PCNA在高血压大鼠肾上腺的表达

目的　观察Dahl大鼠肾上腺中增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的动态变化 ,探讨原发性高血压肾上腺细胞增殖的关系。方法　应用日本引进的Dahl高血压大鼠 ,SP免疫组织化学染色。结果　PCNA免疫阳性细胞在Dah1S和Dah1R大鼠肾上素均有表达 ,主要存在于皮质中。阳性反应产物见于细胞核中。PCNA的阳性细胞数 ,在盐敏感性高血压 (Dah1S)大鼠 ,随着高血压的进展而呈先升高后降低趋势。结论　Dah1高血压可导致大鼠肾上腺皮质PCNA表达的动态变化 ,先升高后降低。初期的增高可能与肾素 血管紧张素 醛固酮系统活性增高有关。后期则可能与持续的高钠离子负荷有关。     

自发性高血压大鼠交感神经节与肾上腺髓质内NPY的表达及超微结构的变化

目的:通过对自发性高血压大鼠(SHR)颈上神经节、肾上腺髓质内神经肽酪氨酸(NPY)表达及超微结构变化的研究,探讨NPY在高血压发生和发展中的作用。方法:随机选取成年大鼠60只,分成SHR组和正常对照组,每组各30只,采用Real-Time PCR技术和免疫组织化学法,检测两组大鼠颈上神经节、肾上腺髓质内NPYmRNA和蛋白的表达;应用透射电镜技术观察上述两种组织内超微结构的改变。结果:与同周龄的正常组大鼠相比,SHR大鼠的血压明显增高(P<0.05),RT-PCR和免疫组织化学方法检测到颈上神经节、肾上腺髓质内NPYmRNA和蛋白质的表达均增高(P<0.05),NPY免疫阳性神经元的数量和阳性细胞的光密度亦增加(P<0.05)。电镜结果示SHR大鼠两种组织内异染色质、线粒体、粗面内质网等数量均明显增加(P<0.05)。结论:SHR颈上神经节、肾上腺髓质内的NPY通过复杂的机制可能参与了高血压的形成。     

大鼠提睾肌缺血再灌注损伤时血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖与凋亡

目的研究大鼠提睾肌缺血再灌注后血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖和凋亡。方法以免疫组织化学SP法和末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记法 (TUNEL)对大鼠提睾肌缺血再灌注后的血管平滑肌细胞和内皮细胞的Bcl-2、Bax、P53和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达进行观察研究。结果缺血再灌注后 ,血管平滑肌细胞和内皮细胞均有Bcl-2、Bax、P53和PCNA的表达 ,在平滑肌细胞 ,Bcl-2阳性细胞数量明显高于Bax和P53。PCNA阳性细胞明显增多。在内皮细胞 ,Bax和P53的表达最强 ,TUNEL阳性细胞率最高。结论大鼠提睾肌缺血再灌注可造成平滑细胞的增殖和内皮细胞的凋亡 ,其结果可能与微循环障碍有关。     

血管紧张素-(1-7)对肾性高血压大鼠肾组织纤维化的影响

目的 :观察血管紧张素 ( 1 7) [Ang ( 1 7) ]对实验性肾性高血压大鼠肾组织纤维化的影响。方法 :采用微渗泵植入技术 ,建立Ang ( 1 7)对二肾一夹 ( 2K1C)高血压大鼠干预模型 ,在光镜下观察肾脏纤维化 ,免疫组化法检测肾组织转化生长因子β1 (TGF β1 ) ,RT PCR检测肾组织内TGF β1 、TGF β1 受体ImRNA水平。结果 :Ang ( 1 7)能减轻2K1C高血压大鼠肾纤维化 ,减少 2K1C高血压大鼠肾组织TGF β1 的蛋白表达 ,降低肾组织内TGF β1 、TGF β1 受体ImRNA水平。结论 :Ang ( 1 7)对 2K1C高血压大鼠肾纤维化作用机制之一是通过减少肾组织内TGF β1 及其受体的表达而实现     

寒冷应激对大鼠肾上腺髓质亨廷顿蛋白相关蛋白1表达的影响

目的 探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)在大鼠肾上腺髓质的超微结构定位,以及寒冷应激对大鼠肾上腺髓质HAP1表达的影响. 方法 成年雄性Wistar大鼠14只,2只用于免疫电镜研究,12只用于寒冷实验研究.寒冷实验中,将动物随机分为对照组和寒冷组,每组6只,寒冷组动物放置4℃环境下,12h后用免疫组织化学和Western blotting方法 检测大鼠肾上腺髓质HAP1表达的变化. 结果 免疫电镜结果 显示,HAP1免疫反应产物分布在肾上腺髓质细胞分泌颗粒外膜及分泌颗粒间的膜性细胞器上.寒冷组大鼠肾上腺髓质HAP1的表达明显减少,和对照组比较有显著性差异( P <0.01). 结论 HAP1可能与肾上腺髓质细胞内分泌颗粒及位于分泌颗粒内的肾上腺素/去甲肾上腺素的运输和释放有关.     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对脑缺血再灌注大鼠Bcl-2、Bax和Beclin-1的表达及细胞凋亡的影响

目的:应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测Bcl-2、Bax、Beclin-1阳性细胞的表达,探讨自噬蛋白Beclin-1与凋亡之间的关系。方法:成年雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R组),Cys C低、中、高浓度组。用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2 h再灌注24 h。采用免疫印迹半定量检测损伤中心脑皮质组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Beclin-1的表达;免疫组织化学检测Bcl-2、Bax和Beclin-1阳性细胞数;TUNEL染色法检测脑组织细胞凋亡。结果:与I/R组相比,Cys C低、中浓度组Bcl-2的表达有不同程度的升高,Bax的表达降低,细胞凋亡减少;而Cys C高浓度组Bcl-2的表达明显降低,Bax的表达显著上升,细胞凋亡增加;Cys C各浓度组Beclin-1的表达都有不同程度的升高。凋亡细胞与Beclin-1表达的相关性分析显示,Cys低、中浓度组细胞的自噬和凋亡呈负相关;Cys C高浓度组细胞的自噬和凋亡呈正相关。结论:Cys C在一定浓度范围内,随自噬蛋白Beclin-1表达的升高可抑制细胞的凋亡,对缺血再灌注损伤脑组织具有保护作用。其作用机制和Bcl-2的表达上调,Bax的表达下调有关;而Cys C较高浓度则无上述作用。     

TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及Thy-1肾炎中表达的影响

目的　研究转化生长因子β1(TGF- β1)对醛糖还原酶(AR)在大鼠系膜细胞(MsC)及大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 (ATG)中表达的影响。方法　采用RT PCR和Westernblot技术分别检测TGF β1刺激后体外培养大鼠系膜细胞AR的表达以 及TGF -β1和AR在ATG中的表达;应用免疫组化检测ATG中TGF -β1、AR的表达,并对染色强度进行图像分析。结果　外源 性TGF- β1作用后,大鼠系膜细胞中AR表达升高,并显示出一定的时间与剂量依赖性。ATG中,随着病程的延长,TGF -β1、AR 表达升高,对免疫组化结果进行图像分析显示,二者表达之间具有相关性(r=0.65,P<0.05)。结论　TGF -β1可以上调其相 关反应性基因AR的表达,后者可能参与了肾小球肾炎发生发展的过程。     

肾上腺髓质素在心血管系统的分布及在心血管功能调节中的 …

观察肾上腺髓质素在大鼠心血管系统的分布及缩血管活性肽对血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素表达的影响。方法与结果：应用免疫组织化学方法证实，大鼠的外周组织，尤其是主动脉和心肌等心血管组织以及培养的血管内皮细胞，血管平滑肌细胞和心肌细胞，均含有丰富的免疫活性的肾上腺髓质素。     

神经调节素对实验性痴呆大鼠的干预作用和可能机制

目的探讨神经调节素1β(NRG1β)对实验性老年痴呆大鼠神经元凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响。方法成年健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、治疗组各10只,经左侧脑室微量注射淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)建立实验性痴呆模型,经右侧脑室注射NRG1β干预治疗,Y型电迷宫检测大鼠的认知功能,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法检测Bcl-2和Bax表达。结果造模成功后,模型组大鼠较对照组认知能力明显下降,TUNEL阳性细胞数明显增多,神经细胞Bcl-2和Bax蛋白表达增强(P0.05)。经NRG1β治疗后,治疗组大鼠较模型组认知能力显著改善,TUNEL阳性细胞显著减少,Bcl-2表达增强,Bax表达减弱(P0.05)。结论 NRG1β可能通过调节Bcl-2和Bax表达而抑制神经细胞凋亡,从而改善实验性痴呆大鼠学习记忆能力。     

Ⅰ型糖尿病脑病模型大鼠空间学习记忆以及海马齿状回细胞凋亡和Bax与Bcl-2蛋白表达的变化

目的探讨1型糖尿病脑病海马齿状回细胞凋亡、Bax与Bcl-2蛋白表达、空间学习记忆之间的相互关系。方法通过腹腔注射链脲佐菌素(溶于柠檬酸缓冲液)建立1型糖尿病脑病模型大鼠,通过腹腔注射柠檬酸缓冲液建立载体模型大鼠。应用Morris水迷宫、TUNEL技术、Bax与Bcl-2免疫组化方法,观察各组大鼠海马齿状回颗粒下区(SGZ)、颗粒细胞层(GCL)的Bax、Bcl-2、TUNEL阳性细胞和空间学习记忆的变化。结果糖尿病脑病组大鼠的SGZ、GCL的Bax阳性细胞数、TUNEL阳性细胞数、水迷宫的逃避潜伏期和游泳距离均明显高于载体模型组或正常对照组大鼠的对应指标(P<0.01);而糖尿病脑病组大鼠的Bcl-2阳性细胞数则明显低于载体模型组或正常对照组大鼠(P<0.01),但以上各组3类阳性细胞的形态和分布却均无明显差异。结论体内长期缺乏胰岛素可打破凋亡基因Bax与抗凋亡基因Bcl-2的蛋白表达水平之间原有的正常动态平衡状态,致使海马齿状回的细胞倾向于多发生细胞凋亡事件,这可能是引发1型糖尿病脑病神经发生障碍及空间学习记忆异常的一个因素。     

内皮素和一氧化氮合酶在Dahl高血压大鼠不同时期大脑皮质表达变化的研究

本研究通过观察 ET和 NOS在不同阶段 Dahl高血压大鼠大脑皮质神经组织及血管内皮细胞的分布变化 ,进一步探讨二者在高血压及其重要并发症—脑卒中发病中的意义。实验用 Dahl S和 Dahl R大鼠 ,在 5周龄投予 8%食盐饲料 ,分别在 10周、11周、12周时取材 ,4%多聚甲醛经左心室灌流固定 ,冰冻切片 ,免疫细胞化学 SP法染色 ,DAB显色。结果 :ET和 NOS免疫阳性细胞在 Dahl S和 Dahl R组大鼠大脑皮质神经元及血管内皮细胞均有分布。每年龄段Dahl S组 ET阳性细胞较同时期 Dahl R组增多 (P <0 .0 5 )。Dahl S组 NOS阳性细胞较同时期 Dah…     

转化生长因子β1 mRNA在实验性肝癌间质差异形成中的意义

目的 :应用原位分子杂交技术观察TGF β1mRNA在实验性大鼠胆管细胞性肝癌 (CC)和肝细胞性肝癌 (HCC)中的表达 ,探讨肝癌间质差异形成的可能机制。方法 :大鼠肝癌组织经HE和AlcianBlue染色确认CC或HCC ,用TGF β1反义RNA探针检测TGF β1mRNA的表达 ,同时以TGF β1正链 ,β actin反义RNA探针分别作为阴性和阳性对照。结果 :CC中多数癌细胞内TGF β1mRNA有较强表达 ,HCC中仅少部分癌细胞胞浆内TGF β1mRNA呈弱到中等强度的表达 ;少数CC的间质细胞也有TGF β1mRNA表达。结论 :由于TGF β1是促进间质形成的重要因子 ,因此CC癌细胞及间质细胞合成并分泌的TGF β1可能是CC间质多于HCC间质的原因     

肾上腺髓质素对缺氧培养骨髓间充质干细胞表达凋亡相关蛋白的影响

背景：肾上腺髓质素基因转染能增强骨髓间充质干细胞在缺血、缺氧环境下的抗凋亡能力,但其机制尚未完全明确。 目的：观察肾上腺髓质素对骨髓间充质干细胞缺血、缺氧时Bax、Bcl-2和Caspase-3等凋亡相关调节蛋白表达的影响。 方法：贴壁法分离、培养、纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞,缺氧、无血清培养0,3,6,9,12 h后用Western blot测定Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达以确定最佳缺氧时间。采用缺氧6 h为时间点,根据缺氧、无血清培养前是否进行肾上腺髓质素预处理分为对照组(未加入肾上腺髓质素)及肾上腺髓质素不同质量浓度组(1,10,100 μg/L),然后采用Western blot测定Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。 结果与结论：①无血清培养条件下缺氧0,3,6,9,12 h后骨髓间充质干细胞 Bax、Bcl-2表达均增加(P < 0.05),缺氧6 h时Bax/Bcl-2比值、caspase-3蛋白达到最小(P < 0.05)。②缺氧6 h时,与1,10 μg/L肾上腺髓质素组相比,100 μg/L肾上腺髓质素组表达Bax蛋白、Caspase-3蛋白最低,Bax/Bcl-2比值最低,而表达Bcl-2蛋白最高(P < 0.05)。结果表明肾上腺髓质素能降低无血清、缺氧条件下骨髓间充质干细胞Bax/Bcl-2比值、Caspase-3蛋白表达,该效应存在剂量依赖性。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

肾小管间质纤维化中成纤维细胞的转化生长因子β1及其Ⅰ型受体蛋白及基因表达检测

目的 :研究腺嘌呤致大鼠肾小管间质纤维化模型的肾组织成纤维细胞中转化生长因子 β1(TGF β1)及其Ⅰ型受体的表达。方法 :腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型 ,由模型肾组织培养肾间质成纤维细胞 ,应用免疫组化、逆转录PCR分别检测TGF β1及其Ⅰ型受体蛋白及mRNA的表达。结果 :成纤维细胞TGF β1、TGF β1I型受体免疫组化阳性 ;逆转录PCR可见 2 94bp的TGF β1及 34 5bp的TGF β1的Ⅰ型受体mRNA特异扩增带。结论 :在肾小管间质纤维化进程中 ,肾间质成纤维细胞是TGF β1的一个来源 ,而且也是其效应细胞 ,从而在TGF β1的作用下出现增生和合成细胞外基质的效应。     

循环间歇性低氧对大鼠肾上腺β淀粉样前体蛋白裂解酶1表达的影响

目的观察β淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)在大鼠肾上腺的表达和定位,检测循环间歇性低氧(CIH)对BACE1表达的影响。方法采用Western blotting和免疫组织化学法检测BACE1在大鼠肾上腺的表达及定位;16只雄性SD大鼠随机分为2组,常氧对照组(control组)和CIH模型组,每组8只。模型制作2周,Western blotting检测各组大鼠肾上腺髓质BACE1和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的表达量。结果BACE1主要定位于大鼠肾上腺髓质神经纤维;与control组相比,CIH组大鼠肾上腺髓质BACE1蛋白水平下降,TH蛋白水平升高(P<0.05)。结论BACE1定位于大鼠肾上腺髓质神经纤维;BACE1水平下调可能参与减缓CIH引起的交感神经活性过度增强。     

杏仁核点燃鼠海马不同亚区Bax mRNA的表达

目的:观察细胞凋亡调控基因Bax mRNA在癫癎鼠海马不同亚区的表达。方法:利用电极植入鼠脑杏仁核的方法建立点燃癫癎模型,采用原位杂交法检测鼠脑海马CA1、CA2、CA3及齿状回(DGL)区Bax mRNA的表达。结果:正常大鼠海马各区少见Bax mRNA阳性细胞表达,杏仁核植入电极大鼠及其点燃后海马各区Bax mRNA表达阳性细胞数增多,点燃鼠Bax mRNA阳性细胞平均光密度高于仅仅植入电极鼠,海马不同亚区Bax mRNA阳性细胞平均光密度值不同。结论:杏仁核点燃癫癎模型鼠的海马不同亚区均存在Bax mRNA表达增强,但不同亚区对Bax mRNA表达敏感性不同,以DGL区为最高。     

新生鼠缺氧缺血脑损伤TGF-β1表达与神经细胞凋亡

目的 研究新生大鼠脑缺氧缺血（HI）后TGF－β1表达和神经细胞凋亡的变化规律，探讨新生儿缺氧缺血脑损伤的发病机制。方法 结扎新生7d龄SD大鼠左颈总动脉后，吸入8％浓度氧2h，建立HIBD模型。应用苏木素－伊红（HE）染色，原位缺口末端标记（TUNEL）及SP免疫组化方法检测新生大鼠HI后存活不同时间大脑皮质和民TGF－β1的表达及神经细胞凋亡的情况。结果 缺氧缺血后8h，大脑皮质和海马出现TGF－β1的表达，缺氧缺血后12h和48h ,TGF－β1出现两次表达高峰，神经细胞凋亡高峰为缺氧缺血后24h，晚期表达TGF－β1的免疫阳性细胞与凋亡细胞均出现在缺血半暗带内。结论 缺氧缺血引起了TGF－β1的表达增强，TGF－β1的表达可能通过对神经细胞凋亡的调控，参与缺氧缺血后神经细胞的修复。     

葛根素减轻乙醇导致大鼠生精细胞的凋亡

目的 观察乙醇导致大鼠生精细胞的凋亡及葛根素的干预。方法 将大鼠30 只,随机均分为对照组、乙醇组及葛根素干预组。于实验第40天免疫组织化学法（SABC）检测左侧睾丸各组Bcl-2、Bax 蛋白在生精细胞的表达; RT-PCR检测右侧睾丸各组Bcl-2及Bax mRNA的表达;TUNEL 法检测生精细胞的凋亡。结果 醇组平均每个生精小管断面中Bcl-2 蛋白阳性细胞数和A值低于对照组(P<0.01),而平均每个生精小管断面中Bax 蛋白的阳性细胞数和A值高于对照组(P<0.01);乙醇组Bax mRNA表达较葛根素干预组及对照组强（P<0.05）,而Bcl-2 mRNA表达较葛根素干预组及对照组弱（P<0.05）;乙醇组每个生精小管横切面中的凋亡细胞数目高于对照组(P< 0.01),葛根素干预组显著缓解上述变化。结论 根素对乙醇导致的大鼠生精细胞凋亡有干预作用。     

转化生长因子-β1,2在不同发育阶段皮肤组织中的定位及表达量的变化

目的 :探讨转化生长因子 - β1,2 (TGF - β1和TGF - β2 )与α -平滑肌肌动蛋白 (α -ASMA)在胎儿和成人皮肤中的分布和表达变化规律。方法 :2 0例被测标本中包括不同胎龄的胎儿皮肤 15例和成人皮肤 5例。用免疫组化方法和病理技术确定这 3种蛋白在不同发育阶段皮肤中的定位和表达量。结果 :在妊娠早期的胎儿皮肤中 ,TGF - β1,2 和α-ASMA呈弱阳性表达 ,随着胎儿生长发育 ,这 3种蛋白的阳性细胞率逐渐增大 ;在妊娠晚期胎儿和成人皮肤中这 3种蛋白的表达量明显多于妊娠早期胎儿皮肤 (P <0 0 1)。TGF - β1,2 的阳性信号主要存在于表皮细胞 ,内皮细胞和部分成纤维细胞中 ,α -ASMA蛋白定位于肌成纤维细胞和汗腺上皮细胞内。结论 :TGF - β1和TGF - β2 可能在皮肤的发生、结构和功能的维持以及皮肤损伤后的修复中起重要作用。     

PAI-1在TGF-β1基因和反义TGF-β1基因转染人肝癌细胞株中的表达

目的 :通过对人肝癌细胞株 (SMMC 772 1)转染TGF β1基因及反义TGF β1基因 ,观察该细胞PAI 1表达的变化。方法 :采用电穿孔法进行基因转染 ,并用Westernblot、Northernblot法加以鉴定后 ,分别应用Westernblot及Northernblot观察该细胞表达PAI 1mRNA的变化。结果 :过表达的TGF β1细胞克隆PAI 1mRNA表达均高于对照组 ,而低表达TGF β1者PAI 1mRNA表达低于对照组。结论 :TGF β1可能通过上调肝癌细胞PAI 1的表达 ,在肝癌浸润和转移过程中发挥重要作用。