黄杆菌属连续耐药性监测结果分析及临床意义

目的了解我院黄杆菌的分离和耐药情况。方法收集我院1999年1月～2008年12月10年间疗养员伤病员标本中分离的黄杆菌鉴定和K—B法药敏试验。同时选择43株脑膜炎败血黄杆菌、16株产吲哚黄杆菌和10株黏金黄杆菌共69株菌株。用琼脂稀释法检测15种抗生素的最低抑菌浓度。结果10年间共栓出黄杆菌1128株，占所有检出革兰阴性菌的5．0％，其中脑膜炎败血黄杆菌占88．3％，产吲哚黄杆菌占8．0％，黏金黄杆菌占29％，芳香黄杆菌占0．6％，其他黄杆菌占0．2％。黄杆菌属除了喹诺酮类抗生素的MIC50和MIC90较低以外，其余的抗生素均很高。结论黄杆菌属对多种抗生素耐药，并且不同种类的黄杆菌对不同的抗生素耐药性有很大的差异。     

临床分离黄杆菌金属β内酰胺酶及其基因型研究

目的了解临床分离黄杆菌（Chryseobacterium spp）耐药特性和金属β内酰胺酶（metallo-β-lactamase，MBL）的产酶率及其基因型。方法采用琼脂稀释法检测50株黄杆菌对18种抗生素的MIC，三纸片增效法、改良三维试验法进行MBL表型检测，PCR检测及序列分析确定MBL的基因型。接合试验检测耐药基因是否具有可转移性，等电聚焦电泳（IEF）测定β内酰胺酶等电点（pI）。结果50株黄杆菌对碳青霉烯类、氨基糖甙类及多种β内酰胺抗生素呈高度耐药，亚胺培南、美罗培南的耐药率均达82．0％，但利福平和喹诺酮类药物表现出很强的抗菌活性。表型检测33株细菌产MBL，产酶率为66．0％。MBL基因型分析结果，20株产吲哚黄杆菌携带bla IND，其中bla IND-1型9株、bla IND-2型10株、bla IND-LIKE型1株。14株脑膜炎败血黄杆菌中检出17种MBL基因，分别为blaB1 2株、blaB2 5株、blaB3 4株、blaB114株、bla GOB-1bla 1株；GOB-101株。接合试验均为阴性，质粒DNA未检出MBL基因。携带bla IND-1^-的菌株（C-5）经IEF、MBL表型检测及β内酰胺酶初筛均为阴性。结论黄杆菌具有严重的多重耐药现象，同时具有很高的MBL检出率。bla B、bla GOB和bla IND可能位于黄杆菌染色体上，不能通过细菌质粒等可移动基因元件发生不同菌株和菌株间传播。bla IND-1可能存在蛋白质的不表达或低水平表达。     

脑膜炎败血黄杆菌产金属β-内酰胺酶的检测及基因型的研究

目的了解杭州市脑膜炎败血黄杆菌的流行及产金属β-内酰胺酶的情况并对其基因型进行研究。方法对100株分离自4所综合性医院的多重耐药脑膜炎败血黄杆菌,用三维试验、改良三维试验和2-巯基丙酸抑制试验检测金属β-内酰胺酶,用Bla-B和GOB的通用引物对表型试验阳性的菌株进行聚合酶链反应(PCR)和测序分析金属β-内酰胺酶的基因型。并用脉冲场凝胶电泳对其中的菌株进行同源性分析。结果用三维试验、改良三维试验和2-巯基丙酸抑制试验检测到61株菌株产金属β-内酰胺酶,用Bla-B和GOB通用引物进行扩增和测序,有60株菌株扩增到金属β-内酰胺酶,其中有51株检测到BlaB基因型,有36株检测到GOB基因型。检测到的Bla-B基因型主要为BlaB-1、2、3、5和BlaB-11这5种类型;检测到的GOB基因型主要为GOB-1、2、4、6和GOB-85种类型。其中产生一种金属β-内酰胺酶的有33株,产两种金属β-内酰胺酶的有27株。浙大医学院附属一院和附属二院主要是BlaB-3和BlaB-11型为主,浙大医学院邵逸夫医院主要是GOB-4和GOB-8为主,杭州市中医院主要是GOB-8基因型。其中1菌株表型试验检测阳性而未能检测到基因型,可能为一种新的基因型有待今后进一步研究。经同源性分析,杭州市中医院的菌株具有很好的一致性,而与其他医院的结果完全不同。结论杭州市多重耐药的脑膜炎败血黄杆菌的主要耐药机制之一是产金属β-内酰胺酶,基因型主要为Bla-B和GOB型。4所医院流行的基因型均不相同。而杭州市中医院的脑膜炎败血黄杆菌具有一定的同源性,区别于其他3所医院,表明系院内感染菌。     

脑膜败血性金黄杆菌感染的分布及耐药性分析

目的了解脑膜败血性金黄杆菌感染的分布和耐药特征及与其产β-内酰胺酶的关系，为临床抗感染治疗提供用药参考。方法对2004年12月至2007年12月住院患者送检的各种标本中分离到的86株首个脑膜败血性金黄杆菌分离株在临床感染的分布情况，对临床常用的17种抗生素的药敏结果和产β-内酰胺酶的情况进行回顾性调查统计分析。用Sensititre微生物鉴定药敏系统鉴定菌株；双纸片协同试验筛选产露聚糖结合凝聚素（MBL）菌株及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株；药敏试验使用Sensititre微生物鉴定药敏系统上机检测和纸片琼脂扩散法检测加做的药敏试验。结果脑膜败血性金黄杆菌在各类标本中痰液的分离频率最高，为81．4％；脑膜败血性金黄杆菌由重症监护病房送检标本分离率最高，为72．1％；呼吸内科病房次之。该菌耐药现象严重，耐药率最低的抗生素是万古霉素。其产MBL率为37．2％，产ESBLs率为24．4％。结论万古霉素对脑膜败血性金黄杆菌保持良好的抗菌活性，脑膜败血性金黄杆菌的高耐药率与高产酶率有关。其临床上引起感染时，应根据病情，参照实验室药敏结果选用合适的抗菌药物。     

医院感染脑膜炎败血性金黄杆菌的分布及耐药性分析

目的了解我院脑膜炎败血性金黄杆菌的分布和耐药性。方法统计分析我院近5年来分离的73株脑膜炎败血性金黄杆菌的耐药情况；用双纸片协同试验筛选金属β-内酰胺酶。结果脑膜炎败血性金黄杆菌产金属β-内酰胺酶为37．0％，主要分布在重症监护（ICU）病房，哌拉西林／他唑巴坦、万古霉素和利福平耐药率较低，分别为45．2％、40．6％和28．5％。结论脑膜炎败血性金黄杆菌表现为多重耐药，临床医师应根据药敏试验合理选择抗菌药物。     

金黄杆菌临床分离株β-内酰胺酶及耐药性分析

目的了解临床分离的金黄杆菌耐药特性和β-内酰胺酶产生情况。方法琼脂稀释法检测50株金黄杆菌对18种抗生素的MIC,改良的三纸片增效法和四槽、五槽三维试验法检测金黄杆菌金属β-内酰胺酶(MBL)、超广谱β-内酰胺酶(ES-BL)和AmpC酶。结果50株金黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为92%、88%,氨曲南为92%,阿米卡星和β-内酰胺抗生素的耐药率均大于40%,显示具有高度耐药性。加替沙星、左氧氟沙星和利福平的MIC90分别为4、8、8μg/ml,表现出很强的抗菌活性。环丙沙星、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦也具有良好的抗菌活性。50株金黄杆菌MBL、ES-BL、AmpC酶产酶率分别为68.0%、26.0%、0.0%。脑膜败血性金黄杆菌中产MBL73.7%,同时产MBL和ESBL42.1%,单产ESBL5.3%。产吲哚金黄杆菌MBL产酶率80.0%。结论金黄杆菌具有高度的多重耐药现象和MBL、ESBL高检出率,应该合理使用抗生素,保护易感人群,准确、及时地做好病原学诊断和耐药性监测并给予正确的治疗。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况及其耐药性监测

目的调查产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的革兰阴性杆菌的耐药状况。方法采用确证试验法检测产ESBLs的革兰阴性杆菌。结果187株革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌24株，检出率为12．83％；它们对β-内酰胺类抗生素呈现极高的耐药性。结论产ESBLs的革兰阴性杆菌具有极高的耐药性及多重耐药性。检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况并探讨它们的耐药谱，有利于指导临床合理使用抗生素。     

黄杆菌产β内酰胺酶检测及耐药性分析

目的探讨本院5年中黄杆菌属医院内感染耐药现状,分析其耐药原因,检测黄杆菌产β内酰胺酶(BLA)及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)情况,为耐药性提供科学理论依据,以指导临床合理用药。方法黄杆菌属的分离和鉴定用全自动微生物分析系统VITEK-32及配套革兰阴性杆菌鉴定卡GNI 卡(V1316)和药敏卡GNS-143(V4628);以纸片法和双纸片协同法检测其产BLA和ESBLs。结果共检出黄杆菌253株,脑膜败血性黄杆菌181株,产吲哚黄杆菌63株,粘金黄杆菌9株。对头孢哌酮/舒巴坦,哌拉西林/他唑巴坦耐药率在<7.4%以下,是该菌治疗的首选药物,对亚胺培南、头孢噻肟、头孢曲松、阿米卡星耐药率均>90%。黄杆菌属细菌是产BLA和ESBLs较强菌株之一,占总菌株的80%以上。结论黄杆菌已成为院内感染的主要菌种之一,且对多种抗菌药物耐药。黄杆菌属大多产BLA和ESBLs酶,并对BLA类抗生素高度耐药,临床上应引起重视。     

黄杆菌产β内酰胺酶检测及耐药性分析

目的探讨本院5年中黄杆菌属医院内感染耐药现状,分析其耐药原因,检测黄杆菌产β内酰胺酶(BLA)及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)情况,为耐药性提供科学理论依据,以指导临床合理用药.方法黄杆菌属的分离和鉴定用全自动微生物分析系统VITEK-32及配套革兰阴性杆菌鉴定卡GN1+卡(V1316)和药敏卡GNS-143(V4628);以纸片法和双纸片协同法检测其产BLA和ESBLs.结果共检出黄杆菌253株,脑膜败血性黄杆菌181株,产吲哚黄杆菌63株,粘金黄杆菌9株.对头孢哌酮/舒巴坦,哌拉西林/他唑巴坦耐药率在＜7.4%以下,是该菌治疗的首选药物,对亚胺培南、头孢噻肟、头孢曲松、阿米卡星耐药率均＞90%.黄杆菌属细菌是产BLA和ESBLs较强菌株之一,占总菌株的80%以上.结论黄杆菌已成为院内感染的主要菌种之一,且对多种抗菌药物耐药.黄杆菌属大多产BLA和ESBLs酶,并对BLA类抗生素高度耐药,临床上应引起重视.     

脑膜炎败血黄杆菌体外抗药活性及金属β内酰胺酶基因型研究

目的 了解临床分离脑膜炎败血黄杆菌（Chryseobacterium meningosepticum）耐药特性和金属β-内酰胺酶（MBL）产酶率及基因型。方法 采用琼脂稀释法检测25株细菌对抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC），三纸片增效法、改良三维试验法检测MBL表型；并采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析，确定MBL基因型。利用接合试验监测耐药基因的可转移性，等电聚焦电泳（IEF）法测定β-内酰胺酶等电点（pI）。结果 25株脑膜炎败血黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率达72．0％，而对利福平和加替沙星、左氧氟沙星的耐药率均低于16．0％。14株细菌检出产MBL，产酶率为56．0％。MBL全编码基因扩增及序列分析显示，14株细菌共检出17个编码MBL的基因，分别为blaB1，2株；blaB2，5株；blaB3，4株；blaB11，4株；blaGOB-1，1株；blaGOB-10，1株。接合试验均为阴性。结论 脑膜炎败血黄杆菌具有严重的多重耐药现象，并具有高MBL检出率。MBL基因可能位于脑膜炎败血黄杆菌的染色体上，不能通过细菌质粒等可移动基因元件发生菌株和菌种间传播。     

痰标本中产超广谱β-内酰胺酶菌株的药敏分析

[目的] 了解从痰标本中分离到的革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶(BSBLs)及产超广谱β-内酰胺酶菌株的药敏情况。[方法] 收集2001年1月至2002年6月从我院呼吸道感染患者中分离出的革兰阴性杆菌共543株，用双纸片协同试验检测超广谱β-内酰胺酶阳性株，并用K-B琼脂扩散法做药敏试验。[结果] 196株肺炎克雷伯杆菌，278株大肠埃希杆菌，69株阴沟肠杆菌。共检出产BSBLs137株，检出率为25．23％，其中肺炎克雷伯杆菌BSBLs阳性率为28．06%；大肠埃希杆菌BSBLs检出率为23．74％；阴沟肠杆菌BSBLs检出率为23．19%，除亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他哇巴坦外，产BSBLs株对其它抗生素的耐药率明显高于非产BSBLs株。[结论] 呼吸道感染患者中大肠埃希杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌产BSBLs情况严重，而且BSBLs株多为多重耐药株。亚胺培喃、美洛培喃、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦是治疗由产ESBLs菌引起感染的有效抗生素。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况及其耐药性监测

目的调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌的耐药状况.方法采用确证试验法检测产ESBLs的革兰阴性杆菌[1].结果187株革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌24株,检出率为12.83%;它们对β-内酰胺类抗生素呈现极高的耐药性.结论产ESBLs的革兰阴性杆菌具有极高的耐药性及多重耐药性.检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况并探讨它们的耐药谱,有利于指导临床合理使用抗生素.     

产金属酶金黄杆菌对药敏谱的影响

目的分析2007年5月～2008年4月我院临床分离的产吲哚金黄杆菌和脑膜败血性金黄杆菌产金属酶(MBL)及对常见抗菌药物的耐药情况。方法临床标本经分离培养后,用Vitek-2-compact分析仪及配套药敏卡对菌株进行鉴定及药敏分析,同时体外试验检测产MBL情况。结果产吲哚金黄杆菌和脑膜败血性金黄杆菌临床分离率分别为1.07%和0.91%,且对多种抗生素耐药,耐药率较高的有替卡西林、替卡西林/克拉维酸、丁胺卡那霉素、氨曲南、头孢曲松、头孢唑肟、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、四环素、亚胺培南及美洛培南,产吲哚金黄杆菌和脑膜败血性金黄杆菌MBL产生率达到68.3%(41/60)。结论产吲哚金黄杆菌和脑膜败血性金黄杆菌MBL产生率高,且对多种抗生素耐药,实验室应加强金属酶的检测。     

阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶、诱导酶的检出与耐药相关性的分析

目的：了解阴沟肠杆菌超广谱β－内酰胺酶和诱导酶的产生和分布情况。并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法：用纸片扩散确证法和相邻纸片法对104株阴沟肠杆菌进行超广谱β－内酰胺酶及诱导酶的检测，用VITEK全自动药敏分析系统和K－B琼脂扩散法检测其对20种抗生素的耐药性。结果：104例阴沟肠杆菌中，检出超广谱β－内酰胺酶阳性株77株，占74％，诱导酶阳性株26株，占25％，13株两种酶同时阳性。超广谱β－内酰胺酶阳性株主要集中在几个病区，诱导酶阳性株则无此倾向，104株菌对多种怀素高度耐药，产超广谱β－内酰胺酶株的耐药率明显高于非产酶株，产诱导酶株的耐药率反而低于非产酶株。结论：阴沟肠杆菌产酶情况和耐药性均十分严重。多重耐药的主要原因是由于菌株产生超广谱β－内酰胺酶，产酶株对三代头孢的体外敏感试验不能正确反映临床的治疗效果。实验室应加强阴肠杆菌产酶情况的检测，治疗产酶阴沟肠杆菌引起的感染，首选亚胺培南，其次为舒普深，任何情况下应避免使用三代头孢。     

革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶及其耐药分子机制的研究

目的分析革兰阴性杆菌所产β-内酰胺酶的表型及基因分型,并研究其耐药分子机制。方法用纸片扩散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）表型检查,头孢西丁三维试验进行AmpCβ-内酰胺酶的表型检查,纸片协同试验筛选产金属β-内酰胺酶（metallo-beta-lactamase,MBL）菌株;用多重PCR技术扩增β-内酰胺酶基因并进行DNA测序;用PCR技术扩增基因元件整合子、插入序列ISEcp1B和转座子tnpU;用MIC药敏法分析革兰阴性杆菌的药物敏感性。结果①革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为24.28%（42/173）,主要由单产ESBLs引起,占13.29%,β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.86%;②整合子检出49株占28.32%,ISEcp1B插入序列检出29株占16.76%,转座子tnpU检出28株占16.18%,基因元件阳性的菌株大多数β-内酰胺酶表型为阳性;③β-内酰胺酶阳性菌株对抗生素的耐药率显著高于阴性菌株。结论革兰阴性杆菌可携带多种β-内酰胺酶,基因元件广泛分布于革兰阴性杆菌中,可能在多重耐药机制中起重要作用。     

产超广谱β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)铜绿假单胞菌的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法收集辽宁省抚顺市矿务局总医院2013-07—2014-07临床标本中分离出的铜绿假单胞菌株,使用PHOENIX100全自动细菌鉴定,使用MIC法进行抗生素敏感性测定。结果 122株铜绿假单胞菌共检出产ESBLs菌珠27株,阳性率为22.1%。结论产ESBLs铜绿假单胞菌对常用抗生素有着更强的耐药性,应加强对超广谱β-内酰胺酶的检测,建议在进行超广谱β-内酰胺酶检测时,首选亚胺培南。     

检测产超广谱β-内酰胺酶耐药基因寡核苷酸芯片的研制及应用

目的探讨用寡核苷酸芯片检测革兰阴性杆菌耐产超广谱β-内酰胺酶抗生素耐药基因的可行性。方法制备了检测产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌寡核苷酸芯片。应用该寡核苷酸芯片检测16例临床革兰阴性杆菌耐药株,并与测序结果比较。结果提取的DNA产物随机引物标记后杂交,杂交结果差异无统计学意义。其结果与测序结果相符。结论寡核苷酸芯片可以推广应用到临床作为耐产超广谱β-内酰胺酶抗生素快速诊断的一种有效方法。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测与思考

[目的]了解肠杆菌科及非发酵菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的携带情况，为临床及时掌握和有效遏制细菌由于ESBLs而导致的耐药性提供实验依据。[方法]细菌的分离按全国临床检验操作规程第2版进行。细菌的鉴定主要采用仪器法（autoscan-4-DADE．U．S．A）。ESBLs的检测采用纸片扩散法初筛和确证，部分菌株辅以E．test法，以保证结果的准确性。[结果]2大类阴性杆菌1462株，产ESBLs的507株，阳性率35％；其中肠杆菌科细菌880株，产ESBLs309株，阳性率42％；此类菌中，大肠埃希菌和弗劳地枸椽酸杆菌产ESBLs最高，都在50％以上；肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌居第2，在45％以上；产酸克雷伯菌位于第3，达30％。非发酵菌523株，产ESBLs的126株，阳性率24％；这类菌中，脑膜炎败血性黄杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌产ESBLs最高，分别达56％和46％。[结论]2大类阴性杆菌产ESBLs都高，且有逐步增高的趋势。此外．2大类阴性杆菌比较，肠杆菌科细菌更易产ESBLs，P〈0．01；只有扩大ESBLs的检测面，与临床共同努力，才能减缓细菌耐药的进程。     

重症监护病房泌尿系感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因分析

目的了解重症监护病房（ICU）泌尿系感染产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型。方法收集2006年2月至8月从ICU中段尿培养中分离的20株产ESBLs的大肠埃希菌进行6种β-内酰胺酶基因的检测。结果20株菌中检出TEM基因11株（55％），CTX-M-1基因10株（50％），CTX-M-9基因3株（15％），SHV基因2株（10％），OXA-1基因1株（5％），OXA-10基因未检出。结论我院ICU泌尿系感染大肠埃希菌产ESBLs基因主要是TEM和CTX-M-1基因，其次为CTX-M-9和SHV基因，OXA-1基因阳性率低，而OXA-10基因未检出。     

肺炎克雷伯杆菌101株临床分布与耐药性分析

目的 分析医院感染肺炎克雷伯杆菌的临床分布及耐药情况,为减少院内肺炎克雷伯菌感染提供理论依据.方法 对2011年3月至2012年2月我院临床分离的101株肺炎克雷伯杆菌标本来源临床科室分布及对17种常用抗菌药物的耐药率进行统计;并对菌株进行超广谱β内酰胺酶检测;运用PCR法检测KPC、IMP、VIM及NDM-1耐药基因并测序.结果 101株肺炎克雷伯杆菌标本,来自痰87株,占86.14％;临床科室分布以高干科、神经内科为主各40株,各占39.60％;药敏结果显示我院肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南最敏感,敏感率为92.08％;其次是头孢替坦和头孢吡肟,敏感率分别为85.15％及80.20％;产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯杆菌70株,检出率为69.31％;耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌6株,其中4株检出KPC-2基因,未检出IMP、VIM及NDM-1耐药基因型.结论 在我院,产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯杆菌检出率较高;肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类抗生素可能与携带KPC-2有关,合理使用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生.