血小板源性内皮细胞生长因子的表达在肝癌诊断中的意义

目的：观察肝癌组织中PD-ECGF的表达情况及其在癌旁组织(小结节性肝硬化、肝细胞增生等)和正常肝细胞的不同表达，探讨PD-ECGF在肝癌诊断、鉴别诊断中的意义。方法：应用S-P免疫组化方法观察5例肝癌细胞的PD-ECGF表达，分析其与肝癌诊断的关系。结果：肝癌细胞PD—ECGF表达强阳性( )、癌旁增生的肝细胞PD—ECGF弱阳性( )、正常肝细胞PD-ECGF弱阳性或阴性( ／-)。PD-ECGF表达与组织学分型无关。结论：PD—ECGF的表达情况可作为肝癌诊断、鉴别诊断的一种标志物。     

血小板衍生生长因子受体在膀胱癌中的表达意义

目的　探讨血小板衍生生长因子受体 (PDGFR)表达与膀胱移行上皮细胞癌发生、生物学行为及预后的关系 .方法　采用免疫组织化学技术——两步法检测 6 8例膀胱移行细胞癌和 10例正常膀胱组织 PDGFR表达及膀胱癌组织中微血管密度 (MVD) .结果　 PDGFR阳性染色分布于癌细胞、间质、血管及炎症细胞的胞质及胞膜 .膀胱癌组织PDGFR阳性率为 83.8% ,明显高于正常膀胱组织 (30 .0 % ,P<0 .0 1) ,膀胱癌组织中 PDGFR阳性表达组的微血管密度(MVD)明显高于 PDGFR阴性表达组 (85± 30 vs 36± 15 ,P<0 .0 1) .结论　 PDGFR表达与正常膀胱组织生长有关 ,过度表达与癌的形成、血管的形成及炎症细胞功能相关 ,未发现PDGFR表达与肿瘤分期、分级及预后相关 .     

血小板源性生长因子对于培养内皮细胞血管内皮细胞生长因子水平的影响

通过免疫组织化学的方法,观察血小板源性生长因子（PDGF）对于培养脐静脉内皮细胞血管内皮细胞生长因子（VEGF）水平的影响,揭示PDGF促进新生血管形成的机制。实验结果：缺氧培养时内皮细胞胞浆VEGF水平上升;不同剂量的PDGF在常规或缺氧培养条件下均能增加内皮细胞VEGF水平,且呈剂量依赖性,提示PDGF可能通过直接促血管形成生长因子的介导作用间接促进新生血管的形成。     

正畸力作用下大鼠牙周组织中血小板衍生生长因子-AA的表达

目的观察大鼠正畸牙移动过程中血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)在牙周组织内的表达变化,探讨PDGF-AA在正畸牙周组织改建中的作用。方法取健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、牙齿移动1、7、14、21天组,每组8只。建立大鼠正畸牙移动动物模型,用免疫组织化学方法检测牙周组织中PDGF-AA的表达。结果大鼠牙周组织中PDGF-AA表达阳性,主要表达在成纤维细胞、成骨细胞、血管内皮细胞胞浆内,实验组强于对照组,在同一实验组中,张力侧的表达均较压力侧强,加力7天为表达的高峰期。结论 PDGF-AA在正畸牙移动的牙周组织改建中起重要作用,主要参与了成骨活动。     

脑梗死后血清血小板衍生内皮细胞生长因子浓度变化与神经功能缺损的关系

目的：研究急性脑梗死后血清血小板衍生内皮细胞生长因子浓度（PD- ECGF）变化与神经功能缺损的关系。方法测定60例脑梗死患者发病后24h内、第3天、第7天、第14天的PD- ECGF浓度,同步评估美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）评分,并记录脑梗死的体积。结果脑梗死患者发病后24h内、第3天、第7天、第14天的平均血清PD- ECGF浓度分别为（4080.62±1569.27）、（4386.03±1746.05）、（5473.24±2312.75）、（3365.72±1421.76）pg/ml,4个时点间的差异有统计学意义（F=14.297,P＜0.05）,并均高于对照组（2687.92±950.60）pg/ml。相应时点的NIHSS评分分别为（6.35±4.09）、（6.25±4.45）、（5.42±4.44）、（4.68±4.49）分,4个时点间的差异无统计学意义（F=1.925,P＞0.05）。发病后第3天脑梗死体积与血清PD- ECGF浓度无相关性（r=0.107,P＞0.05）,但与NIHSS评分具有相关性（r=0.619,P＜0.05）。结论血清PD- ECGF浓度在脑梗死后即有升高,但浓度的高低与神经功能缺损程度和康复无关,与急性脑梗死的病理生理过程相一致。     

脑胶质瘤中血小板衍生生长因子和血管内皮生长因子表达的协同效应

目的：研究血小板衍生生长因子（PDGF）和血管内皮生长因子（VEGF）在脑胶质瘤中的表达及相关性,探讨其在人脑胶质瘤发生、发展和侵袭中的意义。方法：采用免疫组织化学S-P法,检测脑胶质瘤60例、正常脑组织10例中PDGF和VEGF的表达。结果：（1）PDGF在胶质瘤60例中表达30例（50．0％1,不同级别胶质瘤间的表达有差异,其表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=0．5807,P〈O．01）;（2）VEGF在胶质瘤中表达34例（56．7％）,不同级别胶质瘤表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=O．5373,P〈0．01）;（3）PDGF与VEGF在脑胶质瘤中的表达呈正相关fr=0．7715,P〈0．01）。结论：PDGF、VEGF的表达水平随着胶质瘤级别的增加而升高,与胶质瘤的病理学分级呈正相关,与胶质瘤进展密切相关,是恶性程度增高标志,两者在胶质瘤发生、发展中起协同作用。     

猪血小板衍生生长因子的高效液相色谱分析及对血管内皮细胞DNA合成的影响

目的：测定猪血小板衍生生长因子的相对分子质量和纯度并观察其对培养的人血管内皮细胞DNA合成的影响。方法：用高效液想象以谱凝胶过滤柱,标准蛋白制备标准曲线,测定猪血小板衍生生长因子的相对分子质量和纯度;采用培养的人脐静脉血管内皮细胞,应用^3H-TdR掺入的方法。观察猪血小板衍生生长因子对血管内皮细胞DNA合成的影响。结果：测得的猪血小板衍生生长因子的相对分子质量为29120,纯度为89.46%;猪血小板衍生生长因子可促进处于静止状态的人血管内皮细胞DNA的合成,在40ng/ml的质量浓度时DNA的全盛最为明显,且于血小板衍生生长因子作用48h时合成最为显。结论：猪血小板衍生生长因子的相对分子质量为29120,可明显促进培养的血管内皮细胞DNA的合成。     

血管内皮生长因子和血小板衍生生长因子在子宫内膜癌中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨子宫内膜癌中原癌基因血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）的表达与临床病理参数和血管生成的关系。方法采用免疫组织化学的方法检测50例子宫内膜癌中VEGF、PDGF的表达,利用Ⅷ因子相关抗原标记血管内皮细胞,选择能代表肌层浸润深度的切片进行染色。结果子宫内膜癌中VEGF、PDGF的表达显著高于正常子宫内膜,VEGF的表达与临床分期、组织分化程度、肌层浸润深度显著相关。结论VEGF、PDGF可能通过诱导血管生成而促进子宫内膜癌的发生发展。     

血小板衍生生长因子BB与慢性乙型肝炎患者肝纤维化的关系

目的：探讨血小板衍生生长因子BB（PDGF－BB）在慢性乙型肝炎患者肝纤维化发病机制中的作用。方法：对43例慢性乙型肝炎患者行肝穿刺活检，肝组织按常规制成石蜡块，分别进行HE染色、苦味酸天狼红染色，以判断肝脏纤维化程度及炎症活动度；同时行PDGF－BB免疫组织化学染色，半定量分析PDGF－BB阳性细胞表达情况。结果：随着肝纤维化程度和炎症活动度的加重，PDGF－BB在组织中的表达逐渐明显。结论：PDGF－BB是慢性乙型肝炎患者肝纤维化形成的重要的细胞因子，能反映肝纤维化进展状况。     

HBV转染及缺氧应激对HepG2细胞VEGF表达的影响

目的 探讨HBV转染及缺氧应激对HepG2细胞VEGF表达的影响.方法 分别在常氧与缺氧条件下体外培养肝癌细胞系HepG2细胞及HepG2.2.15细胞,用倒置显微镜观察两株细胞形态学变化,在不同时间点(2、6、12、24、48h)检测二者在不同条件下VEGFmRNA及蛋白表达的差异.用Westen-Blot法检测VE...     

神经生长因子对HaCaT细胞增殖及表达趋化因子RANTES的影响

目的:研究神经生长因子(NGF)对HaCaT细胞增殖及表达趋化因子RANTES的影响,探讨NGF与银屑病表皮过度增殖及皮损局部大量T细胞浸润的关系.方法:利用HaCaT细胞体外培养,采用NGF为增殖诱导剂,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度的NGF对HaCaT细胞增殖率的影响,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清液中表达的趋化因子RANTES.结果:MTT实验表明,NGF可刺激HaCaT细胞增殖,刺激作用呈浓度依赖性(r=0.962,P＜0.05);NGF能够诱导HaCaT细胞表达高水平的趋化因子RANTES(P＜0.001,Student's t-test),且呈浓度依赖性.结论:NGF具有显著的促进HaCaT细胞增殖及表达趋化因子RANTES的作用,银屑病皮损区域NGF表达增加可能是引起表皮过度增殖及皮损局部大量T细胞浸润的重要因素.     

RNA干扰沉默血管内皮生长因子抑制人舌癌细胞增殖的实验研究

目的:通过转染能特异性沉默血管内皮生长因子(VEGF)表达的小干扰RNA(siRNA),观察能否抑制人舌癌Tca8113细胞株的增殖.方法:将自行构建的两对表达siRNA的重组质粒(PU-VEGF-siRNA1,PU-VEGF-siRNA2)转染到舌癌Tca8113细胞株中,以空载体组转染为实验对照组,以正常生长的舌癌细胞做空白对照组.实验组和实验对照组经G418筛选后,与空白对照组以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF mRNA的表达,流式细胞技术分析细胞凋亡,MTT比色法检测细胞的生长抑制率.结果:与实验对照组相比,PU-VEGF-siRNA1,PU-VEGF-siRNA2重组体显著降低舌癌细胞VEGF mRNA的表达(P＜0.01),MTT的结果显示分别在24、48、72、96 h对细胞增殖的抑制率增加(P＜0.05),细胞凋亡率也明显增高(P＜0.01);而空载体转染组与空白对照组相比,对Tca8113细胞株增殖无抑制作用,对细胞凋亡变化无明显影响(P＞0.05).结论:PU-VEGF-siRNA在细胞内表达的siRNA 不仅能显著降低VEGF表达,而且能有效抑制人舌癌细胞的增殖.     

血小板生长因子对新生鼠缺血缺氧性脑损伤保护作用

目的探讨血小板生长因子(PDGF)对新生鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法 7日龄Wistar大鼠72只,随机分为假手术组、治疗组和对照组,每组24只。假手术组仅分离右颈总动脉,治疗组和对照组分离右颈总动脉结扎,低氧2h制备新生大鼠HIBD模型。治疗组在成模后即刻给予PDGF50ng/kg腹腔注射,假手术组和对照组成模后即刻腹腔注射等体积的生理盐水。每组随机取8只大鼠于术后12、24、72h处死,取脑组织制备脑细胞悬液,双染法流式细胞仪检测脑细胞凋亡率。结果假手术组各时间点神经细胞凋亡率无明显差异(P>0.05),术后12、24、72h对照组和治疗组神经细胞凋亡率均逐渐增加,差异有显著性(F=130.35、78.83,q=5.07～19.46,P<0.01);各时间点对照组和治疗组较假手术组脑细胞凋亡率显著增加,治疗组较对照组脑细胞凋亡率显著减少,差异有显著性(F=39.01～194.20,q=3.08～16.51,P<0.01)。结论 PDGF可通过减少神经细胞凋亡,发挥对新生鼠HIBD的神经保护作用。     

激素与生长因子在调节成骨样细胞增殖中的作用

细胞的增殖分化受多种激素和生长因子的正负调控，内环境对其也有深刻和影响。在成骨样细胞的研究中药得下列结果：１对细胞增殖的影响：ＩＧＦ－１（１－＾８ｍｏｌ／Ｌ）或ＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）可促进细胞生长，＾３ＨＴｄＲ参入及Ｓ期细胞的百分率，ＴＮＦａ（１０－＾８ｍｏｌ／Ｌ）则可下调Ｓ期细胞以及Ｃ－ｍｙｃ，Ｃ－ｋｉ－ｒａｓ的基因表达。２对爱体数量及Ｋ＾＋通道的影响：ＰＨＴ（１０－＾８ｍｏｌ／Ｌ）可上调ＥＧ     

血小板第4因子对造血细胞增殖的影响

目的研究血小板第４因子（ＰＦ４）预处理与造血干细胞（ＨＳＣ）及祖细胞集落增殖间关系。方法用小鼠骨髓及人脐血细胞经ＰＦ４预处理４８ｈ后接种在半固体培养基上，１２ｄ后对出现的细胞集落进行免疫组化染色及镜下分类计数。结果经ＰＦ４预处理后ＨＳＣ增殖力增强，所形成的细胞集落显著多于对照组，Ｐ＜０．０５。结论ＰＦ４不仅是巨核细胞形成的抑制性因子，而且是提高早期造血细胞比例的因子之一。     

血管内皮生长因子对血管内皮细胞分泌功能的影响及一氧化氮在其中的作用

目的 :观察血管内皮生长因子 (VEGF)对兔离体主动脉内皮细胞分泌功能的影响 ,了解一氧化氮 (NO)在其中所起的作用 ,以明确VEGF的作用机制。方法 :先进行兔主动脉内皮细胞的培养和鉴定 ,然后行传代培养。在第 3～ 5代主动脉内皮细胞培养液中加入不同浓度的VEGF ,培养 6h ,取上清液测定内皮素 (ET)、血管性血友病因子 (vWF)值 ,并应用一氧化氮合成酶 (NOS)抑制剂N -硝基 -L -精氨酸甲酯 (L -NAME)后观察ET、vWF值的变化情况。结果 :VEGF可抑制血管内皮细胞 (VEC)分泌ET、vWF ,并且呈剂量依赖性 (r =- 0 .96 881P <0 .0 1,r=- 0 .9711P <0 .0 1) ,NOS抑制剂L -NAME可剂量依赖性地阻断其效应 (P <0 .0 1)。结论 :NO在VEGF抑制VEC分泌ET、vWF中起中介作用 ,NO是VEGF作用机制中的一个重要通路。     

EFFECT OF PLATELET HEPARIN AFFINITY MATERIALS ON ENDOTHELIAL CELL FIBRINOLYTIC ACTIVITY AND SECRETION OF PROSTACYCLIN

Platelets and endothelial cells play an important role in initiation anddevelopment of atherosclerosis. Much attention has been paid to investigate effect ofplatelet release products on endothelial cells, it is unknown whether platelet products canaffect endothelial cell fibrinolytic activity. We extracted platelet heparin affinity materials(PHAM) from platelet lysate using Heparin-Sepharose CL 6B column, and treated cul-tured human umbilical endothelial cells with PHAM to imitate conditions in vivo. As a re-suit, PHAM could increase endothelial cell PAI activity without change of t-PAantigen. No free t-PA activity was detected in conditioned medium from either stimulatedor nonstimulated endothelial cell cultures. Addition of 10μg/ml PHAM to endothelialcells induced nearly one fold increase of PAI activity (P<0.001). Such increase was timeand dose dependent. Moreover, treatment with PHAM resulted in a dose dependent in-crease of the secretion of prostacyclin (measured by 6-keto-PGF_(1α)), 10μg/ml PHAMcaused six fold increase of prostacyclin (P<0.001). The above results showed thatPHAM could inhibit endothelial cell fibrinolytic activity but increase secretion ofprostacyclin. It is assumed that this could be the negative feedback for protecting thehuman body from thrombus formation. Break of this feedback mechanism may beresponsible for thrombotic diseases.     

rhG-CSF对HL-60细胞增殖的抑制作用

实验选择了不同浓度的rhG-CSF(0.015～0.50μg/ml)体外作用于HL-60细胞5天,检测其细胞数、~3H-TdR掺入量和细胞内cAMP水平。结果表明,细胞数和~3H-TdR掺入量都随rhG-CSF浓度增加而明显下降。在浓度达0.125μg/ml时,这种抑制作用基本达坪值;而细胞内cAMP水平随rhG-CSF浓度增加明显增高,呈剂量依赖性。推测rhG-CSF是通过诱导细胞分化来实现对HL-60细胞增殖的抑制作用。     

Forskolin抑制成骨肉瘤细胞增殖的作用

Forskolin系天然植物中提取到的二萜类化合物，为腺苷酸环化酶的特异激活剂。实验发现它能下调成骨肉瘤细胞的EGF受体，抑制酪氨酸蛋白激酶活性，抑制转化生长因子α（TGFα）的基因表达，抑制3H－TdR参入DNA以及抑制细胞周期的S期，这均支持Forskolin对成骨肉瘤细胞具有抑制增殖的作用。