基于PPARγ/LXRα/ABCG1信号通路探讨黄芪总皂苷-荷叶总生物碱防治高脂血症的机制

目的 观察黄芪总皂苷-荷叶总生物碱配伍对高脂血症大鼠胆固醇逆转运（RCT）的影响,探讨其作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、高脂饮食组和黄芪总皂苷-荷叶总生物碱低（17 mg·kg^-1+40 mg·kg^-1）、中（34 mg·kg^-1+80 mg·kg^-1）、高（68 mg·kg^-1+160 mg·kg^-1）剂量组及辛伐他汀（2.1 mg·kg^-1）组,每组10只。采用高脂饲料连续喂养6周复制高脂血症大鼠模型,从第3周开始除正常组和高脂饮食组给予蒸馏水外,其余各组均灌胃相应药物治疗,给药4周。全自动生化分析仪检测大鼠血脂及肝功能变化;苏木素-伊红（HE）及油红O染色法观察大鼠肝组织病理形态及脂肪变性情况;半自动生化分析仪检测大鼠肝组织和粪便总胆固醇（TC）和总胆汁酸（TBA）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、肝X受体α（LXRα）、三磷酸结合盒转运体G1（ABCG1）和胆固醇7α羟化酶（CYP7A1）mRNA和蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,高脂饮食组大鼠血清TC、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、TBA、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的含量或活性显著升高（P<0.01）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量显著降低（P<0.01）,肝细胞肿胀明显,部分呈气球样改变,肝细胞内含有大量脂肪空泡和红色脂滴,肝组织和粪便TC和TBA含量显著升高（P<0.01）,肝组织PPARγ、LXRα、ABCG1和CYP7A1 mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.01）。与高脂饮食组比较,各给药组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TBA、AST、ALT的含量或活性显著降低（P<0.01）,HDL-C的含量显著升高（P<0.01）,肝细胞肿胀明显减轻,肝组织中气球样变、脂滴空泡和红色脂滴明显减少,肝组织TC和TBA含量明显下降（P<0.05,P<0.01）,粪便TC和TBA含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,肝组织PPARγ、LXRα、ABCG1和CYP7A1 mRNA和蛋白表达明显上调（P<0.05,P<0.01）。结论 黄芪总皂苷-荷叶总生物碱对高脂血症大鼠具有较好的防治效果,其作用机制可能与激活PPARγ/LXRα/ABCG1信号通路,调节RCT有关。     

五首活血化瘀方对血瘀证新西兰兔血脂代谢、肝脏组织及ABCA1、PPARγ表达的影响

目的 观察5首活血化瘀方对血瘀证新西兰兔血脂代谢、肝脏组织及三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）、过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（PPARγ）表达的影响,对比其作用差异,为临床选方用药提供实验室依据。方法 70只新西兰兔随机分为正常组（10只）和造模组（60只）,造模组采用“饥饿+高脂饲料+肾上腺素”方法建立血瘀证模型,造模成功后随机分为模型组、血府组（血府逐瘀汤3.55 g·kg^-1·d^-1）、丹参组（丹参饮1.962 g·kg^-1·d^-1）、失笑组（失笑散0.56 g·kg^-1·d^-1）、活络组（活络效灵汤2.80 g·kg^-1·d^-1）、桃红组（桃红四物汤2.66 g·kg^-1·d^-1）,各复方组灌胃相应复方,正常组和模型组灌胃同等剂量蒸馏水,连续灌胃30 d。治疗结束后腹主动脉取血,检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（ApoA1）含量;苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏组织病理形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝脏组织ABCA1、PPARγ mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测ABCA1、PPARγ蛋白质表达。结果 与正常组比较,模型组HDL-C、LDL-C、TG、TC水平、PPARγ mRNA及蛋白质水平升高（P<0.01）,ApoA1水平降低（P<0.05）,ABCA1 mRNA及蛋白质水平降低（P<0.01）;与模型组比较,5首活血化瘀方HDL-C水平均降低（P<0.05,P<0.01）,血府组与失笑组TG水平降低（P<0.05）,失笑组LDL-C、TC水平降低（P<0.05）,活络组、桃红组ApoA1水平升高（P<0.05,P<0.01）;血府组、失笑组、活络组、桃红组ABCA1 mRNA水平均升高（P<0.01）,5首活血化瘀方均可升高ABCA1蛋白质水平（P<0.05,P<0.01）;5首活血化瘀方PPARγ mRNA水平均降低（P<0.01）,血府组、失笑组、活络组、桃红组PPARγ蛋白质水平均降低（P<0.01）。结论 5首活血化瘀方对血脂异常有一定的调治作用,其可能是通过增加ApoA1、ABCA1的表达促进HDL-C的生成及加强功能异常HDL-C的排泄达到调治作用,其中降脂作用最强的是血府逐瘀汤。     

中药激活PPARα通路治疗高脂血症的活性成分及作用机制研究进展

高脂血症是由血脂代谢紊乱引发的血脂异常疾病,可分为原发性和继发性2类,目前临床诊断标准主要为血脂水平变化,是动脉粥样硬化、胰腺炎、冠心病等高危心血管疾病的诱因。过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）作为脂质代谢中承上启下的关键靶点,参与了包括脂肪酸降解、合成、运输、储存、脂蛋白代谢等多种代谢活动,激活PPARα可通过多种方式维持脂代谢平衡,是治疗高脂血症的重要途径。目前临床上治疗高脂血症主要使用他汀类、贝特类等化学药物,虽然可以在一定程度上减缓病势,但不良反应多且存在耐药性。笔者通过查阅近几年文献总结发现,中药激活PPARα通路治疗高脂血症效果显著且不良反应小,降脂活性成分包括黄酮类、生物碱类、酚类和萜类等多类型化合物,这些活性成分主要通过激活PPARα通路影响下游效应因子表达进而抑制总胆固醇合成和促进脂肪酸氧化,发挥治疗高脂血症的作用。该文系统综述激活PPARα通路的中药活性成分的结构类型及作用机制,为降脂中药新药的合理开发和临床应用提供指导。     

芳香新塔花总黄酮通过调控PPARγ/LXRα/ABCA1通路对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢紊乱的影响

目的 探究芳香新塔花总黄酮对ApoE^-/-动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢及对PPARγ/LXRα/ABCA1通路的影响。方法 60只ApoE^-/-小鼠给予高脂饲料喂养8周后随机分为模型组、阿托伐他汀组(3 mg/kg)及芳香新塔花总黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),每组12只。灌胃给予相应剂量药物干预12周,给药同时继续饲喂高脂饲料;另取12只C57BL/6J小鼠为空白组,灌胃给予生理盐水,同时喂养普通饲料。给药结束后,油红O染色观察肝组织脂质沉积情况,HE染色观察主动脉斑块形态,全自动生化分析仪检测血脂水平,ELISA法检测血清IL-18、IL-1β、MCP-1水平,试剂盒检测肝组织TC、TG、NEFA、FC水平,Western blot法检测肝组织PPARγ、LXRα、ABCA1、ABCG1蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组肝脏脂滴面积增加(P<0.01),血清TC、TG、LDL-C、IL-18、IL-1β、MCP-1水平和肝组织TC、TG、NEFA、FC水平均升高(P<0.05,P<0.01),血...     

桑叶调节PI3K/Akt/PPARα/CPT-1通路改善2型糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢紊乱机制

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/过氧化物酶体增殖物激活受体α/肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（PI3K/Akt/PPARα/CPT-1）信号通路探讨桑叶水提物对2型糖尿病（T2DM）大鼠肝脏糖脂代谢紊乱的作用及其机制。方法 高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）方法制备T2DM模型,按血糖、体质量将造模成功大鼠随机分为模型组、二甲双胍（0.2 g·kg^-1）组和桑叶水提物（含生药4.0 g·kg^-1）组,连续给药8周,每周相同时间测定空腹血糖。苏木素-伊红（HE）染色、油红O染色观察肝脏组织形态学和脂肪变化;生化分析法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨基酸氨基转移酶（AST）水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、Akt、PPAR-α、CPT-1蛋白表达。结果 给药8周后,与正常组比较,模型组大鼠血糖显著升高（P<0.01）;与模型组比较,桑叶水提物组大鼠血糖显著降低（P<0.01）。HE染色显示,正常组大鼠肝组织结构完整,肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列;模型组大鼠肝细胞损伤明显;与模型组比较,桑叶水提物组大鼠空泡变性程度显著降低,未见小胆管增生等病变。油红O染色显示,正常组大鼠肝细胞无明显脂肪变性、坏死,肝细胞几乎无脂滴;模型组大鼠肝内脂滴较正常组明显增加;桑叶给药可明显减少大鼠肝脏脂滴。模型组大鼠TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平较正常组显著升高（P<0.01）;桑叶水提物组大鼠TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平较模型组明显降低（P<0.05,P<0.01）。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、PPARα和CPT-1的蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,桑叶水提物能明显增加p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、PPARα和CPT-1的蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 桑叶水提物可改善T2DM大鼠肝脏糖代谢紊乱,降糖机制可能与调控PI3K/Akt/PPAR-α/CPT-1信号通路有关。     

基于PPAR-α/CPT-1信号通路的桑叶总黄酮调控T2DM大鼠肝脏脂质代谢作用及其机制

目的 观察桑叶总黄酮改善2型糖尿病（T2DM）大鼠肝脏脂代谢紊乱的药效学作用,并基于肝脏过氧化物酶增殖物激活受体-α（PPAR-α）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-l）蛋白探讨其作用机制。方法 采用醇提法+大孔树脂纯化法提取、纯化桑叶总黄酮,并进行鉴定。利用高脂肪饮食（HFD）+链脲佐菌素（STZ）法建立T2DM大鼠模型,选择血糖≥11.1 mmol·L^-1的大鼠,以桑叶总黄酮高、中、低剂量（300、150、75 mg·kg^-1）分别灌胃给药8周,观察大鼠体质量及血糖情况。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肝脏病理变化,生化法检测大鼠血清脂代谢指标总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织PPAR-α及CPT-1 mRNA和蛋白的表达。结果 桑叶总黄酮干预8周后,与正常组比较,模型组大鼠摄食量、肝脏指数、空腹血糖显著升高（P<0.01）;与模型组比较,桑叶总黄酮高、中、低剂量组大鼠摄食量、空腹血糖、肝脏指数显著降低（P<0.01）。HE结果显示,正常组大鼠肝组织结构完整未见明显异常;模型组大鼠肝细胞空泡变性且有炎性浸润;桑叶总黄酮高、中、低剂量组大鼠肝脏结构未见明显异常。血脂四项结果显示,与正常组比较,模型组大鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高（P<0.01）,HDL-C水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,各给药组TC、TG、LDL-C水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,HDL-C水平显著增加（P<0.01）。Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组大鼠PPAR-α和CPT-1 mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,桑叶总黄酮高剂量组PPAR-α和CPT-1 mRNA表达显著升高（P<0.01）。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠PPAR-α和CPT-1蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,桑叶总黄酮高剂量组PPAR-α和CPT-1蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 桑叶总黄酮可有效降低T2DM大鼠血糖,改善肝脏脂质代谢紊乱,其发挥降糖调脂的作用机制可能是通过激活调控PPAR-α和CPT-1蛋白、促进脂肪酸氧化分解,发挥调控脂质代谢,进而发挥降糖作用。     

穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠PPARγ,C/EBPα及脂肪分泌因子表达的影响

目的:观察穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠的治疗作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ),CCATT增强子结合蛋白α(CCAAT-enhancer binding proteinα,C/EBPα),脂联素(Adiponectin),瘦素(Leptin)的影响,探究其在骨髓间充质干细胞脂肪化过程中发挥效应的可能机制。方法:BALB/c小鼠随机分为正常组及模型组,模型组小鼠经60Coy照射联合尾静脉输注DBA/2小鼠淋巴细胞混悬液法造模。模型评估成功后,将成模小鼠随机分为6组,分别为模型组,穿龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组(37. 44,74. 88,149. 76 mg·kg-1·d-1),环孢素组(23. 5 mg·kg-1·d-1),雷公藤多苷组(9. 36 mg·kg-1·d-1),相应药物灌胃14 d。干预完成后,检测各组小鼠外周血象并制作骨髓细胞涂片评价骨髓增生情况。采用贴壁法分离培养各组小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)并进行成脂诱导;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠BMMSCs中PPARγ,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠外周血白细胞(white blood cell,WBC),血红蛋白(hemoglobin,HGB),血小板(blood platelet,PLT)明显降低(P 0. 05);与模型组比较,各治疗组小鼠血象均有不同程度回升,以穿龙薯蓣中剂量组最优(P 0. 05)。与正常组比较,模型组小鼠BMMSCs中PPARγ,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA和蛋白表达明显升高(P 0. 05);与模型组比较,各治疗组小鼠上述指标均被不同程度抑制,其中穿龙薯蓣皂苷中剂量组和环孢素组PPARγ,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA和蛋白表达明显下调,优于雷公藤多苷组(P 0. 05)。结论:穿龙薯蓣皂苷能够促进再障小鼠外周血象恢复,改善骨髓造血。穿龙薯蓣皂苷可抑制AA小鼠BMMSCs PPARγ,C/EBPα的表达,减少脂肪细胞分泌的Adiponectin,Leptin,进而有效地抑制BMMSCs向脂肪细胞的过度分化。     

补阳还五汤对舒张性心衰大鼠心肌线粒体能量代谢及AMPK/PPARα信号通路的影响

目的:探讨补阳还五汤基于腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)信号通路对舒张性心衰(DHF)大鼠心肌线粒体能量代谢的影响及其机制研究。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组与模型组,模型组大鼠运用腹主动脉缩窄法建立DHF大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组,补阳还五汤组(12.72 g·kg~(-1)·d~(-1)),酒石酸美托洛尔组(0.004 5 g·kg~(-1)·d~(-1)),灌胃给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水,各组均每日灌胃1次。药物连续干预8周后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠外周血中单磷酸腺苷(AMP),二磷酸腺苷(ADP),三磷酸腺苷(ATP)的含量;采用投射电镜检测心肌线粒体超微结构的变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织中AMPK,PPARα,PPARγ辅助激活因子1α(PGC-1α)的蛋白表达量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠AMP,ADP含量显著升高,ATP含量显著下降(P0.05,P0.01);与模型组比较,补阳还五汤组、酒石酸美托洛尔组大鼠AMP含量明显降低(P0.01),ADP含量下降(P0.05),ATP含量升高。与假手术组比较,模型组大鼠线粒体数量减少,形态异常;与模型组比较,补阳还五汤组、酒石酸美托洛尔组大鼠线粒体数量明显增加,形态明显改善。与假手术组比较,各组大鼠AMPK蛋白表达量无统计学差异;与假手术组比较,模型组PPARα,PGC-1α蛋白表达水平明显降低(P0.05)。与模型组比较,补阳还五汤组、酒石酸美托洛尔组PPARα,PGC-1α蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过改善线粒体结构和功能,激活AMPK并上调AMPK/PPARα信号通路的表达,从而改善衰竭心脏的能量代谢,延缓心衰进展。     

富硒灵芝多糖调节SCD1,PPARα改善非酒精性脂肪肝病大鼠症状

目的:探讨富硒灵芝多糖对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠血脂、炎性因子、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的影响。方法:120只SD大鼠随机分为正常组,高脂饮食组(模型组),多烯磷脂酰胆碱(50 mg·kg^-1)组和富硒灵芝多糖低、中、高剂量(0.3,0.6,1.2 g·kg^-1,ig)组,高脂高糖饮食12周复制NAFLD模型,相应治疗4和8周后处死大鼠各半,测定血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),白细胞介素-1α(IL-1α),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),肝脏匀浆中SCD1和PPARα含量。结果:处理4周后,与正常组相比,模型组肝脏有明显脂肪空泡,且伴有炎症反应;与模型组相比,富硒灵芝3个治疗组脂肪颗粒明显减少。处理8周后,与正常组相比,模型组HDL-C,LDL-C,IL-1α,IL-1β和TNF-α明显升高,与模型组相比,富硒灵芝多糖3个组的HDL-C,LDL-C,IL-1α,IL-1β和TNF-α明显降低(P<0.05),治疗8周后进一步降低,与多烯磷脂酰胆碱组无显著差异。处理4周后,与正常组相比,模型组肝脏SCD1和PPARα mRNA和蛋白表达降低,与模型组相比,富硒灵芝多糖3个组肝脏SCD1和PPARα mRNA和蛋白表达明显升高,多烯磷脂酰胆碱处理对肝脏SCD1和PPARα mRNA和蛋白表达改善优于富硒灵芝多糖治疗组。结论:富硒灵芝多糖可改善NAFLD大鼠肝脏SCD1和PPARα表达,效果虽弱于多烯磷脂酰胆碱,但也可较好的调节血脂和炎症。     

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织PPARγ信号通路的影响

目的:探索二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白和mRNA表达的影响,以及血清、肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,每组10只,分别为正常组、模型组、二陈汤加味高、中、低剂量(40,20,10 g·kg~(-1)·d~(-1))组,消咳喘组(5 g·kg~(-1)·d~(-1)),二陈汤组(5 g·kg~(-1)·d~(-1))。以烟熏与脂多糖(LPS)气管滴注并用的方法来制备大鼠COPD模型。成功后,治疗组灌胃给药,正常及模型组则灌等量的生理盐水。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清、肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6,IL-10和TNF-α的含量。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PPARγmRNA表达,免疫组化(IHC),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织PPARγ的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清、肺组织匀浆液和BALF中IL-6,TNF-α水平显著升高(P0.01),IL-10水平显著降低(P0.01)。模型组大鼠肺组织PPARγmRNA水平显著降低(P0.01),蛋白表达也明显受抑制(P0.01)。与模型组比较,各治疗组血清、肺组织匀浆液及BALF中IL-6,TNF-α水平均不同程度的降低(P0.01),IL-10则不同程度升高,其中二陈汤加味中剂量组IL-10的兴奋和IL-6,TNF-α的抑制尤为显著。各治疗组大鼠肺组织PPARγmRNA和蛋白水平均有不同程度的升高(P0.01)。结论:二陈汤加味可能通过升高PPARγ的表达,并以此降低IL-6,TNF-α的含量,提升IL-10的含量,来对抗COPD大鼠的炎症反应,改善肺功能。     

大柴胡汤通过CREB/PGC-1α通路保护营养型肥胖大鼠肝脏粒体功能

目的 观察大柴胡汤对营养型肥胖大鼠环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子α（PGC-1α）通路的作用及肝脏线粒体的保护机制。方法 8周龄SD雄性大鼠120只,随机分为正常组20只和造模组100只。正常组给予大鼠维持饲料喂养,造模组给予高脂饲料喂养。造模成功大鼠随机分为模型组、阳性药（二甲双胍）组、大柴胡汤低、中、高剂量组（4.25,8.5,17 g·kg^-1）,每组20只。电子天平称取并比较各组大鼠体质量,计算Lee''s指数,分光光度法检测肝脏线粒体膜电位,电镜检测线粒体超微结构,蛋白免疫印迹法检测PGC-1α蛋白表达和CREB磷酸化作用。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量及Lee''s指数显著增加（P<0.01）,线粒体膜电位显著下降,PGC-1α蛋白表达和CREB磷酸化水平显著下降（P<0.01）;与模型组比较,大柴胡汤能够明显降低肥胖大鼠体质量和Lee''s指数（P<0.05,P<0.01）,提高肝脏线粒体膜电位（P<0.05,P<0.01）和保护线粒体结构完整性,上调PGC-1α蛋白表达和促进CREB磷酸化（P<0.05,P<0.01）。结论 大柴胡汤激活CREB/PGC-1α通路,保护线粒体结构与功能,有效抑制肥胖大鼠体质量增加。     

疏肝温胆汤对动脉粥样硬化家兔LXRα，NF-кB及内皮功能的影响

目的:基于肝X受体α/核转录因子-κB(LXRα/NF-κB)通路探讨疏肝温胆汤对家兔动脉粥样硬化的作用及机制。方法:采用小牛血清白蛋白免疫损伤、高脂饲养和束缚情志应激的方法建立肝郁型的新西兰兔动脉粥样硬化模型。随机分为6组,分别为正常组,模型组,阿托伐他汀组,疏肝温胆汤低、中、高剂量组(2. 18,6. 54,19. 62 g·kg~(-1)·d~(-1))。造模成功后,分别给予阿托伐他汀、疏肝温胆汤低、中、高剂量灌胃,正常组和模型组均予同浓度生理盐水灌胃。连续灌胃6周。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法检测各组主动脉的病理变化;分别采用酶法、硝酸还原酶法和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的水平;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测主动脉组织中C反应蛋白(CRP),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉组织的LXRα/NF-κB信号通路蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组血管腔明显狭窄,粥样斑块形成明显,可见大量的细胞内泡沫样改变,而阿托伐他汀组和疏肝温胆汤高、中、低剂量组的血管狭窄、粥样斑块及泡沫样改变的程度均较模型组低。与正常组比较,模型组的TG,TC和LDL-C升高(P 0. 05),HDL降低(P 0. 05),血清中NO明显降低(P 0. 05),ET-1明显升高(P 0. 05),hs-CRP,IL-1β,IL-6和MMP-9的表达均明显升高(P 0. 05),LXRα的蛋白表达明显降低(P 0. 05),NF-κB的蛋白表达明显升高(P 0. 05);与模型组比较,阿托伐他汀及疏肝温胆汤低、中、高剂量组的TG,TC和LDL-C含量明显降低(P 0. 05),阿托伐他汀组和疏肝温胆汤高剂量组血清中NO明显升高(P 0. 05),ET-1明显降低(P 0. 05),阿托伐他汀组及疏肝温胆汤低、中、高剂量组中CRP,IL-1β,IL-6和MMP-9的表达量均降低(P 0. 05),阿托伐他汀组、疏肝温胆汤各剂量组中LXRα的蛋白表达量均升高(P 0. 05),NF-κB的蛋白表达均明显降低(P 0. 05)。结论:疏肝温胆汤通过调控LXRα/NF-κB信号通路改善血管内皮细胞功能和动脉粥样斑块的稳定性,从而发挥抗动脉粥样硬化效应。     

地黄饮子含药血清通过PPARγ/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的BV2细胞炎症反应＊

目的 研究中药地黄饮子抑制脂多糖（LPS）诱导的小胶质细胞炎症反应的作用机制。方法 使用1 mg·L^-1的LPS诱导小鼠小胶质细胞系（BV2）构建细胞炎症模型，实验分组为空白组、模型组、地黄饮子组（14.5 g·kg^-1）、米诺环素组（150 mg·kg^-1）。地黄饮子组和米诺环素组予以10%的含药血清干预，空白组和模型组给予同等浓度的空白血清。明场下观察细胞形态的变化，实时荧光定量PCR检测促炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平，Western blot检测PPARγ蛋白表达和NF-κB p65活化水平，细胞免疫荧光检测NF-κB p65入核情况。结果 与空白组比较，模型组促炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平均显著升高（P < 0.01）；PPARγ蛋白水平明显降低，NF-κB磷酸化水平明显增高，差异均有统计学意义（P <0.01），LPS刺激使BV2细胞核内NF-κB含量明细增多；给予地黄饮子或米诺环素含药血清干预后，与模型组比较，炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的 mRNA 水平均显著降低（P < 0.05），PPARγ蛋白水平明显升高（P < 0.05），NF-κB磷酸化水平和入核含量明显减少（P < 0.05）。结论 地黄饮子可能通过调控PPARγ/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的BV2细胞炎症反应。     

艳山姜挥发油调控PPAR γ/ABCA1信号抑制巨噬细胞源性泡沫细胞形成的作用机制

目的:探讨艳山姜挥发油(EOFAZ)调控PPARγ/ABCA1抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成的作用机制.方法:将THP-1细胞用佛波酯(PMA,100 μg/L)诱导分化为巨噬细胞,噻唑蓝(MTT)法检测EOFAZ对巨噬细胞活力的影响.油红0染色法检测脂滴的含量;酶法检测总胆固醇(T...     

基于AMPK/PPARα/PGC-1α信号通路探讨金合欢素改善代谢综合征大鼠骨骼肌能量代谢紊乱作用机制北大核心CSCD

目的:探究金合欢素对代谢综合征大鼠骨骼肌能量代谢紊乱的影响,并初步探讨其作用机制。方法:通过果糖诱导自发性高血压(SHR)大鼠建立代谢综合征大鼠模型,灌胃给予金合欢素25、50 mg/kg, 7 w后检测收缩压(SBP)、胰岛素抵抗数指数(HOMA-IR),试剂盒检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)的含量;ELISA法检测腓肠肌组织中ATP含量;采用qPCR法测定大鼠腓肠肌中线粒体DNA(mtDNA)拷贝数;Western Blot法检测UCP 3、线粒体融合蛋白(MFN2)、线粒体裂变因子(MFF)、线粒体动力相关蛋白(Drp1)、线粒体途径凋亡指标蛋白(Cytochrome c)、能量代谢相关蛋白AMPK、p-AMPK、PPAR α、PGC-1α的表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠SBP、HOMA-IR、体质量以及血清中LDL-C、TG含量显著升高(P<0.01),血清中HDL-C、腓肠肌质量、ATP含量、mtDNA拷贝数显著降低(P<0.01),腓肠肌组织线粒体中UCP 3、MFN2、Cytochrome c蛋白表达显著下调(P<0.01),MFF、Drp1蛋白表达显著上调(P<0.01),腓肠肌组织中AMPK蛋白磷酸化表达、PPAR α、PGC-1α蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组相比,金合欢素各组能明显改善代谢综合征大鼠SBP、HOMA-IR、体质量以及血清中HDL-C、LDL-C、TG的含量;升高腓肠肌质量和ATP含量、mtDNA拷贝数,明显上调UCP 3、MFN2、Cytochrome c蛋白表达,下调MFF、Drp1蛋白表达(P<0.05或P<0.01),促进大鼠腓肠肌线粒体融合并抑制其分裂;上调AMPK蛋白磷酸化、PPAR α、PGC-1α蛋白表达(P<0.01)。结论:金合欢素可能通过激活AMPK/PPAR α/PGC-1α通路,促进代谢综合征大鼠骨骼肌线粒体融合并抑制其分裂,增强线粒体功能进而改善代谢综合征大鼠骨骼肌能量代谢紊乱。     

化瘀祛痰方调节AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路抑制炎症小体活化改善AS小鼠肝脏脂质沉积的机制研究

目的?探讨化瘀祛痰方调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1/过氧化酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α（AMPK/SIRT1/PGC-1α）信号通路调控炎症小体活化对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠肝脏脂质沉积的影响及作用机制。方法?将24只ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为模型组、辛伐他汀组、化瘀祛痰方组，8只C57BL/6J小鼠作为正常组对照。造模结束次日各组开始灌胃，正常组和模型组采用等容积生理盐水，辛伐他汀组采用辛伐他汀混悬液2.275 mg/（kg·d），化瘀祛痰方组采用化瘀祛痰方，生药量为20 g/（kg·d），每日1次，连续给药8周。采用全自动生化分析仪检测血清血脂水平；HE染色和油红O染色观察肝脏组织病理和脂质沉积情况；Western Blot法检测肝脏腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、沉默信息调节因子1（SIRT1）、过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α（PGC-1α）、线粒体转录因子A（Tfam）、含pyrin结构域NOD样受体家族3（NLRP3）蛋白表达；实时荧光定量PCR法检测肝脏线粒体DNA（mtDNA）水平；ELISA法检测血清IL-1β、IL-18水平。结果?与正常组比较，模型组甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白总胆固醇（LDL-C）水平显著升高（P<0.01）；肝脏细胞肿胀，排列紊乱，出现大量脂肪空泡，脂质沉积明显；p-AMPK、SIRT1、PGC-1α、Tfam蛋白表达降低，NLRP3蛋白表达升高（P<0.05）； mtDNA相对表达量减少（P<0.01）；IL-1β、IL-18水平升高（P<0.01）。与模型组比较，辛伐他汀组和化瘀祛痰方组TG、TC、LDL-C水平降低（P<0.01）；肝细胞结构有所恢复，少见脂肪空泡，脂质沉积现象改善明显；两组p-AMPK、SIRT1、PGC-1α、Tfam蛋白表达升高，NLRP3蛋白表达减少（P<0.05，P<0.01）；mtDNA相对表达量增加（P<0.01）；两组血清IL-1β、IL-18水平降低（P<0.01）。4组血清高密度脂蛋白总胆固醇（HDL-C）水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论?化瘀祛痰方可通过AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路调节线粒体功能，抑制炎症小体激活和炎性反应，改善肝脏脂质沉积。     

连翘苷通过PPARs信号通路对肥胖大鼠脂质代谢与肠道菌群失调的改善作用研究

目的：探讨连翘苷通过过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)信号通路对肥胖大鼠脂质代谢与肠道菌群失调的影响。方法：选取68只SPF级雄性SD大鼠给予高脂饲料建立肥胖大鼠模型,48只造模成功的肥胖大鼠随机分为模型组、奥利司他(48 mg/kg)组及连翘苷低(80 mg/kg)、高(160 mg/kg)剂量组,每组12只,另设正常对照组12只。灌胃给药,正常对照组及模型组灌胃相应体积蒸馏水。记录大鼠初始、终末体质量和每日摄食量。8 w后,测定各组大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;HE染色观察脂肪组织病理学变化;Q-PCR检测大鼠粪便中8种菌群丰度;RT-PCR和Western Blot检测大鼠脂肪组织中PPARα、PPARβ、PPARγ mRNA及蛋白表达。结果：与模型组比较,各给药组大鼠摄食量、HDL-C水平及双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌属、毛螺菌科、理研菌科菌群相对丰值显著升高,脂肪组织PPARα、PPARβ、PPARγ mRNA及蛋白表达显著升高,体质量增幅、TG、TC、LDL-C水平及大肠杆菌、厚壁菌、...     

芹菜素对肥胖型小鼠脂肪组织AMPK信号通路的作用机制

目的:研究芹菜素对肥胖型db/db小鼠脂肪紊乱的作用及机制。方法:8周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组、芹菜素组(50 mg·kg-1·d-1),雄性C57BL/6J小鼠为正常组,药物干预4周后,检测小鼠体质量、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),总胆固醇(total cholesterol,CHO),甘油三酯(total triglyceride,TG),游离脂肪酸(free fatty acids,FFA),天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST),血肌酐(serum creatinine,SCr),血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);脂肪组织苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察脂肪细胞病理变化;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测胆固醇应答元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein 1c,SREBP1c),脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS),过氧化物增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptorα,PPARα)基因表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)和乙酰CoA羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)磷酸化水平。结果:与模型组比较,芹菜素组小鼠体质量,FBG,CHO,TG,FFA明显降低(P0.05,P0.01);HE染色脂肪细胞变小,脂质沉积减低;脂肪组织SREBP1c,FAS mRNA表达降低(P0.01),p-AMPKα,p-ACC蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。结论:芹菜素可以改善db/db小鼠脂肪代谢紊乱,可能是通过上调脂肪组织AMPK,ACC磷酸化水平,下调SREBP1c,FAS mRNA表达实现。     

补中益气汤通过Adipor1/AMPK/PGC-1α调节脂代谢治疗运动性疲劳

目的 探讨补中益气汤通过脂联素受体1（Adipor1）/磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）/过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α（PGC-1α）对运动性疲劳（EIF）小鼠骨骼肌中脂代谢的影响。方法 将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组、维生素C组。空白组不施加任何干预,其余组通过力竭游泳建立EIF模型。力竭游泳前1 h,空白组、模型组灌服0.2 mL蒸馏水,补中益气汤低、中、高剂量组分别灌胃4.1、8.2、16.4 g·kg^-1的补中益气汤,维生素C组灌胃0.04 g·kg^-1剂量维生素C,持续6周。实验6周后,计算小鼠体质量增长率、脏器指数、力竭游泳时间;酶比色法检测小鼠血清中尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、乳酸（LD）的水平;苏木素-伊红（HE）染色观察骨骼肌组织病理变化;透射电镜（TEM）观察骨骼肌组织超微结构;微板法检测血清中游离脂肪酸（NEFA）、甘油三酯（TG）的含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）测定骨骼肌中Adipor1、磷酸化（p）-AMPK/AMPK、PGC-1α和己糖激酶2（HK2）蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠的体质量增长率、胸腺指数降低,血清中BUN、CK、LD、LDH水平升高（P<0.01）,NEFA、TG含量下降（P<0.01）,骨骼肌组织Adipor1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α、HK2蛋白表达下降（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,补中益气汤高剂量组体质量增长率、胸腺指数、力竭游泳时间显著升高（P<0.01）,BUN、CK、LD、LDH显著下降（P<0.01）,NEFA、TG显著升高（P<0.01）,骨骼肌组织Adipor1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α、HK2蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）;维生素C组胸腺指数、力竭游泳时间明显提高,BUN、CK、LD明显下降（P<0.05,P<0.01）,NEFA、TG显著升高（P<0.01）,骨骼肌组织Adipor1蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论 补中益气汤能够延缓EIF的发生,其机制可能与调节Adipor1/AMPK/PGC-1α信号通路,提高骨骼肌对脂肪的利用率有关。     

瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍和AMPK/PGC-1α信号通路的影响

目的 观察瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍及腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α（PGC-1α）信号通路的影响。方法 70只雄性SD大鼠,随机选取6只作为正常组（CON）,其余给予高脂饲料结合注射异丙肾上腺素（5 mg·kg^-1·d^-1,7 d）,建立以高血脂为基础的缺血性心脏病模型。将造模成功者随机分为模型组（MOD）、瓜蒌薤白半夏汤高剂量（GXBD-H）组、瓜蒌薤白半夏汤中剂量（GXBD-M）组、瓜蒌薤白半夏汤低剂量（GXBD-L）组和美托洛尔（MET）组。其中,GXBD-H组、GXBD-M组和GXBD-L组大鼠分别给予11.2、5.6、2.8 g·kg^-1·d^-1的瓜蒌薤白半夏汤水煎液,MET组给予美托洛尔2.6 mg·kg^-1·d^-1,CON组和MOD组给予等体积纯净水,连续28 d。心导管法测量大鼠血流动力学;透射电镜分析心肌组织线粒体变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清脑钠肽（BNP）和心肌肌钙蛋白T（cTnT）水平;线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1法）检测线粒体膜电位;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测线粒体DNA拷贝数的变化;分光光度计法检测心肌组织三磷酸腺苷（ATP）含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织磷酸化AMPK（p-AMPK）、AMPK、PGC-1α、核呼吸因子1（NRF1）和线粒体转录因子A（TFAM）的表达水平。结果 与CON组比较,MOD组的左室收缩末期压（LVESP）和左室舒张末期压（LVEDP）明显升高（P<0.05,P<0.01）,以及心室收缩时室内压最大上升速率（+dp/dt_max）和左室舒张时室内压最大下降速率（-dp/dt_max）显著降低（P<0.01）;心指数和心肌间质纤维化面积均显著升高（P<0.01）及线粒体破坏损伤;血清BNP、cTnT和丙二醛（MDA）显著升高（P<0.01）,以及血清超氧化物歧化酶（SOD）水平显著降低（P<0.01）;心肌线粒体膜电位、DNA拷贝数和ATP水平均显著降低（P<0.01）;心肌组织的p-AMPK/AMPK、PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白水平显著减少（P<0.01）。与MOD组比较,GXBD-H和GXBD-M组的LVESP、LVEDP、+dp/dt_max和-dp/dt_max明显改善（P<0.05,P<0.01）;心指数和心肌间质纤维化面积均明显降低（P<0.05,P<0.01）及线粒体损伤减轻;血清BNP、cTnT和MDA明显降低（P<0.05,P<0.01）,及血清SOD水平显著升高（P<0.01）;心肌线粒体膜电位、DNA拷贝数和ATP水平均明显增加（P<0.05,P<0.01）;心肌组织的p-AMPK/AMPK、PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 瓜蒌薤白半夏汤可以降低心肌损伤模型大鼠的心功能和心肌病理形态变化,抑制线粒体功能障碍,并上调心肌组织p-AMPK/ AMPK、PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白表达变化。该研究为深入探索经典复方防治心肌损伤的效应机制,提供了新的实验室证据。