半夏泻心汤及其不同拆方对抗生素诱导的菌群紊乱幼鼠结肠黏膜屏障的影响

目的 观察半夏泻心汤及其不同拆方对抗生素诱导的菌群紊乱幼鼠结肠黏膜屏障的影响。方法 70只SPF级雄性Balb/c幼鼠随机抽取10只作为空白组,其余幼鼠予混合抗生素灌胃诱导肠道菌群紊乱,连续灌胃14 d,将造模幼鼠随机分为模型组、阳性对照组、全方组、辛开组、苦降组及甘补组,每组10只。阳性对照组予双歧杆菌四联活菌片溶液0.68 g/kg灌胃,全方组、辛开组、苦降组及甘补组分别予9.1、3.19、1.82、4.1 g/kg半夏泻心汤全方及相应拆方组药液灌胃,空白组、模型组灌胃等体积生理盐水,连续14 d。末次灌胃后收集幼鼠粪便,采用16S rDNA测序分析肠道菌群结构。腹腔注射脂多糖(10 mg/kg)诱导炎症反应,ELISA检测粪便清蛋白含量,HE染色观察结肠黏膜形态,Western blot检测结肠组织紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达。结果 与空白组比较,模型组幼鼠肠道菌群结构明显改变,结肠绒毛结构发育落后、隐窝不明显、腺体萎缩,粪便清蛋白含量明显增加(P<0.01),Occludin和ZO-1蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,全方组和不同拆方组肠...     

从肠道菌群论半夏泻心汤证治

半夏泻心汤证由虚、寒、热三证组成.虚主要为脾胃运化水湿能力减弱,气属阳,脾气虚,则脾阳不足,寒从内生,形成中焦虚寒证.肠道菌群紊乱,线粒体能量代谢障碍,则细胞因缺乏能量致功能受损,表现为脾气虚.另外,肠道菌群紊乱,有益菌减少,影响肠道消化、吸收、代谢功能,导致脾胃功能低下.热证是半夏泻心汤证最明显特征,其形成机制是肠道...     

半夏泻心汤及其拆方对慢性胃溃疡大鼠溃疡灶形态变化的影响

目的：对半夏泻心汤进行拆方研究，观察其对慢性胃溃疡（CGU）大鼠模型的治疗作用，以便进一步指导临床实践。方法：制备大鼠慢性胃溃疡模型，检测溃疡灶肉芽组织及溃疡灶表面黏膜厚度等指标的变化。结果：半夏泻心汤及其拆方各组对慢性胃溃疡大鼠模型溃疡灶肉芽组织及溃疡灶表面黏膜生长均有不同程度的影响。拆方各组中，部分药组之间呈协同的作用趋势，部分药组之间呈制约趋势。结论：半夏泻心汤能够促进溃疡灶肉芽组织的良好生长，促进溃疡灶表面黏膜的生长覆盖，从而达到促进溃疡愈合、降低愈合后溃疡复发的治疗作用。拆方分析显示，本文甘补组药物在促进溃疡愈合、降低愈合后溃疡复发方面发挥着主要作用，而全方组则表现出最佳效果，不仅印证了张仲景组方用药的合理性和科学性，也为进一步认识中医“辛开苦降甘补法”的作用机制提供了一定的实验依据。同时，对于指导临床治疗消化性溃疡中医用药以及新药开发等，都具有一定的参考价值。     

半夏泻心汤拆方研究现况

半夏泻心汤出自张仲景《伤寒论》,由半夏、干姜、黄连、黄芩、人参、炙甘草、大枣7味中药组成,主治寒热错杂之痞证,后世广泛应用于各种消化系统疾病,取得较好的临床疗效。本方由辛开、苦降、甘调3组药物构成,其配伍规律在经方中极具代表性。近年来,半夏泻心汤的拆方研究正受到中医界越来越多的重视,现将研究成果综述如下。     

半夏泻心汤及其拆方对老年胃动力作用机理实验研究

目的半夏泻心汤及其拆方对老年胃动力作用的机理.方法选取老年大鼠40只,随机分为5组,分别以半夏泻心汤辛开、苦降、甘润和全方组相应药液及生理盐水灌胃,检测胃内残留率、血浆胃动素、胃泌素和一氧化氮含量,观察半夏泻心汤不同配伍对上述指标的影响.结果甘润组和全方组血浆胃动素、胃泌素和一氧化氮含量显著升高,胃内残留率显著降低(P＜0.05或P＜0.01);苦降组血浆胃泌素和一氧化氮含量较对照组有所增高(P＜0.05),但血浆胃动素、胃内残留率与对照组比较没有显著性差异(P＞0.05);辛开组血浆胃泌素和一氧化氮含量与对照组比较没有显著性差异(P＞ 0.05),血浆胃动素含量显著降低(P＜0.01),胃内残留率显著高于对照组(P＜0.05).结论半夏泻心汤全方组增加血浆胃动素、胃泌素和一氧化氮的含量,调节老年胃动力的作用最为显著,充分体现了经方的科学性、合理性和配伍严谨的特点.     

半夏泻心汤及其拆方对脾虚大鼠胃泌素和生长抑素的影响

目的:研究半夏泻心汤及其拆方对脾虚大鼠胃泌素(Gas)和生长抑素(SS)的影响。方法:采用苦寒泻下法制作脾虚模型,酶联免疫法检测脾虚大鼠血清胃泌素和生长抑素的含量。结果:苦味药组(4.4g/kg)、辛味药组(7.6g/kg)、辛苦药组(12.0g/kg)、全方组(20.0g/kg)都可以升高模型动物血清的胃泌素含量;辛味药组(7.6g/kg)、辛甘药组(15.6g/kg)、辛苦药组(12.0g/kg)、甘味药组(8.0g/kg)、全方组(20.0g/kg)可以降低模型动物血清生长抑素的含量。同时苦味药组、甘苦药组降低生长抑素以及辛甘药组、甘味药组、甘苦药组升高胃泌素的作用没有统计学意义。结论:半夏泻心汤及其拆方可通过促进胃泌素分泌,抑制生长抑素的分泌,改善脾虚模型大鼠的胃肠功能。     

半夏泻心汤及其拆方对应激性胃溃疡大鼠胆碱能神经元的影响

半夏泻心汤是历代医家治疗脾胃病的有效复方，也是一首适合于中药复方研究的经方。近10年来关于半夏泻心汤的实验研究不断取得进展。目前多采用慢性胃溃疡的动物模型探讨半夏泻心汤的配伍规律。由于导致溃疡的原因是多源的，各种溃疡的发病机制不一，植物神经功能紊乱在应激性胃黏膜损伤的发生中具有重要作用。     

从肠道菌群多样性探讨半夏泻心汤对PCOS大鼠胰岛素抵抗的影响

目的:探讨半夏泻心汤对多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome, PCOS)胰岛素抵抗(Insulin resistance, IR)模型大鼠肠道菌群的影响。方法:采用来曲唑连续灌胃制备多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS IR)模型,随机分成模型对照组、二甲双胍0.135 g/kg组、半夏泻心汤5.31 g/kg组以及半夏泻心汤+二甲双胍(5.31+0.135) g/kg组,另设正常对照组,连续灌胃28 d后称大鼠体质量、卵巢,计算子宫指数,观察卵巢组织病理学,检测血清性激素水平、胰岛素指数(HOMA-IR);用16s rDNA扩增子焦磷酸测序检测肠道菌群变化。结果:与正常对照组比较,模型对照组体质量、子宫指数明显升高,大鼠动情期紊乱,血清睾酮(T)含量、黄体生成素(LH)/促卵泡生成素(FSH)比值明显升高,HOMH-IR指数明显升高,血糖升高(P<0.05),大鼠肠道Chao、ACE指数明显降低,拟杆菌门/后壁菌门比值明显升高,普氏菌属丰度明显升高,苏黎世杆菌属、乳酸杆菌属、阿克曼氏菌属、双歧杆菌属丰度明显降低(P<0.05或P<0.01...     

探讨糖尿病胃轻瘫大鼠肠道菌群失衡致免疫功能失调的机制研究及半夏泻心汤的干预作用

目的:探讨糖尿病胃轻瘫大鼠肠道菌群失衡致免疫功能失调的机制研究及半夏泻心汤的干预作用,为治疗免疫相关性疾病提供一种治疗思路,拓宽半夏泻心汤使用范围及为中药复方免疫调节剂提供实验依据。方法:将造模成功的50只大鼠随机分为模型组、二甲双胍1.80 g/kg组、半夏泻心汤10.20、5.10、2.55 g/kg组,用16sRNA检测大鼠0.1g粪便中肠道益生菌与致病菌的数量;采用化学法检测血清中D-木糖、IgG、sIgA含量;用ELISA法检测IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α含量;采用免疫组化方法检测CD8表达分布。结果:与正常组相比,模型组大鼠肠推进率显著降低,空腹血糖、胃残留、血清D-木糖水平明显升高;肠道形态结构明显损伤,致病菌明显增多,益生菌明显减少,IgG、IL-6、IL-8、TNF-α、CD8水平明显升高,slgA、IL-10显著降低;与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组均能改善肠道微生态环境,促进益生菌的增殖,减少致病菌水平,调节免疫蛋白IgG、slgA及CD8表达,降低致炎因子,上调抗炎因子水平。结论:糖尿病胃轻瘫可导致高血糖、胃肠动力障碍,引起肠道菌群紊乱,降低肠道菌群多样性,损伤肠黏膜免疫屏障。半夏泻心汤能改善糖尿病胃轻瘫大鼠胃肠动力障碍,降低血糖,降低肠黏膜通透性;上调抗炎因子水平,促进益生菌生成,抑制有害菌群,减少肠道菌群对肠黏膜屏障损伤,调控肠道黏膜免疫应答。     

浅谈半夏泻心汤的基本配伍

中药的配伍,是根据病情需要,把两种以上的药物配合在一起使用,例如临床上常常当归、白芍药同用,苍术、川厚朴同用,等等.中药的这种配伍是有规律的,不是随便凑合的.现在我们通过一个常用成方半夏泻心汤浅谈一下中药的基本配伍.     

基于定量蛋白质组学技术探究半夏泻心汤对慢性胃炎大鼠影响的作用机制

目的 应用定量蛋白质组学探究半夏泻心汤抗慢性胃炎的生物学基础。方法 实验大鼠分为正常组、慢性胃炎模型组、半夏泻心汤组,采用56%乙醇灌胃法,4周建立慢性胃炎模型,给药治疗后,取胃组织进行苏木素-伊红（HE）染色,观察各组大鼠胃组织病理损伤及改善情况,提取胃组织蛋白质,运用串联质谱标签（TMT）定量蛋白质组学研究各组之间的差异蛋白情况,采用蛋白免疫印迹法（Western blot）验证关键的差异表达蛋白。结果 从大鼠胃组织中鉴定出4 452个蛋白,其中模型组与正常组差异蛋白为318个。经半夏泻心汤干预后,与模型组相比,共有258个差异蛋白,这些差异蛋白主要富集于cell killing,nucleoid及hijacked molecular function等。京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集发现,作用涉及到三羧酸循环,steroid hormone biosynthesis,retrograde endocannabinoid等信号通路,同时还涉及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）和核转录因子（NF）-κB信号通路。Western blot验证发现14-3-3 theta,干细胞因子（SCF）,肌腱蛋白C（TN-C）,半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）,细胞间黏附分子-1（ICAM-1）,线粒体丙酮酸载体（Mpc1）和免疫相关蛋白GTP酶4（GIMAP4）可能是该方治疗慢性胃炎的关键蛋白。结论 半夏泻心汤治疗慢性胃炎的作用机制涉及到能量代谢、激素调节、炎症反应及免疫过程,利用差异蛋白质组学寻找的靶点蛋白及其涉及的信号通路可能是半夏泻心汤治疗慢性胃炎的生物学基础。     

半夏泻心汤对应激性胃溃疡大鼠生长抑素的影响

目的探讨半夏泻心汤对应激性胃溃疡的作用机理。方法采用水浸一束缚应激造成大鼠急性胃溃疡模型,然后把动物分为正常组、模型组和全方组及各拆方组,观察半夏泻心汤及各拆方组对其治疗作用及对各组大鼠脑组织和胃组织生长抑素（SS）表达（免疫组化反应）的影响,为半夏泻心汤配伍规律提供科学实验研究的参考。结果与正常组（脑组织：0．0305±0．0024、胃组织0．0282±0．0037）比较,模型组（脑组织0．0237±0．0056、胃组织0．0171±0．0053）SS的表达明显下降。与模型组比较,甘补药组（脑组织0．0314±0．0027、胃组织0．0219±0．0059）和全方组（脑组织0．0294±0．0050、胃组织0．0288±0．0027）SS的表达增强,全方组的效果最明显。结论半夏泻心汤通过增加SS的表达发挥治疗作用,全方组配伍合理．     

半夏泻心汤调节胃电节律失常大鼠胃窦Cajal间质细胞自噬的作用

目的：通过观察半夏泻心汤对于胃电节律失常大鼠胃窦组织中Cajal间质细胞(ICCs)自噬的影响,探究其保护作用及调节机制。方法：32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、半夏泻心汤组(24.68 g·kg^-1)及多潘立酮组(2.7 mg·kg^-1)。通过“隔日进食+饮稀盐酸”法建立胃电节律失常大鼠模型,给予半夏泻心汤及阳性药多潘立酮进行干预。每周记录大鼠体质量;生物机能实验系统记录大鼠胃电活动;透射电子显微镜观察大鼠胃窦组织超微结构变化;免疫荧光双标法检测大鼠胃窦组织中酪氨酸激酶受体(c-kit)/自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)共表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃窦组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3)B、p62蛋白表达,并计算LC3BⅡ/Ⅰ。结果：与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻(P<0.01);胃电主频率、主功率下降(P<0.01);电镜下观察到胃窦ICCs超微结构损伤,细胞器变性坏死,可见少量自噬泡;免疫荧光双标结果显示,胃窦组织中c-kit阳性表达减低,Beclin1阳性表达增加;We...     

半夏泻心汤加减联合维得利珠单抗治疗克罗恩病寒热错杂证的临床疗效

目的：评价半夏泻心汤加减联合维得利珠单抗（VDZ）治疗活动期中重度克罗恩病（CD）寒热错杂证的临床疗效及对肠道菌群的影响。方法：将80例患者按随机数字表法分为对照组和观察组，每组各40例。对照组，采用VDZ治疗；观察组，在对照组治疗的基础给予半夏泻心汤加减，每日1剂；连续治疗14周，并随访至52周。于治疗前、治疗后、随访结束时评估CD活动指数（CDAI）评分、CD简化内镜评分（SES-CD）、炎症性肠病患者生活质量问卷（IBDQ）和寒热错杂证评分。评估治疗前后血红蛋白（HGB）、血细胞比容（HCT）、白蛋白（ALB）、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)和粪便钙卫蛋白（FC）。检测治疗前后肠道菌群。进行安全性评价。结果：与本组治疗前比较，治疗后两组患者CDAI、SES-CD和寒热错杂证评分下降（P<0.05）,IBDQ评分升高（P<0.05）；与本组治疗前比较，随访结束时两组CDAI、SES-CD和寒热错杂证评分升高（P<0.05）,IBDQ评分下降（P<0.05）。与对照组治疗结束和随...     

半夏厚朴汤及其拆方改善慢性间歇性低氧小鼠机体铁代谢

目的 观察半夏厚朴汤（BHF）及其拆方对慢性间歇性低氧（CIH）小鼠机体铁代谢的调节作用。方法 42只雄性C57BL/6N小鼠随机分为常氧对照组（Con）、CIH模型组（CIH）、全方组（CIH+BHF）、苏叶组（CIH+苏叶）、厚朴组（CIH+厚朴）、行气组（CIH+厚朴、苏叶）、化痰饮组（CIH+半夏、茯苓、生姜）,每组6只。连续CIH暴露和灌胃给药处理21 d后检测相关指标。比色法检测血清铁,HE染色观察肝脏及十二指肠形态结构、Perls’染色观察肝脏、脾脏、十二指肠铁含量,Western Blot及免疫组织化学染色检测肝脏铁调素（hepcidin）、转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TfR1)、铁泵蛋白1(ferroportin 1,FPN1)、铁蛋白轻链（ferritin light chain,FTL）蛋白表达。结果 与Con组比较,CIH组小鼠血清铁含量降低,小肠黏膜（十二指肠）与肝脏组织结构损伤,肝脏、小肠铁沉积增加（P<0.05）,脾脏铁含量减少（P<0.05）,肝脏TfR1、FTL、hepcidin蛋白表达升高（P<0....     

半夏泻心汤加减治疗围绝经期抑郁症的机制作用

目的:观察半夏泻心汤加减治疗围绝经期抑郁症的临床疗效及对5-羟色胺(5-HT)和促炎因子的影响。方法:将139例患者随机按数字表法分为对照组69例和观察组70例。对照组口服替勃龙片,2.5 mg/次,1次/d;口服盐酸帕罗西汀片,20 mg/次,1次/d。观察组西药治疗同对照组,并内服半夏泻心汤加减,1剂/d。两组疗程均为连续治疗8周。进行治疗前后汉密尔顿抑郁量表17项(HAMD-17),Zung氏抑郁自评量表(SDS),汉密尔顿焦虑量表(HAMA),改良Kupperman(KI),肝郁脾虚证和围绝经期综合征生活质量评定量表(MENQOL)评分;检测治疗前后5-HT,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和脑源性神经营养因子(BDNF),进行不良反应量表(TESS)评价。结果:治疗后观察组HAMD-17和SDS评分均低于对照组(P<0.01);观察组抑郁症疗效优于对照组(Z=2.074,P<0.05);观察组抑郁程度轻于对照组(Z=2.157,P<0.05);观察组患者的HAMA,KI和肝郁脾虚证评分均低于对照组(P<0.01);观察组围绝经期综合征严重程度轻于对照组(Z=2.046,P<0.05);观察组MENQOL量表血管舒缩症状和心理症状2个维度评分和总分均低于对照组(P<0.05);治疗后观察组5-HT高于对照组,BDNF高于对照组(P<0.01),TNF-α,IL-1β水平均低于对照组(P<0.01);观察组TESS评分低于对照组(P<0.01)。结论:在常规西医治疗的基础上,加服半夏泻心汤加减能进一步改善抑郁、焦虑和围绝经期综合(PMS)症状,提高生活质量,并可抑制促炎因子,增强5-HT,BDNF表达,且无不良事件发生。     

基于《伤寒论》探讨半夏泻心汤类方治疗溃疡性结肠炎的机制及研究进展

溃疡性结肠炎（UC）是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的治疗方法。中医药防治此类病证由来已久,仲景曾在《伤寒论》原文中多次论及下利、泄利与久痢、肠风、脏毒等与UC相类似的症状,论述了相应病机与治法,并提出有效的治疗方剂,为后世运用经方辨治UC奠定了基础。近年来,研究发现中医药对防治UC具有独特的优势,不仅能够有效缓解UC患者的症状,还能在很大程度上改善患者的生活质量。研究还发现,无论是从网络药理学、临床观察亦是动物实验,半夏泻心汤类方作为一种中药复方,在治疗UC方面取得了显著的疗效。经过大量的实验探索,研究发现半夏泻心汤类方在治疗UC的原理上与细胞炎症因子、肠道微生物、免疫反应、相关的信号传导途径和细胞焦亡等因素有紧密的关联。本文将会对半夏泻心汤类方在治疗UC中的作用原理做一个全面的概括,包括其理论根源、药物组成和作用机制等各个方面的研究,旨在给临床实践提供更加稳固的理论支持。     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的影响及肠黏膜屏障的保护作用机制

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的药效,并探究黄芩汤在UC中是否能调节肠道菌群,发挥屏障保护作用。方法：雄性Balb/c小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、黄芩汤高(20 g·kg^-1)、中(10 g·kg^-1)、低(5 g·kg^-1)剂量组、菌群干扰组、菌群干扰模型组、菌群干扰黄芩汤组(黄芩汤,20 g·kg^-1)。灌胃抗生素(杆菌肽200 mg·kg^-1、万古霉素200 mg·kg^-1)8 d构建菌群干扰模型,自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d构建UC模型,黄芩汤给药治疗7 d。实验结束后处死小鼠,取血、结肠及粪便,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中紧...     

不同配伍对半夏泻心汤皂苷类成分的肠菌代谢影响研究

目的:比较肠道菌群对半夏泻心汤伞方组、甘补组及其单味人参和甘草中皂苷类成分代谢的影响.方法:利用体外肠道菌群厌氧孵育的技术,研究全方组、甘补组及其单味药提取液与大鼠肠道菌群37℃厌氧环境下培养,采集不同孵育时间点样品,利用LC-MS/MS分析方法进行各原型物及代谢产物的快速分离和含量测定,并求其降解速率K,比较不同配伍组的代谢差异和特征.结果:肠道菌群可将皂苷类成分转化为其代谢产物.根据SPSS单因素方差比较得知不同配伍组中皂苷成分代谢存在差异,甘草酸的降解速率甘补组＞全方组＞单方组(P＜0.05);Rb1在全方中降解最慢;Re的降解速率全方组＞单方组＞甘补组(P＜0.05);Rg1可由Re代谢产生,后降解为Rh1,且降解速率单方组＞甘补组＞全方组(P＜0.05).结论:全方、甘补组对人参皂苷肠菌代谢具有不司的诱导或抑制作用,全方组可以抑制Rb1,Rg1的代谢,促进甘草酸代谢为甘草欠酸,利于吸收发挥药效.复方配伍对Rd,Rg3的肠菌代谢没有影响.     

碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎模型肠道菌群变化及其潜在影响

目的:研究碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎(KOA)模型肠道菌群变化情况,探究肠道菌群与KOA的潜在联系。方法:将SPF级大鼠分为空白对照组和KOA组,通过膝关节局部注射碘乙酸钠制造大鼠KOA模型。通过16SrDNA检测大鼠粪便中的肠道菌群变化情况,蛋白印记法检测结肠组织中NF-κB和TNF-α蛋白表达,RT-qPCR检测结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达情况,苏木精-伊红染色观察结肠黏膜通透性变化,苏木精-伊红染色观察关节滑膜和软骨组织的病理变化情况。ELISA检测血液上清中LBP,IL-1β,TNF-α及IL-10炎症因子水平。结果:与空白对照组相比,从KOA组中筛选出明显变化的肠道菌群,以Akkermansia和疣微菌门变化最为显著,结肠黏膜通透性增加,结肠组织中NF-κB p65及TNF-α蛋白表达升高,结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达升高,血液中促炎因子LBP,IL-1β及TNF-α蛋白含量升高,抗炎因子IL-10蛋白含量降低。结论:KOA病理状态下肠道菌群发生变化,结肠炎症反应增强,结肠炎症反应或许在提高全身炎症反应水平、促进与肠道菌群相关的KOA的病理进程中起到重要的桥梁作用。