人参皂苷Rg_2对体外培养的海马缺氧神经元的预防保护作用

为观察人参皂苷Rg_2对缺氧大鼠海马神经元的保护作用,选取Wistar大鼠海马神经元体外培养14d,随机分为对照组、5μmol/L尼莫地平组(尼莫地平组)、Rg_20.025mmol/L组(Rg_21组)、Rg_20.050mmol/L组(Rg_22组)。将相应药物加入到培养液中孵育4h后,建立急性缺氧细胞模型。采用流式细胞仪检测各组神经元缺氧后的细胞凋亡情况,用酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,并对所得结果加以比较。结果发现,离体条件下人参皂苷Rg_2可显著增强海马神经元的活性,降低其凋亡率及死亡率;提高细胞上清液中超氧化物歧化酶的活性,降低MDA及NO的含量,且呈量效比例关系。以上结果提示,人参皂苷Rg_2在体外有抗缺氧损伤的作用。其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡、提高抗氧化酶的活力、清除自由基而发挥作用。     

灵芝多糖对阿尔茨海默病大鼠海马组织形态学及抗氧化能力的影响

目的观察灵芝多糖（GLP）对阿尔茨海默病（AD）大鼠海马组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量以及空间学习记忆能力等的影响。方法双侧海马内一次性注射β-淀粉样多肽25～35片段（Aβ25-35）制作大鼠AD模型,腹腔注射灵芝多糖水溶液,1周后进行Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力变化。采用分光光度法测定大鼠海马组织SOD活性和MDA含量。采用透射电镜观察海马神经元的超微结构变化。以及灵芝多糖对上述各指标的影响。结果灵芝多糖能明显改善AD模型大鼠低下的空间学习记忆能力。显著提高模型大鼠海马组织SOD活性及降低MDA含量,而且灵芝多糖能明显改善模型大鼠脑组织海马CA1区神经元的退行性变化。结论灵芝多糖能提高海马内抗氧化酶SOD活性,降低丙二醛MDA含量,改善海马CA1区神经元的退行性变化。对老年性痴呆大鼠学习记忆能力可能有增强和提高作用。     

β-淀粉样蛋白对衰老模型大鼠脑海马神经元的毒害作用

研究β－淀粉样蛋白（β－AP）对衰老大鼠海马神经元的影响。采用D－半乳糖（D－gal)建立衰老动物模型，海马内微注射β－AP，检测各组大鼠Y－迷宫分辨学习和一次性被动回避反应的变化，并测定海马超氧化物歧化酶（SOD）活性，丙二醛（MDA)含量，Na^ -K^ -ATP酶活性和海马线粒体膜流动性。可见β－AP加上D－gal组大鼠学习记忆能力，与只用β－AP或D－gal组比较有显著性差异；与β－AP或D－gal组比较Na^ -K^ -ATP酶活性显著降低，MDA含量显著增加，海马线粒体膜流动性显著降低。结果表明，β－AP与D－gal联合使用可导致衰老大鼠脑海马自由基损伤加重，学习记忆能力显著减弱。     

白藜芦醇对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠海马神经元的保护作用

目的 探讨白藜芦醇对亚急性衰老小鼠海马神经细胞的保护作用.方法 D-半乳糖颈背部皮下注射制备亚急性衰老小鼠模型,设正常对照组、对照组、高低剂量处理组和阳性对照组.第3周始,处理组分别给予白藜芦醇15、45mg/kg(低、高剂量)灌胃,对照组给予生理盐水或DMSO溶液灌胃.8周后,检测小鼠血清、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.制作石蜡切片,尼氏染色观察小鼠海马CA1区形态结构,免疫组化检测P53蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 各组小鼠海马组织形态结构无明显变化;与对照组相比,白藜芦醇45 mg/kg体重组小鼠血清和脑组织中SOD活性明显升高,MDA含量明显下降;白藜芦醇45 mg/kg体重组小鼠海马CA1区P53蛋白表达阳性细胞较对照组小鼠减少,但各组均无明显的凋亡细胞.结论 白藜芦醇能增强亚急性衰老小鼠的抗氧化功能,降低亚急性衰老小鼠海马CA1区神经元P53蛋白的表达.     

构建全脑缺血与鞘内置管结合的SD大鼠模型

背景：脑缺血性损伤可导致神经元不可逆性功能丧失,而鞘内用药是目前临床镇痛及神经保护类药物的常用施药途径。大脑损伤后可于鞘内注入神经保护类物质进行干预的实验动物模型是相关神经保护类物质研究的基础。 目的：构建全脑缺血与鞘内置管相结合的动物模型。 方法：采用Pulsinelli四血管阻断全脑缺血模型结合鞘内置管术,将实验大鼠进行四血管阻断与鞘内置管,另设置假手术组不进行血管阻断。术后除假手术组外,一部分大鼠注射虎纹蜘蛛毒素Ⅰ (1.0 µL/kg),设为虎纹蜘蛛毒素Ⅰ组;另一部分大鼠注射等量生理盐水,设为模型组。缺血再灌注4 d后用尼氏染色观察脑组织海马CA1区锥体神经元结构的变化。 结果与结论：假手术组可见大量锥体神经元,排列整齐紧密,胞浆染色清晰,呈蓝色,胞浆内尼氏体均匀丰富。虎纹蜘蛛毒素Ⅰ组锥体神经元排列较整齐,稀疏分布,出现少量胞体浓缩、深染,细胞体积缩小等特征。模型组可见锥体神经元排列散乱,层次不完整,稀疏分布,出现大量胞体浓缩、深染,细胞体积缩小等特征。虎纹蜘蛛毒素Ⅰ组相比模型组大鼠海马CA1区锥体神经元受损程度变小。结果提示,实验成功构建了全脑缺血与鞘内置管相结合的大鼠模型。     

大蒜素抑制脑缺血-再灌注诱导的海马神经元凋亡及其机制初探

目的：探讨大蒜素抗脑缺血-再灌注诱导的海马神经元凋亡作用及其机制。方法： 采用大鼠全脑缺血-再灌注模型，应用流式细胞仪检测海马神经元凋亡率；采用比色法测定海马组织NO和MDA含量及SOD活性。结果： I-R组大鼠海马神经元凋亡率、海马组织NO和MDA含量明显高于sham组，而SOD活性显著低于sham组；静脉给予大蒜素预处理可抑制上述变化，且呈剂量依赖性效应。结论： 大蒜素具有抑制全脑缺血-再灌注诱导的海马神经元凋亡作用及抗氧化作用；大蒜素的抗氧化作用可能是其抑制海马神经元凋亡的重要机制之一。     

右美托咪定对快速眼动睡眠剥夺大鼠学习记忆障碍的影响

目的:探讨右美托咪定对快速眼动(REM)睡眠剥夺大鼠学习记忆障碍的影响。方法:将64只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(control)、快速眼动睡眠剥夺组(RSD)、右美托咪定组(DEX)和右美托咪定干预的快速眼动睡眠剥夺组(RSD+DEX)。每组16只。应用改良多平台水环境法建立大鼠快速眼动睡眠剥夺模型,通过腹腔内注射给予大鼠右美托咪定,采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,采用尼氏染色法检测大鼠海马神经元形态学改变,同时应用试剂盒检测大鼠海马组织匀浆中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与RSD组大鼠相比,RSD+DEX组大鼠逃避成功潜伏期趋于缩短(P 0. 05),穿越平台次数与目标象限时间百分比均明显增加(均P 0. 05),MDA含量减少,SOD活性均增加(P 0. 05),海马CA1区神经元排列较规则,尼氏小体明显增加。结论:右美托咪定能够改善REM睡眠剥夺大鼠学习记忆损伤,这可能与右美托咪定缓解REM睡眠剥夺大鼠海马神经细胞氧化应激和恢复受损细胞有关。     

实验性2型糖尿病大鼠心肌线粒体的氧自由基损伤

目的:研究糖尿病大鼠心肌线粒体氧自由基异常的机制。方法:测定正常对照组和链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠心肌线粒体中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、细胞色素C(Cyt-C)和线粒体钙含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性,并用透射电镜观察病理学改变。结果:模型组心肌线粒体NO、NOS、MDA、钙和胞浆细胞色素C均显著高于对照组(P0.05);线粒体细胞色素C和SOD均显著低于对照组(P0.05)。电镜下,模型组肌原纤维排列紊乱,部分融解消失,线粒体肿胀变性,数目增多。结论:氧自由基异常及脂质过氧化作用参与糖尿病心肌的线粒体损伤;Cyt-C和线粒体钙的改变也是糖尿病心肌线粒体损伤的因素。     

N-乙酰半胱氨酸对慢性间歇缺氧大鼠海马神经元凋亡及氧化应激的影响

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对慢性间歇缺氧(CIH)模型大鼠海马组织氧化应激及海马神经元凋亡的影响。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为慢性缺氧组、NAC治疗组及正常对照组3组，每组10只。采用化学比色法测定海马组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平，同时应用免疫组化方法检测海马CA1 区磷酸化JNK(p-JNK)表达水平，应用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡率。结果:NAC治疗组 MDA水平低于CIH组（1.71±0.43 vs 1.37±0.26，P＜0.05）、SOD活性高于CIH组（44.94±14.01 vs 57.66±14.07，P＜0.05），p-JNK表达水平低于CIH组 （0.53±0.10 vs 0.39±0.16，P＜0.05），海马神经元凋亡率显著低于CIH组（0.32±0.18 vs 0.20±0.11，P＜0.05）。结论:NAC能抑制慢性间歇缺氧导致的氧化应激，从而影响JNK信号转导通路，减少海马神经元凋亡。     

间歇缺氧对血管性痴呆大鼠认知能力的影响及其可能机制

目的： 研究间歇缺氧（IH）对血管性痴呆（VD）大鼠认知能力的影响及其可能机制。方法: 48只Wistar大鼠分为假手术组(对照组)、IH组、VD组和VD+IH组。双侧颈总动脉结扎法制备VD模型,4周后,IH组、VD+IH组给予IH处理4周;通过生物化学法检测海马超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）的含量,TUNEL法检测海马神经元凋亡,RT-PCR检测bcl-2和bax mRNA,Y形迷宫测试大鼠学习、记忆能力。结果: 与对照组相比,IH组海马MDA含量增多而SOD活性降低;VD组bcl-2和bax mRNA表达增加;IH组和VD组均出现明显的CA1区神经元凋亡和迷宫测试中大鼠电击次数的增加（P<0.05）。VD+IH组与其它3组相比,海马MDA增多及SOD减少更为明显,bcl-2/bax mRNA比值显著降低,海马CA1区神经元的凋亡比例（32.83%±6.13%）高于IH组（9.91%±3.17%）、VD组（15.28%±3.71%）和对照组（2.03%±1.42%）,迷宫测试中大鼠电击次数增加（P<0.05）。结论: IH通过加重大鼠海马氧化应激损伤,促进VD大鼠海马凋亡相关基因的表达,加重了海马神经元的迟发性死亡和VD大鼠的认知损害。这可能是慢性脑缺血病人伴随睡眠呼吸暂停低通气综合征后,认知损害加剧的重要机制之一。     

环氧化酶2在铝负荷致大鼠海马神经元损伤中的作用

目的:研究环氧化酶2(COX-2)在铝盐致大鼠海马神经元损伤中的作用。方法:原代海马神经元培养7 d,予以铝盐负荷(终浓度200 μmol·L^-1)建立大鼠海马神经元损伤模型,以COX-2特异性干扰腺病毒(MOI=100)转染神经元,Western blotting检测COX-2蛋白表达水平,酶化学法检测海马神经元超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率及MTT值,倒置荧光显微镜观察海马神经元病理形态变化。结果:COX-2特异性干扰腺病毒转染的神经元COX-2蛋白表达下降,SOD活性、MDA含量、LDH漏出率、MTT值以及大鼠海马神经元的形态和结构未见明显异常变化,但其明显提高了铝盐负荷基础上的海马神经元存活率和SOD活性,显著降低了LDH漏出率和MDA含量,并改善了铝盐负荷后神经元的病理学形态。结论:海马神经元COX-2表达的适度沉默,不会影响海马神经元的形态和功能,但对于铝负荷导致的神经元损伤有保护作用。     

普洱茶膏抗小鼠衰老的保健作用

目的:观察普洱茶膏对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗衰老的保健作用。方法:昆明种清洁级小鼠30只随机分成3组:正常对照组、D-半乳糖模型组及普洱茶膏组;D-半乳糖模型组及普洱茶膏组每天给予皮下注射5%D-半乳糖0.25ml·10g-1,持续6w。第2w后分别给予生理盐水及普洱茶膏(60mg·ml-1)0.5ml灌胃,连续干预4w后,测定血清、肝组织中SOD和MDA水平,并计算肾脏指数、脾脏指数和肝脏指数。结果:与对照组相比,模型组血清MDA含量明显升高(P0.05),而血清SOD活性以及肾脏、脾脏和肝脏指数均显著降低(P0.05);与模型组相比,普洱茶膏组可明显降低MDA含量(P0.05),并明显升高血清、肝组织中SOD的含量(P0.05)以及肾脏、脾脏和肝脏指数(P0.05)。结论:普洱茶膏具有良好的抗小鼠衰老的保健作用。     

雄激素对自由基损伤后海马神经元的保护作用

目的:探讨雄激素对培养大鼠海马神经元自由基损伤后的神经保护作用.方法:取新生大鼠进行海马神经元培养,用不同浓度的H_2O_2造成海马神经元的损伤模型,观察细胞的活力并测量超氧化物歧化酶(SOD)值,一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的含量,预先给予睾酮后(24h)观察细胞的活力及SOD值,NO及MDA的含量变化,同时观察不同时间给予睾酮后细胞的活力.结果:给予H_2O_2后,神经元的活力明显下降,预先进行睾酮培养后细胞的活力明显升高,NO和MDA的生成降低,SOD值升高,睾酮给予后短时间内可以引起神经保护作用.结论:雄激素对H_2O_2造成的神经元损伤具有明显的保护作用,发挥作用为短时间的作用模式,可能与自由基引起的凋亡相关.     

Protective effects of Rg2 on hypoxia-induced neuronal damage in hippocampal neurons

We investigated the neuroprotective effects of Rg(2) in anoxic cultured hippocampal neurons of newborn rats. The cells were divided into a control group, nimodipine group (5 μmol/L), Rg(2) (0.025 mmol/L), and Rg(2) (0.05 mmol/L) group. The apoptosis rate of hippocampal neurons was measured by flow cytometry with staining of PI. The intracellular calcium ion [Ca(2+)]i was observed with fluorospectrophotometer determined by fluorescent probe Fluo-2/AM. The contents of MDA and NO and the activities of SOD in the supernatants of cells were determined by biochemical methods. The results demonstrated that Rg(2) reduced the hypoxia-induced apoptosis, decreased the calcium overload in neurons, increased the activities of SOD, and decreased the contents of MDA and NO in the supernatants of cells. Our study suggests that Rg(2) has a neuroprotective effect against hypoxia-induced neuronal damage in hippocampal neurons mediated by anti-apoptosis, blocking calcium over-influx into neuronal cells, eliminating the free radicals, and increasing the activities of anti-oxidative enzymes to inhibit the oxidative damages caused by anoxic.     

远志皂苷元对H2O2诱导的大鼠海马神经元损伤的影响及其机制

目的: 观察远志皂苷元(senegenin, Sen)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的SD大鼠海马神经元损伤的影响并探讨其作用机制。方法: SD大鼠海马神经元培养至第6 d,随机分为正常组、H₂O₂组、Sen+ H₂O₂ 组和Sen组,药物干预后检测细胞存活率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用 Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化,荧光定量PCR(real-time PCR)检测神经元凋亡相关基因 bcl-2和bax 的表达,进一步采用Western blotting观察Bcl-2和Bax蛋白表达,酶荧光活性检测试剂盒测定caspase-3的活性改变。结果: 与正常组相比,H₂O₂组细胞存活率降低。与H₂O₂组相比,20 μmol/L Sen+ H₂O₂ 组细胞存活率升高,SOD活性升高,MDA含量下降,并且远志皂苷元能够上调bcl-2 mRNA表达、下调bax mRNA表达,降低caspase-3活性,Western blotting结果进一步表明Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达下降,各指标均有显著差异(P<0.05)。结论: 远志皂苷元对H₂O₂处理的海马神经元有一定保护作用,其机制可能与远志皂苷元增强海马神经元抗氧化能力、调节细胞凋亡相关蛋白从而抑制凋亡有关。     

大鼠海马和颞叶一氧化氮合酶阳性神经元在学习记忆时的表达

目的　对获得空间辨别性学习记忆大鼠的海马结构和颞叶皮质内一氧化氮合酶 (NOS)免疫阳性神经元系统的观察 ,为一氧化氮 (NO)在学习记忆活动中的作用提供形态学依据。方法　以经水迷宫训练获得空间辨别性学习记忆的大鼠为模型组 ,建立游水对照组和空白对照组。用免疫组化的方法观察 3组大鼠海马和颞叶的NOS阳性神经元的形态学特征及测定免疫反应阳性产物的光密度值 (OD )。结果　 (1)NOS阳性神经元在 3组大鼠海马和颞叶呈散在分布。在海马CA1、CA2、CA3、CA4及龄状回 (DG)都有少量分布 ,颞叶以Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ层分布为主。神经元胞体形态有锥体形 ,圆形或椭圆形 ,梭形3种。 (2 )模型组大鼠海马和颞叶皮质NOS阳性神经元较对照组明显增多。 (3)其免疫反应阳性产物的OD值也较对照组明显增大。结论　NOS阳性神经元形态发生了可塑性变化 ,参与了学习记忆     

山莨菪碱缓解幼龄鼠缺氧缺血性脑组织形态和功能损伤

目的　探讨山茛菪碱在缺氧缺血性脑损伤幼龄鼠脑组织形态和功能损伤中的调控作用。 方法　50只幼龄大鼠均分为健康对照组、模型组、模型加药组（尾静脉注射山莨菪碱2.5、5、10 mg/kg）共5组。脑组织干湿重法检测脑指数和脑含水率,HE染色观察脑组织病理损伤,TUNEL染色观察脑海马神经元周围组织细胞凋亡情况,Western blot检测脑组织中Bax/Bcl-2、caspase-9、caspase-3、BDNF和NGF蛋白表达水平,RT-PCR检测BDNF和NGF mRNA表达水平,试剂盒检测SOD、MDA和GSH-Px含量。 结果　与健康对照组比较,模型组幼龄鼠脑组织形态和神经功能损伤严重（P<0.05）。与模型组比较,5 mg/kg和10 mg/kg山茛菪碱组脑指数和脑含水率降低（P<0.05）,脑组织病理损伤好转,脑海马神经元周围组织细胞凋亡减少,Bax/Bcl-2、caspase-9、caspase-3表达水平降低（P<0.05）,BDNF和NGF表达水平增高（P<0.05）,MDA含量降低,SOD和GSH-Px含量增高（P<0.05）。 结论　山茛菪碱能够缓解缺氧缺血性脑损伤幼龄鼠脑组织形态和功能损伤。     

麦牙醇对大鼠不完全脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的　研究麦芽醇 (Maltol,MT)对大鼠海马组织不完全性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法　Wistar大鼠双侧颈总动脉夹闭 30min,造成不完全脑缺血 ,松开动脉夹即为再灌注。 2 4只大鼠随机分为三组 :(1 )假手术对照组 (SOC) ,相同手术操作 ,但不夹闭动脉 ;(2 )缺血再灌注组 (IR) ,再灌注 1h ;(3)麦芽醇治疗组 (MT) ,夹闭动脉前后静脉注射 70 0 μmol·L- 1 麦芽醇生理盐水。 3组动物均于再灌注后测海马组织中的丙二醛 (MDA)值、超氧化物歧化酶 (SOD)和ATP酶活性。结果　缺血再灌注组MDA明显升高 (P <0 0 1 ) ,SOD、ATP酶活性明显降低 (P <0 0 1 ) ,MT能降低升高的MDA值 ,改善ATP酶活性 (P <0 0 1 )。但不能改善SOD活性。结论　麦芽醇能清除氧自由基 ,减少脂质过氧反应 ,改善ATP酶活性 ,从而减轻海马组织缺血再灌注损伤。