黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠模型AGEs/RAGE/NF-κB信号通路的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠模型晚期糖基化终产物(AGEs)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨黄芪桂枝五物汤减轻糖尿病周围神经病变的作用机制。方法:以高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导法,制作糖尿病周围神经病变大鼠模型。造模成功后,按照随机数字表法分成模型组、黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组、甲钴胺组,共5组,另设正常组,自第5周开始黄芪桂枝五物汤干预,采用黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组(19. 40,4. 85,2. 43 g·kg-1·d-1)连续灌胃12周;甲钴胺组采用甲钴胺0. 25 mg·kg-1·d-1灌胃。实验结束后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测糖尿病周围神经病变大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测坐骨神经组织中RAGE,NF-κB p65 mRNA含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测坐骨神经组织中RAGE,NF-κB,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β,TNF-α含量,坐骨神经组织RAGE,NF-κB p65 mRNA含量,RAGE,NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达显著增加(P0. 01),p-NF-κB p65/NF-κB p65升高,p-NF-κB p65蛋白表达显著升高(P0. 01)。经黄芪桂枝五物汤干预后,与模型组比较,各给药组血清IL-1β,TNF-α含量,RAGE,NF-κB p65 mRNA含量,RAGE,NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达量均显著降低(P0. 01),黄芪桂枝五物汤高剂量组p-NF-κB p65/NF-κB p65显著降低(P0. 01),且呈剂量相关性,随黄芪桂枝五物剂量增加而效果明显。结论:黄芪桂枝五物汤可减轻糖尿病周围神经病变,其机制可能与阻断AGEs/RAGE/NF-κB信号通路中组织细胞表面RAGE的表达、抑制NF-κB激活及其引发TNF-α触发的氧化应激和过度炎症反应,从而避免细胞受损和功能紊乱有关。     

无尾果醇提物对类风湿性关节炎大鼠的影响

目的研究无尾果乙醇提取物对类风湿性关节炎大鼠的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型,观察醇提物对大鼠体质量、关节炎指数、足肿胀程度、关节病理改变及TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-2、p65、IκBα磷酸化水平的影响。结果乙醇提取物可明显改善大鼠症状,显著降低TNF-α、IL-1β、IL-6、p65、IκBα磷酸化水平(P0.05,P0.01),显著升高IL-2水平(P0.01)。结论无尾果乙醇提取物具有良好的抗类风湿性关节炎作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。     

桂枝附子汤调控AGEs/RAGE/NF-κB信号通路对类风湿关节炎大鼠的影响

目的 研究桂枝附子汤对类风湿关节炎(RA)大鼠的干预作用及对晚期糖基化终末产物(AGEs)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 将50只大鼠随机分为空白组、模型组、桂枝附子汤组(6.1 g/kg)、RAGE抑制剂组(0.5 mg/kg)、桂枝附子汤+RAGE抑制剂组(6.1 g/kg+0.5 mg/kg),每组10只。用牛Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂(IFA)混合乳化诱导建立RA大鼠模型，造模后连续灌胃给药30 d。给药结束后，测定大鼠关节炎指数和关节肿胀度，HE染色观察大鼠踝关节软骨及滑膜组织病理变化，ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，Western blot法检测大鼠踝关节软骨组织RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达，免疫组化(IHC)法观察大鼠踝关节软骨组织AGE和软骨及滑膜组织TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)阳性细胞表达。结果 与模型组比较，桂枝附子汤组、抑制剂组和桂枝附子汤+抑制剂组均能有效降低RA大鼠关节炎指数、关节肿胀度、血清炎性因子IL-6、TNF-α水平...     

黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠免疫相关细胞因子的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠CD4~+/CD8`+及相关细胞因子的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、塞来昔布组、黄芪桂枝五物汤7 d组和黄芪桂枝五物汤14 d组,每组10只。除正常组外,各组大鼠均予冷固法复合外界环境刺激的方法复制阳虚寒凝型骨关节炎模型,共6周。造模结束前,各给药组分别灌胃给药,黄芪桂枝五物汤7 d组或14 d组分别给药7 d或14 d(30 g·kg-1),塞来昔布组给药7 d(20.82 mg·kg-1),正常组及模型组予生理盐水灌胃7 d,至造模结束。造模结束后,免疫组化法检测各组大鼠膝关节软骨诱导型一氧化氮合酶(i NOS),Ⅱ型胶原及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达,取大鼠血液流式细胞法检测CD4~+/CD8~+,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血液中白细胞介素-4(IL-4),C-反应蛋白(CRP)及胰岛素生长因子(IGF),低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量。结果:与正常组比较,模型组CD4~+及CD4~+/CD8~+降低(P0.05),各用药组与模型组比较,黄芪桂枝五物汤14 d组和塞来昔布组CD4+及CD4+/CD8+升高(P0.05)。与正常组比较,模型组IL-4,CRP,HIF-1α及i NOS表达升高(P0.05),Ⅱ型胶原及TGF-β表达降低(P0.05);与模型组比较,各用药组Ⅱ型胶原及TGF-β表达升高(P0.05),IL-4水平降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤14 d组CRP,i NOS及HIF-1α表达降低(P0.05),塞来昔布组CRP及i NOS(P0.05);各用药组之间,与塞来昔布组比较,黄芪桂枝五物汤7 d组和14 d组Ⅱ型胶原表达降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤7 d组i NOS表达升高(P0.05)。IGF水平在各组无显著性差别。结论:黄芪桂枝五物可以调节机体免疫低下状态,并通过调节细胞因子IL-4及下游细胞因子i NOS,HIF-1α,TGF-β1等细胞因子水平的变化,对骨关节炎软骨细胞起正向修复作用。     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素1β活性的影响

目的观察桂枝芍药知母汤对类风湿性关节炎(RA)的治疗作用,并探讨其作用机理。方法以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型,通过测量其关节肿胀程度、关节炎指数观察桂枝芍药知母汤大、中剂量组的治疗效果;采用ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性,小鼠胸腺细胞法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)活性,探讨其作用机理。结果桂枝芍药知母汤大、中剂量组均可使大鼠踝关节肿胀程度和关节炎指数明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.01);同时发现模型组大鼠血清TNF-α含量及IL-1β活性明显升高,治疗组起下调作用,接近正常组水平,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论TNF-α、IL-1β异常增高,与RA发病密切相关。桂枝芍药知母汤可以降低CIA大鼠血清中异常增高的TNF-α、IL-1β浓度,从而抑制或控制RA病情发展。     

赤雹根总皂苷对类风湿性关节大鼠NF-κB p65和IL-6表达的影响

目的:研究赤雹根总皂苷(TSTR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)活性的影响,探讨赤雹根总皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机取10只作为正常对照组,其余大鼠用完全弗氏佐剂诱导佐剂性关节炎。将造模成功的大鼠随机分为赤雹根总皂苷40,80,160 mg/kg,雷公藤多苷12 mg/kg,模型对照组,每组10只。各给药组均灌胃给予相应药物,连续21天。计算大鼠足肿胀度和关节炎指数;ELISA法检测各组大鼠血清IL-6的含量;免疫组化法测定大鼠足跖组织NF-κB p65蛋白及足跖组织和脾脏IL-6蛋白表达水平;Western blot法检测大鼠足跖组织中NF-κB p65蛋白表达水平;RT-PCR法测定大鼠足跖部NF-κB p65mRNA、IL-6 mRNA的表达水平。结果:赤雹根总皂苷各剂量组大鼠组肿胀度和关节炎指数均显著低于模型对照组;血清中IL-6含量和IL-6蛋白表达水平及IL-6 mRNA的表达水平均低于模型对照组;足跖组织中NF-κB p65蛋白表达水平和IL-6 mRNA的表达水平均低于模型对照组。结论:抑制NF-κB和IL-6的表达是赤雹根总皂苷治疗类风湿性关节炎的作用机制之一。     

不同蜂针剂量对佐剂性类风湿性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6的影响

目的:观察不同剂量的蜂针对佐剂性类风湿性关节炎(RA)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6)的影响,探究不同蜂针剂量对类风湿性关节炎的可能机制。方法:建立佐剂性类风湿性关节炎大鼠模型,将wistar大鼠随机分为空白组、模型组和单蜂1 min组、双蜂1 min组、三蜂1min组、单蜂30 s组。观察各组足趾容积以及缩足反应,同时采用ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平。结果:单峰1 min足趾肿胀程度低于模型组(P<0.01),缩足反应对应长于模型组(P<0.05),单蜂1 min比其余治疗组改善足趾肿胀度以及延长镇痛效果要强,而对于血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的影响,单峰1 min表达水平低于模型组(P<0.05),单蜂1 min与其他治疗组相比抑制炎症细胞因子的表达较好。结论:适当剂量的蜂针具有减轻类风湿性关节炎大鼠足趾肿胀度和加强镇痛效果的作用,其机制可能跟抑制RA大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6的表达有关,而单蜂1 min可能为类风湿性关节炎最佳的治疗剂量。     

补阳还五汤加味通过抑制炎症和纤维化改善糖尿病肾病小鼠肾脏损伤

目的：探讨补阳还五汤加味对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾组织保护作用及核转录因子-κB(NF-κB)通路及纤维化因子的影响。方法：24只11～12周龄db/db小鼠适应性喂养1周并监测尿蛋白均阳性后随机分为模型组、补阳还五汤加味组(16.0 g·kg^-1)、厄贝沙坦组(13.5 mg·kg^-1),每组8只。11～12周龄db/m组小鼠8只作为正常组。给予相应药物治疗,其中补阳还五汤加味组及厄贝沙坦组灌胃相应药液,正常组及模型组灌胃等体积蒸馏水,每天1次,连续治疗8周后收集标本,检测小鼠血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿微量白蛋白(mALB)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB),NF-κB抑制因子α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)、转化生长因子-β_...     

基于HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路探讨大黄牡丹汤对急性胰腺炎肠损伤大鼠的干预作用及机制

目的：基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终产物(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨大黄牡丹汤对急性胰腺炎肠损伤大鼠的干预作用及机制研究。方法：120只SPF级Wistar大鼠采用5%牛?胆酸钠逆行胰胆管注射制备急性胰腺炎(AP)肠损伤模型。随机分为正常组、模型组、大黄牡丹汤低、中、高剂量组(3.5、7、14 g·kg^-1),灌胃给药,奥曲肽组(1×10^-5 g·kg^-1),皮下注射,每组20只,正常组和模型组大鼠给予等体积蒸馏水灌胃,于造模前1 h及造模后每隔12 h给药1次,造模后24 h收集样本。观察大鼠一般情况;生化法检测血清中淀粉酶(AMS)、C反应蛋白(CRP);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结肠组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察胰腺和结肠组织病理形态变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中HMG...     

黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠免疫及瘀血状态的影响

目的:通过观察大鼠免疫及瘀血状态的变化从而研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠的影响。方法:50只大鼠随机分为正常组,模型组,塞来昔布组(20.82 mg·kg~(-1)),黄芪桂枝五物汤7 d组和黄芪桂枝五物汤14 d组(30 g·kg~(-1))。除正常组外,各造模组大鼠分别采用冷固法加游泳、隔日给食及寒冷环境刺激的方法复制阳虚寒凝型骨关节炎模型。造模结束前最后2周,各给药组分别按6 m L·kg~(-1)给药,黄芪桂枝五物汤14 d组ig给药14 d,其余各给药组分别ig 7 d,正常组及模型组予生理盐水ig 7 d。ig结束后,分别观察各组大鼠一般状态;量取膝关节周长,计算膝关节肿胀度;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠下肢膝骨关节的病理变化;取大鼠血液,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)β(IL~(-1)β),血浆前列腺素E2(PGE2),血栓素B2(TXB2),6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量,生化法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠关机肿胀度明显升高,胶原纤维增粗、血管翳及炎性细胞浸润较为明显,大鼠血清TNF-α,IL~(-1)β,SOD及6-keto-PGF1α水平明显降低,PGE2,TXB2水平,TXB2/6-keto-PGF1α明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,黄芪桂枝五物汤使造模后大鼠毛色变得柔亮,尾部瘀痕减轻,双下肢活动轻微受限,减少大鼠跛行;关节肿胀度降低,胶原纤维增粗、血管翳及炎性细胞浸润程度减轻,黄芪桂枝五物汤给药后使TNF-α,IL~(-1)β,SOD及6-keto-PGF1α水平升高(P0.05),PGE2,TXB2水平,TXB2/6-keto-PGF1α降低(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎疗效确切,黄芪桂枝五物汤的作用效果与用药时间有关,其作用机制与抗炎及改善机体瘀血状态有关,并有可能通过抗炎细胞因子的调节作用影响机体瘀血状态。