酸枣仁汤对焦虑大鼠海马离子型谷氨酸受体的表达及突触可塑性的作用研究北大核心CSCD

探讨酸枣仁汤对条件性恐惧致焦虑大鼠海马离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)和α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor,AMPAR)的表达及突触可塑性的影响。通过旷场实验、高架十字迷宫实验和明暗箱实验考察酸枣仁汤对焦虑大鼠行为学的影响;利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠海马中谷氨酸(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)含量;采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马区离子型谷氨酸受体的基因及蛋白表达;采用透射电镜技术观察大鼠海马区神经突触超微结构的变化,并通过在体长时程增强(long-term potentiation,LTP)检测技术记录各组大鼠海马区的群峰电位(polulation spike,PS)幅值变化率。行为学结果显示,与模型组相比,酸枣仁汤能有效增加焦虑大鼠的开臂次数、开臂运动时间、开臂占总运动时间百分比、开臂占入臂总次数百分比(P<0.01),显著升高明箱时间和穿梭次数(P<0.01),跨格次数、进入中央格次数、进入中央格时间有增加趋势,表现出明显的抗焦虑作用;ELISA结果显示,与模型组相比,酸枣仁汤组大鼠海马组织中的Glu含量和Glu/GABA比值显著降低(P<0.01),GABA含量显著升高(P<0.01);此外,与模型组相比,酸枣仁汤能明显降低NMDAR(GluN2B、GluN2A)、AMPAR(GluA1、GluA2)的基因和蛋白表达。透射电镜结果表明,酸枣仁汤组海马区的突触、神经元细胞及细胞器较模型组均有改善。LTP检测结果显示,与模型组比较,酸枣仁汤组大鼠海马区的PS幅值变化率在5~35 min显著增加(P<0.05,P<0.01)。综上,酸枣仁汤具有显著的抗焦虑作用,其作用机制可能与减少NMDAR、AMPAR表达水平以及改善神经突触可塑性有关。     

酸枣仁汤对PCPA失眠大鼠焦虑样行为的影响

目的 研究酸枣仁汤对PCPA失眠大鼠焦虑样行为的影响。方法 腹腔注射PCPA建立失眠大鼠模型,72只大鼠随机分为对照组,模型组,酸枣仁汤低、中、高剂量组,舒乐安定组。采用行为学实验观察入睡潜伏期、睡眠持续时间、开放臂进入次数、开放臂停留时间,HE染色观察病理变化,RT-qPCR法、Western blot法、免疫组化法检测BDNF、GAP-43、PSD-95 mRNA和蛋白表达及GFAP蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠入睡潜伏期延长(P<0.01),睡眠时间缩短(P<0.01),并出现焦虑样行为,前额叶出现病理损伤,BDNF、GAP-43、PSD-95 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),GFAP蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,酸枣仁汤各剂量组大鼠入睡潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),睡眠时间延长(P<0.05,P<0.01),焦虑缓解,前额叶病理损伤改善,BDNF、GAP-43、PSD-95 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),GFAP蛋白表达降低(P<0.05,P&l...     

酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响及机制研究

目的:考察酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响及机制研究。方法:50只雄性大鼠随机分为5组,即大平台对照组、睡眠剥夺组、酸枣仁汤大、中、小剂量组,釆用改良多平台法建立大鼠睡眠剥夺模型,进行7天连续睡眠剥夺,并每天给药一次,Morris水迷宫测定学习记忆,TUNEL染色观察大鼠海马神经细胞凋亡,高效液相-电化学检测血NE,DA,5-HT的含量。结果:与睡眠剥夺组相比,酸枣仁汤21g/kg、10.5g/kg组大鼠的学习记忆能力明显改善,海马凋亡阳性细胞凋亡率明显减少,NE含量明显降低,DA,5-HT含量明显升高。结论:酸枣仁汤可改善睡眠剥夺大鼠学习记忆能力,可能与抑制神经细胞凋亡和改变单胺类递质的含量有关。     

酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响

目的探讨酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响。方法在恒温、恒湿、自动光控及电磁屏蔽条件下，给予实验动物不同剂量酸枣仁汤，采用慢性电极埋植技术描记电刺激所致失眠大鼠自由活动情况下的皮层脑电图。分析给予实验动物不同剂量的酸枣仁汤前后失眠大鼠脑电图的变化。结果低剂量酸枣仁汤对失眠大鼠慢波睡眠Ⅰ期（SWS1）睡眠时相有显著延长作用（P〈0．01），对慢波睡眠Ⅱ期（SWS2）没有明显影响（P〉0．05），中剂量酸枣仁汤能明显延长失眠大鼠SWS1和SWS2（P〈0．01），高剂量酸枣仁汤对失眠大鼠SWS2有显著延长作用（P〈0．05）。结论酸枣仁汤对电刺激所致失眠大鼠的睡眠周期有影响，且随着剂量的变化作用不同。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响

目的:研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。应用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠下丘脑GABA含量的变化,Realtime-PCR法检测大鼠下丘脑GABAARα1和γ2亚单位mRNA表达水平。结果:免疫组化法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组较环境对照组GABA含量降低(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组GABA相对表达量相对升高(P0.05)。Realtime-PCR法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组GABAARα1、GABAARγ2表达下调(P0.05);与慢性睡眠剥夺模型组比较,酸枣仁汤组和舒乐安定组GABAARα1、GABAARγ2表达明显上调(P0.05)。结论:酸枣仁汤改善睡眠机制与调控大鼠下丘脑GABA的含量及其受体表达有关。     

基于突触可塑性理论研究电针对抑郁模型大鼠行为学及海马突触相关蛋白mTOR、GSK-3β的影响

目的：通过观察电针“印堂”和“百会”对抑郁模型大鼠大的行为学及海马突触相关蛋白mTOR、GSK-3β(糖原合成酶激酶-3β)的影响,探讨针刺治疗抑郁症的作用机制。方法：正常组15只Wistar大鼠,45只WKY(Wistar-Kyoto)大鼠随机分为电针组、假针组、模型组,治疗前后对所有大鼠进行糖水偏好试验(Sugar Preference Test, SPT)、旷场试验(Open Field Test, OFT)和体重测量。电针组取大鼠“百会穴”“印堂穴”电针治疗,假针组进行假针刺干预,模型组和正常组不进行任何干预。电针组、假针组每天干预1次,干预21天。治疗结束后,用Western Blot法检测大鼠海马mTOR、GSK-3β的表达。结果：和Wistar大鼠相比,干预前WKY大鼠的体重、OFT和SPT评分明显降低(P<0.01)。干预21次后,与模型组及假针组相比,电针组大鼠的体重、OFT和SPT评分明显升高(P<0.01);电针组海马mTOR的表达量要比模型组和假针组更高(P<0.05),且正常组的明显高于模型组(P<0.01);电针组海马GSK-3β的表...     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠海马5-HT1AR和5-HT2AR表达的影响

目的:观察酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠海马5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R表达的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和造模组,造模组用多平台水环境法制造慢性睡眠剥夺模型,造模成功后再将造模组大鼠随机分为模型组、西药组(舒乐安定)和酸枣仁汤组。用自主活动测试仪记录大鼠自主活动时间,用免疫组化和Western blot法检测大鼠海马中5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠tL、tD、tall增加,大鼠活动时间增加(P0.01);与模型组比较,西药组大鼠tL、tall和酸枣仁汤组大鼠tL、tD、tall减少,大鼠活动时间减少。空白组大鼠海马中5-HT_(1A)R水平较高而5-HT_(2A)R水平较低;造模后模型组大鼠海马中5-HT_(1A)R水平下降而5-HT_(2A)R水平上升;给药后西药组和酸枣仁汤组大鼠海马中5-HT_(1A)R水平上升而5-HT_(2A)R水平下降。结论:酸枣仁汤能调节大鼠海马中5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R的表达,从而改善睡眠剥夺大鼠睡眠状态,效果与舒乐安定相当。     

酸枣仁汤对失眠大鼠大脑c-fos及c-jun含量的影响

目的:通过对失眠大鼠进行治疗,探讨酸枣仁汤对失眠的机理和疗效。方法:雌性SPF级别SD系列大鼠40只,随机分正常组、对照组、西药组和中药组,每组10只。对照组、西药组和中药组分别给予生理盐水、安定和酸枣仁汤煎剂灌胃。一周后,对照组、西药组、中医组腹腔注射对氯苯丙氨酸,48h后,采用免疫组化的方法检测大鼠大脑内的c-fos和c-jun。含量。结果:与正常组对比,所有失眠大鼠大脑内的大脑内的c-fos和c-jun均升高(P<0.05);酸枣仁汤能够改善失眠,降低失眠大鼠大脑内大鼠大脑内c-fos和c-jun(P<0.05)。结论:酸枣仁汤可能是通过调节大脑内c-fos和c-jun的表达来治疗失眠,保护大脑,是治疗失眠的理想方法。     

电针“智三针”对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马CA1区突触相关蛋白表达的影响

目的:观察电针"智三针"对血管性痴呆(VaD)大鼠学习记忆及海马CA1区突触后致密物-95(Psd-95)和突触囊泡膜蛋白(Syp)表达的影响,探讨电针"智三针"调控神经元突触可塑性从而改善VaD学习记忆的可能机制。方法:将48只造模成功的大鼠随机分为VaD模型组、尼莫地平组、电针智三针组,每组16只,采用改良Pulsinelli四血管阻断法(4-VO)制作VaD大鼠模型,另取12只未造模大鼠为假手术组。Morris水迷宫检测各组大鼠行为学,免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区Psd-95和Syp阳性细胞表达,蛋白质印迹法检测大鼠海马CA1区Psd-95和Syp蛋白的表达情况。结果:与假手术组比较,VaD模型组大鼠在2 d后逃避潜伏期明显延长,而第三象限游泳时间和跨越平台次数明显减少(P<0.05);与VaD模型组比较,电针智三针组大鼠逃避潜伏期缩短、跨越平台次数增加(P<0.05)。与假手术组比较,VaD模型组大鼠海马CA1区Psd-95与Syp蛋白表达量明显减少(P<0.05);与VaD模型组比较,电针智三针组与尼莫地平组大鼠海马CA1区Psd-95与Syp蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论:电针"智三针"可能通过增加海马CA1区Psd-95和Syp的表达,调控海马CA1区突触可塑性,减少神经元突触丢失,从而达到改善VaD大鼠学习记忆的作用。     

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠视交叉上核c-fos及nNos表达的影响

目的:研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠视交叉上核c-fos及nNos表达的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组、慢性睡眠剥夺模型组、舒乐安定组以及酸枣仁汤组。用透射电镜方法观察大脑下丘脑视交叉上核部位形态学改变,免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠视交叉上核c-fos、nNos表达的变化,采用RT-PCR法检测大鼠视交叉上核c-fos、nNos的表达。结果:与环境对照组相比较,慢性睡眠剥夺模型组c-fos活性明显升高(P0.05),nNos明显升高(P0.05),脂褐素(Lipo)增多增大,扩张肿胀的高尔基体(Golgi)囊泡明显增多;与慢性睡眠剥夺模型组比较,酸枣仁汤组c-fos的表达显著下降(P0.05),nNos明显下降(P0.05),脂褐素显著减少减小。结论:酸枣仁汤能够调控大脑视交叉上核c-fos、nNos的表达,有效调节老年睡眠剥夺大鼠的昼夜节律。     

酸枣仁汤对小鼠试验性急性肝衰竭的影响

目的：研究酸枣仁汤对小鼠试验性急性肝衰竭的影响。方法：雄性昆明小鼠,给予D-半乳糖胺(D-Gal-N)和脂多糖(LPS)同时腹腔注射,制备小鼠急性肝衰竭模型；并于造模前2 h,治疗组分别给予相应药物灌胃,正常、模型组给予蒸馏水灌胃。比较各组小鼠的24 h存活率,血清转氨酶水平,肝脏组织病理学改变,血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的水平,肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶［NOS包括总一氧化氮(T-NOS)和诱生型一氧化氮(iNOS)］的水平。结果：D-Gal-N/LPS可以导致小鼠急性肝衰竭；酸枣仁汤可以提高小鼠存活率,减轻肝脏病变程度,降低血清转氨酶活性及TNF-α,IL-1β的浓度,增加肝脏组织中SOD,GR的活性,降低NOS的活性及MDA,NO的浓度。结论：酸枣仁汤可减轻D-Gal-N/LPS所致的急性肝衰竭,提高小鼠的存活率,其作用机制可能与它影响睡眠从而影响炎性细胞因子(如TNF-α,IL-1)的释放和机体氧化能力的改变有关。     

酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠认知功能及海马NA,GABA,5-HT的影响

目的:观察复方酸枣仁汤(SZRT)对睡眠剥夺(SD)大鼠认知功能及海马NA,GABA,5-HT含量的影响。方法:行为学筛选合格的雄性大鼠50只分为对照组、睡眠剥夺组、酸枣仁汤(SZRT)21.0g/kg,10.50g/kg,5.25g/kg剂量组,建立睡眠剥夺大鼠动物模型,进行7d连续睡眠剥夺,1d1次,Y-型电迷宫测定学习记忆,Elisa法检测海马中去甲肾上腺素(NA),γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)的含量。结果:与睡眠剥夺组相比,SZRT 21.0g/kg组大鼠的学习记忆的能力改善,NA的含量降低,GABA和5-HT含量升高。结论:酸枣仁汤(SZRT)可改善睡眠剥夺大鼠认知功能,与改变单胺类递质作用有关。     

电针对魏一凯二氏大鼠抑郁模型大鼠海马CA1区突触可塑性及5-羟色胺转运体蛋白的影响

目的：观察电针对WKY(Wistar Kyoto)抑郁大鼠行为学、海马CA1区突触可塑性、5-HTT蛋白表达的影响。方法：本实验选取10 只雄性Wistar 大鼠为正常组（Control）,30 只雄性WKY 大鼠随机分成模型组（Model）、电针组（EA）和假针组（Sham EA）。通过糖水偏好实验（SPT）、旷场实验（OFT）和强迫游泳实验（FST）进行行为学测试。采用电生理场电位实验,检测电针对抑郁模型大鼠海马CA1区LTP的作用,即对突触可塑性的影响。并使用Western blot方法检测大鼠海马CA1区5-HTT蛋白表达。结果：Model组糖水偏好比低于正常组（P < 0.01）,EA组糖水偏好比明显高于Sham EA组（P < 0.05）。OFT中,与正常组相比较,Model组中央运动时间,总运动时间,中央运动距离,总运动距离,垂直站立次数均减少,且差异有统计学意义。与Model组相比,电针EA组的中央运动时间和总运动时间明显增加（P < 0.05）。FST中,与正常组相比较,Model组大鼠的不动时间明显增加（P < 0.05）。与Sham EA组和Model组相比较,EA组的不动时间明显缩短（P < 0.05）。Sham EA和Model组LTP均诱导失败,EA治疗后两个脑区均可成功诱导出LTP。Model组兴奋性突触后场电位（Fieldexcitatory postsynaptic potential, fEPSP）斜率明显低于Control组（P < 0.001）,与Sham EA组相比,EA组fEPSP斜率明显升高（P < 0.001）。与Control组相比,Model组5-HTT蛋白的表达显著增高P < 0.001）。与Sham EA相比较,EA组5-HTT的表达降低（P < 0.001）。结论：电针能够改善WKY大鼠的抑郁样行为,下调海马CA1区5-HTT蛋白的过表达,从而修复受损的海马突触可塑性,这可能是电针治疗抑郁症的机制之一。     

浅谈学习记忆中的突触可塑性

学习记忆是脑的基本功能,学习记忆作为脑内高级活动之一,其实质是信号转导和处理问题,而一切功能的产生都是以特定结构为基础的。人类大脑包含数千亿神经元。突触是指一个神经元与另一个神经元的连接点,它是神经元间信息传递的基础。     

逍遥散对慢性应激大鼠海马突触体结构可塑性的影响

目的:观察逍遥散对多相性应激大鼠海马CA3区神经元结构的影响,探究逍遥散抗应激损伤大鼠海马神经突触结构可塑性的机制。方法:W istar大鼠随机分为空白组、模型1组、模型2组、治疗1组、治疗2组,每组10只。采用慢性多相性应激模型,透射电镜观测比较各组大鼠CA3区神经突触超微结构变化。结果:模型1组及模型2组大鼠海马神经元突触的数密度与面密度较空白组均有明显降低(P<0.01),突触连接带的平均面积则无明显变化(P>0.05),而治疗1组与治疗2组大鼠海马神经元突触的数密度与空白组相比则无明显差异(P>0.05);面密度与突触连接带的平均面积则均有所减小。与模型1组相比,两个治疗组大鼠海马神经元突触的数密度与面密度均明显增大。结论:多相性应激可以损伤大鼠的神经突触结构,影响突触间的相互连接。而逍遥散则能减少应激对原有的突触及突触连接的损伤,促进新的突触与突触连接的形成。     

PCPA致大鼠NG2细胞的变化,NG2与GABA的共存关系及酸枣仁汤的干预作用研究

目的:探讨大鼠脑内五羟色胺(5-HT)含量下降后皮质部分NG2细胞的变化,NG2细胞与星形胶质细胞(Ast)、γ-氨基丁酸(GABA)的共存关系及酸枣仁汤的干预作用.方法:根据随机数字表法将雄性SD大鼠分为7d正常组、7d对照组、7d对氯苯丙氨酸(PCPA)组、15 d正常组、15 d对照组、15 d PCPA组、酸枣仁汤(SZRD)组、PCPA+SZRD组,各组大鼠给予相应处理.取大脑皮质前额叶,采取免疫荧光双染法测定大鼠皮质NG2细胞、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、GABA的表达量及NG2/GFAP、NG2/GABA共存定位情况.结果:与7d对照组比较,7 d PCPA组大鼠皮质NG2细胞、GFAP蛋白表达量增加(P＜0.01),GABA蛋白表达量下降(P＜0.05);与15 d PCPA组比较,PCPA+SZRD组大鼠皮质NG2细胞、GFAP蛋白表达量下降(P＜0.01),GABA表达量上升(P＜0.05);NG2细胞与GABA在同一区域表达较多,而与GFAP在同一区域表达较少.结论:5-HT系统的失调能激活皮质NG2细胞、Ast,抑制GABA的表达,NG2细胞可能与Ast、GABA共同影响大脑皮层兴奋性来调节睡眠,酸枣仁汤可能通过5-HT系统调控NG2细胞、Ast、GABA来参与皮层活动的神经调节.     

酸枣仁汤对原发性失眠患者睡眠质量及神经内分泌的影响

目的:评价酸枣仁汤对原发性失眠(PI)患者睡眠质量的影响,探讨其可能机制.方法:招募116例PI患者,随机分为酸枣仁汤组和安慰剂组,分别接受酸枣仁汤(制成颗粒)和安慰剂治疗12周,于基线,治疗4周、8周、12周时采用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评估睡眠质量,监测治疗前后晨8点与夜0点血清促肾上皮质激素释放激素(C...     

酸枣仁汤组分配方对高架十字迷宫大鼠海马NE、5-HT的影响

目的观察酸枣仁汤组分配方SZRT1、SZRT6对高架十字迷宫大鼠海马去甲肾上腺素、5一羟色胺的影响,探讨其抗焦虑作用的机理及物质基础。方法采用国际上通用的高架十字迷宫焦虑动物模型,观察酸枣仁汤组分配方对大鼠行为学的影响,用高效液相色谱法测定大鼠海马去甲肾上腺素、5一羟色胺的含量。结果与对照组比较,组分配方SZRT6组大鼠海马5-HT的含量显著降低（P〈0．05）,SZRT1l组亦降低,但无显著性差异;SZRT1和SZRT6组大鼠海马NE含量均呈不同程度降低,但无显著差异。结论在抗焦虑方面,酸枣仁汤组分配方与地西泮具有某些相同的作用机制,降低海马5-HT的含量可能是地西泮、SZRT6发挥抗焦虑作用的机制之一。其所含的多糖和黄酮类成分可能是降低海马5一HT含量的物质基础。     

酸枣仁汤对血虚小鼠睡眠的影响

目的:研究酸枣仁汤对血虚小鼠睡眠质和量的影响。方法:采用综合放血法建立血虚小鼠模型,1.2g/mL酸枣仁汤灌胃2周,利用小鼠睡眠生物解析系统,记录脑电波和肌电波,分析睡眠觉醒量、不同持续时间睡眠觉醒波出现次数和睡眠时相转换等参数。结果:与对照组比较,在给药结束后第1d,酸枣仁汤减少模型小鼠白天的觉醒总量,增加白天的非快动眼睡眠(NREM)睡眠总量,减少昼夜觉醒与NREM睡眠之间转换次数,改变持续时间为60-110S,120-230S和240-470S睡眠觉醒波出现次数,至给药结束第3d仍减少觉醒总量和增加NREM睡眠总量。结论:酸枣仁汤通过增加白天的NREM睡眠量和减少觉醒和睡眠之间转换次数来治疗血虚失眠。     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠行为学及海马BDNF和TrKB影响的实验研究

目的:观察酸枣仁汤抑郁模型大鼠海马BDNF和TrKB表达的影响。方法:孤养与CUMS模型结合完成大鼠抑郁模型的复制,测定大鼠的糖水消耗情况,并在实验结束后采用免疫组化方法,观察酸枣仁汤对抑郁模型大鼠海马BDNF和TrKB的表达的影响。结果:抑郁模型大鼠糖水消耗量明显减少,海马BDNF和TrKB表达明显降低,酸枣仁汤高剂量组可上调二者的表达。结论:酸枣仁汤可以增加BD-NF和TrKB的表达,促进神经元生存,具有抗抑郁作用。