胰岛素受体缺陷高血压与病机制的研究

目的：为进上步阐明原发性高血压病人们胰岛素抵抗的发病机制，揭示胰岛素受体基因缺陷在原发性高血压病中的作用。方法：对原发性高血压伴胰岛素抵抗患者胰岛素受体基因酪氨酸激酶域外显子１７、１８基因突变进行检测。并对突变的外显子进行核苷酸序列分析。结果：①原发性高血压病人存在着胰岛素抵抗。②原发性高血压病人伴有胰岛素抵抗者３３例中９例发生基因突变占２７．２７％，突变部位发生在外显子１７。银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ     

肺癌患者hPARP-1基因突变PCR-SSCP检测

目的用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术研究肺癌患者聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1（hPARP-1）基因突变情况，寻找与肺癌发生相关的分子标记物。方法收集广东地区220名健康人群和106例肺癌病人的基础资料及血液标本，常规酚-氯法抽提血液DAN，用PCR单链构象多态性（SSCP）法检测hPARP-1基匹1第13，17和20外显子突变情况，并进行DNA序列分析。结果检测出5例肺癌病人在hPARP-1基因第17外显子有杂合性突变，为CAC→CGC的错义突变，即组氨酸→精氨酸。hPARP-1基因其余2个外显予未发现突变。结论PCR-SSCP是筛检基因突变的1种快速有效的方法，hPARP-1基因第17外显子上的突变可能是与肺癌发生相关的1种分子标记物。     

中国人胰岛素受体基因EXON2-2257位点多态性与胰岛素抵抗的关系

目的 从群体角度探讨胰岛素抵抗与胰岛素受体基因多态性的关系。方法 用聚合酶链反应(PCR)对某一特定队列中国人群的胰岛素受体基因第二外显子(EXON2)进行扩增,并用PCR产物直接测序法对EXON2进行了单核苷酸序列分析。结果 在EXON2-2257位点测得单核苷酸多态性,在345人中表现为:纯合CC基因型237人,占68.70％,基因频率0.825;纯合TT基因型13人,占3.77％,基因频率0.175;杂合CT基因型95人,占27.54％,符合Hardy-Weinburg平衡(X2=0.2898,u=3-2=1,0.5相似文献   

多囊卵巢综合征患者瘦素受体基因突变的研究

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者瘦素受体基因突变与瘦素抵抗的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)银染技术结合DNA直接测序,检测PCOS患者33例(PCOS组)及育龄期单纯子宫肌瘤患者33例(对照组)腹壁脂肪组织中瘦素受体(LEPR)基因第2、4、6、7、8、13/14、20外显子的突变。结果共发现24例外显子4上有位置异常的电泳条带,其中PCOS患者18例,对照组6例。经直接测序分析,为A670→G670的纯合多态性突变,即109位氨基酸由赖氨酸(Lys K)置换成精氨酸(ArgR)。PCOS患者的该位点检测到的A→G的多态性变异频率明显高于对照组(P0.05)。所有检出第4外显子K109R多态性的患者血清瘦素水平高于未检出变异者(P0.01)。结论 PCOS患者LEPR基因胞外区第4外显子突变频率高于对照组,第4外显子K109R多态性可能与PCOS有遗传倾向的瘦素抵抗有关。     

Foxa2基因突变与胰岛素β细胞功能的关系

目的研究2型糖尿病患者Foxa2基因表达与胰岛β细胞功能的关系。方法选取2型糖尿病患者70例为T2DM组,健康体检者65例为对照组,两组患者入选后对一般资料及临床生化指标进行测量和检测,并对T2DM组患者进行Foxa2基因检测,把所测得序列与GenBank提供的外显子和启动子进行比较与分析以找出是否有突变。结果 T2DM组胰岛素抵抗指数高于对照组,而胰岛素敏感指数、胰岛β细胞功能指数、糖负荷后胰岛素增值与血糖增的比值(△I30/△G30)、新β细胞功能指数则低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。T2DM组经Foxa2基因检测见突变者总计55例(78.6%),Foxa2基因存在突变者胰岛素抵抗指数高于突变阴性者,而胰岛素敏感指数、胰岛素抵抗指数、新β细胞功能指数低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 2型糖尿病患者Foxa2基因突变可能会增加胰岛素抵抗情况,影响胰岛β细胞功能,由此提示Foxa2基因突变可能为2型糖尿病发病的危险因素之一。     

人群ACE基因多态性与原发性高血压及胰岛素抵抗的关系研究

目的 :探讨中国人群血管紧张素转换酶 (ACE)基因多态性与原发性高血压及胰岛素抵抗的关系。方法 :采用病例对照研究方法 ,对社区人群中确诊的 112例原发性高血压和性别、年龄相匹配的健康人询问可能与原发性高血压有关的因素 ,测定空腹血糖、胰岛素 ,应用聚合酶链反应 (PCR)检测其ACE基因插入 /缺失 (I/D)多态性。结果 :病例组及男性病例组与对照组及男性对照组比较 ,ACE(I/D)多态性构成均有显著差异 ;病例组及男性病例组中DD基因型高于对照组及男性对照组。全组非肥胖人群及男性非肥胖人群中Ⅱ基因型与DD基因型比较 ,胰岛素敏感指数 (ISI)均增高。结论 :中国人群ACE基因 (I/D)多态性与原发性高血压及胰岛素抵抗存在一定关系 ,DD基因型可能是原发性高血压 ,特别是男性原发性高血压的一种遗传易感指标 ;在非肥胖人群中 ,尤其是男性 ,Ⅱ基因型可能容易发生胰岛素抵抗     

胰岛素受体基因NsiI多态性与原发性高血压的相关性研究

[目的]研究胰岛素受体(INSR)基因第8外显子NsiI多态性与原发性高血压病(EH)的关系。[方法]选择山东省五莲县15岁以上居民进行EH流行病学调查,检测相关临床指标,从中选取EH患者221例和正常对照204例,提取外周血白细胞DNA后进行PCR扩增,采用NsiI酶切和对部分PCR产物直接测序检测相关基因多态性。[结果]EH组与正常对照组除收缩压与舒张压有显著差别外,其他临床检验指标差异无统计学意义。EH组INSR基因N2等位基因频率高于正常对照组(P﹤0.05)。[结论]INSR基因NsiI多态性与中国人高压血病有关,N2等位基因可能是高血压病一个易感基因。     

185例华南地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨华南地区非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体（EGFR）基因突变特点及与临床特征的关系。方法收集本院185例NSCLC肿瘤组织，分别提取DNA，采用荧光PCR法扩增EGFR基因第18、19、20、21号外显子，对扩增片段进行DNA正反向测序并分析。结果185例NSCLC中，62例（33．5％）EGFR基因突变，其中18、19、20、21外显子突变分别为2例、41例、5例、14例；共见突变类型16种，热点突变类型为19外显子DelL747→P752（P753S）（构成比8．1％）、DelE746→A750（构成比45．1％）和21外显子L858R（构成比22．6％）；其中4例19外显子突变正、反向测序结果不一致。见20外显子2361G→A沉默突变（28．1％）；女性突变率显著高于男性（46．2％vs24．3％，X2=9．670，P=0．002）。不吸烟者突变率高于吸烟者（41．4％vs17．1％，X2=7．380，P=0．007）。腺癌患者突变率高于鳞癌患者（38．3％vs6．3％，X2=6．426，P=0．011）。临床Ⅲ期患者突变率显著低于临床Ⅱ期、Ⅳ期患者（10．8％vs53．8％，X2=8．026，P=0．003；10．8％vs41．3％，X2=9．518，P=0．002）。同时，未发现EGFR基因突变率与年龄相关。结论华南地区NSCLC患者EGFR基因突变以19、21外显子突变为主。突变率以女性、不吸烟、腺癌者较高。     

原发性肝癌表皮生长因子受体突变的研究

目的对原发性肝癌患者EGFR基因进行检测,分析EGFR基因突变与原发性肝癌及患者年龄组成的关系。方法对2 507例确诊原发性肝癌的石蜡包埋组织样本用PCR扩增法和双向测序法检测EGFR基因突变状态。结果 2 507例患者仅检测出620例(24.74%)EGFR基因20外显子同义突变Q787Q(2361G>A)和263例(10.49%)19内含子点突变(2284-60T>C);EGFR基因突变与患者性别、病理类型无关(P>0.05),与患者的年龄段组成明显相关(P<0.05),且基于年龄段的分布,20外显子突变与19内含子突变呈显著正相关(P<0.05)。结论本研究中未发现EGFR基因热点突变。同义突变位点Q787Q尚存在进一步需要被证实的功能。20外显子突变和19内含子突变与患者年龄分布有明显相关性,可为原发性肝癌患者提供更具体的个体化治疗方案。     

β3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变与胰岛素抵抗相关

目的采用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,探讨β3肾上腺素能受体(β3 adrenergic re-ceptor,β3AR)基因Trp64Arg突变与中国人胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法用PCR-RFLP技术,检测2型糖尿病组(DM组)和正常对照组(N组)β3AR基因型,并测量血糖(FPG)、血浆胰岛素(FINS)等临床生化指标。以FPG×FINS/22.5计算胰岛素抵抗指数(HO-MA-IR),以BM I<25的健康人HOMA-IR的75分位值为界,将DM组分为胰岛素相对敏感组及相对抵抗组。结果与无突变者相比,β3AR Trp64Arg突变携带者BM I升高,2组间WHR、血脂、血压、心率、病程及发病年龄差异无统计学意义。胰岛素相对抵抗组68例,占DM组的56.7%,提示2型DM患者大部分存在IR。胰岛素相对抵抗组β3AR Trp/Arg基因型频率明显高于胰岛素相对敏感组,提示β3AR Trp64Arg基因突变参与IR的发生。结论β3AR Trp64Arg突变参与中国人体重的调节,可能是IR的危险因素之一。     

肥胖患者血清胰岛素、真胰岛素的变化及其胰岛素抵抗的影响因素分析

目的　观察单纯性肥胖患者血清胰岛素、真胰岛素变化 ,并分析胰岛素抵抗的影响因素。方法　单纯性肥胖者 70例 ,正常对照组 3 0例 ,均检测身高、体重、腰围、臀围 ,同时测定血清真胰岛素 (TI)、免疫活性胰岛素 (IRI)、空腹血糖 (FPG)、血甘油三脂 (TG)、胆固醇 (CHO) ,计算胰岛素敏感指数 (ISI) [ISI1=1/(FPG×TI) ,ISI2 =1/(FPG×IRI) ] ,并对ISI1与各指标进行相关性分析。结果　肥胖患者血清胰岛素、真胰岛素水平明显高于对照组 (P <0 0 1) ,ISI1、ISI2 显著低于对照组 (P <0 0 1) ,但ISI1的降低要比ISI2 降低明显 ( P <0 0 1) ;直线相关分析显示 ,ISI1与BMI、体重、腰围、TG呈负相关 ,γ依次为 -0 678、-0 5 40、-0 5 68( P <0 0 1) ,-0 2 47,(P <0 0 5 )。多元步回归分析显示影响肥胖患者ISI1的最重要因素是BMI( -0 5 14 )、TG( -0 3 5 0 )、腰围 ( -0 3 11) ( χ2 =0 669,F =3 3 814 ,P <0 0 1)。去除BMI的影响因素后 ,ISI1与TG明显负相关 (γ =-0 2 96,P <0 0 5 )。结论　肥胖患者有高胰岛素血症和胰岛素抵抗 ,真胰岛素水平比免疫活性胰岛素水平更能反映胰岛素抵抗的程度 ,胰岛素抵抗与BMI、甘油三脂、腰围明显相关。     

输送胰岛素的无创方式

需用胰岛素治疗的糖尿病患者过去一般通过注射方式来摄入胰岛素,这给人体带来创伤、疼痛甚至感染,既不方便,又降低了吸收效率.生物医学工程正在研究开发输送胰岛素的无创方式.本文依据其商业化的可行性,依次介绍了几种方案,包括:肺吸胰岛素喷雾、口腔胰岛素喷雾、鼻内胰岛素喷雾、口服胰岛素、胰岛素膏贴、纳米胰岛素泵等.     

胰岛素对人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物-2基因表达的影响

目的观察胰岛素对人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物-2（IRS-2）基因mRNA表达的影响。方法用胰岛素干预人成骨肉瘤MG-63细胞，半定量RT-PCR检测细胞IRS-2基因mRNA的表达量。结果10^-10mol/L～10^-6mol/L胰岛素上调细胞IRS-2基因mRNA的表达（P＜0．05），且具有剂量依赖性。胰岛素的调节还存在时效依赖性，10^-8mol/L胰岛素干预12h可下调细胞IRS-2基因mRNA的表达（P＜0．05），干预24h～48h上调细胞IRS-2基因mRNA的表达（P＜0．05）。结论胰岛素可影响人成骨肉瘤MG-63细胞IRS-2基因mRNA的表达，胰岛素可能对1型糖尿病患者骨质疏松的发生和发展起着重要的作用。     

短期持续胰岛素皮下输注对不同病程2型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响

目的探讨短期持续胰岛素皮下输注对不同病程2型糖尿病患者胰岛素抵抗的改善。方法随机选择72例2型糖尿病患者,按照病程不同分为2型糖尿病新诊断组(A组,22例,病程<3个月)、病程<5年组(B组,26例)、病程≤10年组(C组,24例)。患者均进行短期持续胰岛素皮下输注治疗,疗程为2周。治疗前后进行口服糖耐量试验,并测定负荷后30、120min血浆胰岛素和C肽水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(Homa-IR)。结果与治疗前比较,治疗后A组口服糖耐量试验0、30、120min胰岛素和C肽水平均上升,差异均有统计学意义(P<0.05);B组口服糖耐量试验0、30min胰岛素及C肽水平均上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前后C组各时间点胰岛素、C肽水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后3组Homa-IR均较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后Homa-IR水平为C组>B组>A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论短期持续胰岛素皮下输注能改善不同病程2型糖尿病患者的胰岛素抵抗,但改善程度随病程延长而下降。对2型糖尿病患者进行早期干预,有利于胰岛素功能改善。     

胰岛素泵治疗糖尿病的临床观察

目的　比较胰岛素泵持续皮下胰岛素输注 (CSII)法和传统的多次皮下注射胰岛素治疗法对 1型和 2型糖尿病的短期疗效。方法　糖尿病病人 48例 ( 1型糖尿病 14例 ,2型糖尿病人 3 4例 ) ,随机分为CSII组和对照组 ,CSII组予胰岛素泵持续皮下注射短效诺和灵 ,对照组于三餐前皮下注射短效诺和灵和睡前注射中效诺和灵。结果　两组达到相同的血糖水平 ,CSII组所需的治疗时间、胰岛素用量以及低血糖发生率明显减少 (P <0 0 5 )。结论　胰岛素泵强化治疗能更有效的模拟生理胰岛素的分泌 ,更快、更有效的控制高血糖 ,减少血糖波动和低血糖的发生     

糖皮质激素加重高糖诱导的胰岛素抵抗

目的 探讨糖皮质激素和高浓度糖（高糖）共同作用诱导胰岛素抵抗的分子机理。方法 分离的大鼠脂肪细胞在5.25mM葡萄糖或加地塞米松（Dex）0.3μM培养基中孵育24h，然后测定葡萄糖的转运率，胰岛素受体底物（IRS）1／2的酪氨酸磷酸化、IRS1／2及蛋白激酶B（PKB）的蛋白表达。结果 高糖抑制了这些细胞的糖摄取率、IRS1酪氨酸磷酸化及蛋白表达，Dex加重高糖的以上抑制作用；高糖增加IRS2蛋白表达，Dex部分对抗高糖的此作用及抑制IRS2酪氨酸磷酸化。结论 高糖能诱导胰岛素抵抗，Dex加重高糖的此作用。其作用机制与影响胰岛素信号蛋白磷酸化及蛋白表达等因素有关。     

Insulin and atherogenesis

A number of processes are involved in the pathogenesis of atherosclerosis. These include an injury to the endothelial cell barrier of the inner lining of the artery, infiltration of the artery by lipid filled monocyte-macrophages, proliferation of smooth muscle cells, synthesis of connective tissue and thrombus formation. Insulin may be involved in several of these processes. Over 40 years ago it was shown that insulin is necessary for the production of experimental atherosclerosis in cholesterol fed, alloxan diabetic rabbits. Insulin inhibits regression and stimulates formation of lipid containing lesions in a number of species, and can promote lesions in animals fed normal diets. Insulin is also related to lipid metabolism in the artery wall and interacts with blood pressure to stimulate lipid synthesis in arteries. Arterial smooth muscle cells cultured from a number of species including humans proliferate in response to levels of insulin similar to those found in normal human physiology. The proliferative effects of insulin are mediated by the insulin-like growth factor receptor and hence may not be impaired in states of insulin resistance. Insulin also stimulates arterial smooth muscle cell migration. Insulin stimulates cholesterol synthesis in cultured smooth muscle cells and enhances LDL receptor activity in a number of cell types. Insulin stimulates connective tissue synthesis, and promotes clotting.Corresponding author     

儿童肥胖症胰岛素抵抗的初步探讨

从免疫与糖代谢的关系方面探讨儿童胖症的发病机制。方法对５２例肥胖儿童及４０例正常儿童进行血糖，胰岛素，抗胰岛素抗体水平葡萄糖糖耐量试验的检测对比分析。结果肥胖组血胰岛素水平和抗胰岛素抗体水平与对照组比较比较差异有非常显著意义；肥胖儿童葡萄糖耐量试验呈延迟反应。结论肥胖儿童的胰岛素抵抗与抗胰岛素抗体水平有关。     

肥胖患者血清真胰岛素及其胰岛素抵抗的关系研究

目的　观察单纯性肥胖患者血清真胰岛素和胰岛素抵抗的关系。　方法　单纯性肥胖者 70例 ,正常对照组3 0例 ,均检测身高、体重、腰围、臀围 ,同时测定血清真胰岛素 (TI)、空腹血糖 (FPG)、血甘油三脂 (TG)、胆固醇 (CHO) ,计算胰岛素敏感指数 (ISI) [ISI =1/(FPG×TI) ] ,并对ISI与各指标进行相关性分析。　结果　肥胖患者血清真胰岛素水平明显高于对照组 (P <0 0 1) ,ISI显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,直线相关分析显示 ,ISI与BMI、体重、腰围、TG呈负相关 ,r依次为 -0 .678、-0 .5 40、-0 .5 68(P <0 .0 1) ,-0 .2 47,(P <0 .0 5 )。多元逐步回归分析显示影响肥胖患者ISI的最重要因素是BMI( -0 .5 14 )、TG( -0 .3 5 0 )、腰围 ( -0 .3 11) (R2 =0 .669,F =3 3 .814 ,P <0 .0 1)。去除BMI的影响因素后 ,ISI与TG明显负相关 (r =-0 .2 96,P <0 .0 5 )。　结论　肥胖患者有高真胰岛素血症和胰岛素抵抗 ,胰岛素抵抗与BMI、甘油三脂、腰围明显相关。