基于调控HIF-1α表达探讨温经汤改善大鼠子宫内膜异位症的机制

目的:观察温经汤对子宫内膜异位症(EMs)大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及线粒体超微结构的影响,探讨温经汤治疗EMs的作用机制。方法:采用自体内膜移植法复制大鼠EMs模型,小动物超声成像系统检测异位病灶体积,依据体积均衡原则随机分为模型组、温经汤低、中、高剂量组(4.85,9.7,19.4 g·kg~(-1))及孕三烯酮组(0.25 mg·kg~(-1)),每组10只,另设假手术组10只。药物治疗6周后,超声成像系统及卡尺分别测量异位病灶体积,苏木素-伊红(HE)染色观察异位内膜组织形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测腹腔液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测在位或异位内膜组织HIF-1αmRNA及蛋白表达,透射电镜观察异位内膜线粒体超微结构。结果:与假手术组比较,模型组可见异位病灶生成,呈囊泡样结构,病灶内可见典型的子宫内膜组织形态,IL-1β,TNF-α,TGF-β1含量显著升高(P0.01),HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05,P0.01),透射电镜可见异位内膜胞浆中线粒体数量增加,结构完整;与模型组比较,温经汤各剂量组异位病灶体积显著降低(P0.01),且超声检测结果与卡尺测量结果大体一致,HE染色可见异位内膜柱状上皮细胞破损或脱落、间质细胞疏松;温经汤各剂量组TNF-α含量明显降低,温经汤中、高剂量组IL-1β,TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01);温经汤各剂量组还可明显降低HIF-1αmRNA及蛋白表达(P0.05,P0.01);且温经汤治疗后异位内膜线粒体明显肿胀,嵴断裂甚至消失,部分线粒体空泡变性,外膜破裂。结论:温经汤对大鼠实验性EMs具有较好的治疗作用,机制与降低HIF-1α表达,改善异位病灶乏氧,诱导异位内膜线粒体损伤有关。     

大蒜素对子宫内膜异位症大鼠异位病灶及缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的:研究大蒜素对子宫内膜异位症(EMs)大鼠异位病灶的影响.方法:采用自体内膜移植的方法制备大鼠EMs模型,50只模型大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组(0.5 mg/kg,阳性对照组)和大蒜素低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高剂量(20 mg/kg)组,每组10只;另取10只大鼠设为假手术组.各组分别1次...     

子宫内膜异位症患者子宫内膜HIF-1α、CD34、CD54的表达及相互关系

目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CD34、CD54与子宫内膜异位症(EMS)发生的关系,以期探讨EMS的发病机制。方法选取26例EMS手术患者,所有病例均经腹腔镜或开腹手术确诊,经病理证实为腹膜型EMS 8例,卵巢子宫内膜异位囊肿9例,子宫腺肌症9例,同期选取子宫肌瘤手术患者6例为对照组,应用免疫组织化学法(SP)测定2组子宫内膜组织中HIF-1α、CD34、CD54的表达。结果 HIF-1α、CD34、CD54在腹膜型EMS组、卵巢子宫内膜异位囊肿组、子宫腺肌症组的表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。HIF-1α与CD34、CD54的表达呈正相关。结论 HIF-1α可能在EMS异位病灶形成中起重要作用,推测内异症的发生与局部病灶缺氧有关。且HIF-1α与CD34的表达呈正相关,提示HIF-1α可以促进内异症组织血管生成;HIF-1α与CD54的表达呈正相关,推测HIF-1α可加强异位内膜细胞的黏附作用,从而有利于形成异位灶。     

鳖甲煎丸通过HIF-1α/NF-κB信号通路调控巨噬细胞极化的机制探讨

目的 探讨鳖甲煎丸通过调控巨噬细胞极化防治肝纤维化的作用和机制。方法 运用血清药理学方法,体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过氯化钴（CoCl₂）刺激RAW264.7细胞建立体外缺氧模型,将细胞随机分为空白组、CoCl₂模型组（200 mmol·L^-1）、鳖甲煎丸低（0.55 g·kg^-1）、中（1.1 g·kg^-1）、高（2.2 g·kg^-1）和扶正祛瘀胶囊组（0.56 g·kg^-1扶正祛瘀胶囊）。采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测各组细胞增殖水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测巨噬细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测巨噬细胞极化相关蛋白与HIF-1α/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白表达水平;细胞免疫荧光检测NF-κB信号通路相关蛋白、HIF-1α的分布及表达。结果 与空白组比较,CoCl₂刺激24 h后,RAW264.7细胞增殖受抑制明显（P<0.05）;与模型组比较,用相应含药血清处理24 h后,各用药组能促进RAW264.7细胞增殖（P<0.05）。与空白组比较,模型组HIF-1α、IL-1β、IL-6 mRNA表达均有明显升高（P<0.05）;与模型组比较,鳖甲煎丸与扶正祛瘀胶囊处理后能不同程度的降低巨噬细胞中HIF-1α、IL-1β、IL-6 mRNA的表达水平（P<0.05）。与空白组比较,模型组HIF-1α及M1巨噬细胞表型蛋白IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达明显升高（P<0.05）,M2巨噬细胞表型蛋白IL-10表达明显降低（P<0.05）。与模型组比较,鳖甲煎丸与扶正祛瘀胶囊组HIF-1α、IL-6、TNF-α蛋白表达降低（P<0.05）,CD163、IL-10蛋白表达升高（P<0.05）。与空白组比较,模型组NF-κB p65、磷酸化（p）-NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶α/β（p-IKKα/β）、磷酸化NF-κB抑制蛋白α（p-IκBα）蛋白表达明显升高（P<0.05）;与模型组比较,鳖甲煎丸与扶正祛瘀胶囊组NF-κB p65、p-NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IκBα蛋白表达明显降低（P<0.05）。与空白组比较,模型组促进HIF-1α和NF-κB p65的入核表达;与模型组比较,鳖甲煎丸和扶正祛瘀胶囊组能抑制HIF-1α和NF-κB p65的入核表达。结论 鳖甲煎丸可调控巨噬细胞极化,减轻缺氧环境下巨噬细胞相关炎症反应损伤,从而延缓肝纤维化进展,其机制可能与其调控HIF-1α/NF-κB信号通路有关。     

二陈汤加味对COPD患者缺氧诱导因子-1α及沉默信息调节因子1的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的肺功能、氧化应激、缺氧诱导因子-1α(Hif-1α)及沉默信息调节因子1(Sirt1)的影响,评价二陈汤加味对COPD患者抗氧化损伤及抗炎的作用与机制。方法:选取符合纳入标准的急性加重期和稳定期COPD患者各120例,各期分成对照组和治疗组。各组均在西药治疗的基础上,治疗组给予二陈汤加味,疗程14 d。检测肺功能,测定血液酸碱度(pH),氧分压(PaO_2),二氧化碳分压(PCO_2),氧饱和度(SaO_2)。紫外分光光度计检测血清还原型谷胱甘肽(GSH),超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆白细胞介素(interleukin)-6,IL-1β,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)含量,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMCs)中Hif-1α和Sirt1 mRNA表达,ELISA法测定PBMCs中HIf-1α和Sirt1含量,荧光酶联免疫吸附法测定PBMCs中Sirt1活性。结果:急性加重期和稳定期治疗后,与对照组比较,治疗组1 s用力呼气容积(FEV_1),1 s用力呼气量/用力肺活量(FVC)均显著增大(P0.01),治疗组总有效率明显高于对照组(P0.05),治疗组PaO_2,SaO_2均显著增加,PCO_2显著降低(P0.01),SOD,GSH-Px活性均显著升高(P0.01),MDA含量显著降低(P0.01),治疗组PBMCs中Sirt1 mRNA表达,Sirt1含量及其活性均明显增加(P0.05,P0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α,CRP,Hif-1α含量,Hif-1αmRNA表达均明显降低(P0.05)。结论:二陈汤加味对COPD有抗氧化损伤、抗炎作用。其机制可能为增强Sirt1基因的表达,提高Sirt1活性,抑制Hif-1αmRNA表达,减少IL-1β,IL-6,TNF-α,CRP合成与释放,以保护肺组织、改善肺功能。     

归芪聪志汤及其拆方对VD模型大鼠海马神经元HIF-1α,VEGF和HO-1表达的影响

目的:研究归芪聪志汤及其拆方对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马组织缺氧诱导因子~(-1)α(HIF-1α),血管内皮生长因子(VEGF),及血红素加氧酶~(-1)(HO~(-1))表达的影响,并探讨相关的作用机制。方法:Wistar大鼠称体质量后,按随机原则选出10只作为假手术组,将其余90只大鼠采用改良后的双侧颈动脉永久性结扎法制备VD大鼠模型,造模后,筛选成功模型大鼠54只随机分为6组,分别为模型组,阳性药组(吡拉西坦,3.6 g·kg~(-1)),归芪聪志汤组(9.9 g·kg~(-1)),活血通络组(拆方1组,9.9 g·kg~(-1)),化痰解毒组(拆方2组,9.9 g·kg~(-1)),补气养血组(拆方2组,9.9 g·kg~(-1)),每组9只。连续灌胃28 d后,Morris水迷宫予以行为学检测,苏木素-伊红(HE)染色观察海马神经元的形态改变,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测大鼠海马HIF-1α,VEGF及HO~(-1) mRNA和蛋白的表达。结果:治疗4周后,与假手术组比较,VD模型组大鼠的平均逃避潜伏期明显延长、跨原平台次数明显减少(P0.05),大鼠海马的HIF-1α,VEGF,HO~(-1) mRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),HE染色显示VD模型大鼠海马神经细胞损伤严重;与模型组比较,归芪聪志汤组与吡拉西坦组大鼠的逃避潜伏期均显著缩短、跨原平台次数均显著增加(P0.05),大鼠海马的HIF-1α,VEGF,HO~(-1) mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P0.05),HE染色显示归芪聪志汤与吡拉西坦组大鼠海马神经细胞损伤减轻。结论:归芪聪志汤组改善VD模型大鼠的学习记忆能力优于各拆方组,其作用机制可能与上调HIF-1α,VEGF及HO~(-1)因子的表达,减轻氧化应激损伤,激发脑内的损伤修复有关。     

缺氧诱导因子-1α对肝星状细胞影响的研究进展＊

肝纤维化是慢性肝病进程中肝脏反复损伤和修复的结果，是以细胞外基质过度累积为主要特征的病理过程。肝星状细胞异常活化是肝纤维化的细胞学基础，其活化受多种因素影响，其中，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）发挥了重要作用。HIF-1α作为机体适应缺氧应激的关键细胞因子，对肝星状细胞的活化、增殖和促细胞外基质形成、促血管新生能力的改变有重要意义。中医药可通过调控HIF-1α的表达以及改善肝脏乏氧微环境减轻肝纤维化的程度，因此HIF-1α有望成为中医药防治肝纤维化的新靶点。本文就HIF-1α的概述、HIF-1α调控肝星状细胞活化、自噬、凋亡等功能以及中医药调控HIF-1α的表达防治肝纤维化等方面作一综述。     

温经汤治疗子宫内膜异位症的疗效及对机体免疫功能的影响

目的观察温经汤治疗子宫内膜异位症(EMs)的疗效及对机体免疫功能的影响。方法将70例EMs患者随机分为观察组和对照组各35例。对照组给予米非司酮治疗,观察组在对照组治疗基础上给予温经汤口服。观察2组治疗后的疗效,治疗前后囊肿最大直径、痛经评分、痛经时间、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10、干扰素(INF)-γ、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和NK细胞比例的变化。结果观察组总有效率明显高于对照组(P0.05)。2组治疗前囊肿最大直径、痛经评分、痛经时间、IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和NK细胞比例比较差异均无统计学意义(P均0.05);2组治疗后囊肿最大直径、痛经评分、痛经时间、IL-4、IL-10、CD4+和CD4+/CD8+均较治疗前明显降低(P均0.05),而IL-2、INF-γ、CD8+和NK水平均较治疗前明显升高(P均0.05),且观察组各指标的改善情况均明显优于对照组(P均0.05)。结论温经汤治疗EMs的疗效显著,其机制可能与纠正Th1/Th2比例和T细胞亚群比例失衡有关。     

芍药汤通过抑制HIF-1α调节Th17/Treg平衡治疗溃疡性结肠炎

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在溃疡性结肠炎辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）平衡中的作用及芍药汤的干预机制。方法 将48只SD大鼠随机分为正常组,模型组,美沙拉嗪组（0.42 g·kg^-1）,芍药汤组（11.1 g·kg^-1）,抑制剂组（2-甲氧基雌二醇,0.015 g·kg^-1）,芍药汤+抑制剂组,采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导溃疡性结肠炎模型,各组分别对应给予生理盐水,美沙拉嗪,芍药汤,抑制剂及芍药汤+抑制剂治疗7 d,观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数,采用苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理学改变,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中白细胞介素-10（IL-10）,IL-17,IL-23水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织叉头状/翼状螺旋转录因子P3（FoxP3）,维甲酸相关孤儿受体（RORγt）,HIF-1α蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠疾病活动指数（DAI）评分,肠黏膜病理学评分显著升高（P<0.01）,血清中的IL-10水平显著降低（P<0.01）,IL-17和IL-23显著升高（P<0.01）,结肠RORγt及HIF-1α蛋白水平显著升高（P<0.01）,FoxP3蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,芍药汤组DAI评分,肠黏膜病理学评分降低（P<0.05,P<0.01）,血清中IL-10水平升高（P<0.01）,IL-17,IL-23降低（P<0.01）,结肠RORγt及HIF-1α蛋白水平降低（P<0.01）,FoxP3蛋白表达升高（P<0.01）;与抑制剂组比较,芍药汤组及芍药汤+抑制剂组RORγt,FoxP3及HIF-1α蛋白表达差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 芍药汤可以有效治疗溃疡性结肠炎,其作用机制可能与抑制HIF-1α来调节Treg/Th17的重新平衡相关。     

加味升降散调控HIF-1α/NOX4信号通路对膜性肾病大鼠氧化应激和凋亡的影响

目的 探讨加味升降散对膜性肾病（MN）大鼠血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）信号通路的干预作用,研究其减轻肾组织氧化应激和凋亡的相关机制。方法 采用阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）尾静脉注射方法复制MN模型,将成功造模的大鼠随机分为模型组,加味升降散组和贝那普利组。各组根据相应的药物剂量灌胃（ig）,每日1次。在给药的第4周末检测相关指标,检测24 h尿蛋白（UTP）,尿素氮（BUN）,肌酐（SCr）的变化情况,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠肾脏中超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）,活性氧（ROS）水平,原位末端标记法（TUNEL）检测大鼠肾组织细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠肾脏中HIF-1α,NOX4的mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肾脏HIF-1α,NOX4蛋白表达水平,免疫组化（IHC）检测大鼠肾脏相关凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,B细胞淋巴瘤-xl（Bcl-xl）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,Bcl-2细胞死亡调节子抗体（Bim）蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠UTP明显上升（P<0.05）,SOD水平明显减少,MDA,ROS明显增多（P<0.05）,HIF-1α,NOX4的mRNA及蛋白表达水平明显上升（P<0.05）,Bax,Bim蛋白表达水平明显增高,Bcl-xl,Bcl-2蛋白表达水平下降（P<0.05）,肾组织细胞凋亡显著增多;与模型组比较,各给药组大鼠UTP水平均有不同程度下降（P<0.05）,SOD水平明显上调,MDA,ROS含量显著下降（P<0.05）,HIF-1α,NOX4的mRNA及蛋白表达量明显下降（P<0.05）,Bax,Bim蛋白表达水平下降,Bcl-xl,Bcl-2蛋白表达水平明显上升（P<0.05）,肾组织细胞凋亡显著减少。结论 加味升降散的保肾作用可能与其通过抑制HIF-1α/NOX4通路,缓解MN大鼠肾组织氧化应激状态,减少肾组织细胞凋亡有关。     

附子理中汤灌肠对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠 NF-κB,TNF-α,IL-1β表达的影响

目的:观察附子理中汤灌肠对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜核因子-κB(NF-κB),血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法:48只SPF级Wistar大鼠共分为6组,分别为正常组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组及柳氮磺胺吡啶(SASP)组,每组8只:附子理中汤高、中、低剂量组分别为14.06,7.03,3.51 g·kg-1,柳氮磺吡啶组予柳氮磺吡啶0.46 g·kg-1;空白组及模型组以等体积生理盐水,每天给药1次,从造模后第3天开始用药,持续灌肠给药15 d。观察附子理中汤灌肠对脾肾阳虚型UC大鼠NF-κB,TNF-α及IL-1β表达的影响。结果:与正常组相比,模型组大鼠肠黏膜炎症面积和损伤评分明显升高,较模型组而言不同剂量附子理中汤组大鼠肠黏膜炎症面积和损伤评分明显下降(P0.05);与正常组相比,模型组大鼠肠黏膜NF-κB的含量以及血清TNF-α,IL-1β的含量明显增多(P0.05);与模型组比较不同剂量的附子理中汤均能不同程度降低大鼠肠黏膜NF-κB的含量以及血清TNF-α,IL-1β的含量(P0.05)。结论:附子理中汤灌肠对脾肾阳虚型UC大鼠肠黏膜具有抗炎和修复作用,其机制可能与其抑制NF-κB的激活,下调TNF-α,IL-1β的表达有关。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症模型大鼠内膜组织缺氧诱导因子-1α、葡萄糖转运因子-1表达的影响

目的: 探讨补肾温阳化瘀方治疗内异症的可能作用机制。 方法: 选用SPF级雌性大鼠复制腹膜型内异症大鼠模型,将造模成功的大鼠分为4组:补肾温阳化瘀方高剂量组(16只)、低剂量组(16只)、丹那唑组(16只)、模型组(17只),并设对照组(12只)。运用免疫组化(S-P)法,检测内异症模型大鼠治疗前、后异位内膜组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运因子-1(GLUT-1)的表达,并比较治疗前后异位灶体积变化。 结果: 补肾温阳化瘀方高、低剂量组及丹那唑组治疗后子宫内膜异位灶体积较治疗前明显缩小(P<0.05),且以补肾温阳化瘀方高剂量组最显著(P<0.01);HIF-1α,GLUT-1在模型组异位内膜的表达与对照组在位内膜相比显著升高(P<0.01);补肾温阳化瘀方高、低剂量组及丹那唑组均能够显著抑制HIF-1α,GLUT-1的高表达(P<0.01),与对照组表达无明显差异,且以中药高剂量组作用效果最显著,低剂量组次之;丹那唑组与补肾温阳化瘀方高剂量组比较抑制效果有差异(P<0.05)。 结论: 补肾温阳化瘀方可能通过抑制HIF-1α与GLUT-1的表达达到治疗内异症的目的。     

金莲花总黄酮解热作用及对TNF-α,IL-1β和PGE2含量的影响

目的：观察金莲花总黄酮（Flavonoids from Trollius ledebouri Reichb,FTLR）解热作用。方法：选取连续3天基础体温在38.5~39.0 ℃ 的家兔,随机取6只作为正常对照组,其余家兔耳缘静脉注射细菌内毒素250 ng·kg^-1发热模型,取药后1.5 h体温上升>1 ℃ 的家兔30只。按体温分层随机分为发热模型组、FTLR 200,100,50 mg·kg^-1剂量组,阿司匹林组100 mg·kg^-1组,灌胃给药,发热模型组ig等容积蒸馏水。药后1,2,3及4 h分别测体温1次。采用ELISAE法测定血清中TNF-α和IL-1β及脑脊液中PGE₂表达水平。结果：FTLR 200及100 mg·kg^-1剂量组及阿司匹林组家兔各时间点的平均体温明显均低于模型对照组（P<0.01）;50 mg·kg^-1组家兔药后2~4 h体温低于对照组（P<0.05）;各给药组血清中TNF-α和IL-1β及脑脊液中PGE₂的含量均低于模型对照组（P<0.05或P<0.01）。结论：FTLR有明显的解热作用,并有明显的剂量依赖关系。其解热作用机制与抑制细菌内毒素引起的TNF-α,IL-1β和PGE₂等致热因子的合成或释放有关。     

HIF-1α表达与含砷中药复方治疗骨髓增生异常综合征的预后生存相关性

目的 骨髓增生异常综合征（MDS）是一组克隆性造血干细胞疾病,本研究旨在探讨MDS患者骨髓细胞中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达情况,及其与MDS临床特征、含砷中药复方治疗疗效和生存预后的相关性。方法 根据纳入排除标准,收集2022年1月至2022年9月期间中国中医科学院西苑医院血液科治疗予含砷中药复方的27例MDS患者,行骨髓穿刺术采集骨髓样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测骨髓细胞中HIF-1α表达水平,分析其与临床特征的相关性,以Logistic、Cox模型回归分析影响MDS患者疗效及预后生存的危险因素。结果 MDS患者骨髓细胞相比正常人中HIF-1α mRNA水平表达较低;HIF-1α与骨髓增生程度（r=0.384,P<0.05）、骨髓粒细胞系统%（G%）（r=0.560,P<0.01）呈正相关;Logistic回归分析显示HIF-1α在随访疗效中是危险因素（P<0.05）;Cox回归分析显示,HIF-1α是影响MDS患者生存预后的独立危险因素［比值比（OR）=398.968,95%置信区间（CI）（1.281,116 858.743）,P<0.05］。结论 MDS患者骨髓细胞中的HIF-1α表达水平与临床骨髓增生程度和G%密切相关,HIF-1α是MDS疗效和生存预后危险因素。     

基于HIF-1α/VEGFA信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌细胞的影响

目的 基于缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子A（VEGFA）信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌（TNBC）细胞的影响。方法 建立TNBC移植瘤模型,随机分为模型组,卡培他滨组（0.2 mg·kg^-1）,柴胡桂枝汤低、中、高剂量组（10.62、21.23、42.46 g·kg^-1）,每组10只,干预21 d。给药结束后,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中HIF-1α mRNA表达情况;免疫组化法（IHC）检测肿瘤组织中HIF-1α、TNF-α、VEGFA的表达水平及CD34染色检测肿瘤内血管生成情况并计算微血管密度（MVD）;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGFA、表皮生长因子受体（EGFR）蛋白的表达。结果 与模型组比较,卡培他滨组、柴胡桂枝汤低、中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01）,HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01）,HIF-1α、TNF-α、VEGFA和CD34阳性细胞表达及MVD明显降低（P<0.05,P<0.01）,HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平显著降低（P<0.01）。与卡培他滨组比较,柴胡桂枝汤中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01）,HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01）,HIF-1α、TNF-α和VEGFA阳性细胞表达显著降低（P<0.01）,CD34表达及MVD显著降低（P<0.01）,HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平均显著降低（P<0.01）。结论 柴胡桂枝汤可能通过调控HIF-1α/ VEGFA信号通路,抑制TNBC细胞血管生成,从而发挥抗肿瘤作用。     

肾蕨对乙酸致小鼠肛门溃疡的作用及NF-κB，TNF-α，IL-1β和COX-2表达的影响

目的:研究肾蕨叶水提取物(NLD)对小鼠肛门溃疡模型的作用及机制。方法:以20%乙酸(HAc)0.5 m L涂抹小鼠肛门,制备肛门溃疡模型,将50只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、NLD低、中、高剂量(0.45,0.9,1.8 g·kg-1)组,每组10只。各组小鼠自外涂给NLD计时,第10天处死。采集肛门、直肠组织,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠肛门、直肠组织中核转录因子(NF)-κB,肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β和环氧合酶(COX)-2mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠肛门、直肠组织中NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肛门、直肠组织形态学变化。结果:NLD可恢复小鼠体质量增长趋势,降低小鼠肛门脏器指数,下调小鼠肛门、直肠组织中NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2 mRNA(P0.01),降低小鼠肛门、直肠组织中NF-κB,TNF-α,IL-1β和COX-2蛋白表达(P0.01);NLD 0.9,1.8 g·kg-1剂量组可抑制炎性细胞的浸润及黏膜下层血管扩张,改善相应炎症反应。结论:NLD对肛门溃疡模型小鼠的肛门溃疡有明显的改善作用,其机制可能与下调NF-κB mRNA和蛋白的表达,进而下调其下游因子TNF-α,IL-1β与COX-2的基因表达有关。     

青蒿琥酯对实验性脉络膜新生血管的干预作用及对视网膜脉络膜组织HIF-1α，VEGF表达的影响

目的 通过观察青蒿琥酯（ART）对实验性脉络膜新生血管（CNV）及相关蛋白表达的影响,探讨其对CNV的干预作用及可能机制。方法 将80只BN大鼠随机分为5组,每组16只,除正常组外,其余应用532 nm激光机建立CNV动物模型。5组分别灌胃给药14 d,ART低剂量、高剂量组10.08,20.16 mg·kg^-1·d^-1,正常组、模型组、康柏西普组等容积1%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液灌胃,同时康柏西普组予5 μL玻璃体腔注射1次。分别在7,14 d应用眼底荧光素血管造影法（FFA）评价CNV荧光素渗漏情况（灰度值）,苏木素-伊红（HE）染色观察CNV组织病理学变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测视网膜脉络膜中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）,血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平。结果 FFA结果显示,与正常组比较,模型组灰度值在7 d及14 d时升高（P<0.01）;7 d时与模型组比较,ART高剂量组、康柏西普组灰度值降低（P<0.01）;14 d时与模型组比较,ART各剂量组、康柏西普组灰度值不同程度降低（P<0.05,P<0.01）。HE结果显示,与正常组比较,模型组CNV厚度值在7 d及14 d时显著升高（P<0.01）;与模型组比较,ART各剂量组、康柏西普组CNV厚度值降低（P<0.01）。与正常组比较,模型组HIF-1α,VEGF表达量在7 d及14 d时不同程度升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,ART各剂量组、康柏西普组表达量降低（P<0.01）。结论 ART对实验性CNV具有抑制作用,其机制与下调实验性CNV形成早期HIF-1α,VEGF的表达有关。     

丹参注射液对大鼠脊髓损伤后低氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察丹参注射液对大鼠脊髓损伤(SCI)后低氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其参与脊髓损伤修复的机制。方法:选取50只SD大鼠(SPF级)建立Allens’重力打击SCI模型(正常组除外)后,随机分为正常组、模型组、丹参治疗组、丹参加雷帕霉素组和甲泼尼龙琥珀酸钠组(每组10只)。正常组常规饲养,其余实验组均按1 m L·kg-1·d-1剂量分别腹腔注射生理盐水、丹参注射液、丹参注射液(含雷帕霉素3 mg·kg-1)和尾静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠溶液30 g·L-1。伤后1,3,7,14 d时采用联合行为评分法(CBS)评价大鼠脊髓神经功能恢复情况。伤后14 d处死动物,采用免疫组化染色和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各实验组HIF-1α和VEGF的表达差异。结果:SCI后14 d,与正常组比较,模型组大鼠CBS评分升高,HIF-1α和VEGF表达升高(P0.05);与模型组比较,丹参治疗组CBS评分降低,HIF-1α和VEGF表达升高(P0.05);与丹参治疗组比较,丹参加雷帕霉素组CBS评分升高,而HIF-1α和VEGF表达降低(P0.05);上述指标在丹参治疗组和甲泼尼龙琥珀酸钠组之间的差异不具有统计学意义。结论:丹参注射液可通过调节HIF-1α和VEGF的表达从而参与脊髓的损伤修复。     

姜黄素对人类子宫内膜异位症异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1及间质细胞增殖和侵袭的影响

目的观察姜黄素对人类子宫内膜异位症异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达及间质细胞增殖和侵袭的影响。方法建立子宫内膜异位症异位内膜组织的间质细胞原代培养模型,随机分为对照组(0μmol/L)、姜黄素低剂量组(10μmol/L)、姜黄素中剂量组(30μmol/L)、姜黄素高剂量组(50μmol/L),分别连续给药24 h后PCR法检测异位内膜组织中SDF-1的mRNA表达情况,分别连续给药12 h、24 h、48 h后MTT法检测异位内膜组织细胞抑制率,分别连续给药48 h后Transwell小室观测异位内膜组织细胞侵袭能力。结果姜黄素各剂量组异位内膜间质细胞中SDF-1 mRNA表达量均显著下降(P均0.05),且随药物浓度的增加下降更明显。各浓度姜黄素对细胞作用24 h、48 h、72 h后细胞抑制率比较差异均有统计学意义(P均0.05),同时点姜黄素高、中、低剂量组细胞抑制率比较差异均有统计学意义(P均0.05),姜黄素对异位内膜间质细胞的生长增殖抑制呈明显的剂量和时间效应关系。作用48 h后,侵袭抑制率组间整体比较差异有统计学意义(P0.05),随着姜黄素浓度的升高,间质细胞的侵袭数量减少,浓度越高,侵袭率越低。结论姜黄素可以明显降低异位内膜组织中SDF-1表达,且随着姜黄素浓度的增加SDF-1表达呈阶梯型减少,SDF-1/CXCR4轴可能参与了子宫内膜异位症的发展过程;姜黄素对异位内膜细胞的增殖、侵袭有明显抑制作用,抑制作用呈阶梯型增强。姜黄素可能通过降低细胞SDF-1mRNA的表达,抑制上游核转录因子κB(NF-κB)活性而下调MMP的表达,进而抑制人子宫内膜异位症细胞的侵袭和转移。     

4种归肺经中药对肺热证小鼠TNF-α,IL-1β表达的影响

目的：探讨麻黄、干姜、黄芩、桑白皮4味归肺经中药对小鼠肺热证的影响,并初步揭示其作用机制。方法：将100只昆明种小鼠随机分为正常对照组,模型组,麻黄、干姜、黄芩、桑白皮组（20,10 g·kg^-1）,每组10只,灌胃给药7 d,每天1次,于实验第4,5,6天鼻腔滴入肺炎链球菌菌液建立小鼠肺热证模型,病理学观察肺组织形态变化,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,免疫组化法测定肺组织TNF-α,白介素-1β（IL-1β）蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组肺组织实变（P<0.001）,血清TNF-α含量升高（P<0.01）,肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较,麻黄低剂量组,干姜高、低剂量组,黄芩高剂量组肺组织病理有明显改善（P<0.01,P<0.05）;血清TNF-α含量降低,除干姜高剂量组、黄芩低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达降低,其中,TNF-α表达除干姜低剂量组、桑白皮高剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,IL-1β表达除麻黄低剂量组、桑白皮低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论：麻黄、干姜、黄芩、桑白皮可以干预肺热证,抑制TNF-α,IL-1β炎症因子表达可能是其减轻小鼠肺热证肺组织损伤的主要途径。