小或愈合,坏死黑痂脱落,深溃疡创面变浅,且长出鲜红色肉芽。结论硼酸湿敷配合氮-氖激光照射、聚维酮碘封包,能促进溃疡的愈合,有效地控制病情。     

NK细胞临床应用进展

NK细胞是除T、B细胞之外的第三类淋巴细胞,具有独特功能的细胞亚群.NK细胞既是重要的外向性自然防御细胞,又是体内多种免疫细胞的调节细胞.不仅具有溶解靶细胞(某些肿瘤细胞和病毒感染细胞)的能力,而且还兼有重要的生理性免疫调节作用,在临床造血干细胞移植和抗肿瘤中发挥重要作用,被认为是机体免疫中不可忽视的细胞.研究发现,某些疾病的发生、发展及转归都与NK细胞有着密切的关系.     

T及NK细胞型慢性淋巴细胞白血病

Ｔ及ＮＫ细胞型慢性淋巴细胞白血病郭秀英齐君原＊（滨州卫校生物化学教研室，滨州市２５６６０３＊中国医学科学院血液学研究所，天津市３０００２０）慢性淋巴细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＬＬ）绝大多数来自Ｂ细胞，约占９...     

细胞因子预处理对体外扩增NK 细胞活性的影响

目的 采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血单个核细胞（PBMCs）进行自然杀伤细胞（NK）的 扩增培养,培养过程中白细胞介素IL-2、IL-12、IL-15、IL-18 以不同组合及不同方式添加,探究体外培养 NK 细胞的细胞因子最佳组合和添加方式。方法 根据细胞因子组合及添加方式的不同,将NK 培养分为3 组。 A 组：IL-2+IL-15 组,B 组：IL-2+IL-12+IL-15+IL-18 组,C 组：IL-12+IL-15+IL-18 预处理/IL-2 组。 培养过程中第7 天和第14 天分别取样统计各组细胞因子培养后的细胞数量,并使用流式细胞仪检测NK 细胞 表面分子表达;将NK 细胞与K562 细胞共培养,然后ELISA 测定NK 细胞的IFNγ 释放量,CSFE/7-AAD 法 检测NK 细胞的杀伤活性。结果 3 组不同的培养方式所得细胞的扩增倍数差异无统计学意义,随着培养时间的 增加,NK细胞的比例也逐渐上升,3组间NK细胞比例差异无统计学意义（P >0.05）。NK细胞表面CD25（IL-2Rα） 的表达情况比较,差异有统计学意义（P <0.05）,C 组的阳性率高于A 和B 组。IFN-γ 的释放量和NK 细胞的 体外杀伤活性一致,均为C 组高于A 和B 组。对肿瘤患者的NK 细胞,C 组的细胞因子添加方式也能很好的进 行扩增（CD3-CD56+ 细胞比例大于50%）。结论 C 组中的细胞因子预处理方式能够高效扩增NK 细胞,与A 或B 组联合添加的方式比较,该方式能显著激活NK 细胞的杀伤活性。     

子宫内膜异位症患者红细胞免疫功能与NK细胞活性的相关性

目的: 探讨红细胞免疫功能及自然杀伤(NK)细胞活性在子宫内膜异位症(内异症)发病中的作用,以及两者之间的相关性。方法:采用红细胞C3b受体花环试验（RC3bR）及红细胞免疫复合物花环试验(RIcR)测定44例内异症患者(内异症组)红细胞免疫功能变化,采用4-甲基偶氮唑盐(MTT)法检测患者外周血NK细胞活性,并与正常妇女(对照组)进行比较。结果:内异症组RC3bR及NK细胞活性低于对照组(P<0.05),其值随内异症病情加重有逐渐下降趋势;内异症组Ⅲ,Ⅳ期患者RIcR较对照组明显升高(P<0.05)。44 例内异症患者RC3bR值与NK细胞活性的降低程度呈直线正相关(r=0.6659,P<0.01)。结论：内异症患者红细胞免疫功能及NK细胞活性的降低可能与该病的发生与发展有关。     

rhIL-10对小鼠T淋巴细胞及NK细胞活性的影响

目的 研究ｒｈＩＬ－１０对小鼠免疫功能的影响。方法 用ＭＴＴ还原法检测ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖试验,中性红染色法检测ＮＫ细胞活性。结果 ｒｈＩＬ－１０能抑制小鼠Ｔ淋巴细胞及ＮＫ细胞活性（Ｐ〈０．０１）,这种抑制作用随剂增加而加强,结论ｒｈＩＬ－１０能抑制小鼠Ｔ淋巴细胞及ＮＫ细胞活性,并呈剂量依赖关系。     

标本保存温度和保存时间对流式自然杀伤细胞和B细胞数量检测的影响

目的：检测标本保存时间和保存温度,为流式自然杀伤（natural killer,NK）细胞和B细胞检测标准化操作提供科学依据。方法采用四色流式细胞术分析健康体检人群外周血NK细胞和B细胞数量百分比,检测保存时间与保存温度对实验结果的影响。结果未经处理的全血标本常温（18℃）保存后检测结果稳定,低温、高温及长时间保存都引起检测结果降低;全血标本经荧光抗体染色后,用多聚甲醛固定可在4℃条件下保存1周。结论流式细胞分析法检测NK细胞和B细胞,若标本不能及时处理宜18℃保存并在96 h内检测;处理后的样本可在4℃条件下保存1周。     

淋巴母细胞性NK／T细胞淋巴瘤与EB病毒的关系

目的 探讨淋巴母细胞性NK/T细胞淋巴瘤与EB病毒的关系。方法 收集5例母细胞性NK/T细胞淋巴瘤,1例原发于鼻腔,4例原发于淋巴结。用免疫组织化学SP法确定瘤细胞本质,用原位杂交法检测EB病毒编码的RNA（EBER1/2）。结果 原发于鼻腔的1例EBER1/2呈阳性,原发于淋巴结的4例EBER1/2均阴性。EB病毒潜伏膜蛋白（LMP-1）全部阴性。结论 EBV在母细胞性NK/T细胞淋巴瘤的发生中可能具有一定作用。     

脑肿瘤患者手术前后T细胞亚群及NK细胞活性的变化

目的 探讨脑肿瘤患者手术前后细胞免疫功能的变化及其临床意义。方法 采用单克隆抗体酶标法对22例脑肿瘤和12例脑内血肿患者手术前后不同时期的T细胞亚群及NK细胞活性进行动态监测。结果 脑肿瘤CD3^ 、CD4^ ,CD10^16 56和CD4^ /CD8^ 比值较对照组均有不同程度降低。而胶质瘤组较其余两组明显下降。34例患者术后4期CD3^ ,CD4^ ,CD16 56^ 比值均发生变化。胶质瘤组在术后1至2周明显低于其余两组。术后3至4周才逐渐恢复至正常水平。结论 脑肿瘤患者细胞免疫功能被抑制。且恶性胶质瘤较良性肿瘤更为明显，手术应激能导致T细胞亚群及NK细胞活性变化。脑肿瘤切除术后细胞免疫功能呈现暂时抑制至逐渐恢复的过程。     

妊娠早期子宫NK细胞中HIF和VEGF的表达

目的:探讨妊娠子宫自然杀伤细胞(uterinenaturalkillercell,uNK)和外周血NK细胞(peripheralnaturalkillercell,pNK)中乏氧诱导因子(hypoxiainduciblefactor,HIF)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)C、VEGFE的表达。方法:采用免疫磁珠法分离纯化妊娠早期uNK和pNK细胞,提取其总RNA,采用RT-PCR技术检测HIF和VEGF的mRNA在人妊娠早期uNK细胞和pNK细胞中的表达。结果:①人妊娠早期uNK细胞中HIFmRNA表达强于pNK细胞(2.31±0.19和0.12±0.02);②VEGFC和VEGFE在两种细胞中均有表达,但VEGFE在uNK中的表达强于pNK(0.82±0.03和0.10±0.01),VEGFC在两种细胞中的表达相近。结论:人妊娠早期uNK细胞HIF和VEGFE的强表达可能与uNK细胞在胎盘血管形成中的作用密切相关。     

混合胸腺移植诱导皮肤移植物免疫耐受的实验研究

目的通过建立混合胸腺移植模型,对混合胸腺移植诱导皮肤移植物免疫耐受及其机制进行初步研究.方法混合胎胸腺移植3个月后,进行异基因皮肤移植,观察异种皮肤移植物的存活情况,并利用流式细胞仪检测各组受体动物外周血中CD4 CD25 T细胞的百分率,利用免疫组化观察宿主骨髓源细胞在胸腺移植物内的分布情况.利用脾细胞过继转移,观察对异种供体抗原已产生耐受的受者脾细胞,能否将耐受状态过继转移至正常BALB/c小鼠.结果混合胸腺移植3个月后,受体外周血白细胞中CD4 CD25 T细胞的百分率为(2.83±0.20)% ,与正常BALB/c小鼠相比,相差不显著.免疫组化染色显示,在移植胸腺内宿主源MHC-Ⅱ分子阳性细胞主要位于髓质,并具有典型树突样外观.将对F344大鼠皮肤已产生耐受的脾细胞,过继转移至免疫健全的BALB/c小鼠,可特异延长胸腺供体来源的F344大鼠皮肤移植物的平均存活时间.结论通过胸腺移植诱导的免疫耐受,主要是以胸腺内的中枢排除机制以及调节性T细胞的免疫抑制作用为主,而且此种耐受具有一定的"可转传性".     

混合胸腺裸小鼠移植模型的建立及重建T细胞功能的体外研究

目的　建立混合胸腺移植模型 ,并在体外观察重建T细胞的功能状况。方法　首先建立混合胸腺裸小鼠左肾包膜下移植模型 ,流式细胞仪检测受体动物外周血中T细胞的重建情况 ,并利用刀豆素A(concanavalinA ,ConA)增殖实验和混合淋巴细胞培养检测其体外功能状态。结果　混合胸腺移植 3个月后 ,移植的胸腺组织在裸小鼠肾包膜下能够正常发育 ,并有效重建了受体外周血中的CD4 T和CD8 T细胞。体外功能检测显示 ,受体的脾细胞对ConA的刺激有良好的反应性 ,并对供体胸腺来源的F3Q44大鼠抗原刺激表现为特异性的低反应。结论　混合胸腺移植不仅在数量上可重建受体裸小鼠外周血中CD4 T和CD8 T细胞 ,而且受体中重建的T细胞还可发挥正常的免疫功能     

麻风易感人群NK细胞活性的检测

目的　探讨麻风病易感因素 ,为研究麻风患者细胞免疫低下与遗传因素的关系提供参考数据。　方法　采用改良细胞毒法对恩施州麻风病高发区 12 0位与麻风患者有血缘关系的人群进行NK细胞活性检测 ,并检测当地无麻风病家族史的正常健康人群NK细胞活性作为对照。　结果　大多数与麻风患者有血缘关系的人NK细胞活性与正常人没有差异 ,少数个体NK细胞活性明显低于正常人 (χ2 =4.0 7,P <0 .0 5 )二者有显著差异。　结论　NK细胞活性低下可能是麻风易感原因之一。