四妙丸对高尿酸血症大鼠肠道尿酸排泄影响的研究

目的：以“浊瘀”和小肠“泌清别浊”为理论基础,探讨四妙丸对肠道尿酸排泄的影响。方法：55只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组10只,模型组、苯溴马隆组(4.7 mg/kg)、四秒丸高、中、低剂量组(2260.6 mg/kg、1130.3 mg/kg、565.2 mg/kg)各9只,以氧嗪酸钾和次黄嘌呤制备高尿酸血症(Hyperuricemia, HUA)大鼠模型,连续21 d。第7天验证模型后剔除造模失败大鼠,每组设置8只。除正常组外,第8天开始给药灌胃每天1次,持续14 d。采集血样、尿液、十二指肠液、空肠液、回肠液,测定和计算指标[包括血清尿酸(Serum uric acid, SUA)、尿酸清除率(Clearance of uric acid, CUA)、肠道总尿酸(Total intestinal uric acid, TUA)、十二指肠尿酸(duodenum uric acid, DUA)、空肠尿酸(jejunum uric acid, JUA)、回肠尿酸(Ileum uric acid, IUA)]。结果：模型组大鼠SUA显著升高,CUA显著降低,TUA、DUA、IUA、...     

基于肠道尿酸转运体ABCG2的芒果苷降尿酸作用机制分析

目的:探讨芒果苷对尿酸诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸、肠道尿酸转运体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2[ATP-binding cassette superfamily G(White)member 2,ABCG2]mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨芒果苷降尿酸的作用机制。方法:昆明种小鼠60只,随机分为6组,每组10只,分为正常组,模型组组,芒果苷(1.5,3.0,6.0 mg·kg~(-1))组和阳性药苯溴马隆(25.0 mg·kg~(-1))组,除正常组外,以腹腔注射的方式给予小鼠尿酸,诱导形成高尿酸血症模型,同时灌胃给予芒果苷及苯溴马隆,2周后磷钨酸法检测小鼠血尿酸,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠空肠、回肠部ABCG2 mRNA和蛋白的表达,并采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠回肠病理学变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠血尿酸显著升高,小鼠的空部、回肠部ABCG2 mRNA明显降低,小鼠的空部、回肠部ABCG2蛋白明显升高(P0.05,P0.01),病理变化不明显;灌胃给药2周后,与模型组比较,芒果苷(3.0,6.0 mg·kg~(-1))组小鼠血尿酸明显下降(P0.05,P0.01),芒果苷(1.5,3.0,6.0 mg·kg~(-1))组小鼠的空部、回肠部ABCG2 mRNA表达均明显的上调,芒果苷(6.0 mg·kg~(-1))组小鼠空肠部ABCG2蛋白明显下调,而在小鼠回肠部,芒果苷(3.0,6.0 mg·kg~(-1))组的ABCG2蛋白表达明显下调(P0.05)。结论:芒果苷可明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,并能使小鼠肠道ABCG2 mRNA和蛋白表达改变恢复至正常水平。     

虎杖-桂枝药对配伍对大鼠慢性高尿酸血症和肾、肠尿酸转运体表达的影响

目的:研究虎杖-桂枝药对配伍对大鼠高尿酸血症的防治作用及对尿酸盐阴离子转运体1(URAT1),有机阴离子转运蛋白3(OAT3),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2(ABCG2)表达的影响。方法:84只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,苯溴马隆组(10 mg·kg~(-1)),痛风定组(160 mg·kg~(-1))和虎桂低、中、高剂量组(3.5,7,14 g·kg~(-1))。以皮下注射氧嗪酸钾(200mg·kg~(-1))和ig次黄嘌呤(50 mg·kg~(-1))和乙胺丁醇(250 mg·kg~(-1))的方法,建立高尿酸血症大鼠模型。第4天开始各组大鼠ig给予相应药物,每天1次,连续2周,测定血尿酸(SUA),尿尿酸浓度(UUA),肌酐(Cr),尿素氮(BUN),谷丙转氨酶(GPT)水平;以RT-PCR方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3和小肠ABCG2的mRNA表达水平,以Western blot方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3的蛋白表达水平;以免疫组化方法测定大鼠小肠ABCG2的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血尿酸水平显著升高,尿尿酸排泄减少,肾脏URAT1 mRNA和蛋白高表达,肾OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白低表达,具有明显统计学差异(P0.01)。与模型组比较,虎桂药对高中剂量组能显著降低血尿酸和尿素氮水平,增加24 h尿酸排泄量;虎桂药对高中剂量组能显著降低肾脏URAT1 mRNA和蛋白表达量水平,升高肾脏OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白的表达量水平,均具有明显统计学差异(P0.01,P0.05)。结论:虎桂药对有明显的抗高尿酸血症作用,可能是通过下调大鼠肾脏URAT1的表达,并上调大鼠肾脏OAT3和小肠ABCG2的表达而减少尿酸的重吸收并增加其排泄。     

萆薢分清丸通过调控尿酸盐转运蛋白表达水平干预高尿酸血症大鼠的作用机制

目的 通过观察萆薢分清丸对高尿酸血症（HUA）模型大鼠肾脏尿酸盐转运蛋白及mRNA水平的影响,探讨该方对HUA大鼠的干预作用机制。方法 60只雄性SD大鼠随机为正常组、模型组、别嘌醇组（0.03 g·kg^-1）和萆薢分清丸低、中、高剂量组（0.8、1.6、3.2 g·kg^-1）。除正常组外,其余各组大鼠每天灌胃氧嗪酸钾1.5 g·kg^-1和腺嘌呤0.1 g·kg^-1以建立HUA模型,连续28 d,以血尿酸（SUA）水平升高为标准。造模成功后依据组别给予相应药物干预,1次/d,连续28 d。末次给药24 h后,采集大鼠尿液和血液,采用酶比色法测定尿尿酸（UUA）、SUA、尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）水平;取大鼠双侧肾脏,称重,计算肾脏系数;苏木素-伊红（HE）染色法观察肾脏病理变化;免疫组化（IHC）检测肾脏组织中尿酸转运体1（URAT1）、葡萄糖转运体9（GLUT9）、有机阴离子转运体1（OAT1）、有机阴离子转运体3（OAT3）、ATP结合盒转运蛋白G2（ABCG2）蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测URAT1、GLUT9、OAT1、OAT3、ABCG2 mRNA水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠肾脏系数明显增加（P<0.05）;SUA、BUN和SCr水平明显升高（P<0.05）,UUA水平明显降低（P<0.05）;肾小管代偿性扩张,管内可见尿酸盐结晶和蛋白管型;肾脏组织中URAT1、GLUT9蛋白表达水平及mRNA水平明显升高（P<0.05）,OAT1、OAT3和ABCG2蛋白表达水平及mRNA水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较,各给药干预组大鼠肾脏系数明显减小（P<0.05）;SUA、BUN和SCr水平明显降低（P<0.05）,UUA水平明显升高（P<0.05）;肾脏组织病变明显减轻,URAT1、GLUT9蛋白表达水平及mRNA水平明显降低（P<0.05）,OAT1、OAT3和ABCG2蛋白表达水平及mRNA水平明显升高（P<0.05）。结论 萆薢分清丸可通过调节尿酸盐转运蛋白表达水平来实现其对HUA的干预作用。     

牡丹花总黄酮对高尿酸血症大鼠降尿酸作用

目的 探究牡丹花总黄酮对高尿酸血症大鼠的药效学作用,为高尿酸血症治疗药物的研究开发提供科研数据支撑。方法 使用腺嘌呤合并乙胺丁醇复制大鼠高尿酸血症模型,大鼠随机分为正常组、模型组、别嘌醇组（42 mg·kg^-1）、痛风舒片组（600 mg·kg^-1）、牡丹花总黄酮高、中、低剂量组（TFPF 260、130、65 mg·kg^-1）。记录观察大鼠状态,每5 d记录一次大鼠体质量;测定末次给药24 h大鼠尿量、饮水量、尿液中尿酸（UA）、尿蛋白水平;计算大鼠肾脏指数;苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠胸腺、脾脏组织;测定大鼠血清中尿酸（UA）、肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活力、总抗氧化能力（T-AOC）活力;测定大鼠肝脏中黄嘌呤氧化酶（XOD）、腺苷脱氨酶（ADA）活性;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠肾脏中尿酸转运体1（URAT1）、阴离子转运蛋白1（OAT1）、葡萄糖转运蛋白9（GLUT9）含量。结果 与模型组比较,牡丹花总黄酮可改善大鼠精神状态,增加大鼠体质量（P<0.01）、促进大鼠尿液尿酸排泄（P<0.01）,降低尿蛋白量（P<0.05）;降低大鼠24 h尿量、饮水量、肾脏脏器指数（P<0.05）、血清中UA、Cr、BUN、MDA含量（P<0.05,P<0.01）;抑制肝脏中XOD（P<0.05）、ADA活性（P<0.05,P<0.01）;减少肾匀浆GLUT9表达量（P<0.05）;提高血清SOD和T-AOC活性及肾脏中OAT1表达量（P<0.01）;改善大鼠胸腺和脾脏病理变化。结论 牡丹花总黄酮对高尿酸血症大鼠肾脏具有一定的保护作用,其作用与促进尿酸排泄,抑制氧化反应,抑制尿酸合成关键酶活性,调节尿酸转运蛋白表达有关。     

saRNA激活ABCG2表达增强肾和肠细胞排泄尿酸的研究

目的 筛选、研究小激活RNA(small activating RNA, saRNA)增强ABCG2基因表达对肾、肠细胞排泄尿酸(uric acid, UA)的影响,探索促进UA排泄的全新一类治疗机制药物。方法 设计靶向小鼠和人ABCG2基因的saRNA,转染小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)和人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western Blot筛选强激活效果的saRNA;检测强激活saRNA增强TCMK-1和HK-2细胞排泄UA的作用。筛选的saRNA通过尾静脉注射高尿酸血症(hyperuricemia, HUA)模型小鼠,检测血尿酸(serum uric acid, SUA)、尿尿酸(urine uric acid, UUA)、肠道UA、血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)和血清肌酐(serum creatinine, SCr)含量,以及肝脏黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)活性,验证所选saRNA促进UA排泄的作用。苏木精-伊红染色法(H&E)染色观察小鼠肾脏和小肠病理改变。RT...     

四妙丸、六君子丸干预高尿酸血症合并胰岛素抵抗大鼠模型 实验研究

目的 研究四妙丸、六君子丸对高脂饲料联合果糖水喂养、氧嗪酸钾灌胃所致的高尿酸血症(HUA)合并胰岛素抵抗(IR)大鼠的影响.方法 Wistar雄性大鼠36只,空白组6只(不予干预),其余大鼠建立HUA合并IR模型,造模成功后随机分为模型组、苯溴马隆组(苯溴马隆0.83 g/kg)、非布司他组(非布司他1.24 g/kg...     

二妙丸水提取物对高尿酸血症小鼠尿酸失衡及其相关基因和蛋白水平的影响

目的研究二妙丸水提取物对高尿酸血症小鼠尿酸失衡及其相关基因和蛋白水平的影响。方法用氧嗪酸钾盐诱导小鼠以建立高尿酸血症模型。二妙丸(3.9、7.8g/kg)、黄柏(1.95、3.9g/kg)和苍术(1.95、3.9g/kg)各水提取物分别连续ig给予小鼠1周,末次给药1h后,分别测定小鼠血清、肝脏和尿液中尿酸水平,测定血肌酐(SCr)和尿肌酐(UCr)水平及肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性;采用RT-PCR方法测定小鼠肝脏XOD和肾脏尿酸盐重吸收转运子mURAT1 mRNA表达水平;利用Western Blotting方法测定小鼠肝脏XOD和肾脏mURAT1蛋白水平。结果与模型组比较,二妙丸水提取物低、高剂量和黄柏水提取物高剂量均显著降低血清和肝脏尿酸水平,及SCr水平,增加尿液中尿酸水平和UCr水平。二妙丸和黄柏水提取物2个剂量均显著抑制肝脏XOD活性,下调XOD mRNA和蛋白表达,降低肾脏mURAT1 mRNA和蛋白表达水平。而苍术水提取物2个剂量对上述指标均无显著影响。结论二妙丸水提取物具有抑制高尿酸血症小鼠尿酸生成和促进尿酸排泄的双重调节作用,以降低血清尿酸水平,其机制可能与抑制XOD与mURAT1 mRNA和蛋白表达水平有关。     

加味四妙汤对高尿酸血症和痛风性关节炎防治作用的实验研究

目的:研究加味四妙汤对动物痛风性关节炎的防治作用及其作用机制。方法:采用尿酸、酵母膏分别致高尿酸血症模型,测定小鼠、大鼠血清尿酸水平、大鼠尿尿酸水平,计算尿酸排泄量;微晶型尿酸钠(MSU)诱导大鼠痛风性关节炎模型,观察大鼠步态,测定关节肿胀度、关节浸出液中TNF-α和PGE2水平。结果:加味四妙汤24,12 g.kg-1ig能明显降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平;12,6 g.kg-1ig能显著降低高尿酸血症大鼠血清尿酸水平,增加尿酸相对排泄量;显著抑制MSU致急性痛风性关节炎大鼠关节肿胀度,改善大鼠步态,降低关节浸出液中TNF-α、PGE2含量。结论:加味四妙汤有明显的抗高尿酸血症、防治痛风性关节炎的作用,其机制可能主要是促进尿酸排泄,抑制关节TNF-α、PGE2等因子合成与释放有关。     

萆薢总皂苷对慢性高尿酸血症大鼠尿酸排泄指标的影响

目的研究萆薢总皂苷（totalsaponinofdioscorea,TSD）对慢性高尿酸血症大鼠尿酸排泄指标的影响以及血尿酸（SUA）水平与尿酸排泄指标之间的相关性。方法90只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,TSD高、中、低剂量组（300、100、30mg／kg）及苯溴马隆（10mg／kg）组,每组15只。以氧嗪酸钾加乙胺丁醇制备慢性高尿酸血症模型。大鼠自由饮水、饮食,从第3周开始灌胃给药,每天1次,连续4周,分别于14、28d测定SUA、血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、尿量（UV）、尿尿酸（UUA）、尿肌酐（UCr）含量,计算尿酸排泄指标[包括：24h尿酸排泄量（24hUUA）、尿酸排泄分数（FEUA）、尿酸清除率（CUr）、肌酐清除率（CCr）、单位肾小球滤过尿酸排泄（EurGF）及UUA与UCr比值（UUA／UCr）]。采用Pearson相关分析,对SUA与尿酸排泄指标之间的相关性进行分析。结果模型组大鼠14、28dSUA、SCr均显著升高,UUA、24hUUA、CCr、CUr、FEUA、EurGF、UUA,uCr均显著降低。TsD能剂量依赖性地降低高尿酸血症大鼠SUA,显著增加UUA、24hUUA、CCr、CUr、FEUA及EurGF,其作用与苯溴马隆相近。TSD对高尿酸血症大鼠BUN、UCr、UUA／UCr和UV均无明显影响。相关性分析显示：给药14d和28d,SUA水平与SCr呈正相关（r=0．359,r=0．306）,与CUr、FEUA、CCr呈显著负相关（r=-0．749,-0．733;r=-0．669,-0．646;r=-0．359,-0．273）,与EurGF、UUA／UCr之间无明显相关性（r=0．134,0．078;r=-0．057,-0．065）;14dSUA与24hUUA呈负相关（r=-0．267）,与UUA、UCr之间无相关性;28dSUA与UUA、UCr呈负相关（r=-0．269,r=-0．275）,与24hUUA之间无相关性。结论TSD可促进尿酸排泄,显著提高尿酸排泄指标;SUA水平与SCr呈正相关,与CUr、FEUA、CCr呈显著负相关;FEUA和CUr是肾脏排泄尿酸的敏感指标。     

痛风宁颗粒对实验性血尿酸升高大小鼠尿酸代谢的影响

目的 评价痛风宁颗粒对不同造模方法致大、小鼠血尿酸升高模型血尿酸代谢的影响.方法 以分组对照试验方案,采用先给小鼠干预性药物3 d.然后以黄嘌呤腹腔内注射致小鼠血尿酸升高;以及给大鼠干预性药物1周.然后以腺嘌呤合乙胺丁醇灌胃致大鼠血尿酸升高,分别于造模后0.5、1 h后摘大小鼠眼球取血,采用氧化酶法检测血尿酸.结果 大小鼠造模后血尿酸值均显著高于正常对照组(P<0.01);痛风宁高、中剂量组对大小鼠血尿酸升高均有显著抑制作用,其尿酸值水平均显著低于模型对照组(P<0.01),并接近于正常对照组及痛风利仙组、别嘌呤醇组水平:痛风宁低剂量组对大小鼠的血尿酸升高也有抑制作用,但其血尿酸水平仍显著高于其它治疗组及正常对照组.结论 痛风宁颗粒可以有效抑制尿酸生成增多或伴有尿酸排泄减少情况下血尿酸水平的升高,其中高、中剂量组的作用更强.     

苗药痛风停汤对高尿酸血症大鼠降尿酸机制研究

目的:通过探讨痛风停汤对高尿酸血症大鼠血尿酸水平、血清黄嘌呤氧化酶(XO)浓度、肾小管上皮细胞的尿酸盐转运体(UAT)mRNA和尿酸盐阴离子转运蛋白1(URAT1)mRNA的表达的影响,研究苗药痛风停汤的具体降尿酸作用机制.方法:将56只SD大鼠随机分为苗药痛风停高、中、低组、空白组和模型组、别嘌醇组、苯溴马隆组.除空...     

清热排毒胶囊对高尿酸血症大鼠血尿酸及黄嘌呤氧化酶的影响

目的观察清热排毒胶囊对高尿酸血症大鼠血清尿酸及肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响,探讨其部分作用机理。方法选用健康SPF级SD雄性大鼠48只,随机分成空白组、模型组、别嘌醇组及清热排毒胶囊高、中、低剂量组,各组均予相应药物灌胃7d后,采用腹腔注射次黄嘌呤及皮下注射氧嗪酸钾制备大鼠高尿酸血症模型。检测大鼠血清尿酸（UA）及肝脏黄嘌呤氧化酶活性（XOD）。结果清热排毒胶囊高剂量组大鼠血清UA水平显著降低（P〈0.01）。清热排毒胶囊高、低剂量可抑制大鼠肝脏XOD活性,与模型组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论清热排毒胶囊可通过抑制肝脏黄嘌呤氧化酶活性而降低血清尿酸水平。     

加味四物四藤汤不同提取物对大鼠血尿酸及黄嘌呤氧化酶的影响

目的：探讨加味四物四藤汤中两种不同工艺提取物（TFT-Ⅰ、TFT-Ⅱ）和复方中黄芪对高尿酸血症作用的强度差异。方法采用次黄嘌呤合并氧嗪酸钾盐诱导造成高尿酸血症模型。70只大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌呤醇组、TFT-Ⅰ低剂量组、TFT-Ⅰ高剂量组、TFT-Ⅱ低剂量组、TFT-Ⅱ高剂量组,各给药组予相应药物灌胃,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃,每日1次,连续给药7d。采用全自动生化分析仪测定大鼠血清尿酸（SUA）水平,采用比色法测定大鼠血清、肝组织黄嘌呤氧化酶（XOD）活性。结果与模型组比较,TFT-Ⅰ、TFT-Ⅱ高剂量组可显著降低大鼠血清SUA水平及血清、肝组织XOD活性（P＜0.05）,且2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;TFT-Ⅰ、TFT-Ⅱ低剂量对上述炎性因子影响差异无统计学意义（P＞0.05）。结论加味四物四藤汤中黄芪和四物汤的醇溶性成分能有效降低SUA水平。     

祛湿泄浊合剂对高尿酸血症模型小鼠血清尿酸以及肾脏XOD、ADA的影响

目的:观察祛湿泄浊合剂对高尿酸血症模型小鼠尿酸、肾功能以及肝脏的黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)的影响。方法:采用氧嗪酸钾混悬液按照400 mg·kg-1的剂量一次性腹腔注射制备小鼠高尿酸血症模型,将84只小鼠随机分为对照组、模型组、痛风定对照组、祛湿泄浊合剂低剂量组、中剂量组、高剂量组。自由饮食7 d,使用氧嗪酸钾混悬液腹腔注射,2 h后取各组小鼠,摘眼球取血测定尿酸、肾功能。24小时后取小鼠肝脏,进行均浆,测定肝组织中XOD、ADA的活性。结果:与模型组比较,祛湿泄浊合剂中剂量组能降低氧嗪酸钾盐所致的小鼠高血尿酸,差异有统计学意义(P0.05),与对照组比较,模型组能提高小鼠血尿酸水平,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,其余各组小鼠的黄嘌呤氧化酶及腺苷脱氨酶的活性均增高,差异具有统计学意义(P0.01);与对照组比较,模型组、祛湿泄浊合剂各剂量组黄嘌呤氧化酶及腺苷脱氨酶的活性明显改善,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:祛湿泄浊合剂能够有效降低高尿酸血症小鼠模型的血尿酸水平,可能与影响XOD、ADA酶的活性有关。     

痹清胶囊对鸡高尿酸血症模型尿酸代谢的影响

目的:建立与人类代谢相似的高尿酸血症动物模型,观察中药复方制剂痹清胶囊对其血尿酸代谢的影响并探讨机理.方法:选用鸡为模型动物,以高蛋白,高钙饲料制备造模剂,塑造高尿酸血症模型,于造模第七天选取血尿酸水平大于80mg/L的蛋鸡,分组给药,观察痹清胶囊3个剂量组连续灌胃给药2周后,检测血尿酸和XOD活力的变化.结果:模型组用药后,模型鸡的血尿酸值显著下降,粪便尿酸排泄量增加,血清XOD活性降低.结论:痹清胶囊有明显的降尿酸作用,其机制可能是既抑制尿酸生成又促进尿酸排泄.     

基于痛风性关节炎ABCG2尿酸转运靶点的穿山龙调控机制研究

目的:首次引入ABCG2尿酸转运蛋白,探讨其在痛风性关节炎中的作用机制和穿山龙总皂苷的干预作用。方法:通过Real-time PCR和Western blot方法,检测高尿酸血症小鼠肾脏ABCG2转运蛋白的mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组m ABCG2的mRNA和蛋白表达量均明显降低(P0.001)。穿山龙总皂苷低剂量组可明显回调该基因的mRNA表达(P0.001),穿山龙总皂苷高、中剂量组均可回调ABCG2 mRNA表达(P0.05,P0.001)。穿山龙总皂苷高、中、低剂量组均可回调ABCG2蛋白的表达(P0.001,P0.05和P0.05)。结论:穿山龙总皂苷可通过对肾脏尿酸转运体ABCG2的调控来促进尿酸的排泄实现对高尿酸血症的降尿酸作用。