纳米鹿茸粗多肽对体外培养的软骨细胞代谢的影响

软骨细胞是关节软骨中惟一的细胞，在软骨形成、代谢以及修复中起着极其重要的作用。有研究表明，鹿茸具有促软骨细胞增殖作用，本研究旨在探讨纳米鹿茸及普通鹿茸粗多肽对体外培养的软骨细胞代谢功能的影响，比较药物制成纳米粉后与普通粉的作用强度。     

补肾壮骨胶囊对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的：通过观察补肾壮骨胶囊对兔膝OA软骨细胞凋亡的影响,探讨其治疗膝OA的作用机理。方法：将40只雄性新西兰大白兔随机分为4组：A正常组、B模型组、C治疗组、D对照组,用改良Hulth法制造兔膝OA模型,C组给予补肾壮骨胶囊,D组给予壮骨关节丸。给药8周后,将兔处死后用TUNEL法观察补肾壮骨胶囊对实验性兔膝OA软骨细胞凋亡的影响,RT-PCR检测Bax、Bcl-2在mRNA水平表达的变化。结果：研究显示A组凋亡指数最小,B组凋亡指数最高,C、D组凋亡指数明显小于B组,高于A组。Bax/Bcl-2比值在B组明显高于A组,C、D组与B组比较,比值下降;C组和D组比较,比值无明显差异。结论：补肾壮骨胶囊可以抑制Bax,促进Bcl-2表达,提高Bcl-2/Bax比值,抑制关节软骨细胞的凋亡。     

医用臭氧对兔膝关节骨性关节炎软骨细胞IL-1β表达的影响

目的：观察臭氧对兔膝关节骨性关节炎软骨细胞IL-1β表达的影响。方法：成年新西兰大白兔36只,随机分为正常组4只、对照组16只、实验组16只;采用Hulth法将3组实验动物制成膝关节骨性关节炎模型。待造模成功后,实验组每日向膝关节腔内注射臭氧,连续7d;对照组关节腔内注射氧气,连续注射7d;正常组不作处理。于造模后第7d处死3组实验动物,DAB法检测膝关节软骨细胞IL-1β的表达。结果：IL-1β阳性细胞率：实验组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;对照组与正常组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：医用臭氧能明显降低早期OA软骨中的IL-1β的表达,这可能是臭氧治疗骨性关节炎的重要机制之一。     

虾青素对兔骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡影响的研究

目的通过观察虾青素对新西兰兔骨性关节炎模型的软骨细胞增殖与凋亡基因表达的影响,初步探索其干预软骨细胞代谢的作用机制。方法取5月龄新西兰兔骨性关节炎模型的膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,分别采用MTT法、TUNEL法、免疫组化法对细胞增殖、凋亡及细胞周期调控基因Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53 mRNA的表达进行检测。结果不同剂量组虾青素可显著促进软骨细胞体外增殖,并可通过减弱软骨细胞Bax、Caspase-3、p53 mRNA的表达,增强Bcl-2 mRNA的表达来减缓软骨细胞凋亡进程。结论虾青素可有效调控兔骨性关节炎软骨细胞代谢,增强细胞活性,延缓凋亡,具有研发成为骨性关节炎治疗药物的潜能。     

兔膝关节骨性关节炎模型的建立及软骨细胞的分离、培养

[目的]探讨复制兔膝骨性关节炎(KOA)的实验动物模型及其软骨细胞的分离、培养。[方法]用改良Hulth造模法复制膝骨性关节炎,进行X线摄片、透射电镜观察造模后细胞形态的改变,用双酶解法分离膝骨关节软骨细胞,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL法)观察细胞的凋亡。[结果]正常组膝关节面光滑平整,软骨细胞膜完整。造模组膝关节内侧间隙明显变窄,关节面粗糙有骨赘生成,软骨细胞胞核固缩,细胞膜破损。[结论]改良Hulth造模法复制KOA操作简单、创伤小,可保持膝关节一定的稳定性,为KOA可靠的造模方法。机械-酶消化法可获得数量多、纯度高的软骨细胞,且软骨的存活率高。     

兔膝关节骨性关节炎模型的 建立及软骨细胞的分离、培养

[目的] 探讨复制兔膝骨性关节炎(KOA)的实验动物模型及其软骨细胞的分离、培养。[方法] 用改良Hulth造模法复制膝骨性关节炎, 进行X线摄片、透射电镜观察造模后细胞形态的改变, 用双酶解法分离膝骨关节软骨细胞, 末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记测定法(TUNEL法)观察细胞的凋亡。[结果] 正常组膝关节面光滑平整, 软骨细胞膜完整。造模组膝关节内侧间隙明显变窄, 关节面粗糙有骨赘生成, 软骨细胞胞核固缩, 细胞膜破损。[结论] 改良Hulth造模法复制KOA操作简单、创伤小, 可保持膝关节一定的稳定性, 为KOA可靠的造模方法。机械-酶消化法可获得数量多、纯度高的软骨细胞, 且软骨的存活率高。     

“双固一通”温针灸对实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:研究"双固一通"温针灸在预防兔膝关节骨性关节炎过程中对兔膝关节软骨细胞凋亡的影响。方法:24只日本大耳白兔随机分为"双固一通"温针灸组、模型组和正常组,每组8只。采用结扎股静脉法建立兔膝骨性关节炎模型,"双固一通"温针灸组在造模开始时采用"双固一通"温针灸法,对关元(CV 4)、足三里(ST 36)、内膝眼(EX-LE4)、犊鼻(ST 35)和阳陵泉(GB 34)等穴进行预防性治疗;正常组不做任何处理,正常喂养。在造模8周后,各组分别通过透射电镜观察兔膝关节软骨细胞的超微结构,TUNEL染色光镜下观察软骨细胞凋亡情况。结果:"双固一通"温针灸组兔膝关节软骨细胞超微结构接近正常组,模型组软骨细胞轮廓不清楚,胞膜坏死崩解,胞浆内细胞器消失,细胞裂解为致密颗粒样物质,细胞固缩、变形,甚至出现核分裂,染色质浓聚;"双固一通"温针灸组和模型组软骨细胞凋亡指数高于正常组(P<0.01),"双固一通"温针灸组软骨细胞凋亡指数低于模型组(P<0.01)。结论:"双固一通"温针灸可抑制实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞过度凋亡,从而对兔膝骨性关节炎起防治作用。     

伤科消炎膏对骨性关节炎软骨细胞影响的组织学观察

目的：观察自制伤科消炎膏外用敷贴荆对骨性关节炎软骨细胞形态的影响。方法：自行研制骨伤科外用药伤科消炎膏敷贴刑．用大白鼠制作骨性关节炎动物模型。成功后给予用药，经2个治疗周期（90d）后处死模鼠．切取其膝关节软骨组织制片，观察药物对软骨细胞代谢的影响。结果：外用伤科消炎膏敷贴的模鼠膝关节软骨完整性较好，厚度较高，细胞排列较正常，软骨下骨密度中等；而未使用外用药的模鼠软骨内纤维变性明显，细胞肿胀、松解，排列发生紊乱，部分形成垂直柱状增生，软骨下骨密度过低或过高，形成囊性变和钙化。结论：伤科消炎膏敷贴能对骨性关节炎的关节软骨起到一定的保护作用，并能改善其代谢，但具体作用机理不明。     

刺老苞根皮黄酮对兔骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡影响的研究△

目的：通过观察刺老苞根皮黄酮对新西兰兔骨性关节炎模型的软骨细胞增殖与凋亡基因表达的影响,初步探索其干预软骨细胞代谢的作用机制。方法：取5月龄新西兰兔骨性关节炎模型的膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,分别采用MrITll法、TUNEL法、免疫组化法对细胞增殖、凋亡及细胞周期调控基因Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53mRNA的表达进行检测。结果：不同剂量组刺老苞根皮黄酮可显著促进软骨细胞体外增殖,并可通过减弱软骨细胞Bax、Caspase-3、p53mRNA的表达,增强Bcl-2mRNA的表达来减缓软骨细胞凋亡进程。结论：刺老苞根皮黄酮可有效调控兔骨性关节炎软骨细胞代谢,增强细胞活性,延缓凋亡,具有研发成为骨性关节炎治疗药物的潜能。     

胰岛素抵抗对膝骨性关节炎软骨细胞自噬作用的影响

膝骨性关节炎（Knee Osteoarthritis,KOA）是一种常见的以关节软骨退行性变和继发性骨质增生为主要特征的慢性退行性疾病,可累及滑膜、关节囊及关节其他部位。本病好发于中老年人,女性多于男性,且严重影响病人的生活质量。KOA的病因复杂,传统观点认为此病的发生主要由于机械因素及与年龄相关的软骨退变所致。近年来,流行病学的调查研究发现。     

中药鹿茸性激素的含量测定

用放射免疫法测定了中药鹿茸雌二醇和睾酮的含量。结果显示澳鹿茸雌二醇含量（１５．３±１．８２）ｎｇ／ｍＬ,梅花鹿茸的含量为（１１．４±１．２６） ｎｇ／ｍＬ与鹿角镑（１．９６±０．２６） ｎｇ／ｍＬ相比有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）,鹿茸伪品和鹿角胶的雌二醇含量与鹿角镑相比没有显著性差异（Ｐ＞０．０５）,提示雌二醇是鹿茸治疗宫冷不孕的物质基础;测定鹿茸中雌二醇的含量可作为评价鹿茸品质的依据;鹿茸中睾酮的含量低,提示睾酮不是鹿茸壮阳的有效成分,进一步研究鹿茸中促雄激素样物质,必将为鹿茸的壮阳作用提供依据。     

12种鹿茸药材的性状鉴别

本文对13种鹿茸药材进行了外观性状比较鉴别,并列检索表、外观形态简图及名称图示供鉴定参考。     

FTIR用于不同商品等级鹿茸的品质评价

采用傅立叶变换红外光谱法（PTIR）结合二阶导数技术对不同商品等级鹿茸的品质差异进行了研究。结果表明,鹿茸的特征峰主要为2926,2855,1746,1656,1549,1030cm^-1等吸收峰,它们分别代表脂类、氨基酸和多糖等主要成分。一等品鹿茸片中某些含亚甲基较多的酯类、氨基酸、蛋白质类成分含量较高,二等品所含的糖类物质比较多,三等品由于骨化程度相对较大,几种成分的含量都相对较低。本文运用FTIR从宏观整体的角度方便快速、准确有效地实现了对不同商品等级鹿茸的品质评价,为类似药材的品质评价提供了参考。     

鹿茸总多肽对维A酸致骨质疏松大鼠的防治作用

 目的观察鹿茸总多肽(TVAP)对维A酸诱导大鼠骨质疏松的影响。方法通过ig维A酸70 mg·kg^-1·d^-1,连续14d,建立大鼠骨质疏松模型。造模同时sc TVAP 60,40,20 mg·kg^-1·d^-1,治疗30 d后,处死动物。取血分离血清,测定血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP);取左侧股骨,计算骨重系数和测定骨Ca,P含量;取右侧股骨,测定中段和下1/3处骨密度;取左侧胫骨,做骨组织形态计量测定。结果与模型组比较,TVAP明显改善维A酸诱导大鼠的骨Ca含量降低(P<0.01),骨重系数下降(P<0.001)和骨密度降低(P<0.05,P<0.01)以及骨病理形态发生的明显改变:平均骨小梁宽度(MTPT)变窄(P<0.001)、平均骨小梁间距(MTPS)变大(P<0.05)、松质骨体积(TBV)降低(P<0.01)等骨质疏松改变。但对血中反映骨代谢状况的生化指标Ca,P含量和ALP活性无明显影响。结论TVAP能纠正维A酸所致骨重建的负平衡状态,使骨量增加,骨组织显微结构趋于正常,对大鼠骨质疏松有防治作用。     

鹿茸多肽促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

目的 :探讨鹿茸多肽对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法 :Wistar大鼠 36只 ,雌雄各半 ,随机分成对照组和鹿茸多肽用药组。建立切断大鼠坐骨神经保留一侧神经外膜模型 ,术后隔日于失神经支配的靶器官注射给药。于术后 2、4、6周观察坐骨神经功能指数、电生理、组织学及超微结构。结果 :坐骨神经功能指数、潜伏期及诱发电位恢复率在各时间点上用药组优于对照组P <0 0 1。组织学检查有髓神经纤维数、纤维直径、截面积在各时间点上用药组优于对照组P <0 0 1。超微结构观察用药组各时间点上有髓神经纤维的髓鞘厚度、成熟度均优于对照组。结论 :鹿茸多肽能促进神经再生及功能的恢复。     

鹿茸及其有效成分对小鼠脑单胺氧化酶的抑制作用

体外实验证明,从鹿茸氯仿提取物中分离的石油醚不溶部分(部位Ⅶ)鼠脑MAO-B活性具有显著的抑制作用,但对MAO-A活性抑制不明显。石油醚可对小溶部分(部位Ⅵ)对MAO-B活性无明显的影响。     

麝香乌龙丸对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 观察麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡和凋亡调控基因bcl-2及其抑制基因bax的影响,探讨麝香乌龙丸对关节软骨的保护作用是否与抑制细胞凋亡与调节bcl-2及bax的表达有关.方法 选用健康日本大耳白兔30只,随机分成正常对照组、造模组、麝香乌龙丸组.用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型, 4周后处死全部动物,取右膝关节胫骨内侧髁软骨,软骨组织切片用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,免疫组化法检测关节软骨中bcl-2、bax的水平.结果 麝香乌龙丸组细胞凋亡率明显低于造模组(P＜0.05),bcl-2在麝香乌龙丸组中的表达高于造模组(P＜0.05),bax的表达低于造模组(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸通过上调bcl-2的表达,下调bax的表达,达到抑制兔实验性膝骨关节炎软骨中软骨细胞的过度凋亡,这可能是该药治疗骨性关节炎机制之一.     

鹿茸提取物促进老年小鼠核酸和蛋白质合成作用及机制的研究

给雄性老年小鼠(24月龄)连续灌服15天鹿茸水提取物(1.0g/kg/d),对肝和睾丸的重量、肝脑组织RNA和蛋白质含量、血清中蛋白质含量,肝细胞核RNA含量均有明显增加的作用,并明显增强肝细胞核RNA聚合酶的活性。体外实验证明,鹿茸水提取物在较低浓度(10～100μg/ml)时,对RNA聚合酶的活性呈明显的增强作用。以上结果提示,鹿茸水提取物促进老年小鼠核酸和蛋白质合成效应是由于其能明显增强RNA聚合酶的活性。     

鹿茸的FTIR性质与传统质量等级之关系

研究了鹿茸的傅里叶变换红外光谱(FTIR)特性与传统质量的关系。发现鹿茸质量等级的内在数字化“Z”值规律性。从而为鹿茸片特别是用目前方法难于确定质量等级的鹿茸粉,提供了质量等级的客观指标。     

鹿茸多肽促进皮肤创面愈合的实验研究

目的探讨鹿茸多肽对皮肤创面愈合的影响。方法将48只大鼠随机分成对照组和实验1组、实验2组、实验3组,每组12只。以大鼠背部脊柱为中心设计5 cm×5 cm创面,实验1组单纯肌肉注射鹿茸多肽,实验2组单纯创口外部用鹿茸多肽,实验3组则肌注与外部混合应用,均每日给药1次,分别于24,6,,8,10,121,4 d观察创面的愈合情况;于第10天测量创面大小,计算愈合面积及愈合速度;计数单位质量组织细菌数;测定肉芽组织羟脯氨酸含量。结果创面愈合面积、愈合速度和肉芽组织羟脯氨酸含量实验3组优于其他3组,而单位质量组织细菌计数低于其他3组。结论鹿茸多肽能够提高皮肤愈合速度,增加组织细胞间连接,加速上皮化生。