压电石英晶体微阵列免疫传感器检测hCG的实验研究

目的　构建一种新型压电石英晶体人绒毛膜促性腺激素 (hCG)免疫微阵列传感器。方法　抗hCG β单克隆抗体采用蛋白A(SPA)法固定在 2× 5的AT切向、基频 1 0MHz的石英晶体微阵列金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电石英晶体hCG免疫微阵列传感器。结果　构建的hCG压电石英晶体微阵列免疫传感器对hCG的响应特性良好 ,其检测线性范围为 2 .5～ 2 50mIU ml,TSH、FSH、LH对hCG的检测基本无干扰 ;60例临床标本检测结果与荧光免疫检测法符合 (P >0 .0 5) ,两种方法的相关系数为 0 .92。结论　研制的压电石英晶体hCG免疫微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、省时、操作简单、不需标记、能在线实时检测等优点 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断检测     

压电石英晶体振荡频率检测平台的建立及应用

目的　构建一种 2× 5型压电石英微阵列振荡频率检测平台。方法　利用基频 1 0MHz的 2× 5型石英晶体微阵列作为传感换能器件 ,自行设计自激式振荡频率检测仪、频率分析软件PESA2 .0 ,与计算机连接组成压电石英晶体传感器检测平台 ,并应用于气、液相检测。结果　石英晶体微阵列在气、液相起振能力强 ,并获得稳定振荡 ,气相稳定度可达± 1Hz ,液相≤ 2Hz。消除了温度、电离辐射、机械震动等因素的干扰 ;实现了频率信号检测的自动化、微机化和自能化。结论　该检测平台具有检测频率稳定、自动化和智能化程度较高、能实时检测等优点 ,是一种新型压电晶体振荡频率检测共用平台 ,可广泛用于压电传感器振荡频率的检测     

压电免疫传感器阵列检测尖吻蝮蛇毒的初步研究

目的 探讨以压电传感阵列技术榆测尖吻蝮蛇毒的可行性.方法 构建2×5的AT切向、基频10 MHz的石英晶体微阵列,将尖吻蝮蛇毒抗体巯基化,通过自组装技术固定在石英晶体金膜电极表面,检测不同浓度的尖吻蝮蛇毒标准液.结果 尖吻蝮蛇毒压电免疫传感器阵列上,最适抗体固定浓度为3 μg/ml,尖吻蝮蛇毒与相应抗体反应时间为40 min,检测尖吻蝮蛇毒最低浓度为0.1μg/ml,蛇毒浓度在0.1～4.0μg/ml范围时,与晶体频率变化之间呈良好的线性关系.结论 采用压电免疫传感器阵列检测尖吻蝮蛇毒响应特性良好,具有灵敏度高、操作简单、不需标记等优点,是实现快速仪器化检测蛇伤的可能途径.     

压电石英晶体传感器液相检测的影响因素

目的　探讨压电石英晶体传感器液相检测的影响因素。方法　采用AT切向镀金膜的石英晶体制成 2× 5型石英晶体微阵列 ,观察晶体振荡频率在不同粘度和密度的甘油PBS( 0 .15mol LpH 7.0 )溶液、不同浓度的NaCl溶液、不同pH的PB溶液( 0 .0 6 7mol L)及不同体积的PBS溶液 ( 0 .15mol LpH 7.0 )中的变化规律以及机械冲击和重新加样对晶体振荡频率的影响。结果　石英晶体振荡频率随溶液粘度和密度、离子浓度、pH的增大而降低。溶液体积、机械冲击和重新加样对晶体频率基本无影响。结论　石英晶体传感器所处溶液体系的性状如粘度、密度、离子浓度、pH等因素对其振荡频率有较大的影响 ,石英晶体传感器用于生物反应检测时应减少和避免上述因素的干扰     

压电胰岛素免疫传感器的实验研究

目的 构建一种新型压电胰岛素免疫传感器。方法 AT切向、基频10MHz的石英晶体用金属夹县和乳胶套圈固定形成检测池，抗人胰岛素单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电板表面制成抗体敏感膜，构成压电胰岛素免疫传感器。结果 构建的压电胰岛素免疫传感器对胰岛素的响应特性良好，其线性检测范围为2．5—160．0mIU／L，C肽对胰岛素的检测基本无干扰，但胰岛素原与传感器存在轻微的交叉反应，传感器可再生后重复使用5次；60例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合(P＞0．05)，两种方法的相关系数为0．92。结论 研制的压电胰岛素免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能实时再现检测和重复使用等优点，对比实验表明其检测结果准确，能用于临床实验诊断，具有临床推广价值。     

心肌肌红蛋白压电免疫芯片检测方法的建立

目的 研制一种新型、快速地用于检测心肌肌红蛋白的压电免疫芯片.方法 设计四通道芯片微阵列,采用双功能基团交联剂Sulfo-LC-SPDP将心肌肌红蛋白单克隆抗体巯基化,固定于石英晶体的金膜电极表面制备生物敏感膜,构建压电免疫芯片.结果 芯片用于检测心肌肌红蛋白的灵敏度达50ng/mL,与酶联荧光分析法具有较好的相关性,可用于半定量检测心肌肌红蛋白.结论 构建的压电免疫芯片具有灵敏度高、特异性好等特点,具有一定的临床应用价值.     

压电石英晶体甲胎蛋白免疫传感器的实验研究

目的　构建一种新型压电甲胎蛋白 (AFP)免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定组成检测池 ,抗人AFP单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电AFP免疫传感器。结果　构建的压电AFP免疫传感器对AFP的响应特性良好 ,其线性检测范围为 2 0～ 10 0 0ng ml ,癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原 (PSA)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对AFP的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次 ;68例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 ,两种方法的相关系数为 0 92 ,P <0 0 1。结论　研制的压电AFP免疫传感器是一种灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能重复使用和实时在线检测AFP的新方法 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。     

压电C肽免疫传感器的实验研究

目的：构建一种新型压电C肽免疫传感器，方法：AT切向，基频10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池，抗人C肽单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜，构成压电C肽免疫传感器。结果：构建的压电C肽免疫传感器C肽的响应特性良好，其线性检测范围为0．375－12．0ng/ml，胰岛素，胰岛素原对C肽的检测基本无干扰，传感器可再生后重复使用5次，58例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合（P＞0．05），两种方法的相关系数为0．94。结论：研制的压电C肽免疫传感器具有灵敏度高，特异性好，不需标记，操作简单，省时，能实时在线检测和重复使用等优点，对比实验表明其检测结果准确，能用于临床实验诊断，具有临床推广价值。     

检测蝮蛇毒的压电免疫传感器阵列的初步构建

目的 初步构建适宜于蝮蛇毒检测的压电免疫传感阵列.方法 制作2×5型压电免疫传感阵列,AT切向、基频10MHz,通过自组装技术将巯基化后的蝮蛇毒抗体固定在石英晶体金膜电极表面,检测不同浓度的标准蝮蛇毒液,时压电晶体频率变化数据进行采集和分析.结果 蝮蛇毒压电免疫传感器阵列上,达到最大频率变化的最小抗体浓度为4μg/mL;蝮蛇毒与抗体反应40分钟后频率达到稳定状态;蝮蛇毒浓度低于0.1μg/mL时,频率变化不明显,蝮蛇毒浓度在0.1～5.0μg/mL范围时,与晶体频率变化间呈线性关系.结论 初步构建的蝮蛇毒压电免疫传感器阵列响应特性良好,具有灵敏度高、操作简单、不需标记等优点,是较有前景的蝮蛇毒检测方法 .     

压电石英晶体传感器检测单链DNA的研究

目的：对石英晶体传感器检测单链DNA的可行性进行论证，并对其DNA固定方法进行研究。方法：利用聚乙烯亚胺(PEI)黏附和戊二醛(Glu)交联法，将单链DNA探针固定在基频为10MHz的AT切型石英晶体的镀金表面，制成压电石英晶体DNA传感器，用该DNA传感器进行互补单链DNA定量定性检测，并用1．2mol/L NaOH和1．2mol/L HCl对杂交后的传感器进行了再生。结果:在50-400ng/ml的范围内，响应信号与检测浓度成线性相关，并具有良好的特异性。杂交后的DNA传感器能反复再利用。结论：石英晶体传感器可以用于DNA的杂交检测。     

自组装法研制超氧化物歧化酶生物传感器

本文利用自组装法制备了直接吸附和半胱胺修饰自组装超氧化物歧化酶生物传感器。采用镀金压电石英晶体微电极为工作电极、饱和甘汞电极为参比电极、自制石墨电极为对电极的三电极体系和电化学石英晶体微天平(EQCM)技术对监测超氧化物歧化酶(SOD)在裸金电极和半胱胺修饰金电极上自组装成膜吸附的过程。利用循环伏安法对自组装电极的直接电化学行为进行测定,然后利用电流-时间曲线法对超氧阴离子的响应进行了测定。研究了pH和扫描速率对酶电极的峰电流和峰电位的影响。     

适配子型压电石英晶体传感器探针固定方法的研究

目的 比较金膜表面两种探针固定法的优劣,选择适配子型压电传感器探针固定的最佳方法.方法 用巯基固定法及生物素-亲和素固定法将针对人IgE的适配子探针固定在压电传感器的金膜表面,对不同浓度IgE引起的频率变化进行检测.结果 与巯基法相比,生物素-亲和素法固定探针压电传感器频率下降更为明显,检出限低,线性范围宽,0.1～2.5 mg/L浓度范围内IgE浓度与频率变化呈明显的线性相关,相关系数0.994 5.结论 在压电基因传感器探针固定中效果良好的巯基法在适配子探针固定中并不适用,生物素-亲和素法在适配子压电传感器探针固定中有明显优势.     

声电子胰岛素免疫传感器固定化活性抗体膜的制备研究

选择５％聚乙烯醇为膜材料，与１０ｕ／ｍｌ胰岛素抗体混匀，在压电石英晶体上制备活性抗体膜。放免法检测结果表明，抗体膜具有良好的机械强度、透性和响应性能。抗体膜与不同浓度的胰岛素抗原结合，显示抗体膜上胰岛素结合量与胰岛素浓度呈线性相关。     

压电免疫传感器与ELISA、TPPA法在梅毒筛查试验中的对比研究

目的研制压电免疫传感芯片法快速检测梅毒特异性抗体。方法采用吸附-交联法将梅毒基因工程重组抗原固定在镀金石英晶体表面。运用压电免疫传感阵列检测技术快速检测梅毒特异性抗体。以压电免疫传感芯片为实验方法,以ELISA作对照方法,以TPPA作为确认方法进行对比研究。结果30份临床样本,实验方法与对照方法的灵敏度均为100％,特异度分别是85％和75％,一致率分别是90％和83．3％。压电蛋白芯片法与TPPA法检测数据之间存在相关关系,属半定量实验。结论运用压电免疫传感阵列对梅毒螺旋体抗体进行快速检测,具有灵敏度高、特异性好,检测速度快等优点,特别适用于野战条件下献血者血液快速筛查。     

压电石英晶体生物传感器的血浆凝血因子检测系统的效能研究

目的研究用压电石英晶体传感器进行凝血因子检测的系统,介绍血浆凝血因子检测系统的工作原理.方法利用压电石英晶体的逆压电反应,基于模糊和解耦控制技术,采用单片机进行恒温恒湿控制和频率计数,测得血浆凝集时间,来确定凝血因子的活性和含量.结果本检测系统提高了凝血因子检测的方便性、精度和一致性.结论压电石英晶体传感器用于凝血因子检测具有精度高和成本低等优点,有广阔的临床应用和推广前景.     

纳米金颗粒质量放大压电DNA传感器频移信号的研究

目的探讨纳米金颗粒质量放大压电DNA传感器频移信号的可行性,以进一步提高检测灵敏度。方法将巯基化的单链DNA探针固定于压电DNA传感器石英晶体金膜表面,封闭后加入合成的生物素化的互补靶DNA与之进行杂交反应,最后用5nm粒径的链亲和素标记的胶体金追加标记于杂交后的生物素化的靶DNA上,以增加石英晶振金膜表面的质量负载,从而降低石英晶振的响应频率,进一步放大频移信号。结果检测终浓度为10-8mol/L的阳性靶序列时杂交反应前后频移为(12.7±5.5)Hz,加入终浓度为9%的纳米金颗粒放大后总频移为(126±2.6)Hz,后者显著高于前者(P<0.01)。另外,对不同终浓度的阳性靶序列检测后发现,频移与其终浓度的lg值之间具有显著的线性关系,相关系数为0.974,而且最低检出限达到了10-12mol/L。结论实验结果表明该方法可以显著放大压电DNA传感器的频移信号,从而进一步提高压电DNA传感器检测的灵敏度。     

压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原方法的研究及应用

目的建立一种压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原(Fib)的方法.方法采用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;观察血浆凝集过程中晶体振荡频率的变化,确定血浆凝集反应的起点和终点.结果 (1)检测池加入凝血酶原待频率稳定后,血浆标本加入反应体系后,晶体振荡快速下降,由于反应中形成的纤维蛋白原凝块的质量、体积与晶体接触的面积以及血清产生的量不同,造成频率瞬时的上升、下降,或频率稳定,直至反应结束频率平稳,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点,计算两点的时间即为反应时间,查标准曲线得纤维蛋白原的含量.(2)该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r＝0.957).结论压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原是一种实时在线检测的方法,在线观测凝集反应的终点,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确.且操作简单,快速,成本低廉,是一种敏感性高、重复性好的方法,并可用于临床检测.     

纳米微粒增敏的压电化学传感器

以TiO2 纳米微粒膜作为固载 β 环糊精的基体 ,可以实现 β 环糊精在压电石英晶体表面的超容量固载 ,固载容量为 4 μg cm2 。β 环糊精 TiO2 纳米微粒膜修饰的压电传感器对苯、甲苯、硝基苯、氯苯、o 二甲苯、m 二甲苯、p 二甲苯气体检测时响应时间为 1min ,检测浓度下限可低至 4 0ng ml。该方法为提高压电化学传感器的灵敏度和缩短响应时间提供了一种新方法