雪莲花醇提物对大鼠组织和红细胞的抗氧化活性

 目的研究雪莲花醇提物(ESLHM)的抗氧化活性。方法用·HO生成系统Fe²⁺维生素C诱导大鼠心、肝、肾组织匀浆脂质过氧化,用TBA比色法测定MDA含量;用NBT还原法测酵母多糖A刺激大鼠中性粒细胞产生的O₂^-;用分光光度法测H₂O₂诱发的大鼠红细胞溶血度。结果对照组大鼠心、肝、肾匀浆经Fe²⁺+维生素C溶液诱发后MDA含量较空白组升高(P<0.01),中性粒细胞受酵母多糖A刺激后O₂^-生成较空白组升高(P<0.01),红细胞经H₂O₂诱发后溶血度较空白组升高(P<0.01)。而6.3,12.5,25,50,100,200μ·L^-1 ESLHM能不同程度抑制Fe²⁺维生素C诱导的大鼠心、肝、肾脂质过氧化产物MDA生成,其抑制心、肝、肾MDA生成的IC₅₀分别为29.4,32.9,31.4 μg·L^-1,其量效关系均呈负相关,相关系数分别为-0.905, -0.912,-0.908,相关性检验P值均<0.01;能不同程度抑制酵母多糖A刺激中性粒细胞生成O₂^-,其抑制中性粒细胞生成O₂-的IC₅₀为24.6 μg·L^-1,其量效关系呈负相关,相关系数为-0.887(P<0 01);能不同程度抑制H₂O₂诱发的红细胞氧化溶血,其抑制红细胞氧化溶血的IC₅₀为57.6μg·L^-1,其量效关系呈负相关,相关系数为-0.905(P<0.01),.结论雪莲花醇提物通过清除·HO,O₂^-及H₂O₂发挥抗氧化活性。     

草苁蓉抗脂质过氧化活性研究

目的: 研究草苁蓉提取物(BRE)的抗脂质过氧化活性。 方法: 用分光光度法测定肝匀浆和肝线粒体的总抗氧化能力、抗活性氧能力以及H₂O₂和Fe²⁺+H₂O₂诱导的肝匀浆和肝线粒体丙二醛(MDA)含量。 结果: BRE可明显提高肝匀浆和肝线粒体总抗氧化能力和活性氧清除能力,明显抑制肝匀浆和肝线粒体脂质过氧化作用。 结论: BRE具有抗脂质过氧化活性。     

水翁花对微粒体和神经细胞氧化损伤的保护作用

目的 :研究水翁花对小鼠肝微粒体膜脂氧化及H₂O₂ 诱导的PC12神经细胞氧化损伤的保护作用。方法 :用小鼠肝微粒体膜脂氧化模型、细胞培养MTT法测定细胞的存活率等方法。结果 :水翁花水提物能强烈抑制小鼠肝微粒体膜脂氧化 ,IC₅₀为0.013g·L^-1,效果优于阳性对照维他命E(IC₅₀为 0.064 g·L^-1) ;对H₂O₂ 引起的PC12神经细胞氧化损伤亦显示出较强的抑制作用 ,对神经细胞表现出保护作用。结论 :水翁花对膜脂氧化及神经细胞的氧化损伤的保护作用 ,可能用于治疗与氧化损伤有关的脑疾。     

二氢杨梅素抗脂质过氧化作用的研究

目的 :研究二氢杨梅素 (DMY)抗脂质过氧化作用。方法 :采用分光光度法测定DMY对由Fe²⁺ 维生素C(Fe²⁺ VitC)体系、Fe²⁺ 过氧化氢 (Fe²⁺ H₂O₂ )体系、Fe-半胱氨酸 (Fe²⁺ Cys)体系诱导的脂质过氧化的抑制作用。结果 :DMY能抑制离体大鼠脑、心、肝匀浆及线粒体脂质过氧化并表现出剂量依赖关系。结论 :DMY具有较好的抗脂质过氧化作用 ,具有进一步研究与开发价值。     

过氧化氢诱导PC12细胞凋亡及芍药苷的保护作用

 目的探讨过氧化氢诱导PC12细胞凋亡及芍药苷保护作用的可能机制。方法MTT测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,DCFH-DA为细胞内荧光探针,测定细胞内ROS浓度,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位。结果200μmol·L^-1H₂O₂可诱导PC12细胞凋亡,细胞内ROS浓度增加,细胞线粒体跨膜电位明显下降。预先经过0.1,1和10μmol·L^-1浓度的芍药苷处理后,H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡明显减少,同时明显减弱H₂O₂对细胞内ROS浓度和线粒体跨膜电位的影响。结论芍药苷可抑制过氧化氢诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制细胞内ROS累积,稳定细胞线粒体跨膜电位有关。     

枸杞多糖-1对羟自由基所致小鼠肝线粒体损伤的作用

 目的 研究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)组分1(LBP1)清除羟基自由基(·OH)的效果及其对·OH所致小鼠肝线粒体氧化损伤的作用效果。方法 用Fe²⁺+H₂O₂或Fe²⁺+VC系统产生·OH;用水杨酸法研究LBP1清除·OH的效果;用硫代巴比妥酸法测定小鼠肝线粒体丙二醛含量、用以DPH为荧光探剂的荧光偏振法测定小鼠肝线粒体膜流动性、以及用分光光度法测定小鼠肝线粒体膨胀程度研究LBP1抗·OH氧化损伤的效果。结果 LBP1可以清除·OH,减少·OH所致丙二醛的产生,抑制·OH所致膜流动性下降和减轻·OH所致肝线粒体膨胀程度,并呈量效关系。结论 LBP1具有清除·OH和抑制·OH所致小鼠肝线粒体氧化损伤的作用。     

肉苁蓉总苷体外清除自由基及对OH·引发的DNA损伤的保护作用

 目的研究肉苁蓉总苷体外清除自由基作用及对OH·引起的DNA损伤的保护作用。方法采用现代生物化学发光技术,检测肉苁蓉总苷对O₂,OH·,H₂O₂等自由基的清除作用。并通过Cu²-Phen-H₂O₂-VitC-DNA发光体系研究肉苁蓉总苷对OH．引起的DNA氧化损伤的保护作用。结果肉苁蓉总苷对O₂,OH·,H₂O₂活性氧自由基均有清除作用。其50%抑制浓度( IC₅₀)分别为0.0731,7.031,0.098,0.1254mg·mL^{-1。对DNA化学发光的IC50为0.4211ug·mL-1。结论实验结果表明,肉苁蓉总苷能有效地清除各种活性氧自由基,能保护OH·引发的DNA氧化损伤。}     

人参-三七-川芎提取物延缓过氧化氢诱导的内皮细胞衰老中线粒体氧化应激的作用

目的 通过观察人参-三七-川芎提取物（GNC）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）衰老中线粒体氧化应激的影响,探讨GNC对衰老HUVECs的治疗机制。方法 本研究以HUVECs作为研究对象,H₂O₂诱导内皮细胞衰老作为模型,实验分为空白组,H₂O₂组,H₂O₂+DMSO组（DMSO）,白藜芦醇组（Resv）及GNC提取物低（GNC-L）,中（GNC-M）,高（GNC-H）质量浓度组,除空白组,H₂O₂组外,其余各组分别给予DMSO 1 mL·L^-1,Resv 8 μmol·L^-1,GNC 400,300,200 mg·L^-1药物干预,24 h后除空白组外给予300 μmol·L^-1 H₂O₂诱导HUVECs衰老,再给予正常培养基培养24 h。采用衰老特异性β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色法鉴定细胞衰老程度,流式细胞仪分析细胞周期,采用Mito SOX RED荧光染色法测定细胞内线粒体活性氧（mtROS）水平,以JC-10为荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测含锰超氧化物歧化酶（MnSOD）与磷酸化（p-）p66的蛋白表达。结果 SA-β-gal染色结果显示,与空白组比较,H₂O₂组SA-β-gal染色蓝染细胞显著增多（P<0.01）;与H₂O₂组比较,各浓度组SA-β-gal染色蓝染细胞显著减少（P<0.01）;细胞周期结果显示,与空白组比较,H₂O₂组G₀/G₁期细胞数量比例明显增多（P<0.05）,G₂/M期细胞比例明显减少（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC各组及Resv组G₀/G₁期细胞数量比例明显减少（P<0.05）,GNC-H组,Resv组在G₂/M期细胞比例明显增加（P<0.05）。线粒体ROS荧光结果显示,与空白组比较,H₂O₂组强度明显减弱（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC-H,GNC-M组强度明显增高（P<0.05）;线粒体膜电位结果显示,与空白组比较,H₂O₂组荧光强度显著下降（P<0.01）;与H₂O₂组比较,GNC-H,GNC-M,GNC-L组线粒体膜电位荧光强度显著增高（P<0.01）,Resv组明显增高（P<0.05）;Western blot结果显示,与空白组比较,H₂O₂组MnSOD含量明显降低（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC-H与GNC-M组表达明显增多（P<0.05）;与空白组比较,H₂O₂组p-p66含量显著增高（P<0.01）;与H₂O₂组比较,各用药组表达显著降低（P<0.01）,表明用药后可减轻细胞内线粒体氧化应激反应。结论 中药人参-三七-川芎提取物可以延缓H₂O₂诱导的血管内皮细胞的衰老,药物干预后,细胞线粒体活性氧、线粒体膜电位及相关蛋白MnSOD,p-p66蛋白发生明显改善,氧化应激反应减轻,其机制可能是中药通过抑制线粒体氧化应激反应延缓血管内皮细胞衰老的进程。     

红车轴草总黄酮体外抗氧化作用的研究

 目的 探讨红车轴草总黄酮体外抗氧化作用。 方法 采用分光光度法测定 H₂O₂ 诱导红细胞溶血作用,用 2- 硫代巴比妥酸法测定小鼠红细胞膜脂质及肝组织匀浆脂质过氧化产物丙二醛（ MDA ）含量。 结果 红车轴草总黄酮在 0.2~1.6 mg·L^-1 内能抑制 H₂O₂ 诱导红细胞溶血和红细胞膜脂质过氧化作用, IC₅₀ 分别为 0.93 及 0.92 mg·L^-1 ,均呈较好的量效关系;红车轴草总黄酮在 4~32 mg·L^-1 内能抑制肝组织脂质过氧化产物的形成, IC₅₀ 为 17.5 mg·L^-1 。 结论 在一定浓度范围内红车轴草总黄酮体外具有明显的抗氧化作用。     

川芎嗪烟酸酯对神经细胞氧化损伤的保护作用

 目的观察川芎嗪烟酸酯(TMPN)对H₂O₂引起的体外培养大鼠脑皮层神经细胞及人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧化性损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法H₂O₂诱导体外培养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y细胞进入氧化应激状态,观察TMPN对神经细胞氧化损伤的保护作用。结果TMPN能显著升高氧化损伤神经细胞的存活率,减少乳酸脱氢酶(LDH)的漏出,对H₂O₂诱导的神经细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_I)的升高有明显的抑制作用,并能减少胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成,提高谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论TMPN可以有效保护活性氧对培养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y细胞的氧化损伤,维持细胞的正常生理功能,其机制可能与TMPN抑制H₂O₂诱导的[Ca²⁺]_I异常升高,减少脂质过氧化物生成,增加抗氧化物质的含量有关。     

草苁蓉水萃取物对四氯化碳致肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用

目的:研究草苁蓉水萃取物(BRAF)对四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用.方法:将实验小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素阳性对照组(50 mg· kg-1)及BRAF高、低剂量组(200,100 mg·kg-1).每日给小鼠灌胃水飞蓟素或BRAF 1次,共7d.实验末期,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)、Ca2+-Mg2+-ATP酶(Ca2+-Mg2+-ATPase)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量.结果:BRAF明显降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT,AST和ALP水平,减轻肝组织损伤,升高肝脏SOD,CAT,GPx和GSH水平,升高肝线粒体SOD,Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性,降低肝匀浆及线粒体MDA含量.结论:BRAF降低CCl4致急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激,对CCl4致小鼠急性肝损伤具有保护作用.     

杨桃根多糖体外抗氧化作用的研究

目的:探讨杨桃根多糖(Yangtaogen polysaccharide,YTGP)的抗氧化活性。方法:邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲-Fe2+/H2 O2体系研究YTGP对自由基的作用,用硫代巴比妥酸法测小鼠肝中丙二醛(MDA)含量。在体外化学模拟条件下测定杨桃根多糖的总还原能力。结果:YTGP能有效抑制MDA的产生,能明显地抑制.OH和O2-的生成。结论:YTGP在体外有明显的抗氧化作用。     

漏芦醇提取物的体外抗氧化作用

目的:研究祁州漏芦醇提取物的抗氧化活性。方法:以高铁还原法检测祁州漏芦醇提取物对肝组织总抗氧化能力的影响,以硫代巴比妥酸(TBA)法检测对肝组织的抗脂质过氧化作用。结果:漏芦醇提取物浓度依赖性地增高肝匀浆总抗氧化能力,同时浓度依赖性地抑制肝组织脂质过氧化作用,其对H2O2,.OH和Fe2+诱导的肝匀浆脂质过氧化作用的半数抑制浓度(IC50)分别为56.4,144.2,355.6 mg·L-1;对H2O2和Fe2诱导的肝线粒体脂质过氧化作用的IC50分别为781,36.3 mg·L-1。结论:漏芦醇提取物具有体外抗氧化作用。     

神经节苷脂对染砷人脑皮层神经元的保护作用

 目的研究神经节苷脂对As2O3体外干预的皮质神经元的保护作用及可能机制。方法将人原代脑皮质神经细胞分为 5组,空白对照组、5 μmol·L^-1 As₂O₃干预组和5μmol·L^-1 As₂O₃加神经节苷脂50,100,200 μg·L^-1组,Fluo-3/AM荧光探针标记皮质神经元胞浆钙([Ca²⁺]i),激光共聚焦显微镜实时测定[Ca²⁺]_i的变化。磷基转移法测定细胞膜和胞浆的蛋白激酶C(PKC) 的活性。流式细胞仪检测细胞凋亡百分比。结果 5 μol·L^-1的As₂O₃,作用3 min,[Ca²⁺]_i开始升高,并随时间延长逐渐明显,As₂O₃加神经节苷脂200 μg·L^-1,作用9 min,[Ca²⁺]i才开始升高,且程度远没有As2O3组明显。5 μmol·L^-1的As₂O₃组的 PKC活化程度明显高于As₂O₃加神经节苷脂组,以细胞膜相明显。24 h凋亡率分别为:As₂O₃组78.5%,As₂O₃加神经节苷脂 200μg·L^-1组13.5%。结论神经节苷脂抑制As₂O₃引起的皮质神经元的[Ca²⁺]i升高和PKC活化,抑制细胞凋亡。并通过对细胞膜靶点的保护来实现对神经细胞的保护作用,这进一步证明砷剂最初的作用靶点是细胞膜。     

楮实子红色素体外抗氧化作用研究

目的:探讨楮实子红色素(Fructus B roussonetiaHaem atochrom e,FBH)体外抗氧化作用。方法:采用H2O2和Fe2 系统产生羟基自由基,NADH-PMS-NBT系统产生超氧阴离子自由基,并观察了FBH对羟基自由基及超氧阴离子自由基清除效果以及对H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制和对肝组织匀浆自氧化终产物MDA及VC-Fe2 系统引起的线粒体的形态改变的抑制作用。结果:FBH能显著清除超氧阴离子及羟基自由基,抑制H2O2诱导小鼠红细胞溶血和肝匀浆自氧化,对肝线粒体也有保护作用。结论:FBH有较强的体外抗氧化作用。     

黄酮醇类化合物对心肌细胞凋亡过程caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达影响

 目的研究槲皮素、杨梅素、桑色素和芦丁对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。方法体外培养Wistar乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞凋亡模型;随机分组:正常组,损伤组和用药组。用药组分别加入30μmol·L^-1的4种黄酮醇类化合物,孵育1h后,除正常组之外,加入H₂O₂诱导细胞凋亡。加入不同浓度的药物后,采用MTT法观察细胞存活情况,来进行药物有效浓度的筛选。采用TUNEL、流式细胞仪法检测心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3蛋白、Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果MTT结果显示,4种黄酮醇类在5和30μmol·L^-1时对细胞没有毒性。4种黄酮醇类化合物与损伤组比较,槲皮素、杨梅素、桑色素的心肌细胞凋亡率降低、Bcl-2/Bax比值增大、抑制caspase-3蛋白的活化。结论槲皮素、杨梅素和桑色素对心肌细胞凋亡有保护作用,可以通过抑制caspase-3蛋白的活化、上调Bcl-2蛋白的表达或是降低Bax的表达来发挥作用,槲皮素表现出较强的抗凋亡活性。     

竹节参总皂苷对H2 O2致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:通过建立H2O2诱导心肌细胞氧化应激损伤模型,观察竹节参总皂苷(SPJ)对心肌细胞的保护作用.方法:将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常组,模型组(H2O2),SPJ低剂量组(50 mg·L-1),SPJ高剂量组(100 mg·L-1).H2O2诱导心肌细胞氧化损伤2h后SPJ孵育24 h,显微镜下观察细胞搏动频率,MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶( LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛( MDA)含量.结果:SPJ(50,100 mg·L-1)可明显增加心肌细胞搏动频率,降低H2O2所致乳鼠心肌细胞LDH释放量,升高SOD,CAT,GSH-Px活性,降低MDA含量(P＜0.01或P＜0.05).结论:SPJ对H2O2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤有明显保护作用.