APP17肽对Aβ25—35诱导神经细胞凋亡保护作用

目的：通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ25－35诱发SH－SY5Y细胞凋亡是否有保护作用。并对其保护作用机制作进一步的探讨。方法：选用细胞形态观察，半定量LM－PCR DNA ladder Assay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17肽是否对Aβ25－35诱发SH－SY5Y细胞凋亡有保护作用；通过测定细胞MTT代谢率，共聚焦显微镜观察Aβ25－35和APP17肽对细胞内过氧化物含量，线粒体膜电位的影响以及Western Blotting观察细胞内凋亡诱导因子AIF及核转录因子NF－κB的表达情况，探讨了APP17肽的保护作用机制。结果：APP17肽可以明显改善Aβ25－35造成的细胞形态损伤，显著降低细胞凋亡比率；与Aβ25－35损伤组相比，APP17肽预孵育能明显提高细胞MTT代谢率，稳定线粒体膜电位，减少AIF的表达；有效降低Aβ25－35引起的细胞内过氧化物含量增高；并且使具有神经保护作用的核转录因子NF－κB表达增加。结论：APP17肽可以稳定线粒体功能，降低细胞内过氧化物含量，激活NF－κB并使其持续表达，对Aβ25－35诱导的SH－SY5Y细胞亡有比较明显的保护作用。     

牛蒡子苷元诱导人白血病细胞凋亡的作用及机制

牛蒡子来源于菊科两年生草本植物牛蒡子属牛蒡(Aictium lappa L.)的干燥成熟果实,为常用中药.有疏风散热、解毒透疹、利咽消肿等功效,现代药理学研究表明牛蒡子有抗病毒[1,5]、抗炎[2]、抗癌[3,4]、抑制热休克反应[6]等广泛的药理活性.其主要活性成分是牛蒡子苷元(arctigenin,ARG)[1].     

复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究

目的:研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽(Aβ)25-35(Aβ25-35)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:将SH-SY5Y细胞接种后分为对照、Aβ25-35(25μmol.L-1)和复方脑康胶囊(0.725g.mL-1)+Aβ25-35(25μmol.L-1)组。通过测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积,观察复方脑康胶囊对Aβ导致神经毒性的保护作用。结果:与对照组比较,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入复方脑康胶囊水提液后,可使上述指标恢复或接近正常。结论:复方脑康胶囊具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性。     

梓醇对乳胞素诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的探讨梓醇对蛋白酶体抑制剂乳胞素诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法梓醇10μmol·L-1预处理SH-SY5Y细胞1 h后,加入乳胞素10μmol·L-1继续处理24 h。倒置显微镜下观察细胞形态的变化,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化,酶联免疫吸附检测细胞内20S蛋白酶体含量。结果与正常对照组相比,梓醇10μmol·L-1对细胞存活率、形态和凋亡及20S蛋白酶体含量无显著差异;乳胞素10μmol·L-1组细胞存活率为(72.0±1.8)%,明显降低(P<0.05),细胞凋亡率为(64.7±2.6)%,明显增高(P<0.05)。Hoechst33258染色发现梓醇细胞核形态改变,出现凋亡小体;细胞内20S蛋白酶体含量降低60%,差异具有统计学意义(P<0.05)。与乳胞素10μmol·L-1组相比,梓醇10μmol·L-1预处理组细胞存活率(87.9±2.2)%明显增高(P<0.05),细胞凋亡率为(51.4±1.5)%,明显降低(P<0.05)。Hoechst33258染色发现,梓醇细胞核形态明显改善;细胞内20S蛋白酶体含量升高了1.9倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论梓醇对乳胞素诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与梓醇提高SH-SY5Y细胞内20S蛋白酶体含量有关。     

毛蕊花苷对MPP~+诱导的SHSY5Y细胞凋亡的保护作用

目的观察肉苁蓉提取物毛蕊花苷对MPP+诱导的SHSY5Y细胞损伤的影响。方法用MTT法检测细胞存活率,以流式细胞仪检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变化,以及细胞凋亡的发生,并用荧光酶标仪测定caspase-3的活性,蛋白印迹测定Bcl-2的表达水平。结果200μmol·L-1MPP+处理细胞24h降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达38.9%;细胞内活性氧水平及caspase-3的活性升高;而线粒体膜电位却明显降低。而预先给予0.1、1或者10mg·L-1浓度的毛蕊花苷处理细胞12h,可提高细胞存活率;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到29.5%,15.3%和8.6%,而且细胞内活性氧的水平明显降低,并可逐渐恢复线粒体的高能量状态;caspase-3的活性不断降低,Bcl-2的表达水平增高,并呈现一定的剂量依赖性。结论毛蕊花苷能抑制MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与其降低细胞内活性氧水平,维持线粒体膜电位的高能状态和抑制caspase-3的活性有关。     

松果菊苷对TNFα诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的　探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法　用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变化,并用荧光酶标仪测定caspase 3的活性。结果　100μg·L-1 TNFα处理细胞 36h显著降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达37%;细胞内活性氧水平及caspase 3的活性升高;而线粒体膜电位却明显降低,红 /绿荧光强度的比值由正常的 5 97降低为 0 35左右。而预先给予 1, 10或者 100mg·L-1浓度的松果菊苷处理细胞 2h,可提高细胞存活率;并可有效抑制DNAladder的发生;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25 9%, 18 3% 和 8 2%;激光共聚焦显微镜结果显示松果菊苷可明显抑制细胞内活性氧产生;并可逐渐恢复线粒体的高能量状态;caspase 3的活性不断降低,并呈现了一定的剂量依赖性。结论　松果菊苷能抑制TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平,抑制caspase 3的活性和维持线粒体膜电位的高能状态有关。     

黄芩苷对H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其对Trx表达的影响

目的探讨黄芩苷对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法采用体外培养细胞的方法,建立SH-SY5Y细胞H2O2损伤模型。分设药物组(50,100,200μmol/L)、H2O2损伤组、阴性对照组。采用MTT法检测细胞活力,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞的Trx表达的变化。结果同H2O2损伤组比较,黄芩苷能明显减轻H2O2引起的SH-SY5Y细胞的损伤,同时Trx表达升高。结论黄芩苷对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能是黄芩苷通过上调Trx表达,起到抗氧化作用,继而起到抗凋亡的作用。     

牛蒡苷元对鱼藤酮致大鼠脏器损伤的保护作用

目的观察鱼藤酮对帕金森模型大鼠各脏器的损伤,探讨牛蒡苷元对其缓解与治疗作用。方法采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液4周的方法建立大鼠帕金森模型,并灌胃给予不同剂量的牛蒡苷元进行干预治疗,观察各组大鼠脏器指数。采用HE染色法和电镜法观察大鼠脏器损伤程度,检测血清中丙氨酸转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、肌酐(creatinine,CRE)与尿素氮(urea nitrogen,BUN)的含量。结果模型组大鼠的肝指数和肾指数与正常组相比显著升高,血清中ALT与BUN的含量显著升高(P≤0.01),肝脏切片显示肝脏内存在着中央静脉扩张、慢性炎症细胞浸润等病理改变,肾皮质和髓质内均有慢性出血和炎性浸润,并可见肾小球固缩。牛蒡苷元治疗后肝肾指数显著降低,血清中ALT与BUN明显降低(P≤0.01),肝肾相应损伤有所缓解。结论牛蒡苷元能有效抑制鱼藤酮所致的大鼠肝脏和肾脏肿大,可缓解和治疗鱼藤酮所引起肝和肾的损伤。     

Liriodendrin对多巴胺所致SH—SY5Y细胞损伤的保护作用

目的用多巴胺诱导的SH—SY5Y细胞凋亡模型，研究从小蜡树皮提取的单体化合物liriodendrin的神经保护作用。方法应用MTT法检测liriodendrin对细胞存活率的影响。应用Annexin V-FITC与PI双染流式法检测firiodendrin对多巴胺诱导的细胞凋亡的影响。应用荧光染料DCFH—DA及Rhodamine123对细胞内活性氧簇（ROS）及线粒体膜电位（Δψm）进行了检测。此外，应用RT—PCR方法，对细胞内P53基因的转录水平进行了检测。结果在经过10^-8，10^-7，10^-6，10^-5及10^-4mol·L^-1浓度liriodendrin处理后，细胞存活率与多巴胺处理组相比有显著性提高。流式细胞术结果显示liriodendrin具有显著的抗细胞凋亡作用。同时liriodendrin可明显改善多巴胺引起的 Δψm下降，并可以逆转多巴胺诱导的ROS水平升高。此外，liriodendrin还可以降低多巴胺引起的P53基因转录水平的升高。结论Liriodendrin对多巴胺诱导的细胞损伤有明显保护作用。推测主要机制可能与其调节细胞氧化应激反应及细胞凋亡的信号转导通路有关，提示该化合物可以作为治疗退行性神经疾病如帕金森氏病等的候选化合物。     

类叶升麻苷对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的探讨类叶升麻苷对鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用及其机制。方法采用MTT法检测细胞存活率,以荧光染料Hoechst33342染色分析细胞核的形态学变化,用流式细胞仪定量分析细胞凋亡峰,以2,′7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)为标记探针检测细胞内活性氧的产生。结果①0.5μmol.L-1的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞48 h能引起细胞存活率的显著下降;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达47.39%;大部分细胞胞体皱缩,突起缩短消失或断裂;染色质皱缩、浓缩、断裂及形成凋亡小体;细胞内活性氧水平上升。②预先用盐生肉苁蓉提取物类叶升麻苷(10,20或40 mg.L-1)处理细胞6 h,可提高细胞存活率;明显改善鱼藤酮引起的细胞形态学变化;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25.87%,23.97%,10.45%;以DCFH-DA为标记探针检测到20 mg.L-1类叶升麻苷可明显抑制鱼藤酮引起的细胞内活性氧产生。结论类叶升麻苷能抑制鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平有关。     

黄芩苷通过上调SIRT1保护SH-SY_5Y氧化应激的损伤

观察黄芩苷(baicalin,BL)对过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用,并初步探讨SIRT1是否是其发挥作用的靶点及其可能机制。培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞加入黄芩苷(25、50及100μmol·L-1)预孵育12 h,加入H2O2(150μmol·L-1)作用24 h诱导产生氧化损伤,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、一氧化氮(NO)含量;并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及应用免疫荧光组化法检测Caspase-3的活性、RT-PCR检测SIRT1水平。结果表明,与H2O2模型组比较,黄芩苷(50和100μmol·L-1)组的细胞存活率增高(P<0.05、P<0.01),而LDH、NO的释放量及细胞凋亡数(P<0.05、P<0.01)、Caspase-3的表达量均减少;SIRT1 mRNA表达明显(P<0.05、P<0.01)。黄芩苷对H2O2损伤的SY5Y细胞具有保护作用,可减轻神经细胞的损伤、抑制细胞的凋亡,其作用机制可能是通过上调SIRT1水平而抑制Caspase-3表达实现的。     

人参水提物对MPP^＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的研究人参水提物（WEG）对四氢吡啶离子（MPP^＋）诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP＋致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予WEG干预。应用MTT比色法检测细胞活力;Hoechst33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果0.5mmol·L^-1MPP^＋作用于SH-SY5Y细胞60h,MTT值降低到（51.97%±2.46%）（P〈0.01）,Hoechst 33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,凋亡率增加到（40.52%±1.68%）（P〈0.01）,而WEG则能明显改善SH-SY5Y细胞的凋亡特性,显著升高其MTT值,降低凋亡率（P〈0.05）。结论人参水提物对MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的保护作用。     

20-羟基蜕皮甾酮对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

本文旨在研究一种类固醇激素即20-羟基蜕皮甾酮对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其作用机制。预孵育20-羟基蜕皮甾酮可以明显提高H2O2诱导的SH-SY5Y细胞的生存率,减少乳酸脱氢酶（LDH）漏出率,抑制脂质过氧化水平（MDA）升高,提高超氧化物歧化酶（SOD）活性。此外,20-羟基蜕皮甾酮可以通过降低Bax/Bcl-2的比值,延缓caspase-3的活化来抑制H2O2诱导的细胞凋亡。本研究表明20-羟基蜕皮甾酮对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞具有保护作用,有可能用于由氧化应激和凋亡导致的神经退行性疾病的治疗。     

13-甲基十四烷酸对H2O2诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的：探讨13-甲基十四烷酸（13-MTD）对过氧化氢（H2O2）诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的影响。方法：采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。光镜观察细胞形态,SRB法检测细胞存活率,AO/EB双重染色法检测细胞凋亡,MTT法检测线粒体活性。结果：与正常对照组相比,H2O2损伤模型组细胞出现明显病理改变,细胞存活率、线粒体活性均显著下降（P〈0.01）,细胞凋亡率显著升高（P〈0.01）;13-MTD10、20、40μg/mL可显著提高细胞存活率（P〈0.01）;13-MTD5、10、20μg/mL可显著下调细胞凋亡率（P〈0.01）;13-MTD5、10、20、40μg/mL可显著提高细胞MTT代谢率（P〈0.01）;且存在一定量效差异（P〈0.05,P〈0.01）。结论：不同剂量的13-MTD对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤具有保护作用。     

葛根素保护双氧水诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

目的探讨葛根素对双氧水(H_2O_2)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用及其机制。方法建立体外神经元损伤模型,MTT法观察细胞存活率;Hoechst 33342染色观察细胞核改变;JC-1染色检测细胞线粒体膜电位的改变;酶活性检测线粒体caspase-3和caspase-9的变化;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、p-Akt、Akt蛋白的表达。结果与H_2O_2模型组相比,葛根素预处理能明显改善H_2O_2诱导的SHSY5Y细胞存活率下降(P<0.05),缓解H_2O_2引起的线粒体膜电位的下降(P<0.01),抑制caspase-3和caspase-9的酶活性(P<0.01),减少H_2O_2诱导的细胞凋亡。此外,葛根素还促进细胞内p-Akt、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达,而这种作用能被PI3K/Akt的抑制剂LY294002所抑制。结论葛根素可保护H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,这种保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的。     

壁虎粗多肽对SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究壁虎粗多肽(GCPs)对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞增殖、凋亡能力的影响.方法 用不同浓度GCPs(0,0.08,0.12,0.16,0.20,0.24,0.32 mg·mL-1)分别处理SH-SY5Y细胞24,48,72 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测SH-SY5Y细胞增殖能力的变化,根据MTT结...     

葫芦素B抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖机制的初步研究

目的研究葫芦素B对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的影响及其作用的分子机制。方法通过MTT法检测葫芦素B对SH-SY5Y细胞增殖的影响,流式细胞仪检测葫芦素B对SH-SY5Y细胞凋亡和生理水平上活性氧含量、线粒体膜电位的影响。Hoechst 33258染色检测药物处理前后细胞形态的变化。Westernblot检测葫芦素B处理SH-SY5Y细胞24 h前后Bcl-2、Bax、p21、p53等蛋白合成的变化。结果实验浓度范围内,葫芦素B可时间与浓度依赖性地抑制SH-SY5Y细胞增殖;浓度依赖性地诱导SH-SY5Y细胞凋亡、活性氧水平升高和线粒体膜去极化;在蛋白水平上,葫芦素B能诱导凋亡抑制蛋白Bcl-2下调,促凋亡蛋白Bax、p21、p53上调。结论葫芦素B在体外能显著抑制SH-SY5Y细胞增殖,这一影响可能通过诱导细胞凋亡、ROS积累、线粒体膜去极化及其相关蛋白表达变化来实现。     

Protective Effect of Total Phenolic Compounds from Inula helenium on Hydrogen Peroxide-induced Oxidative Stress in SH-SY5Y Cells

Inula helenium has been reported to contain a large amount of phenolic compounds, which have shown promise in scavenging free radicals and prevention of neurodegenerative diseases. This study is to investigate the neuroprotective effects of total phenolic compounds from I. helenium on hydrogen peroxide-induced oxidative damage in human SH-SY5Y cells. Antioxidant capacity of total phenolic compounds was determined by radical scavenging activity, the level of intracellular reactive oxygen species and superoxide dismutase activity. The cytotoxicity of total phenolic compounds was determined using a cell counting kit-8 assay. The effect of total phenolic compounds on cell apoptosis due to hydrogen peroxide-induced oxidative damage was detected by Hoechst 33258 and Annexin-V/PI staining using fluorescence microscope and flow cytometry, respectively. Mitochondrial function was evaluated using the mitochondrial membrane potential and mitochondrial ATP synthesis by JC-1 dye and high performance liquid chromatography, respectively. It was shown that hydrogen peroxide significantly induced the loss of cell viability, increment of apoptosis, formation of reactive oxygen species, reduction of superoxide dismutase activity, decrease in mitochondrial membrane potential and a decrease in adenosine triphosphate production. On the other hand, total phenolic compounds dose-dependently reversed these effects. This study suggests that total phenolic compounds exert neuroprotective effects against hydrogen peroxide-induced oxidative damage via blocking reactive oxygen species production and improving mitochondrial function. The potential of total phenolic compounds and its neuroprotective mechanisms in attenuating hydrogen peroxide-induced oxidative stress-related cytotoxicity is worth further exploration.