葛根素对去卵巢小鼠学习记忆和突触结构的影响

 目的研究葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆和突触结构的影响。方法卵巢摘除(Ovx)或假手术(Sham)后一周,雌性小鼠给予4周的葛根素(Pur,40,120mg·kg^-1,ip)或苯甲酸雌二醇(EB,4μg·d^-1,sc)治疗。分别用Morri′s水迷宫和穿梭箱检测小鼠的空间记忆和主动回避行为;通过制备超薄切片电镜观测学习记忆相关脑区海马CA1和前皮层的突触超微结构变化。结果Ovx小鼠经120mg·kg^-1 Pur治疗后,在水迷宫中搜寻平台的平均路径显著缩短(P<0.05),主动逃避电击的次数明显增多(P<0.01)。同时,葛根素增加Ovx小鼠海马和前皮层的突触后密度(PSD)厚度,并减小突触间隙宽度,但对突触界面曲度、突触活性带长度没有明显作用。结论长期Pur治疗可通过影响海马和前皮层突触结构改善雌激素剥夺小鼠的记忆损伤。     

葛根素对去卵巢大鼠学习记忆能力和海马结构的保护作用

目的:研究不同剂量葛根素对去卵巢大鼠学习记忆能力和海马结构的影响。方法:SD雌性大鼠,切除双侧卵巢后,连续腹腔注射葛根素(120,60,30mg/kg)30d后,用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力;通过电镜观测与学习记忆相关脑区海马CA1的突触超微结构变化。结果:葛根素高剂量(120mg/kg)和中剂量(60mg/kg)组大鼠逃避潜伏期随着训练天数的增加明显缩短(P<0.01,P<0.05),倍美力片(120mg/kg)、葛根素高剂量(120mg/kg)和中剂量(60mg/kg)组大鼠跨越平台次数明显增加(P<0.05),且在平台象限停留时间均明显延长(P<0.05);模型组大鼠海马CA1区神经细胞核明显固缩,染色质浓缩成团,分布于核膜边缘,核仁不清楚,核膜增厚,部分断裂,核内可见空腔,胞浆内大量脂褐素堆积,而葛根素高剂量(120mg/kg)组则细胞核形态较规则,染色质分布均匀,核仁明显,核膜光滑;葛根素中剂量(60mg/kg)组细胞核轻度浓缩,染色质分布较均匀,核内偶见空腔,胞浆内少量脂褐素堆积;但葛根素低剂量(30mg/kg)组与模型组相似,细胞核形态相对较规则。结论:葛根素对去卵巢大鼠学习记忆能力减退和海马CA1结构异变具有一定的保护作用。     

开心散对睡眠剥夺小鼠学习记忆的影响

目的 探讨开心散对睡眠剥夺小鼠学习记忆改善的影响.方法 用轻柔刺激法建立睡眠剥夺模型.选用CD -1小鼠,随机分为6组,对照组、模型组、人参总皂苷组、开心散大、中、小剂量组.观察各组小鼠睡眠剥夺后跳台实验行为变化,大脑皮层TChE、SOD、CAT血浆MDA含量变化.结果 ①睡眠剥夺后对照组、开心散中剂量组跳台实验潜伏期显著低于睡眠剥夺组(P＜0.05).②对照组、人参总皂苷组、开心散中剂量组大脑皮层TchE含量显著低于睡眠剥夺组(P＜0.05).③对照组、开心散中剂量组大脑皮层SOD、CAT含量显著高于睡眠剥夺组(P＜0.05).对照组、开心散中剂量组血浆MDA含量显著低于睡眠剥夺组(P＜0.05).结论 开心散中剂量对睡眠剥夺导致小鼠学习记忆的损伤有明显的保护作用.其保护作用强于人参总皂苷.     

紫苏子油对小鼠学习记忆能力的影响

分别给予幼龄小鼠灌胃不同剂量的紫苏子油，连续１５ｄ，可减少小鼠跳台错误次数，能明显提高小鼠水迷路测验的正确百分率，缩短到达终点时间，并能促进小鼠脑内核酸及蛋白质的合成，调节小鼠脑内单胺类神经递质水平。结果提示紫苏子油能促进小鼠学习记忆能力并与小鼠脑内的核酸，蛋白质及单胺类神经递质含量有关。     

卵巢摘除及补充雌激素对小鼠骨折愈合中钙沉积的影响

为研究雌激素对卵巢摘除后已发生显著骨丢失的ｂａｌｂ／ｃ系小鼠股骨骨折愈合的影响，将１４４只ｂａｌｂ／ｃ小鼠随机分为假手术组（ＳＯ组）、卵巢摘除组（ＯＶＸ组）、补充低剂量雌激素组（Ｅ１组）、补充高剂量雌激素组（Ｅ２组）。小鼠于折骨后５天、１０天、１５天、２０天、３０天处死，测定骨痂中的钙盐沉积率。结果ＳＯ组、ＯＶＸ组和Ｅ１组，骨痂中的钙盐沉积率在折骨后１５天达峰值，ＯＶＸ组钙盐沉积峰值显著低于ＳＯ组     

西洋参皂甙对睡眠剥夺小鼠学习记忆获得的影响

西洋参皂甙100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg给小鼠连续灌胃7天后,剥夺睡眠24h,西洋参皂甙对其学习记忆获得能力下降有明显改善作用,可使避暗试验的潜伏期明显延长,受电击次数显著减少。     

骨碎补对东莨菪碱模型小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨骨碎补改善东莨菪碱模型小鼠学习记忆能力的作用机制。方法 昆明小鼠分为空白组、东莨菪碱模型组、骨碎补组、盐酸多奈哌齐组、抗脑衰胶囊组、ER阻断剂组。行为学测试小鼠学习记忆能力;HE染色观察小鼠海马形态;免疫组化法检测小鼠海马中雌激素受体ERα、ERβ、FSHR、LHR表达;ELISA测定小鼠海马中ACh含量、AChE、ChAT活性。结果与模型组对比,行为学测试各给药组小鼠学习记忆能力明显改善(P 0.01);海马神经元结构清晰、排列紧密;ERα、ERβ、FSHR、LHR表达增加(P 0.05或P 0.01);ACh含量增加(P 0.01)、ChAT的活性增加(P 0.01)、AChE活性减弱(P 0.01),且均被ER阻断剂逆转。结论 ER通路介导骨碎补改善东莨菪碱模型小鼠胆碱能系统,增强学习记忆能力。     

葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体氨基酸水平的影响

 目的研究葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体氨基酸水平的影响。方法大脑中动脉栓塞(MCAO)60min建立大鼠局部脑缺血模型。给药组在缺血前30min和再灌注开始时分别腹腔注射Pur(50,100mg·kg^-1,ip)。用脑微透析仪收集缺血前后和再灌注过程纹状体的细胞外液,高效液相色谱分析其兴奋性和抑制性氨基酸水平;缺血再灌注24h取脑用TTC染色法测算脑梗死体积和水肿率。用流式细胞仪结合Annexin-V荧光标记法检测Pur(40,100μmol·L^-1)对体外培养海马神经细胞谷氨酸(0.5mmol·L^-1)诱导细胞凋亡的保护作用。结果缺血开始后,纹状体的天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)和牛磺酸(Tau)水平快速升高,最高时分别达缺血前的8.92,14.15,9.07和4.84倍。再灌注开始后,氨基酸水平迅速下降,120min后接近正常。100mg·kg^-1Pur在减小脑梗死体积和脑水肿的同时,显著降低脑缺血过程纹状体氨基酸水平,其最高值分别比缺血组降低35.7%(Asp)、43.2%(Glu)、28.5%(GABA)和31.8%(Tau)(P<0.01);Glu/GABA比值明显低于缺血大鼠。流式细胞检测结果显示,100μmol·L^-1Pur明显抑制谷氨酸兴奋毒作用,分别使海马神经细胞的凋亡率和坏死率降低33.1%和35%(P<0.01)。结论Pur可有效抑制脑缺血诱导的细胞外氨基酸水平升高和谷氨酸兴奋毒作用,该机制可能与Pur的抗脑缺血作用有关。     

玛咖脂溶性提取物对睡眠剥夺小鼠学习记忆的影响

目的:研究玛咖脂溶性提取物对睡眠剥夺造成的小鼠学习记忆力下降的影响,并对脂溶性成分进行分析。方法:将48只雄性昆明种小鼠随机分为空白组,睡眠剥夺组,玛咖脂溶性提取物低、高剂量(60,200 mg·kg~(-1))组,连续ig给药16 d。实验第13天采用小平台水环境法制备小鼠睡眠剥夺模型,以通道式水迷宫实验测试小鼠睡眠剥夺24,48,72 h的学习记忆能力,观察睡眠剥夺72 h后小鼠脑组织病理学变化并检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量。用气相色谱-质谱仪(GC-MS)和高效液相色谱仪(HPLC)对玛咖脂溶性成分进行检测。结果:与空白组相比,睡眠剥夺组小鼠水迷宫潜伏期显著延长,盲端错误次数显著增加(P0.05),补充玛咖脂溶性提取物高剂量可显著缩短小鼠在通道式水迷宫中的潜伏期(P0.05),减少盲端错误次数;降低脑组织MDA含量(P0.01),使SOD和GSH-Px活力恢复到正常水平;降低海马组织的损伤。结论:补充含有玛咖酰胺的脂溶性提取物可以缓解睡眠剥夺导致的小鼠学习记忆力的降低和海马组织的损伤,其机制可能与抑制脂质过氧化有关。     

小檗碱对小鼠学习记忆及开场行为的影响

采用跳台法、步入法及开场装置观察了小檗碱对小鼠学习记忆行为及在新异环境中的探究行为和自主活动的影响，小檗碱０．４、４μｇ／只侧脑室注射可改善东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍及促进正常小鼠的记忆保持，对环己酰亚胺致记忆再现障碍及开场行为无影响。     

3'-甲氧基葛根素对缺血再灌注大鼠脑内氨基酸动态变化的实验研究

目的:研究脑缺血时3’-甲氧基葛根素对谷氨酸、天门冬氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸的抑制作用,探讨脑缺血损伤再灌注过程中其对神经损伤的保护机制。方法:制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,利用脑微透析技术收集大鼠纹状体细胞外液中的氨基酸类神经递质,并3’-甲氧基葛根素灌胃治疗;HPLC荧光检测用药前后4种氨基酸的含量变化。结果:3’-甲氧基葛根素可降低缺血时脑组织中兴奋性氨基酸Asp,Glu的浓度,同时使抑制性氨基酸Tau,GABA含量明显降低。结论:3’-甲氧基葛根素能降低缺血引起的脑内兴奋性氨基酸的毒性,调节脑内兴奋性氨基酸的含量。因此,该药改善脑内氨基酸的变化状态是改善和保护急性期脑梗死大鼠脑内神经保护作用机制之一。     

定志小丸对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响及机制

目的:研究经典古方定志小丸(由石菖蒲、远志、茯苓、人参按2∶2∶3∶3比例组成)对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响及可能的作用机制.方法:将小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(石衫碱甲0.05 mg·kg-1)、定志小丸高、中、低剂量组(700,350,175 mg·kg-1),连续灌胃7d后,腹腔注射东茛菪碱(1.5 mg · kg-1)制备小鼠学习记忆障碍模型,通过Morris水迷宫试验评价各组小鼠的学习记忆功能,并测定各组小鼠全脑中谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(Ach)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)活性.结果:行为学测试结果表明定志小丸能明显降低模型小鼠在Morris水迷宫定位航行试验中的平均潜伏期,增加空间探索试验中的穿越平台次数、目的象限游泳路程及时间的百分比;增加小鼠脑中Glu,5-HT,DA和Ach含量,降低GABA含量和AchE活性.结论:定志小丸可明显改善东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍,增强小鼠学习记忆的能力,其作用机制可能与调节Glu/GABA系统以及提高脑中Ach和单胺递质含量有关.     

葛根素对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察葛根素对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用。方法以链脲菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠及以氢化可的松琥珀酸钠(HCSS)诱导胰岛素抵抗小鼠模型,观察葛根素对正常、糖尿病及胰岛素抵抗模型小鼠血糖及血清胰岛素水平的影响。结果葛根素对正常小鼠空腹血糖无明显影响,可明显降低STZ诱导的糖尿病小鼠的血糖和血清胰岛素水平,使胰岛素敏感性指数显著升高,对HCSS诱导的小鼠胰岛素抵抗也有明显的改善,且均呈一定的剂量依赖性趋势。结论葛根素可显著改善实验性糖尿病小鼠的胰岛素抵抗。     

葛根素促进人成骨样MG-63细胞分化的分子机制研究

目的 探讨植物雌激素葛根素促进人成骨样MG-63细胞分化的分子机制。方法 选择兼有2种雌激素受体（estrogen receptor,ER）亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,采用磷酸苯二钠法、ELISA法及小RNA干扰等技术,探讨葛根素对人成骨细胞分化的作用及作用机制。结果 葛根素可通过提高MG-63细胞中碱性磷酸酶（ALP）活性和I型胶原蛋白分泌促进成骨细胞分化成熟,该作用可被纯ER阻断剂ICI 182, 780完全阻断,应用小RNA干扰技术进一步证实葛根素对成骨细胞ALP活性、I型胶原蛋白分泌的调节作用是由ERα和ERβ共同介导的。结论 葛根素对成骨细胞分化的调节是经ER途径,由ERα和ERβ共同介导。     

五味子总素对记忆障碍模型小鼠学习记忆的改善作用

目的:观察五味子总素对记忆障碍模型小鼠学习记忆的改善作用。方法:在整体水平,以腹腔注射戊巴比妥钠(20 mg.kg-1)建立小鼠记忆障碍模型,五味子总素(0.5,1.0,2.0 g.kg-1.d-1)连续灌胃14 d后,检测小鼠学习记忆能力;测定脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性;分析海马区核转录因子-κB p65(NF-κB p65),Caspase-3的表达。在细胞水平,采用过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤,以五味子总素(0.062 5,0.125,0.25 g.L-1)进行预保护24 h,检测细胞活性及细胞上清液中NO的变化;检测PC12细胞中Bcl-2的表达。结果:与模型组比较,五味子总素可延长小鼠有效区停留时间、平台停留时间;提高小鼠脑内SOD活性并降低NO含量;抑制NF-κB p65蛋白的核表达、抑制Caspase-3蛋白的表达,与模型组比较有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。五味子总素可提高PC12细胞的存活率并降低其细胞上清液中NO的浓度;可增加Bcl-2的表达量,与H2O2模型组比较有差异(P<0.05,P<0.01)。结论:五味子总素具有改善记忆障碍模型小鼠学习记忆的作用,其机制可能与抑制NF-κB的核转录、抑制海马区Caspase-3蛋白的表达;或是在细胞水平调节Bcl-2家族蛋白的表达而有效降低脂质过氧化产物水平等多种途径有关。     

脑力智宝对东莨菪碱所致学习记忆获得障碍小鼠的保护作用

目的:探讨脑力智宝对东莨菪碱所致学习记忆获得障碍小鼠的保护作用与机制。方法:腹腔注射东莨菪碱制备学习记忆获得障碍模型小鼠,以跳台法观察脑力智宝对模型小鼠学习记忆能力的影响,并检测血清与脑内胆碱酯酶活性、脑内游离氨基酸的含量。结果:脑力智宝能显著改善模型小鼠的学习记忆能力,有效抑制血清及脑内胆碱酯酶的活性,并显著提高脑内谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)水平,降低γ-氨基丁酸(GABA)水平。结论:脑力智宝增强小鼠的学习记忆获得过程的作用机制可能与抑制胆碱酯酶合成、提高脑内Glu/GABA比值有关。     

中药YN-3号对慢性应激大鼠学习记忆能力及海马CREB的影响

目的:探讨中药YN-3号对慢性应激模型大鼠学习记忆能力的影响及作用机制。方法:40只SD大鼠分为空白组、模型组、YN-3组和百优解组,应用孤养合并慢性复合应激方法造模,观察大鼠Open-field实验和"Y"型电迷宫成绩的变化;免疫组化方法检测海马内CREB(环磷酸腺苷反应单元结合蛋白)表达情况。结果:模型组大鼠自主运动和学习记忆能力显著降低(P<0.01),YN-3组行为学成绩与模型组比较有所提高(P<0.05);模型组大鼠海马内CREB含量较空白组显著降低(P<0.01),YN-3组与模型组比较海马内CREB含量有所提高(P<0.01),与百优解组比较无显著差异。结论:提示中药YN-3号可以在一定程度上对抗慢性应激所致的学习记忆行为改变,其机制可能与海马内CREB信号物质变化有关。     

葛根素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探讨葛根素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法:用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,葛根素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性,用改良的Lowry法测蛋白含量。结果:葛根素在1×10-4mol/L~1×10-8mol/L浓度范围内24h,48h促进成骨细胞增殖,在1×10-6mol/L~1×10-8mol/L范围内48h及1×10-8mol/L72h提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论:葛根素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。