妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘血管内皮生长因子的变化及其意义

目的　探讨妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘血管内皮生长因子 (VEGF)与胎儿窘迫的关系。方法　采用蛋白免疫印迹(westernblot )测定胎盘VEGF含量 ,其中妊娠肝内胆汁淤积症患者 (ICP组 ) 3 3例 ,正常晚期妊娠妇女 3 0例 (对照组 )。采用免疫组织化学方法测定VEGF在胎盘表达部位 ,及胎盘血管密度。结果　ICP组较对照组胎盘VEGF表达部位相同 ,但表达量明显减少 (P <0 0 1) ,且病情越重表达越少 ;ICP组较NLP组胎盘血管密度明显减少 (P <0 0 5 )。结论　ICP患者胎盘分泌VEGF减少造成胎盘血管形成不良 ,血管密度减少、血管通透作用下降 ,由于宫缩等刺激因素 ,可致胎儿宫内窘迫     

色素上皮衍生因子对植入型凶险性前置胎盘形成的影响及机制研究

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对胎盘微血管床形成的影响及其相关的发病机制。方法选择2014年7月-2015年8月福建省立医院产科剖宫产分娩的孕妇32例,其中植入型凶险性前置胎盘患者16例(PA组),另外16例作为对照组。采用免疫组化法检测两组胎盘组织的PEDF及血管内皮生长因子(VEGF)的定位表达,并计数微血管密度(MVD);利用RT-PCR及Western Blot检测胎盘组织中PEDF和VEGF的mRNA和蛋白质表达。利用ELISA法检测孕妇外周血清中PEDF及VEGF水平。结果 1两组胎盘PEDF及VEGF主要表达在胎盘血管内皮细胞上。PEDF及VEGF的mRNA和蛋白含量差异均有统计学意义(P0.05)。2两组胎盘MVD含量差异均有统计学意义(P0.05)。3两组外周血中PEDF水平差异无统计学意义(P0.05)。结论植入型凶险性前置胎盘组织低表达PEDF,与VEGF及MVD均呈负相关关系,说明植入型胎盘组织PEDF的表达过低是导致对VEGF抑制不足及胎盘病理性血管形成的原因。     

生长抑素对裸鼠肝部分切除后肝癌组织血管内皮生长因子表达及新生血管形成的影响

目的　观察生长抑素对肝部分切除裸鼠肝癌组织微血管密度 (MVD)和血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响 ,探讨其对肝部分切除后残肝肿瘤生长的影响。方法　 3 0只裸鼠随机均分成 3组 :A组 (对照组 ) ,B组 (肝部分切除组 )和C组 [生长抑素(SST)治疗组 ] ,A组仅将人肝癌组织种植于右肝叶 ,B组和C组切除肝左叶和中叶后于右肝叶种植人肝癌组织 ,C组术后第一天开始腹腔注射SST(2 5 0ug/kg ,bid) ,B组和C组腹腔注射等量的生理盐水 ,3组动物于 3 5d后处死 ,检测肿瘤大小和重量 ,采用免疫组化和图像分析法检测MVD和VEGF的表达。结果　B组肝癌组织MVD和VEGF表达较A组明显增强 (P <0 0 5 )肿瘤重量和体积亦明显增加 (P <0 0 5 ) ,C组肝癌组织MVD和VEGF表达较B组和A组明显减低 (P <0 0 5 )肿瘤重量和体积亦明显减少 (P <0 0 5 )。结论　SST可以通过拮抗VEGF的表达 ,抑制肿瘤新生血管形成而减轻肝部分切除促肿瘤生长的作用。     

胎儿宫内发育迟缓患者胎盘血管内皮生长因子的变化及其意义

目的检测胎儿宫内发育迟缓(IUGR)患者胎盘血管内皮生长因子(VEGF)的水平,并探讨其与胎儿宫内发育迟缓发病的关系。方法应用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测50例正常晚期妊娠妇女(对照组)和56例胎儿宫内发育迟缓者(IUGR组)的胎盘VEGF水平。结果(1)对照组VEGF为(11737±3328)ng/L,IUGR组VEGF为(6545±2483)ng/L,二组比较差异显著(P<001)。(2)IUGR组胎盘重量〔(465±58)g〕较对照组〔(575±98)g〕显著下降(P<001)。(3)IUGR组新生儿体重为(1987±506)g,较对照组(3176±503)g显著下降(P<005);两组新生儿身长差异无显著性(P>005),胎盘VEGF的表达与胎盘重量和新生儿体重均呈显著正相关(P<001)。结论IUGR患者胎盘VEGF水平下降,可能是胎儿宫内发育迟缓发病机理中的一个重要因素。     

miR-210对子痫前期患者胎盘组织血管内皮生长因子表达的影响研究

目的探讨miR-210对子痫前期患者胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)表达调控的研究。方法选取2017年9月-2019年2月杭州市富阳区第一人民医院、杭州市富阳区妇幼保健院、浙江大学附属妇产科医院就诊的90例孕妇。根据美国妇产科医师协会(ACOG)颁布的指南,确诊为子痫前期(PE)的60例患者中包括轻度子娴前期30例(PE1)和重度子娴前期30例(PE2)。随机选取30例正常孕妇为对照组。用免疫组化SP法检测各组孕妇胎盘组织中VEGF表达情况,VEGF主要标记部位为绒毛间充质细胞间、血管内皮细胞胞浆和胞膜。结果各组孕妇年龄、孕龄和孕次比较差异无统计学意义(P>0. 05)。各组孕妇胎盘中VEGF的表达显示,VEGF在对照组、PE1组、和PE2组均有阳性表达。其中对照组VEGF的阳性表达率为86. 67%,PE1组VEGF的阳性表达率为63. 33%,PE2组的VEGF的阳性表达率为36. 67%。PE1组和PE2组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0. 05)。且对照组、PE1组和PE2组的VEGF阳性表达率逐渐降低,3组差异有统计学意义(P<0. 05)。miR-210表达上调与孕产妇收缩压、舒张压、肌酐和尿酸呈正相关(P <0. 05),与孕期、BMI和丙氨酸转氨酶呈负相关(P <0. 05);VEGF表达下调与孕产妇孕期、收缩压、舒张压、丙氨酸转氨酶和尿酸呈正相关(P<0. 05),与BMI和肌酐呈负相关(P<0. 05)。miR-210与VEGF表达呈负性相关(P<0. 05)。结论 PE1组、PE2组和对照组孕妇胎盘中均有VEGF阳性表达;且通过检测孕妇胎盘miR-210表达明显增加,而PE孕妇胎盘中VEGF mRNA表达明显低于正常孕妇,miR-210的上升会引起PE患者胎盘组织VEGF表达下降。     

PEDF对胎盘位置附着异常中异常胎盘微血管床形成的研究

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对胎盘位置附着异常中胎盘微血管床形成的影响。方法选择2014年6月至2015年8月我院剖宫产分娩的孕妇48例,其中胎盘植入(PA组)16例,前置胎盘(PP组)16例,对照组16例。胎盘进行病理学检查,免疫组化检测三组胎盘组织的MVD;RT-PCR及Western Blot检测胎盘组织中PEDF和VEGF的m RNA和蛋白质表达。结果①三组胎盘组织中PEDF及VEGF蛋白含量、PEDF及VEGF m RNA含量及MVD比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。②胎盘中PEDF与VEGF、MVD均呈负相关关系(r=-0.778,P=0.000;r=-0.827,P=0.000)。③胎盘血管情况:PA组绒毛血管数量丰富,管径粗大,侵及肌壁间血管;PP组绒毛间血管增生程度有所减轻,未侵及肌层;对照组则无上述变化。结论①胎盘位置异常组中胎盘的PEDF表达过低是导致VEGF负性调节不足以及胎盘病理性血管形成的原因,参与了胎盘位置异常的发生。②三组胎盘中PEDF含量均有显著差异,提示PEDF含量可以反映异常胎盘血管的侵袭程度。     

促红细胞生成素对脑出血神经再生影响的临床研究

[目的]探讨重组人促红细胞生成素对脑出血患者神经再生的影响。[方法]应用腰穿注射重组人促红细胞生成素,观察脑出血患者血清VEGF、bFGF的变化以及欧洲卒中量表。[结果]治疗组d7、d10、d14、d17、d21血清VEGF和血清bFGF高于对照组,治疗组欧洲卒中量表d10、d14、d17、d21高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]通过腰穿注入重组人促红细胞生成素能促进脑出血患者的神经再生。     

骨髓单个核细胞缺血肢体局部移植对缺血组织血管再生作用的研究

目的分析骨髓单个核细胞局部移植对缺血组织血管再生的作用及机制。方法从大鼠胫骨及股骨采集骨髓细胞，密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞分离、切断近交系Wistar大鼠右侧股动脉及其分支，建立单侧后肢缺血模型。分7点局部注射单个核细胞悬液(移植组)或磷酸盐缓冲液(对照组)术后第3、7、14d获取内收肌制作组织匀浆，ELISA法测定匀浆中bFGF、VEGF和IL-18因子水平；术后第2,4周免疫组化法分析肌肉组织毛细血管密度。结果术后第3d，移植组bFGF表达水平高于对照组(P＜0．01)。术后第3、7d，移植组IL-1β水平高于对照组(P＜0．01)术后第2、4周移植组内收肌毛细血管密度高于对照组(P＜0.01)。结论在大鼠缺血后肢局部直接植入骨髓单个核细胞可诱导新生血管形成；骨髓单个核细胞分泌bFGF、IL-1β等多种因子在局部直接植入骨髓单个核细胞促进血管再生的机制中可能起主要作用。     

血清VEGF、胆汁酸、胎盘毛细血管密度与ICP孕妇妊娠结局的关系

目的探讨ICP患者及正常晚期妊娠妇女血清VEGF、胆汁酸、胎盘毛细血管密度的变化特点及临床意义.方法将34例ICP患者设为实验组,30例正常晚孕者设为对照组,测定实验组、对照组VEGF、胎盘毛细血管密度、胆汁酸变化并进行比较.结果实验组胆汁酸浓度与对照组相比较差异有显著性(P＜0.05),实验组VEGF浓度与对照组比较差异有显著性(P＜0.05),实验组胎盘毛细血管密度与对照组相比较,差异有非常显著性(P＜0.001),实验组血清VEGF水平与胎盘毛细血管密度成正相关,r=0.479(P＜0.05).对照组中孕妇血VEGF水平与胎盘毛细血管密度成正相关,r=0.508(P＜0.05).实验组胎儿窘迫发生率与对照组比较差异有显著性(P＜0.05),实验组早产发生率与对照组比较差异有显著性(P＜0.01).结论ICP导致不良妊娠结局的原因与血清VEGF浓度、胎盘毛细血管密度、血清胆汁酸浓度有关,适时选择剖宫产终止妊娠可明显改善ICP孕妇胎儿预后.     

植入性胎盘组织滋养细胞中趋化因子CXCL-12及其受体CXCR-4 CXCR-7的表达和意义

目的探讨植入性胎盘组织滋养层细胞趋化因子CXCL-12及其受体CXCR-4、CXCR-7的基因转录和蛋白表达特点。方法选取正常孕妇(对照组) 80例和植入胎盘孕妇患者(植入组) 83例、乳腺癌患者(乳腺癌组) 80例,采用RTPCR方法检测组织细胞中趋化因子CXCL-12及其受体CXCR-4、CXCR-7的基因转录表达水平,使用SP免疫组化法测定滋养细胞中CXCL-12、受体CXCR-4、CXCR-7蛋白含量及其分布,通过应用Transwell侵袭实验、划痕实验方式对3组细胞的侵袭、迁移能力进行检测。结果乳腺癌组患者的基因表达水平明显高于对照组和植入胎盘组,差异有统计学意义(P0.05)。乳腺癌组的CXCR-4及CXCR-7的表达水平明显高于对照组和植入胎盘组,差异有统计学意义(P0.05)。乳腺癌组的侵袭能力强于植入胎盘组,差异有统计学意义(P0.05);乳腺癌组迁移能力大于植入胎盘组,差异有统计学意义(P0.05)。结论植入性胎盘组织滋养层细胞完全区别于乳腺癌组织细胞,它们在各自的分子表达水平、侵袭能力和迁移能力方面差异有统计学意义(P0.05),应用滋养层细胞分子表达特征可以作为早期诊断标志物,在临床有一定推广意义。     

突出腰椎间盘组织VEGF的表达及其意义

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）在正常的椎间盘组织和不同类型突出椎间盘组织中的表达及意义。方法 将41例来源于腰椎间盘突出症患者手术中取得的椎间盘组织（其中包含型17例，非包含型24例）和13例来源于脊柱侧凸前路手术及腰椎骨折前路手术所获得的椎间盘组织作HE染色及VEGF免疫组化检测，并作对照分析。结果对照组中椎间盘组织VEGF表达均为阴性，突出椎间盘组织中包含型VEGF阳性表达率为41．2％（7/17），非包含型为79．2％（19/24），其细胞来源主要是血管内皮细胞。非包含型及包含型VEGF阳性表达率均高于对照组，其差异有显著性（P〈0．05）。非包含型VEGF阳性表达率高于包含型，有显著性差异（P〈0．05）。非包含型病程在一年内者VEGF阳性表达率高于病程在一年以上者，有显著性差异（P〈0．05）。结论 突出的椎间盘组织可以诱导产生VEGF且与突出类型、病程相关，即非包含型VEGF阳性表达率高于包含型，非包含型病程一年以内者VEGF阳性表达率高于病程一年以上者。提示VEGF可能通过促进新生血管的发生、发展，在突出腰椎间盘组织自发性吸收中发挥促进作用。     

MMP-9在突出腰椎间盘中的表达及意义

目的检测突出组和正常组腰椎间盘中基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）表达,探讨MMP-9在突出腰椎间盘中的作用及意义。方法通过免疫组化方法,应用MMP-9多克隆抗体,对40例突出腰椎间盘和20例正常腰椎间盘标本进行染色。结果突出组的MMP-9阳性细胞率显著高于正常组,非包含组的MMP-9阳性细胞率显著高于包含组。结论MMP-9在突出组腰椎间盘中高表达,提示MMP-9可能与椎间盘退变有关。     

突出腰椎间盘中Ⅱ型胶原的表达及意义

目的检测突出组和正常组腰椎间盘基质中Ⅱ型胶原的表达,探讨Ⅱ型胶原与腰椎间盘退变、突出的关系。方法通过免疫组化方法,应用Ⅱ型胶原多克隆抗体,对40例突出腰椎间盘和20例正常腰椎间盘标本进行染色。结果正常组的Ⅱ型胶原阳性面积百分比显著高于突出组,包含组的Ⅱ型胶原阳性面积百分比显著高于非包含组。结论腰椎间盘基质中Ⅱ型胶原含量下降可能引起椎间盘退变、突出。     

基质金属蛋白酶-1、3在椎间盘的表达和意义

目的检测突出和非突出椎间盘中是否有肉芽组织形成以及基质金属蛋白酶-1、3的表达,并分析酶活性与肉芽组织和椎间盘突出类型之间的关系。方法52个椎间盘(12个非突出,40个突出)标本分别用HE染色以检测肉芽组织的数量,以及链酶亲和素-生物素复合物(SABC、StrepAvitin-BiotinConplex)加MMP-1和MMP-3单克隆抗体染色以检测MMP-1和MMP-3的表达。结果在经韧带型脱出和游离型标本中普遍有包含巨噬细胞,纤维母细胞及毛细血管的肉芽组织存在。而在凸出及韧带下突出型标本中很少见,在非突出型标本中,无肉芽组织表达。在肉芽组织中的大部分细胞和软骨细胞(纤维环和髓核)有明显的染色阳性的MMP-1和MMP-3的表达。突出组织中的MMP-1和MMP-3含量较非突出组织中的含量明显增高(P<0.01),游离型和经韧带型脱出标本中的MMP-1和MMP-3的表达较韧带下脱出和凸出型增高(P<0.05)。结论MMP-1、MMP-3可能与椎间盘退变及突出等病理改变有关。在突出椎间盘中,与肉芽组织炎性细胞有关的MMP-1、MMP-3的阳性表达,提示这些蛋白酶与组织降解造成的椎间盘病理改变有关系。     

腰间盘HIZ与TNF-α表达的相关性研究及其在椎间盘内破裂症中的诊断价值

目的：观察腰间盘信号改变与间盘组织TNF-α表达的关系,分析研究HIZ在椎间盘内破裂症中的诊断价值。方法：38例经椎间盘造影诊断为IDD的患者,行腰椎MRI检查和Pfirrmann分级及VAS评分,根据VAS评分结果分为轻度疼痛A组、中度疼痛B组及重度疼痛C组;根据Pfirrmann分级标准将Ⅲ级归入轻度退变D组,Ⅳ级为中重度退变F组。取手术切除的HIZ及非HIZ间盘组织行TNF-α免疫组化染色观察和TNF-α含量检测,同时以5例脊柱骨折患者手术时取出的间盘组织作为对照。结果：（1）间盘信号与年龄间的直线相关系数R值0.6111,信号与年龄呈负相关;信号与间盘内TNF-α表达量呈负相关,R值为-0.8710。（2）随着疼痛症状加重,间盘信号逐渐减弱,A、B、C组间盘信号改变与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。（3）间盘退变程度与间盘信号改变及TNF-α表达量相关,D组、F组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。（4）IDD患者HIZ间盘组织局部炎性反应明显,TNF-α免疫组化染色阳性;HIZ组TNF-α表达量明显强于非HIZ组和对照组（P〈0.05）。结论：（1）间盘信号与年龄、TNF-α表达量及VAS评分负相关。（2）IDD患者HIZ中TNF-α阳性表达明显,表明HIZ可作为IDD诊断的一个特异性影像改变。     

丙酮酸乙酯对宫内感染致脑损伤新生仔鼠AQP4表达和脑组织超微结构的影响

目的 研究丙酮酸乙酯(EP)对宫内感染致新生仔鼠脑损伤水通道蛋白4(AQP4)表达和脑组织超微结构的影响。方法 选取36只孕鼠随机分为 LPS组(n=12)、EP组(n=12)、NS组(n=12)。LPS组:孕17 d、18 d连续两天腹腔注射 LPS 380 μg/kg;EP组:同法制备孕鼠宫内感染模型,并在注射LPS后立即给予孕鼠腹腔注射 EP 40 mg/kg;NS组:腹腔注射同等量生理盐水。对孕鼠分娩后的胎盘和新生仔鼠脑组织进行HE染色观察宫内感染和脑损伤情况。剔除早产鼠,各组随机选取新生仔鼠36只,于生后12、24、48 h对脑组织进行免疫组织化学染色,观察AQP4的表达;电镜观察脑组织超微结构的变化。结果 与NS组比较,LPS组孕鼠胎盘组织可见大量的炎性细胞浸润,有宫内感染,LPS组仔鼠HE染色提示有脑损伤;与LPS组相比较,EP组仔鼠出生后24 h、48 h脑组织AQP4的表达量均低于LPS组(P<0.05);电镜下LPS组神经细胞超微结构显示损伤严重。结论 丙酮酸乙酯对宫内感染致脑损伤新生仔鼠的脑组织具有一定的神经保护作用,可能与AQP4表达水平有关。     

丙酮酸乙酯对宫内感染致脑损伤新生仔鼠12-脂氧合酶表达和细胞凋亡的影响

目的研究丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)对宫内感染致新生仔鼠脑损伤12-脂氧合酶表达和细胞凋亡的影响。方法 36只孕鼠随机分为LPS组、EP组、NS组,每组各12只。LPS组:于孕17天、18天孕鼠连续两天腹腔注射脂多糖380μg/kg;EP组:相同的方法制备孕鼠宫内感染模型,并于孕鼠腹腔注射LPS后立即给予腹腔注射EP 40mg/kg;NS组:给予等量生理盐水腹腔注射。孕鼠分娩后,取胎盘进行HE染色,以观察宫内感染情况。剔除早产鼠,随机选取各组仔鼠36只,分别于出生后1d、3d、7d进行检测,观察脑组织12-脂氧合酶(12-lipoxygenase,12-LOX)的表达和神经细胞凋亡情况。结果与NS组比较,LPS组孕鼠胎盘组织可见明显的炎性细胞浸润,血管充血等病理改变;与LPS组相比较,EP组仔鼠出生后1、3、7d脑组织12-LOX的表达量均低于LPS组(P0.05)、神经细胞凋亡指数均也均低于LPS组(P0.05)。结论 EP对宫内感染致脑损伤新生仔鼠的脑组织具有保护作用,可能与12-LOX表达水平和细胞凋亡降低相关。     

大鼠孕期地塞米松给药次数对仔鼠脑星形胶质细胞发育的影响

目的通过产前地塞米松治疗,探讨不同给药疗程对仔鼠脑星形胶质细胞发育的影响。方法实验孕大鼠随机分为3种情况用药,孕期1剂组于孕17d肌注地塞米松0.8mg/kg/d,孕期4剂组于孕17、18、19、20d各肌注地塞米松0.8mg/kg/d,对照组肌注等量生理盐水。对各组孕鼠所生的仔鼠,分别于生后第1、7、14d称脑重,检测大脑白质与海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,并与对照组作比较。结果孕期激素治疗各组仔鼠全脑重量较对照组下降,尤以4剂组最明显;孕期激素治疗4剂组7日龄、14日龄鼠脑海马、白质GFAP的表达较对照组减少,1剂组与对照组相比无明显差异。结论大鼠孕期重复激素治疗会影响后代脑星形胶质细胞的成熟。     

前炎症因子在脊髓型颈椎病发病中的作用

目的探讨前炎症因子在脊髓型颈椎病发病的早期变化，探讨前炎症因子与颈椎间盘早期退变的关系。方法收治的20例脊髓型颈椎病患者，完整摘除并且取出的32个颈椎节段的椎间盘及其髓核组织，作为实验组的病例来源。选择3具新鲜尸体中15个颈部椎间盘组织，作为对照组。观察TNF—α，IL-1β，IL-6的表达情况。结果实验组TNF-α，IL-1β，IL-6阳性表达率和IOD值均显著高于对照组（P〈0．01）。结论突出的颈椎间盘可产生TNF-α，IL-1β，IL-6阳性细胞，提示这些细胞因子在颈椎椎间盘早期退变中发挥作用。     

腰椎间盘突出症患者脑脊液胱抑蛋白C水平研究

目的对腰椎间盘突出症患者的脑脊液胱抑蛋白C水平进行研究，以了解其与腰椎间盘突“；症之间的关系。方法选取2006年4月至2008年12月于笔者所在医院治疗的39例腰椎间盘突出症患者为研究对象，将其分为腰椎间盘膨出组（A组）13例、腰椎间盘突出组（B组）13例和腰椎间盘脱出组（C组）13例，同时选取健康对照组（D组）13例，对所有人员的脑脊液胱抑蛋白C水平进行检测后，将结果进行研究比较。结果经研究比较发现，D组的脑脊液胱抑蛋F1C水平明显低于其他三组（P〈0．01），而A、B、C三组之间比较，C组明显高于A组与13组（P〈0．05），A组与B组比较，差异不大（P〉0．05）。同时发现其与其他因素也有关系。结论腰椎间盘突出症患者的脑脊液胱抑蛋白C水平明显高于健康人群，且腰椎间盘脱出型水平尤其高，值得临床进一步研究。